1、仪器分析仪器分析一、色谱定性分析qualitative analysis in chromatograph二、色谱定量分析quantitative analysis in chromatograph qualitative and quantitative analysis in chromatograph1.1.利用纯物质定性的方法利用纯物质定性的方法 利用保留值定性利用保留值定性：通过对比试样中具有与纯物质相同保通过对比试样中具有与纯物质相同保留值的色谱峰，来确定试样中是否含有该物质及在色谱图留值的色谱峰，来确定试样中是否含有该物质及在色谱图中的位置。不适用于不同仪器上获得的数据之间的对比
2、。中的位置。不适用于不同仪器上获得的数据之间的对比。利用加入法定性利用加入法定性：将纯物质加入到试样中，观察各组分将纯物质加入到试样中，观察各组分色谱峰的相对变化。色谱峰的相对变化。利用相对保留值利用相对保留值r r2121定性定性 相对保留值相对保留值r r2121仅与柱温和固定液性质有关。在色谱手仅与柱温和固定液性质有关。在色谱手册中都列有各种物质在不同固定液上的保留数据，可以用册中都列有各种物质在不同固定液上的保留数据，可以用来进行定性鉴定。来进行定性鉴定。又称又称KovatsKovats指数指数()，是一种重现性较好的定性参数。，是一种重现性较好的定性参数。测定方法：测定方法：将正构烷
3、烃作为标准，规定其保留指数为分子中碳原子将正构烷烃作为标准，规定其保留指数为分子中碳原子个数乘以个数乘以100100（如正己烷的保留指数为（如正己烷的保留指数为600600）。）。其它物质的保留指数（其它物质的保留指数（I IX X）是通过选定两个相邻的正构是通过选定两个相邻的正构烷烃，其分别具有烷烃，其分别具有Z Z和和Z Z1 1个碳原子。被测物质个碳原子。被测物质X X的调整保留的调整保留时间应在相邻两个正构烷烃的调整保留值之间如图所示时间应在相邻两个正构烷烃的调整保留值之间如图所示：)lglglglg(100)()1()()()()()1(ZttttItttZRZRZRXRXZRXRZ
4、R 之间之间和和应介于应介于数数为一对正构烷烃的含为一对正构烷烃的含，注：注：)()()(nzRzRxRtttCnzz 小型化的台式色质谱联用仪（小型化的台式色质谱联用仪（GC-MSGC-MS；LC-MSLC-MS）色谱色谱-红外光谱仪联用仪；红外光谱仪联用仪；组分的结构鉴定组分的结构鉴定SampleSampleGas Chromatograph(GC)Mass Spectrometer(MS)SeparationIdentification1.1.峰面积的测量峰面积的测量 （1）峰高（）峰高（h）乘半峰宽（乘半峰宽（Y 1/2）法：近似将色谱峰当作等法：近似将色谱峰当作等腰三角形。此法算出的
5、面积是实际峰面积的腰三角形。此法算出的面积是实际峰面积的0.94倍：倍：A=1.064 hY1/2 （2）峰高乘平均峰宽法：当峰形不对称时，可在峰高）峰高乘平均峰宽法：当峰形不对称时，可在峰高0.15和和0.85处分别测定峰宽，由下式计算峰面积：处分别测定峰宽，由下式计算峰面积：A=h（Y 0.15+Y 0.85）/2 （3）峰高乘保留时间法：在一定操作条件下，同系物的半）峰高乘保留时间法：在一定操作条件下，同系物的半峰宽与保留时间成正比，对于难于测量半峰宽的窄峰、重叠峰宽与保留时间成正比，对于难于测量半峰宽的窄峰、重叠峰（未完全重叠），可用此法测定峰面积：峰（未完全重叠），可用此法测定峰面积
6、：A=hbtR （4）自动积分和微机处理法）自动积分和微机处理法 试样中各组分质量与其色谱峰面积成正比，即：试样中各组分质量与其色谱峰面积成正比，即：m i=fi Ai （定量依据）（定量依据）绝对校正因子：比例系数绝对校正因子：比例系数f i，单位面积对应的物质量：，单位面积对应的物质量：f i=m i /Ai 定量校正因子与检测器响应值成倒数关系：定量校正因子与检测器响应值成倒数关系：f i=1/Si 相对校正因子相对校正因子fi：即组分的绝对校正因子与标准物质的绝：即组分的绝对校正因子与标准物质的绝对校正因子之比。对校正因子之比。当当mi、mS以摩尔为单位时，所得相对校正因子称为相对以摩
7、尔为单位时，所得相对校正因子称为相对摩尔校正因子（摩尔校正因子（f M）,用表示；当用表示；当mi、mS用质量单位时用质量单位时,以以（f m）,表示。表示。ississiisiiAAmmAmAmfff /相对校正因子的测定相对校正因子的测定注意事项注意事项：相对校正因子与待测物、基准物和检测器类型有相对校正因子与待测物、基准物和检测器类型有关，与操作条件（进样量）无关关，与操作条件（进样量）无关 基准物：基准物：TCDTCD苯；苯；FIDFID丁庚烷丁庚烷 以氢气和氦气作载气测的校正因子可通用以氢气和氦气作载气测的校正因子可通用 以氮气作载气测的校正因子与两者差别大以氮气作载气测的校正因子与
8、两者差别大siAAsi和和测测混匀进样混匀进样基准物基准物纯品纯品过程：精称过程：精称 保留时间接近保留时间接近与与前提：前提：sisiismissiisimmAAfAfAfmm 特点及要求：特点及要求：归一化法简便、准确；归一化法简便、准确；进样量的准确性和操作条件的变动对测定结果影响不大；进样量的准确性和操作条件的变动对测定结果影响不大；仅适用于试样中所有组分全出峰的情况仅适用于试样中所有组分全出峰的情况；必须已知所有组分的校正因子。必须已知所有组分的校正因子。100)(100%121 niiiiiniiAfAfmmmmc%100%1001 niiiiAAAAAC同系物或结构异构体同系物或
9、结构异构体试样配制：试样配制：准确称取一定量的试样准确称取一定量的试样m，加入一定量内加入一定量内标物标物mS计算式：计算式：SsiisiSsiisiAfAfmmAfAfmm;%100100100 SsiisSsiisiiAfAfmmmAfAfmmmx内标物要满足以下要求：内标物要满足以下要求：（a）试样中不含有该物质；试样中不含有该物质；（b）与被测组分性质比较接近；与被测组分性质比较接近；（c）不与试样发生化学反应；不与试样发生化学反应；（d）出峰位置应位于被测组分附近，且无出峰位置应位于被测组分附近，且无组分峰影响。组分峰影响。（e）内标物为高纯度标准物质，或含量已）内标物为高纯度标准物
10、质，或含量已知物质知物质 内标法优点：内标法优点：进样量不超量时，重复性及操作条件对结果无影响进样量不超量时，重复性及操作条件对结果无影响只需待测组分和内标物出峰，与其他组分是否出峰只需待测组分和内标物出峰，与其他组分是否出峰无关无关 适合测定微量组分适合测定微量组分 内标法缺点：内标法缺点：制样要求高；找合适内标物困难；已知校正因子制样要求高；找合适内标物困难；已知校正因子每个试样的分析，都要进行两次称量，不适合大批每个试样的分析，都要进行两次称量，不适合大批量试样的快速分析。量试样的快速分析。若将内标法中的试样取样量和内标物加入量固定若将内标法中的试样取样量和内标物加入量固定，则：，则：常
11、数SiiAAc%对样对样）（）（sisiiiAAAACC)(%)(sisimmmm ）纯）纯（）样）样过程：（过程：（sisiffAA和和的比值消除的比值消除利用利用0的截距为的截距为前提：前提：sisiAAmm对对样样）（）（）（）（%isisiiCAAAAC内标对比法特点：内标对比法特点：不需要校正因子不需要校正因子 进样量对结果影响不大进样量对结果影响不大 注：对于正常峰，可以注：对于正常峰，可以h h代替代替A A计算含量计算含量外标法也称为外标标准曲线法。外标法也称为外标标准曲线法。特点及要求：特点及要求：外标法不使用校正因子，外标法不使用校正因子，不需要所有组分出峰不需要所有组分出峰准确性准确性较高；较高；操作条件变化对结果准确操作条件变化对结果准确性影响较大。性影响较大。对进样量的准确性控制要对进样量的准确性控制要求较高，适用于大批量试样的求较高，适用于大批量试样的快速分析。快速分析。b外标一点法：外标一点法：一种浓度一种浓度对照物对比样品中待测组分对照物对比样品中待测组分含量含量前提：截距为前提：截距为0，对照品，对照品浓度与待测组分浓度接浓度与待测组分浓度接近近c外标两点法：外标两点法：前提：选取两点对照品前提：选取两点对照品的浓度，需涵盖待测浓的浓度，需涵盖待测浓度度 siisiiAACC)()(
