1、酒精摇瓶实验一、实验目的掌握酒精发酵的基本原理。二、实验原理酒精发酵是在厌氧条件下,己糖分解为乙醇并释放出二氧化碳。酒精发酵的类型有 3 种:即通过 EMP 途径的酵母菌酒精发酵、通过 HMP 途径的细菌酒精发酵和通过 ED 途径的细菌酒精发酵三、实验材料1. 菌种酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)2. 培养基酵母斜面培养基(YDP) 酵母液体培养基装液量;接种量3. 溶液及试剂10%的 H2SO4 溶液;1%的 K2Cr2O7 溶液;10%的 NaOH 溶液4. 器材四、方法步骤1. 液体种子的制备和发酵液的接种培养(1) 活化酿酒酵母斜面,培养 1824h;取菌种
2、一满环接入 150ml 三角瓶中,2830保温培养 24h,作为液体种子(2) 以 5%的接重量接种 250ml 三角瓶和 18mm180mm 试管;2830培养24 36h 后观察结果(3) 二氧化碳生成的检测。先观察三角瓶中的发酵液有无泡沫或气泡逸出,再观察发酵试管中的杜氏小管有无气体聚集(4) 取 10%的 NaOH 溶液 1ml 注入发酵试管内,轻轻搓动发酵管,观察液面是否上升2. 酒精生成的检验(1) 打开 250ml 三角烧瓶棉塞,闻闻有无酒精气味(2) 从 250ml 三角瓶中取出发酵液 5ml,注入空试管中,再加 10%的 H2SO4 溶液 2ml;接着向试管中滴加 1%的 K
3、2Cr2O7 溶液 1020 滴,观察试管溶液颜色变化五、结果分析(1) 杜氏小管内有气体聚集,说明发酵过程中有二氧化碳的生成加 NaOH 后,轻轻搓动发酵管,发现液面上升,因为在此过程中发酵产生的二氧化碳与氢氧化衲反应生成碳酸氢钠,液面上升。(2) 打开三角瓶瓶塞,可闻到明显的酒香味,说明酿酒酵母一发酵长生酒精。滴加 K CrO 溶液,管内有橙黄色变为黄绿色,说明发酵产生了酒精,且酒精27与 K CrO 反应。27。六、思考题1.什么是巴斯德效应,如何利用其指导酒精发酵?答:与有氧情况下相比,酵母在缺氧条件下,消耗更多烦的葡萄糖,生物组织中和细胞中糖发酵被氧抑制即为巴斯德效应,即氧气可降低糖类的分解代谢和减小糖酵解产物的积累在酒精发酵的初期,通入大量氧气,可使菌体大量增长,在产生发酵产物的时期,使其处于缺氧状态下,可以增加发酵产物的积累。