1、高三生物专题复习专题二 实验部分（1）能独立完成“生物知识内容表”所列的生物实验，包括理解实验目的、原理、方法和操作步骤，掌握相关的操作技能，并能将这些实验涉及的方法和技能进行综合的运用。（2）具备验证简单生物学事实的能力，并能对实验现象和结果进行解释、分析和处理。（3）具有对一些生物学问题进行初步探究的能力，包括运用观察、实验与调查，假说演绎、建立模型与系统分析等科学研究方法。（4）能对一些简单的实验方案做出恰当的评价和修订。1、高考要求的课本实验及其注意事项2、如何进行实验设计，书写实验步骤3、如何评价和完善实验4、还值得关注的实验一、高考要求的实验（1）观察DNA和RNA在细胞中的分布（
2、2）检测生物组织中的还原糖、脂肪和蛋白质 （3）用显微镜观察多种多样的细胞（4）用高倍镜观察线粒体和叶绿体（5）通过模拟实验探究膜的透性（6）观察植物细胞的质壁分离和复原（7）探究影响酶活性的因素（8）叶绿体色素的提取和分离（9）探究酵母菌的呼吸方式（10）观察细胞的有丝分裂（11）模拟探究细胞表面积与体积的关系（12）观察细胞的减数分裂（13）低温诱导染色体加倍（14）调查常见的人类遗传病（15）探究植物生长调节剂对扦插枝条生根的作用（16）模拟尿糖的检测（17）探究培养液中酵母菌数量的动态变化（18）土壤中动物类群丰富度的研究（19）探究水族箱（或鱼缸）中群落的演替 必修1（11个）必修2
3、（3个）必修3（5个）实验一 观察DNA、RNA在细胞中的分布(必修一p26)一实验目的：初步掌握观察DNA和RNA在细胞中分布的方法二实验原理：1甲基绿和吡罗红两种染色剂对DNA和RNA的亲和力不同，甲基绿使DNA呈现绿色，吡罗红使RNA呈现红色。利用甲基绿、吡罗红混合染色剂将细胞染色，可以显示DNA和RNA在细胞中的分布。2盐酸能够改变细胞膜的通透性，加速染色剂进入细胞，同时使染色体中DNA和蛋白质分离，有利于DNA与染色剂结合。方法步骤：0.9%生理盐水 人口腔上皮细胞8%盐酸蒸馏水30水浴吡罗红甲基绿染色剂制片水解冲洗染色观察取口腔上皮细胞水解冲洗染色显微镜观察固定三方法步骤：操作步骤
4、操作步骤注意问题注意问题解释解释取口腔上取口腔上皮细胞制皮细胞制片片载玻片要洁净，滴一滴质量分载玻片要洁净，滴一滴质量分数为数为0.90.9%的的NaClNaCl溶液溶液用消毒牙签在自己漱净的口腔用消毒牙签在自己漱净的口腔内侧壁上轻刮几下取细胞内侧壁上轻刮几下取细胞将载玻片在酒精灯下烘干将载玻片在酒精灯下烘干防止污迹干扰观察效果防止污迹干扰观察效果保持细胞原有形态保持细胞原有形态消毒为防止感染，漱口避免消毒为防止感染，漱口避免取材失败固定装片取材失败固定装片水解水解将烘干的载玻片放入质量分数将烘干的载玻片放入质量分数为为8%8%的盐酸溶液中，用的盐酸溶液中，用30300 0C C的的水浴保温水
5、浴保温5min5min改变细胞膜通透性，加速染改变细胞膜通透性，加速染色剂进入细胞，促进染色体色剂进入细胞，促进染色体的的DNADNA与蛋白质分离而被染色与蛋白质分离而被染色冲冼涂片冲冼涂片用蒸馏水的缓水流冲洗载玻片用蒸馏水的缓水流冲洗载玻片10S10S洗去残留在外的盐酸洗去残留在外的盐酸染色染色滴滴2 2滴吡罗红甲基绿染色剂于滴吡罗红甲基绿染色剂于载玻片上染色载玻片上染色5min5min 观察观察先低倍镜观察，选择染色均匀、先低倍镜观察，选择染色均匀、色泽浅的区域，移至视野中央，色泽浅的区域，移至视野中央，调节清晰后才换用高倍物镜观调节清晰后才换用高倍物镜观察察使观察效果最佳使观察效果最佳人
6、口腔上皮细胞DNA、RNA分布洋葱鳞片叶内表皮细胞DNA、RNA分布四、实验结果：细胞核呈绿色，细胞质呈红色1、观察DNA和RNA在细胞中的分布时，下列哪项操作是正确的 A 染色时先用甲基绿溶液染色，再滴加吡罗红染液 B 将涂片用8%盐酸处理后，接着用染色剂染色 C 观察时应选择染色均匀、色泽较浅的区域 D 先用低倍物镜找到较清晰的细胞，然后马上转动转换器换上高倍物镜2、在处理洋葱根尖细胞时，加入8%盐酸的目的不包括 A 改变细胞膜通透性，加速染色剂进入细胞 B 使染色体中的DNA与蛋白质分离 C 杀死细胞，有利于DNA与染色剂结合 D 水解DNA，破坏DNA分子结构CD实验二 用显微镜观察多
7、种多样的细胞（必修一P7）一实验目的：1）使用高倍显微镜观察几种细胞，比较不同细胞的异同点2）运用制作临时装片的方法二实验原理：利用高倍镜可以看到某些在低倍镜下无法看到的细胞结构，例如：可以看到叶绿体、线粒体等细胞器，从而能够区别不同的细胞，但不能看到其具体的构造。三方法步骤：第一步：转动反光镜使视野明亮第二步：在低倍镜下观察清楚后，把要放大观察的物像移至视野中央第三步：用转换器转过高倍物镜，换镜后，只准调节细准焦螺旋和反光镜提示：（1）成像特点：放大倒立的虚像。（2）放大倍数计算：物镜的放大倍数目镜的放大倍数。放大倍数指的是物体的长或宽。（3）物像的移动方向与装片的移动方向相反。（4）低倍镜
8、下成像特点：物像小、细胞数目多、视野亮。高倍镜下成像特点：物像大、细胞数目少、视野暗。（5）物镜和目镜的判断方法：物镜有螺纹，目镜无螺纹。（6）放大倍数的判断方法：目镜：镜头长放大倍数小，镜头短放大倍数大。物镜：镜头长放大倍数大，镜头短放大倍数小。物镜与装片之间的距离：距离近放大倍数大，距离远放大倍数小。实验注意事项实验三 用高倍镜观察线粒体和叶绿体（必修一P47）一实验目的：使用高倍镜观察叶绿体和线粒体的形态分布。二实验原理：叶绿体的辨认依据：叶绿体是绿色的，呈扁平的椭圆球形或球形。线粒体辨认依据：线粒体的形态多样，有短棒状、圆球状、线形、哑铃形等。健那绿染液是专一性染线粒体的活细胞染料，可
9、以使活细胞中线粒体呈现蓝绿色。三实验材料：观察叶绿体时选用：藓类的叶、黑藻的叶。取这些材料的原因是：叶子薄而小，叶绿体清楚，可取整个小叶直接制片，所以作为实验的首选材料。若用菠菜叶作实验材料，要取菠菜叶的下表皮并稍带些叶肉。因为表皮细胞不含叶绿体。椭球形或球形、绿色实验现象人的口腔上皮细胞人的口腔上皮细胞（在光学显微镜下可以观察到）线粒体线粒体短棒状、圆球状、线形、哑铃形等四方法步骤：步步 骤骤注注 意意 问问 题题分分 析析1 1、制片。用镊子取、制片。用镊子取一片黑藻的小叶，放一片黑藻的小叶，放入载玻片的水滴中，入载玻片的水滴中，盖上盖玻片。盖上盖玻片。制片和镜检时，制片和镜检时，临时装临
10、时装片片中的叶片不能放干了，中的叶片不能放干了，要随时保持有水状态要随时保持有水状态否则细胞或叶绿体失否则细胞或叶绿体失水收缩水收缩，将影响对叶，将影响对叶绿体形态和分布的观绿体形态和分布的观察。察。2 2、低倍镜下找到叶、低倍镜下找到叶片细胞片细胞 3 3、高倍镜下观察叶、高倍镜下观察叶绿体的形态和分布绿体的形态和分布 4 4、制作人的口腔上、制作人的口腔上皮细胞临时装片皮细胞临时装片在洁净载玻片中央滴一在洁净载玻片中央滴一滴健那绿染液滴健那绿染液用牙签用牙签取碎屑取碎屑盖盖玻片盖盖玻片 5 5、观察线粒体、观察线粒体蓝绿色的是线粒体，细蓝绿色的是线粒体，细胞质接近无色胞质接近无色。实验四
11、观察植物细胞的质壁分离和复原（必修一P61“探究”）一、实验目的：1学会观察植物细胞质壁分离与复原的方法。2了解植物细胞发生渗透作用的原理。二实验原理：1质壁分离的原理：当细胞液的浓度小于外界溶液的浓度时，细胞就会通过渗透作用而失水，细胞液中的水分就透过原生质层进入到溶液中，使细胞壁和原生质层都出现一定程度的收缩。由于原生质层比细胞壁的收缩性大，当细胞不断失水时，原生质层就会与细胞壁分离。2质壁分离复原的原理：当细胞液的浓度大于外界溶液的浓度时，细胞就会通过渗透作用而吸水，外界溶液中的水分就通过原生质层进入到细胞液中，整个原生质层就会慢慢地恢复成原来的状态，紧贴细胞壁，使植物细胞逐渐发生质壁分
12、离复原。实验步骤及预期结果：制作洋葱鳞片叶表皮细胞临时装片显微镜观察表皮细胞有紫色液泡原生质层紧贴细胞壁0.3g/mL 蔗糖溶液显微镜观察液泡体积变小、紫色变深原生质层与细胞壁逐渐分离清水显微镜观察液泡体积变大、颜色变浅质壁分离复原步步 骤骤注注 意意 问问 题题分分 析析1制作洋葱表皮的临时装片。制作洋葱表皮的临时装片。在载玻片上滴一滴水，撕取洋葱在载玻片上滴一滴水，撕取洋葱鳞片叶外表皮放在水滴中展平鳞片叶外表皮放在水滴中展平（也可挑取几条水绵放入水滴（也可挑取几条水绵放入水滴中）。盖上盖玻片。中）。盖上盖玻片。盖盖玻片应盖盖玻片应让盖玻片的让盖玻片的一侧先触及一侧先触及载玻片，然载玻片，然
13、后轻轻放平。后轻轻放平。防止装片产生气泡。防止装片产生气泡。2观察洋葱（或水绵）细胞可观察洋葱（或水绵）细胞可看到：液泡大，呈紫色，原生质看到：液泡大，呈紫色，原生质层紧贴着细胞壁。（或水绵细胞层紧贴着细胞壁。（或水绵细胞中有带状叶绿体，原生质层呈绿中有带状叶绿体，原生质层呈绿色，紧贴着细胞壁。色，紧贴着细胞壁。液泡含花青素，所以液泡呈液泡含花青素，所以液泡呈紫色。紫色。先观察正常细胞与后先观察正常细胞与后面的面的“质壁分离质壁分离”起对照作用。起对照作用。3观察质壁分离现象。从盖玻观察质壁分离现象。从盖玻片的一侧滴入片的一侧滴入03g/ml的蔗糖溶的蔗糖溶液，在另一侧用吸水纸吸引，重液，在另
14、一侧用吸水纸吸引，重复几次。镜检。观察到：液泡由复几次。镜检。观察到：液泡由大变小，颜色由浅变深，原生质大变小，颜色由浅变深，原生质层与细胞壁分离。原生质层与细层与细胞壁分离。原生质层与细胞壁之间充满蔗糖溶液。胞壁之间充满蔗糖溶液。重复几次重复几次糖液浓度不糖液浓度不能过高能过高蔗糖溶液浓度大于细胞液浓度，蔗糖溶液浓度大于细胞液浓度，细胞通过渗透作用失水，细胞通过渗透作用失水，细胞细胞壁伸缩性小原生质层的伸缩性壁伸缩性小原生质层的伸缩性大，大，液泡和原生质层不断收缩，液泡和原生质层不断收缩，所以发生质壁分离。所以发生质壁分离。4观察细胞质壁分离的复原现观察细胞质壁分离的复原现象。从盖玻片的一侧
15、滴入清水，象。从盖玻片的一侧滴入清水，在另一侧用吸水纸吸引，重复几在另一侧用吸水纸吸引，重复几次。镜检。观察到：液泡由小变次。镜检。观察到：液泡由小变大，颜色由深变浅，原生质层恢大，颜色由深变浅，原生质层恢复原状。复原状。发生质壁分发生质壁分离的装片，离的装片，不能久置，不能久置，要马上滴加要马上滴加清水，使其清水，使其复原。复原。细胞液的浓度高于外界溶液，细胞液的浓度高于外界溶液，细胞通过渗透作用吸水，所以细胞通过渗透作用吸水，所以发生质壁分离复原现象。因为发生质壁分离复原现象。因为细胞失水过久，也会死亡。细胞失水过久，也会死亡。为了使细胞完全浸入清水中。为了使细胞完全浸入清水中。1、实验材
16、料的选择：必须选择有大液泡并有颜色的植物细胞，便于在显微镜下观察现象。2、不用高浓度蔗糖溶液(如0.5g/ml）做实验。虽然能发生质壁分离但不能复原，因细胞过度失水而死亡。3、若用可穿膜的物质（如：KNO3）做实验会出现质壁分离后自动复原现象，因外界物质会转移到细胞内而引起细胞液浓度升高。4、动植物细胞在吸水与失水方面的差异:动物细胞没有细胞壁，因此不会有质壁分离现象；植物细胞由于有细胞壁的限制和保护不会因持续吸水而涨破。实验注意事项实验五 观察细胞的有丝分裂（必修一P115）一实验目的：1制作洋葱根尖细胞有丝分裂装片2观察植物细胞有丝分裂的过程，识别有丝分裂的不同时期，比较细胞周期不同时期的
17、时间长短。3绘制植物细胞有丝分裂简图。二实验原理：1在高等植物体内，有丝分裂常见于根尖、芽尖等分生区细胞。由于各个细胞的分裂是独立进行的，因此在同一分生组织中可以看到处于不同分裂时期的细胞。2染色体容易被碱性染料（如龙胆紫溶液）着色，通过在高倍显微镜下观察各个时期细胞内染色体（或染色质）的存在状态，就可判断这些细胞处于有丝分裂的哪个时期，进而认识有丝分裂的完整过程。三实验材料：洋葱（可用葱、蒜代替）。因为根尖生长点属于分生组织，细胞分裂能力强，易观察到有丝分裂各个时期的细胞。四实验步骤：步步 骤骤注注 意意 问问 题题分分 析析一、根尖的培养一、根尖的培养实验前实验前3434天，让洋葱放在广天
18、，让洋葱放在广口瓶上，底部接触清水。根长口瓶上，底部接触清水。根长约约5cm5cm时可用。时可用。置于温暖处，置于温暖处，常换水。常换水。因为细胞分裂和生长需因为细胞分裂和生长需要水分、适宜的温度和要水分、适宜的温度和氧气。氧气。二、装片的制作二、装片的制作（解离（解离漂洗漂洗染色染色制片）制片）1 1解离：上午解离：上午1010时至下午时至下午2 2时时，剪取洋葱根尖，剪取洋葱根尖23mm23mm，立即，立即放入盛有质量分数为放入盛有质量分数为15%15%的盐的盐酸和体积分数为酸和体积分数为95%95%的酒精溶的酒精溶液的混合液（液的混合液（1 1：1 1）的玻璃皿）的玻璃皿中，室温下解离中
19、，室温下解离35min35min解离时间要保解离时间要保证，细胞才能证，细胞才能分散开来。分散开来。解离时间也不解离时间也不宜过长。宜过长。目的：溶解细胞间质，目的：溶解细胞间质，使组织中的细胞相互分使组织中的细胞相互分离开来。离开来。此时，细胞已此时，细胞已被盐酸杀死。被盐酸杀死。否则，根尖过于酥软，否则，根尖过于酥软，无法取出。无法取出。2 2漂洗：待根尖酥软后，用漂洗：待根尖酥软后，用镊子取出，放入盛有清水的玻镊子取出，放入盛有清水的玻璃皿中漂洗约璃皿中漂洗约10 min10 min。漂洗要充分，漂洗要充分，可换水可换水1212次。次。目的：洗去解离液，便目的：洗去解离液，便于染色。于染
20、色。3 3染色：把洋葱根尖放进盛有染色：把洋葱根尖放进盛有质量浓度为质量浓度为0.01g/mL0.01g/mL或或0.02g/mL0.02g/mL的龙胆紫溶液的玻璃的龙胆紫溶液的玻璃皿中染色皿中染色35min35min。染色时间不宜过长，染色时间不宜过长，否则显微镜下一片否则显微镜下一片紫色，无法观察。紫色，无法观察。龙胆紫等为碱性染料，呈龙胆紫等为碱性染料，呈紫色，可使染色体着色。紫色，可使染色体着色。醋酸洋红溶液，呈红色，醋酸洋红溶液，呈红色，也能使染色体着色。也能使染色体着色。4 4制片：用镊子将这段洋葱根制片：用镊子将这段洋葱根尖取出来，放在载玻片上，加尖取出来，放在载玻片上，加一滴清
21、水，并用镊子尖把洋葱一滴清水，并用镊子尖把洋葱根尖弄碎，盖上盖玻片，在盖根尖弄碎，盖上盖玻片，在盖玻片上再加一片载玻片。然后，玻片上再加一片载玻片。然后，用拇指轻轻地压载玻片，使细用拇指轻轻地压载玻片，使细胞分散开来。胞分散开来。要弄碎根尖，再垂要弄碎根尖，再垂直向下均匀用力压直向下均匀用力压片，不可移动盖玻片，不可移动盖玻片，片，目的：使细胞分散，避免目的：使细胞分散，避免细胞重叠，便于观察。做细胞重叠，便于观察。做得成功的装片，标本被压得成功的装片，标本被压成云雾状。成云雾状。三、观察三、观察1 1低倍镜观察：把装片放在低低倍镜观察：把装片放在低倍镜下，慢慢移动装片，找到倍镜下，慢慢移动装
22、片，找到分生区细胞。分生区细胞。2 2高倍镜观察：移走低倍镜，高倍镜观察：移走低倍镜，换上高倍镜，用细准焦螺旋和换上高倍镜，用细准焦螺旋和反光镜把视野调整清晰，仔细反光镜把视野调整清晰，仔细观察，观察，找出找出处于细胞分裂期中处于细胞分裂期中期的细胞，期的细胞，再找出再找出前期、后期前期、后期、末期的细胞、末期的细胞。一定要找到分生区。一定要找到分生区。在一个视野里，往在一个视野里，往往不容易找全有丝往不容易找全有丝分裂过程中各个时分裂过程中各个时期的细胞。如果是期的细胞。如果是这样，可以慢慢地这样，可以慢慢地移动装片，从邻近移动装片，从邻近的分生区细胞中寻的分生区细胞中寻找。找。分生区细胞特
23、点是：分生区细胞特点是：细胞呈正方形，排列紧密细胞呈正方形，排列紧密显微观察（注意观察分析下面实物图像）先低倍（找分生区细胞），再高倍（先找中、后期细胞，再找到各时期的细胞）(1)甲观察到的实验结果是 ，乙观察到的实验结果是 ，丙观察到的实验结果是 。A染色体未着上颜色，无法看清 B细胞重叠，看不到染色体C染色体着上颜色，清晰可见 D染色体着色很浅，模糊不清BDA实验六 观察细胞的减数分裂（必修二P21）一实验目的：通过观察蝗虫精母细细胞减数分裂固定装片，识别减数分裂不同的阶段染色体的形态、位置和数目，加深对减数分裂过程的理解。二实验原理：蝗虫的精母细胞进行减数分裂形成精细胞，再形成精子。此过
24、程要经过两次连续的细胞分裂：减数第一次分裂和减数第二次分裂。在此过程中，细胞中的染色体形态、位置和数目都在不断地发生变化，因而可据此识别减数分裂的各个时期。实验材料的选取思考：观察减数分裂的材料为什么宜选用雄性个体的生殖器官，如蝗虫精巢、哺乳动物的睾丸？a.雄性个体产生的精子数量远远多于雌性个体产生的卵细胞数量，雄性生殖腺内减数分裂旺盛，可以观察到各时期的图像。b.卵巢中的减数分裂不连续，次级卵母细胞需要在精子的刺激下才继续完成减。三、方法步骤低倍镜低倍镜观察观察在在低倍镜下低倍镜下观察蝗虫精母细胞减数分裂固观察蝗虫精母细胞减数分裂固定装片识别初级精母细胞、次级精母细胞定装片识别初级精母细胞、
25、次级精母细胞和精细胞和精细胞高倍镜高倍镜观察观察先在低倍镜下先在低倍镜下依次找到减数第一次分裂中依次找到减数第一次分裂中期、后期和减数第二次分裂中期、后期的期、后期和减数第二次分裂中期、后期的细胞细胞，再在，再在高倍镜下高倍镜下仔细观察染色体的形仔细观察染色体的形态、位置和数目态、位置和数目根据观察结果，尽可能多地绘制减数分裂根据观察结果，尽可能多地绘制减数分裂不同时期的细胞简图不同时期的细胞简图绘图绘图观察细胞的减数分裂实验七 检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质 （必修一P18）一实验目的：尝试用化学试剂检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质二实验原理：某些化学试剂能使生物组织中的有关有机化合物，
26、产生特定的颜色反应。1可溶性还原糖（如葡萄糖、果糖、麦芽糖）与斐林试剂发生作用，可生成砖红色的Cu2O沉淀。2脂肪可以被苏丹染液染成橘黄色（或被苏丹染液染成红色）。淀粉遇碘变蓝色。3蛋白质与双缩脲试剂发生作用，产生紫色反应。（蛋白质分子中含有很多肽键，在碱性NaOH溶液中能与双缩脲试剂中的Cu2+作用，产生紫色反应。）。三实验材料1做可溶性还原性糖鉴定实验，应选含还原糖高，颜色为白色的植物组织，如苹果、梨。（因为组织的颜色较浅，易于观察。）2做脂肪的鉴定实验。应选富含脂肪的种子，以花生种子为最好，实验前一般要浸泡34小时（也可用蓖麻种子）。3做蛋白质的鉴定实验，可用富含蛋白质的黄豆或鸡蛋清四、
27、实验试剂斐林试剂（包括甲液：质量浓度为0.1g/mL NaOH溶液和乙液：质量浓度为0.05g/mL CuSO4溶液）、苏丹或苏丹染液、双缩脲试剂（包括A液：质量浓度为0.1g/mL NaOH溶液；B液：质量浓度为0.01g/mL CuSO4溶液）、体积分数为50%的酒精溶液，碘液、蒸馏水。五、方法步骤：（一）可溶性糖的鉴定操操 作作 方方 法法注注 意意 问问 题题解解 释释1 1.制备组织样液。（去制备组织样液。（去皮、切块、研磨、过滤）皮、切块、研磨、过滤）苹果或梨组织液必须临苹果或梨组织液必须临时制备。时制备。因苹果多酚氧化酶含量高，因苹果多酚氧化酶含量高，组织液很易被氧化成褐色，组织
28、液很易被氧化成褐色，将产生的颜色掩盖。将产生的颜色掩盖。2 2.取取2 2mL组织样液。组织样液。3 3.向试管内注入向试管内注入1 1mL新新制的斐林试剂，振荡。制的斐林试剂，振荡。应将组成斐林试剂的甲应将组成斐林试剂的甲液、乙液分别配制、储液、乙液分别配制、储存，存，使用前才将甲、乙使用前才将甲、乙液等量混匀成斐林试剂液等量混匀成斐林试剂；切勿将甲液、乙液分别切勿将甲液、乙液分别加入苹果组织样液中进加入苹果组织样液中进行检测。行检测。斐林试剂很不稳定，甲、斐林试剂很不稳定，甲、乙液混合保存时，乙液混合保存时，生成的生成的Cu(OH)2在在709070900 0C C分解分解成黑色成黑色Cu
29、O和水；和水；甲、乙液分别加入时可能甲、乙液分别加入时可能会与组织样液发生反应，会与组织样液发生反应，无无Cu(OH)Cu(OH)2生成。生成。4.4.试管放在盛有试管放在盛有50-50-65650 0C C温水的大烧杯中，温水的大烧杯中，加热约加热约2 2分钟，观察到溶分钟，观察到溶液颜色：浅蓝色液颜色：浅蓝色 棕棕色色 砖红色（沉淀）砖红色（沉淀）最好用试管夹夹住试管最好用试管夹夹住试管上部，使试管底部不触上部，使试管底部不触及烧杯底部，试管口不及烧杯底部，试管口不朝向实验者。也可用酒朝向实验者。也可用酒精灯对试管直接加热。精灯对试管直接加热。防止试管内的溶液冲出试防止试管内的溶液冲出试管
30、，造成烫伤；管，造成烫伤；缩短实验时间。缩短实验时间。（二）脂肪的鉴定操操 作作 方方 法法注注 意意 问问 题题解解 释释花生种子浸泡、去皮、切下一花生种子浸泡、去皮、切下一些子叶薄片，将薄片放在载玻些子叶薄片，将薄片放在载玻片的水滴中，用吸水纸吸去装片的水滴中，用吸水纸吸去装片中的水。片中的水。干种子要浸干种子要浸泡泡3434小时，小时，新花生的浸新花生的浸泡时间可缩泡时间可缩短。短。因为浸泡时间短，不易切片，因为浸泡时间短，不易切片，浸泡时间过长，组织较软，浸泡时间过长，组织较软，切下的薄片不易成形。切片切下的薄片不易成形。切片要尽可能薄些，便于观察。要尽可能薄些，便于观察。在子叶薄片上
31、滴在子叶薄片上滴2323滴苏丹滴苏丹或苏丹或苏丹染液，染色染液，染色1 1分钟。分钟。染色时间不染色时间不宜过长。宜过长。用吸水纸吸去薄片周围染液，用吸水纸吸去薄片周围染液，用用50%50%酒精洗去浮色，吸去酒酒精洗去浮色，吸去酒精。精。酒精用于洗去浮色，不洗去酒精用于洗去浮色，不洗去浮色会影响对橘黄色脂肪滴浮色会影响对橘黄色脂肪滴的观察。同时，酒精是脂溶的观察。同时，酒精是脂溶性溶剂，可将花生细胞中的性溶剂，可将花生细胞中的脂肪颗粒溶解成油滴。脂肪颗粒溶解成油滴。用吸水纸吸去薄片周围酒精，用吸水纸吸去薄片周围酒精，滴滴1212滴蒸馏水，盖上盖玻片。滴蒸馏水，盖上盖玻片。滴上清水可防止盖盖玻片
32、时滴上清水可防止盖盖玻片时产生气泡。产生气泡。低倍镜下找到花生子叶薄片的低倍镜下找到花生子叶薄片的最薄处，可看到细胞中有染成最薄处，可看到细胞中有染成橘黄色或红色圆形小颗粒。橘黄色或红色圆形小颗粒。装片不宜久装片不宜久放。放。时间一长，油滴会溶解在乙时间一长，油滴会溶解在乙醇中。醇中。生物组织中脂肪的鉴定三、蛋白质的鉴定操操 作作 方方 法法注注 意意 问问 题题解解 释释制备组织样液。（浸制备组织样液。（浸泡、去皮研磨、过泡、去皮研磨、过滤。）滤。）黄豆浸泡黄豆浸泡1 1至至2 2天，容易研磨成浆，天，容易研磨成浆，也可购新鲜豆浆以节约实验时间。也可购新鲜豆浆以节约实验时间。鉴定。加样液约鉴
33、定。加样液约2ml2ml于试管中，加入双缩于试管中，加入双缩脲试剂脲试剂A A，摇匀；再，摇匀；再加入双缩脲试剂加入双缩脲试剂B B液液3434滴，摇匀，溶液滴，摇匀，溶液变紫色。变紫色。A液和液和B液也液也要分开配制，要分开配制，储存。鉴定时储存。鉴定时先加先加A液后加液后加B液。液。CuSO4溶液溶液不能多加。不能多加。先加先加NaOHNaOH溶液，为溶液，为CuCu2+2+与蛋白质与蛋白质反应提供一个碱性的环境。反应提供一个碱性的环境。A A、B B液混装或同时加入，会导致液混装或同时加入，会导致CuCu2+2+变成变成Cu(OH)Cu(OH)2 2 沉淀，而失效。否沉淀，而失效。否则则
34、CuSOCuSO4 4的蓝色会遮盖反应的真实的蓝色会遮盖反应的真实颜色。颜色。可用蛋清代替豆浆。可用蛋清代替豆浆。蛋清要先稀释。蛋清要先稀释。如果稀释不够，在实验中蛋清如果稀释不够，在实验中蛋清 粘在试管壁，与双缩脲试剂反应粘在试管壁，与双缩脲试剂反应后会粘固在试管内壁上，使反应后会粘固在试管内壁上，使反应不容易彻底，并且试管也不易洗不容易彻底，并且试管也不易洗干净。干净。附：淀粉的检测和观附：淀粉的检测和观察察碘液不要滴太碘液不要滴太多多以免影响颜色观察以免影响颜色观察试剂成分试剂成分使用方法使用方法反应实质反应实质斐林斐林试剂试剂双缩脲双缩脲试剂试剂0.1g/mlNaOH0.05g/mlC
35、uSO40.1g/mlNaOH0.01g/mlCuSO4先混合再加入，需加热依次加入，不需加热Cu(OH)2被还原，呈砖红色碱性条件下Cu2+与肽键反应,呈紫色实验注意事项 还原性糖：有还原性基团游离醛基或酮基的糖；如葡萄糖、果糖、麦芽糖、乳糖。非还原性糖：淀粉、纤维素、蔗糖、糖原。实验八 叶绿体色素的提取和分离（必修一P97）一实验目的：1尝试用过滤方法提取叶绿体中的色素和用纸层析法分离提取到的色素。2分析实验结果，探究叶绿体中有几种色素，以及各自所呈现的颜色二实验原理：1叶绿体中的色素是有机物，不溶于水，易溶于有机溶剂中，所以用无水乙醇等能提取色素。2层析液是一种脂溶性很强的有机溶剂。叶绿
36、体色素在层析液中的溶解度不同，分子量小的溶解度高，随层析液在滤纸上扩散得快，溶解度低的随层析液在滤纸上扩散得慢。所以用纸层析法来分离四种色素。三、实验材料：幼嫩、鲜绿的菠菜叶实验步骤称量、剪碎加试剂_(溶解色素)_(研磨充分)_(保护色素不被破坏)研磨(破坏细胞，利于色素释放)过滤(粘稠度大，不能用滤纸，用单层尼龙布。)无水乙醇SiO2CaCO3提取绿叶中的色素 1cm铅笔细横线剪去两角画滤液细线：用毛细吸管画，细、直、干燥后重复画分离绿叶中的色素：层析液滤液细线 层析液不能没及滤液细线、加盖 防止两侧色素扩散快，色素带不整齐制备滤纸条：步步 骤骤注注 意意 问问 题题分分 析析1提取色素提取
37、色素5克绿叶剪碎，放入研钵，克绿叶剪碎，放入研钵，加加SiO2、CaCO3和和5mL丙丙酮（或酮（或10mL无水乙醇）无水乙醇）迅速、充分研磨。迅速、充分研磨。加加SiO2加加CaCO3 加丙酮加丙酮迅速迅速加加SiO2为了研磨得更充分。为了研磨得更充分。加加CaCO3防止研磨时叶绿素受到破坏。防止研磨时叶绿素受到破坏。因为叶绿素含镁，可被细胞液中的有因为叶绿素含镁，可被细胞液中的有机酸产生的氢代替，形成去镁叶绿素，机酸产生的氢代替，形成去镁叶绿素，CaCO3可中和液泡破坏释放的有机酸，可中和液泡破坏释放的有机酸，防止叶绿体被破坏防止叶绿体被破坏。2 2收集滤液收集滤液漏斗基部放一单层尼龙布，
38、漏斗基部放一单层尼龙布，研磨倒入漏斗内挤压，将研磨倒入漏斗内挤压，将滤液收集到小试管中，用滤液收集到小试管中，用棉花塞塞住试管口。棉花塞塞住试管口。尼龙布起过滤作用。尼龙布起过滤作用。试管口用棉花塞塞紧是为了防止丙酮试管口用棉花塞塞紧是为了防止丙酮挥发。挥发。3制备滤纸条制备滤纸条将干燥的滤纸，顺着纸纹将干燥的滤纸，顺着纸纹剪成长剪成长5cm，宽，宽1cm的纸的纸条，一端剪去二个角，并条，一端剪去二个角，并在距这一端在距这一端1cm处划一铅处划一铅笔线。笔线。干燥顺干燥顺着纸纹着纸纹剪成长剪成长条条一端剪一端剪去二个去二个角角 可使层析液同时到达滤液细线。可使层析液同时到达滤液细线。4 4划滤
39、液细线划滤液细线用毛细吸管吸取少量滤液，用毛细吸管吸取少量滤液，沿铅笔线划出细、齐、直沿铅笔线划出细、齐、直的一条滤液细线，干后重的一条滤液细线，干后重复三次。复三次。滤液细线越滤液细线越细、越齐越细、越齐越好。重复三好。重复三次。次。防止色素带之间部分重叠。防止色素带之间部分重叠。增加色素在滤纸上的附着量，增加色素在滤纸上的附着量，实验结果更明显。实验结果更明显。5 5纸层析法分离色素纸层析法分离色素将将3mL3mL层析液倒入烧杯中，层析液倒入烧杯中，将滤纸条（划线一端朝下）将滤纸条（划线一端朝下）插入层析液中，用培养皿插入层析液中，用培养皿盖盖上烧杯。盖盖上烧杯。层析液不能层析液不能没及滤
40、液细没及滤液细线。烧杯要线。烧杯要盖培养皿盖。盖培养皿盖。防止色素溶解在层析液中，防止色素溶解在层析液中，层析液中的苯、丙酮、石油醚层析液中的苯、丙酮、石油醚易挥发。易挥发。6 6观察实验结果观察实验结果 扩散最快是扩散最快是胡萝卜素，胡萝卜素，扩散最慢是扩散最慢是叶绿素叶绿素b b，含，含量最多的是量最多的是叶绿素叶绿素a a。四种色素之所以能被分离，是四种色素之所以能被分离，是因为四种色素随层析液在滤纸因为四种色素随层析液在滤纸上的扩散速度不同。上的扩散速度不同。实验九 探究影响酶活性的因素（必修一P78、P83）一实验目的：1探究不同温度和PH对过氧化氢酶活性的影响。2培养实验设计能力。
41、二方法步骤：提出问题作出假设设计实验（包括选择实验材料、选择实验器具、确定实验步骤、设计实验记录表格）实施实验分析与结论表达与交流。实例1：比较过氧化氢酶和Fe3+的催化效率一）实验原理：鲜肝提取液中含有过氧化氢酶，过氧化氢酶和Fe3+都能催化H2O2分解放出O2。经计算，质量分数为3.5%的FeCl3溶液和质量分数为20%的肝脏研磨液相比，每滴FeCl3溶液中的Fe3+数，大约是每滴肝脏研磨液中过氧化氢酶分子数的25万倍。二）方法步骤：步骤步骤试管编号试管编号 说明说明1 12 23 34 4 一一二二 观观测测指指标标结论结论2ml2ml2ml2ml3%3%3%3%常温90 FeCl3肝脏
42、研磨液2滴2滴不明显少量较多大量不复燃 不复燃变亮复燃过氧化氢在不同条件下的分解速率不一样过氧化氢在过氧化氢酶的作用下分解速率最快反应条件自变量自变量因变量因变量无关变量无关变量变量变量 H2O2 浓度剂量剂量气泡产生带火星的木条比较过氧化氢在不同条件下的分解速率实验注意事项步骤步骤注意问题注意问题解释解释取取4 4支洁净试管，编号，支洁净试管，编号，分别加入分别加入2mL H2mL H2 2O O2 2溶液溶液不让不让H H2 2O O2 2接接触皮肤触皮肤H H2 2O O2 2有一定的腐蚀性有一定的腐蚀性将将2 2号试管放在号试管放在90900 0C C左左右的水浴中加热，观右的水浴中加
43、热，观察气泡冒出情况，与察气泡冒出情况，与1 1号对照号对照 向向3 3号、号、4 4号试管内分号试管内分别滴入别滴入2 2滴滴FeClFeCl3 3溶液和溶液和2 2滴肝脏研磨液，观察滴肝脏研磨液，观察气泡产生情况气泡产生情况不可用同一不可用同一支滴管支滴管 肝肝脏研磨液必脏研磨液必须是新鲜的须是新鲜的 肝脏在制成肝脏在制成研磨液研磨液由于酶具有高效性，若滴入的由于酶具有高效性，若滴入的FeClFeCl3 3溶液中混有少量的过氧化氢酶，会溶液中混有少量的过氧化氢酶，会影响实验准确性影响实验准确性 因为过氧化氢酶是因为过氧化氢酶是蛋白质，放置过久，可受细菌作用蛋白质，放置过久，可受细菌作用而分
44、解，使肝脏组织中酶分子数减而分解，使肝脏组织中酶分子数减少，活性降低少，活性降低 研磨可破坏肝细胞结构，使细胞内研磨可破坏肝细胞结构，使细胞内的酶释放出来，增加酶与底物的接的酶释放出来，增加酶与底物的接触面积触面积2-3min2-3min后，将点燃的后，将点燃的卫生香分别放入卫生香分别放入3 3号和号和4 4号试管内液面的上方，号试管内液面的上方，观察复燃情况观察复燃情况放卫生香时，放卫生香时，动作要快，动作要快，不要插到气不要插到气泡中泡中现象：现象：3 3号试管产生气泡少，冒泡时号试管产生气泡少，冒泡时间长，卫生香几乎无变化，间长，卫生香几乎无变化，4 4号试管号试管产生气泡多，冒泡时间短
45、，卫生香产生气泡多，冒泡时间短，卫生香猛烈复燃避免卫生香因潮湿而熄灭猛烈复燃避免卫生香因潮湿而熄灭 实例2：温度对酶活性的影响一）实验目的：1初步学会探索温度对酶活性的影响的方法。2探索淀粉酶在不同温度下催化淀粉水解的情况。二）实验原理：1淀粉遇碘后，形成紫蓝色的复合物。2淀粉酶可以使淀粉逐步水解成麦芽糖和葡萄糖（淀粉水解过程中，不同阶段的中间产物遇碘后，会呈现红褐色或红棕色。）麦芽糖和葡萄糖遇碘后不显色。注：市售a-淀粉酶的最适温度约600C三）方法步骤：摇匀混合，放置各自温度反应5min结论：淀粉酶在60 中活性最强1 1号号2 2号号3 3号号4 4号号5 5号号6 6号号3%3%可溶性
46、可溶性淀粉淀粉2ml2ml2ml2ml2ml2ml2%2%淀淀粉酶粉酶1ml1ml1ml1ml1ml1ml分别保温分别保温冰水冰水6060水浴水浴沸水浴沸水浴冰水冰水6060水浴水浴沸水浴沸水浴分别保温分别保温2 2分钟分钟混合保温混合保温4 4号倒入号倒入1 1号；号；5 5号倒入号倒入2 2号；号；6 6号倒入号倒入3 3号号检测检测在各混合试管中滴加碘液在各混合试管中滴加碘液2 2滴滴颜色颜色变蓝变蓝不变蓝探究温度对淀粉酶活性的影响分析：为什么不用斐林试剂来进行检测？操作操作注意问题注意问题解释解释取取3 3支试管，编上号，然支试管，编上号，然后分别注入后分别注入2mL2mL可溶性淀可溶
47、性淀粉溶液粉溶液 另取另取3 3支试管，编上号，支试管，编上号，然后分别注入然后分别注入1mL1mL新鲜淀新鲜淀粉酶溶液粉酶溶液 将装有淀粉溶液和酶溶将装有淀粉溶液和酶溶液的试管分成液的试管分成3 3组，分别组，分别放入热水（约放入热水（约60600 0C C）、）、沸水和冰块中，维持各沸水和冰块中，维持各自的温度自的温度5min5min不能只用不同不能只用不同温度处理淀粉温度处理淀粉溶液或酶溶液溶液或酶溶液防止混合时，由于两种溶液的防止混合时，由于两种溶液的温度不同而使混合后温度发生温度不同而使混合后温度发生变化，反应温度不是操作者所变化，反应温度不是操作者所要控制的温度，影响实验结果。要控
48、制的温度，影响实验结果。分别将淀粉酶溶液注入分别将淀粉酶溶液注入相同温度下的淀粉溶液相同温度下的淀粉溶液中，摇匀后，维持各自中，摇匀后，维持各自的温度的温度5min5min保持各自温度保持各自温度时间不能太短时间不能太短淀粉酶催化淀粉水解需要一定淀粉酶催化淀粉水解需要一定时间时间在在3 3支试管中各滴入支试管中各滴入1-21-2滴碘液，摇匀后观察这滴碘液，摇匀后观察这3 3支试管中溶液颜色变化支试管中溶液颜色变化并记录并记录碘液不能滴加碘液不能滴加太多太多防止影响实验现象的观察防止影响实验现象的观察（注（注意：探索淀粉酶对淀粉和蔗糖意：探索淀粉酶对淀粉和蔗糖的水解作用实验中必须用斐林的水解作用
49、实验中必须用斐林试剂鉴定反而不用碘液）试剂鉴定反而不用碘液）实例3：PH值对酶活性的影响操作步骤：用表格开式显示实验步骤：（注意操作顺序不能错）序号序号加入试剂或处理方法加入试剂或处理方法试管试管1 12 23 31 1注入新鲜的淀粉酶溶液注入新鲜的淀粉酶溶液1mL1mL1mL1mL1mL1mL2 2注入蒸馏水注入蒸馏水1mL1mL/3 3注入氢氧化钠溶液注入氢氧化钠溶液/1mL1mL/4 4注入盐酸注入盐酸/1mL1mL5 5注入可溶性淀粉溶液注入可溶性淀粉溶液2mL2mL2mL2mL2mL2mL6 660600 0C C水浴保温水浴保温5min5min 7 7加入斐林试剂，边加边振加入斐林
50、试剂，边加边振荡荡2mL2mL2mL2mL2mL2mL8 8水浴加热煮沸水浴加热煮沸1min1min 9 9观察观察3 3支试管中溶液颜色变支试管中溶液颜色变化变记录化变记录 实验十 探究酵母菌的呼吸方式（必修一P91）一实验目的：1了解酵母菌的无氧呼吸和有氧呼吸情况2学会运用对比实验的方法设计实验二实验原理：1酵母菌是一种单细胞真菌，在有氧和无氧的条件下都能生存，属于兼性厌氧菌，因此便于用来研究细胞呼吸的不同方式。方程式（略）2 CO2可使澄清石灰水变混浊，也可使溴麝香草酚蓝水溶液由蓝变绿再变黄。根据石灰水混浊程度或溴麝香草酚蓝水溶液变成黄色的时间长短，可以检测酵母菌培养CO2的产生情况。3
