1、习题：一、名词解释 1.临床检验生物化学(Clinical Biochemistry) 2.组合试验(profile tests) 二、问答题 1.试述临床检验生物化学的研究领域。 2.试述临床检验生物化学在医学中的地位及应用。 3.简述临床检验生物化学的进展及发展趋势。 第一章 绪论答案 一、 名词解释 1. 临床检验生物化学(Clinical Biochemistry): 临床检验生物化学是在人体正常生物化学基础上，研究病理状态下生物化学改变，寻找这些改变的特征性标志并建立可靠实用检测方法，通过对这些特征性标志物的检测，为健康评估、疾病预防、诊断、治疗、病情和预后判断等提供生物化学信息和决
2、策依据的一门学科。 2. 组合试验(profile tests): 在循证检验医学基础上，将某些疾病或器官系统功能的有关检验项目，进行科学合理的组合，以便获取更全面完整的病理生物化学信息的方法。如了解肝脏功能的组合试验。 二、问答题 1. 试述临床检验生物化学的研究领域。 临床检验生物化学的学科领域主要包括以下三方面： 1. 揭示有关疾病的病理生物化学改变，从本质上阐明疾病发生、发展、转归的生物化学机制，为疾病的预防、诊断、疗效及预后评估，提供理论基础。 2. 在上述研究基础上，寻找具有疾病特异性的生物化学标志物，并建立特异度、灵敏度高，简便而高性价比的检测方法，从而在临床开展有关项目的检测，
3、提供反映这些标志物改变的客观数据。 3. 将检测项目的数据，转化为预防、诊断和疗效及预后评价信息。 2. 试述临床检验生物化学在医学中的地位及应用。 在医学中，临床生物化学是阐明疾病发生、发展及转归的分子机制，从本质上认识病变准确部位及具体环节，为寻找有效的预防和治疗靶点，疾病的诊断及病情和预后判断，提供理论基础的一门重要病理学学科。 其在医学中的应用主要包括：1. 揭示疾病发生的分子机制。2.通过对有关疾病生物化学改变的特征性生物标志检测方法的建立和实施，为判断有无及何种疾病提供客观依据。而动态观察这些标志物的改变，可对病情发展、转归、预后及治疗方案的制定和效果判断，提供依据。3. 临床检验
4、生物化学技术，涵盖了当前医学研究中常用的主要方法技术。因此，也是医学特别是临床医学各个领域研究的一门共同性工具学科。 3. 简述临床检验生物化学的进展及发展趋势。 分子诊断学迅速发展，代表了的发展方向； 深入寻找高诊断特异性和灵敏性的新生物化学标志，提高诊断性能； 检测技术和方法的更新完善，更加及时、准确地提供检验结果； 全程质量管理； 以循证检验医学为基础，科学评价有关检测项目的诊断性能，合理有效地开展临床生物化学检验。 一、单项选择题 (A 型题 ) 1 转氨酶的辅酶是 A 磷酸吡哆醛 B NADPH C NADH D FAD E FMN 2 SI 制中酶活性单位为 A U/L B Kat
5、al C g/L D ml/L E pmol 3酶的活性国际单位 (U) 是指 A 在 25 及其他最适条件下，每分钟催化 lmol 底物反应所需的酶量 B 在特定的条件下，每分钟催化 1 mol 底物发生反应所需的酶量 C 在 37 条件下，每分钟催化 lmmol 底物发生反应所需的酶量 D 在规定条件下，每秒钟催化 lmol 底物反应所需的酶量 E 在最适条件下，每小时催化 lmol 底物发生反应所需的酶量 4目前我国临床实验室测定酶活性浓度推荐温度为 A (25 0.1) B (37 0.5) C (37 0.3) D (37 0.1) E (37 1) 5下列哪种酶是血浆特异酶 A 淀
6、粉酶 B 凝血酶原 C 碱性磷酸酶 D 酸性磷酸酶 E 脂肪酶 6下列哪一种酶只位于细胞浆 A 酸性磷酸酶 B 谷氨酸脱氢酶 C 乳酸脱氢酶 D 天冬氨酸脱氢酶 E 异柠檬酸脱氢酶 7在正常妊娠过程中血清酶增高最明显的是 A LD B ALP C CK D AMY E LPS 8下列哪一种辅因子的生成可通过测定 340nm 处吸光度的降低数来表示 A FADH2 B NAD+ C NADH D FMN E NADPH 9血清保存在室温活性会升高的酶是 A LD B ALP C ACP D ALT E AST 1 0 ALT 在人体各组织中含量最多的是 A 肾脏 B 心脏 C 骨骼肌 D 红细胞
7、 E 肝脏 1 1改变连续监测法测酶活性浓度的常数 K 值大小最方便的途径为 A 改变酶反应温度 B 改变监测时间长短 C 改变底物浓度 D 改变标本稀释度 E 改变酶反应的 pH 值 12酶促反应进程曲线通常可用于确定 A 酶反应线性范围 B 适宜的 pH C 适宜的酶量范围 D 反应线性期的时间范围 E 底物的浓度 13目前国内外应用连续监测法测定血清 ALT 所选测定波长为 A 280nm B 340nm C 405nm D 450nm E 560nm 14进行酶活性浓度测定时，常推荐加入磷酸吡哆醛的酶是 A ALP B ALT C CK D LD E AMY 15连续监测法测定 ALT
8、 所用基质通常是 A 丙氨酸 -a 酮戊二酸 B 丙酮酸 - 谷氨酸 C 门冬氨酸 -a 酮戊二酸 D 草酰乙酸 - 谷氨酸 E 谷胱甘肽 - 氨基酸 16显示“胆酶分离”前兆的疾病是 A 急性心肌梗死 B 肝癌 C 脂肪肝 D 肝坏死 E 胆石症 1 7 LD 催化乳酸生成丙酮酸的反应较适当的 pH 是 A 10.5 B 9.0 C 7.6 D 7.0 E 4.6 1 8 乳酸脱氢酶一般形成的同工酶的种类有 A 2 种 B 3 种 C 4 种 D 5 种 E 6 种 19骨折时血清 LD 同工酶上升最高的是 A LDl B LD2 C LD3 D LD4 E LD5 20 CK 含量最多的人
9、体组织是 A 肝脏 B 肌肉 C 肺 D 肾脏 E 心脏 21急性心肌梗死时，最先增高的酶是 A ALT B LD C CK D AST E a-HBD 22在测定肌酸激酶试剂中含有巯基化合物，如 N- 乙酰半胱氨酸，目的是 A 使酶分子有别构效应 B 稳定酶活性中心的二硫键 C 除去腺苷激酶 (AK) 的影响 D 巯基化合物是肌酸激酶底物之一 E 除去肌酸激酶抑制剂 23对乙醇中毒最敏感的血清酶是 A GGT B ALP C CK D LD E ALT 24与心脏是否受损关系不大的血清酶是 A AST B a-HBD C CK D LD E ALP 25 ACP 含量最多的人体组织是 A 肝
10、脏 B 骨骼 C 红细胞 D 血小板 E 前列腺 26为防止红细胞对 ACP 测定的干扰，常加入下列何种抑制剂以提高检测的特异性 A 苯丙氨酸 B L- 酒石酸 C 尿酸 D EDTA E L- 半胱氨酸 27在碱性溶液中进行醋酸纤维薄膜电泳时，最接近正极 ( 移动最快 ) 的 ALP 同工酶是 A 肝 ALP B 骨 ALP C 肠 ALP D 胎盘 ALP E 肾 ALP 28同时测定下列哪种血清酶有助于鉴别 ALP 升高的来源 A ACP B GGT C LD D CK E AST 29在骨骼和肝脏疾病的诊断中最重要的酶是 A LD B CK C ALP D ACP E AMY 30人血
11、清中的淀粉酶是 A a 淀粉酶 B 淀粉酶 C 淀粉酶 D A+B E A+C 31用于辅助诊断有机磷中毒的酶是 A AMY B ACP C LPL D ChE E ALP 32临床上常用来分析同工酶的方法 A 电泳法 B 层析法 C 沉淀法 D 热失活分析法 E 蛋白酶水解法 33患者，男， 32 岁，饮酒饱餐后上腹部剧痛 6 小时，伴大汗，频吐。查体：面色苍白，血压 9.3/6.7kPa(70/50mmHg) ，心率 132 次分，左上腹肌紧张，压痛及反跳痛，腹部移动性浊音阳性，血淀粉酶 740U L( 正常上限为 220U/L) 。该患者首先考虑的诊断为 A 急性胆囊炎 B 肝性黄疸 C
12、 急性胰腺炎 D 溶血性黄疸 E 胆石症 二、多项选择题 ( B型题 ) A-HBD BLD CAST DCK EACP 1对前列腺癌诊断价值最大的血浆酶是（ ）。 2急性心肌梗死时，最先恢复正常的血浆酶是（ ）。 AAST和ALT BALP和CK CLPS和AMS DAST和AMS ECK和CK-MB 3多用于胰腺炎诊断的酶是（ ）。 4多用于肝脏疾患诊断的酶是（ ）。 5多用于急性心肌梗死诊断的酶是（ ）。 6多用于骨骼疾患诊断的酶是（ ）。 三、多项选择题 (X 型题 ) 1 影响血清酶变异的生理因素有 A 性别 B 年龄 C 进食 D 运动 E 以上都不是 2 下列酶中具有酶原形式的酶
13、有 A 胃蛋白酶 B 胰蛋白酶 C ALT D ALP E 糜蛋白酶 3 下列对酶活性浓度测定描述正确的是 A 可测定产物生成量 B 可测定底物消耗量 C 与底物浓度无关 D 需最适温度 E 需最适酸碱度 4 临床上应用酶检测诊断疾病时，一般考虑下列哪些因素 A 组织与血清酶活性比值在 100 倍以上 B 组织损伤后，酶能较快地释放到血液中 C 要有合适的生物半寿期 D 同工酶有一定组织分布特异性 E 酶的组织分布广 5 肌酸激酶存在于 A 心肌 B 骨骼肌 C 脑组织 D 红细胞 E 肝 6 标本溶血对测定结果有影响的血清酶是 A CK B LD C ALT D AST E GGT 7 CK
14、 的变异体主要是指 A 巨 CK1 B CK-MB C CK-MM D 巨 CK2 E CK-BB 8 ACP 与 ALP 作用类似，主要区别在于 A 最适 pH 不同 B 组织来源不同 C 所作用的底物种类相近 D 缓冲液种类不同 E 稳定性不同 9 连续监测法进行酶学测定中常见的干扰因素有 A 样本本身含有其他酶和物质干扰 B 工具酶中混有其他酶的污染 C 非酶反应的干扰 D 分析容器的污染与沉淀形成 E 使用双试剂 10 下列代谢物与其酶法测定所用试剂的组合，正确的是 A 尿酸 - 尿酸酶 - 过氧化氢酶 B 葡萄糖 - 葡萄糖氧化酶 - 葡萄糖 -6 磷酸脱氢酶 C 尿素 - 尿素酶
15、- 谷氨酸脱氢酶 D 甘油三酯 - 脂蛋白脂肪酶 - 甘油激酶 E 胆固醇 - 胆固醇氧化酶 - 过氧化物酶 11 下列血清酶及其测定所用试剂的组合，正确的是 A ATP-GGT 、 B alanine-ALT C NAD-LD D p-nitrophenyl phosphate-ALP E ADP-CK 12 碱性磷酸酶活性升高可见于 A 变形性骨炎 B 骨肿瘤 C 恶性贫血 D 甲状腺功能低下 E 梗阻性黄疸 13 G6PD 可用于测定 A 葡萄糖 B 淀粉酶 C 脂肪酶 D 乳酸脱氢酶 E 肌酸激酶 四、名词解释 1酶 2血浆固有酶 3酶的半寿期 4连续监测法 5工具酶 6酶活性IU定义
16、 7同工酶 8底物启动模式 五、问答题 1.根据米-曼式方程计算，当s=3Km时，其反应速度V为多大? 2.简述正常血浆中的酶动态特点及影响酶浓度的因素 3.简述病理性血浆中酶浓度异常的机制 4.简述酶浓度的测定方法。 5.简述酶偶联反应法的原理。 6.简述临床同工酶的分析方法。 7.简述体液中酶浓度测定的主要影响因素及控制 8.临床酶学测定之前，标本的采集、处理与贮存有何注意点? 9.简述自动生化分析仪进行临床酶学测定时系数K值的计算与应用。 10.简述ALT测定及其临床意义。 11.简述CK及其同工酶测定的临床意义。 12.试述血清ACP活性测定的临床意义。13.试述血清淀粉酶测定有何临床
17、意义? 第二章 生物化学检验中的诊断酶学参考答案 一、单项选择题 (A 型题 ) 1 A 2 B 3 B 4 D 5 B 6 C 7 B 8 C 9 B 1 0 E 1 1 D 12 D 13 B 14 B 15 A 16 D 1 7 B 1 8 D 19 E 20 B 21C 22 B 23 A 24 E 25 E 26 B 27 A 28 B 29 C 30 A 31 D 32 A 33 C 二、多项选择题 ( B型题 ) 1E 2D 3 C 4A 5E 6B 三、多项选择题 (X 型题 ) 1 ABCD 2 ABE 3 ABDE 4 ABCD 5 ABC 6 ABCD 7 AD 8 AB
18、DE 9 ABCD 10 ACDE 11 BCDE 12 ABE 13 AE 四、名词解释 1酶是一种由活细胞产生，具有高度专一性、高度催化活性的物质 ，又称为生物催化剂 ，主要是蛋白质。 2血浆固有酶指属血浆蛋白的固有成分，在血浆中发挥特定催化作用的一类酶，也称血浆特异酶。 3酶失活至原来活性一半时所需时间称为酶的半寿期（t 1/2 ）。半寿期可用来代表酶从血中清除的快慢。 4连续监测法是指每隔一定时间（260s），连续多次测定酶反应过程中某一反应产物或底物量随时间变化的数据，求出酶反应初速度，间接计算酶活性浓度的方法。 5在酶学分析中，作为试剂用于测定化合物浓度或酶活性浓度的酶称为工具酶。
19、 6酶活性IU定义为：在特定条件下， 1 min能转化1 m mol底物 的酶量，即 1IU=1 m mol.min -1 。目前国内外大多数临床实验室常省略国际二字，即将IU简写为 U。 7同一种属中由不同基因或等位基因所编码的多肽链单体、纯聚体或杂化体，具有相同的催化作用，但其分子构成、空间构象、理化性质、生物学性质以及器官分布或细胞内定位不同的一组酶称为同工酶。 8底物启动模式是指样品先与缺乏某种底物的试剂1预孵育一定时间后，再加入含这种底物的试剂2，启动样品中的待测酶的酶促反应。 五、问答题 1V=Vms/(Km+s)= Vm*3Km /(Km+3Km)=3/4Vm=0.75Vm，即V
20、/Vm=0.75。 2 正常血浆中酶的动态变化特点：正常血浆酶根据酶的来源及其在血浆中发挥催化功能的情况，可将血浆酶分成血浆特异酶和非血浆特异酶两大类，非血浆特异酶可进一步分为外分泌酶、细胞内酶和其他酶。一般认为，血液中酶的清除方式与其他血浆蛋白质类似，但是具体清除途径尚未完全明了。血浆酶主要在血管内失活或分解，尿液则是小分子酶排出的途径。 影响酶浓度的因素包括 影响正常血浆酶含量的自身因素和生物学因素，前者主要有细胞内外酶浓度的差异、酶的相对分子量、酶的组织分布、酶在细胞内的定位和存在形式、酶的半寿期等；后者主要是性别、年龄、食与药物、运动、妊娠与分娩、体位改变、昼夜变化及家庭因素等。 3血
21、浆酶的病理性变化主要包括酶合成异常、酶释放增加、酶清除异常等。酶合成异常包括合成减少和合成增多。酶从病变（或损伤）细胞中释放增加是疾病时大多数血清酶增高的主要机制。炎症、缺血、坏死、创伤和肿瘤等是细胞释放大分子酶蛋白的重要原因。此外，血液含抑制物、代谢紊乱、药物、遗传性酶缺陷等原因也可致酶活性下降。 4酶 浓度 测定方法分为绝对定量法和相对定量法两大类。绝对定量法是直接测定酶蛋白量或酶摩尔浓度。相对定量法是根据酶的催化活性或酶促反应速度来间接测定酶浓度的方法。目前临床上所用的方法多属相对定量法。 5 在酶活性测定时，如果底物或产物不能直接测定或难于准确测定，可采用酶偶联法测定，即在反应体系中加
22、入一个或几个工具酶，将待测酶生成的某一产物转化为新的可直接测定的产物，当加入酶的反应速度与待测酶反应速度达到平衡时，指示酶的反应速度即代表待测酶的活性 。 6临床同工酶的分析方法有 电泳法、免疫分析法、 色谱法、动力学分析法、蛋白酶水解法 。 7体液中酶浓度测定时，要控制的主要影响因素包括 标本及标本采集和处理因素、试剂及方法学因素、仪器及操作因素，以及最适测定条件选择与条件的优化。 8 测定酶浓度的样本来自不同的组织和器官，但以血清和血浆最为常用，特别是血清，既可避免抗凝剂的影响，又可防止抗凝时因振摇所致的溶血。 临床酶学测定之前，标本的采集、处理与贮存应注意：防止 溶血、合理使用抗凝剂、适
23、宜的温度、减少副反应干扰。此外，采集各种体液样本的器皿质地和洁净度，采血部位，以及血清中过量的胆红素、脂质，样品制备过程中的振摇等，均影响酶活性测定。 9 用自动生物化学分析仪测定酶活性，通常采用公式进行计算。当条件固定时， 理论 K 值为常数。 由于仪器等诸多因素的影响， 在临床实际工作中，均需用校准物 定期检查和校正实际测定 K 值。 10 转氨酶的测定方法有许多种，以往多用比色法如赖氏法 （Reitman-Frankel） 、金氏法 （King） 和改良穆氏法 （Mohun） ，其中以赖氏法最常用，由于此法操作简便、经济，一些小型实验室仍在使用。目前，国内外实验室多采用IFCC推荐的连续
24、监测方法对 ALT 进行测定。 ALT主要用于肝脏疾病的诊断。 由于肝细胞中ALT浓度比血液高约7000倍，只要有1/1000肝细胞中的ALT进入血液就足以使血中ALT升高1倍，故此酶是 反映 肝损伤的一个很灵敏指标。 但应特别注意的是，重症肝炎时由于大量肝细胞坏死， 血中ALT可仅轻度增高，临终时常明显下降，但 胆红素却进行性升高，出现所谓“酶胆分离”现象，常是肝坏死的前兆。 11 CK 的测定方法有比色法、紫外分光光度法和荧光法等。由于以磷酸肌酸为底物的逆向反应速度为正向反应速度的6倍，所以采用逆向反应进行测定较为普及。如肌酸显色法和酶偶联法，其中后者最常用，为国内外测定 CK 的参考方法
25、。CK 同工酶 多用电泳和免疫抑制法测定，但两法均会受溶血和巨CK的干扰，免疫抑制法还会受到CK-BB的干扰。因此现在推荐用免疫化学方法直接测定 CK-MBmass ，可不受溶血和巨CK的干扰。CK 同工酶亚型 （CK-MM 亚型 和 CK-MB亚型 ）多用琼脂糖凝胶高压电泳和等电聚焦电泳等。 CK 及其同工酶和亚型是目前临床上测定次数最多的酶，主要用于心肌、骨骼肌和脑疾患的诊断和鉴别诊断及预后判断。 12 ACP 的测定多是利用磷酸苯二钠法和磷酸对硝基酚法等在酸性条件下测定 ACP 。国外多推荐使用磷酸百里酚酞为底物的比色法，因为前列腺ACP对此底物亲合力高，测定结果基本能反映ACP含量高低
26、。不同方法参考值也不同。此外还可通过用 L- 酒石酸这类抑制剂鉴别和估量 PAP 活性。由于 ACP 不稳定，酶活性测定困难，目前已发展一些免疫学方法特异而灵敏地测定 ACP 特别是 PAP 。 总ACP升高可作为前列腺癌、骨疾病或网状内皮系统疾病的诊断指标。 13 临床上测定血液AMY主要用于诊断急性胰腺炎，常在腹痛后 23 h 开始升高（也有延至12 h 后升高者），多在1224 h 达峰值，25 d 恢复正常。 峰 值 一般为4 ULN 6 ULN ，最高可达40倍。此值愈高，急性胰腺炎的可能性就愈大， 但 高低和疾病预后关系不大，但 若持续性升高达数周，常提示胰腺炎有反复，或有并发症发
27、生。尿 AMY 约于发病后1224 h 开始升高，下降也比血液 AMY 慢，因此在急性胰腺炎后期测定尿 AMY 更有价值。 唾液腺疾病如腮腺炎患者血AMY也可升高，但临床 表现迥异 ，且主要为S-AMY升高，有别于胰腺炎以P-AMY升高为主。 第二章 生物化学检验中的诊断酶学参考答案 一、单项选择题 (A 型题 ) 1 A 2 B 3 B 4 D 5 B 6 C 7 B 8 C 9 B 1 0 E 1 1 D 12 D 13 B 14 B 15 A 16 D 1 7 B 1 8 D 19 E 20 B 21C 22 B 23 A 24 E 25 E 26 B 27 A 28 B 29 C 30
28、 A 31 D 32 A 33 C 二、多项选择题 ( B型题 ) 1E 2D 3 C 4A 5E 6B 三、多项选择题 (X 型题 ) 1 ABCD 2 ABE 3 ABDE 4 ABCD 5 ABC 6 ABCD 7 AD 8 ABDE 9 ABCD 10 ACDE 11 BCDE 12 ABE 13 AE 四、名词解释 1酶是一种由活细胞产生，具有高度专一性、高度催化活性的物质 ，又称为生物催化剂 ，主要是蛋白质。 2血浆固有酶指属血浆蛋白的固有成分，在血浆中发挥特定催化作用的一类酶，也称血浆特异酶。 3酶失活至原来活性一半时所需时间称为酶的半寿期（t 1/2 ）。半寿期可用来代表酶从血
29、中清除的快慢。 4连续监测法是指每隔一定时间（260s），连续多次测定酶反应过程中某一反应产物或底物量随时间变化的数据，求出酶反应初速度，间接计算酶活性浓度的方法。 5在酶学分析中，作为试剂用于测定化合物浓度或酶活性浓度的酶称为工具酶。 6酶活性IU定义为：在特定条件下， 1 min能转化1 m mol底物 的酶量，即 1IU=1 m mol.min -1 。目前国内外大多数临床实验室常省略国际二字，即将IU简写为 U。 7同一种属中由不同基因或等位基因所编码的多肽链单体、纯聚体或杂化体，具有相同的催化作用，但其分子构成、空间构象、理化性质、生物学性质以及器官分布或细胞内定位不同的一组酶称为同
30、工酶。 8底物启动模式是指样品先与缺乏某种底物的试剂1预孵育一定时间后，再加入含这种底物的试剂2，启动样品中的待测酶的酶促反应。 五、问答题 1V=Vms/(Km+s)= Vm*3Km /(Km+3Km)=3/4Vm=0.75Vm，即V/Vm=0.75。 2 正常血浆中酶的动态变化特点：正常血浆酶根据酶的来源及其在血浆中发挥催化功能的情况，可将血浆酶分成血浆特异酶和非血浆特异酶两大类，非血浆特异酶可进一步分为外分泌酶、细胞内酶和其他酶。一般认为，血液中酶的清除方式与其他血浆蛋白质类似，但是具体清除途径尚未完全明了。血浆酶主要在血管内失活或分解，尿液则是小分子酶排出的途径。 影响酶浓度的因素包括
31、 影响正常血浆酶含量的自身因素和生物学因素，前者主要有细胞内外酶浓度的差异、酶的相对分子量、酶的组织分布、酶在细胞内的定位和存在形式、酶的半寿期等；后者主要是性别、年龄、食与药物、运动、妊娠与分娩、体位改变、昼夜变化及家庭因素等。 3血浆酶的病理性变化主要包括酶合成异常、酶释放增加、酶清除异常等。酶合成异常包括合成减少和合成增多。酶从病变（或损伤）细胞中释放增加是疾病时大多数血清酶增高的主要机制。炎症、缺血、坏死、创伤和肿瘤等是细胞释放大分子酶蛋白的重要原因。此外，血液含抑制物、代谢紊乱、药物、遗传性酶缺陷等原因也可致酶活性下降。 4酶 浓度 测定方法分为绝对定量法和相对定量法两大类。绝对定量
32、法是直接测定酶蛋白量或酶摩尔浓度。相对定量法是根据酶的催化活性或酶促反应速度来间接测定酶浓度的方法。目前临床上所用的方法多属相对定量法。 5 在酶活性测定时，如果底物或产物不能直接测定或难于准确测定，可采用酶偶联法测定，即在反应体系中加入一个或几个工具酶，将待测酶生成的某一产物转化为新的可直接测定的产物，当加入酶的反应速度与待测酶反应速度达到平衡时，指示酶的反应速度即代表待测酶的活性 。 6临床同工酶的分析方法有 电泳法、免疫分析法、 色谱法、动力学分析法、蛋白酶水解法 。 7体液中酶浓度测定时，要控制的主要影响因素包括 标本及标本采集和处理因素、试剂及方法学因素、仪器及操作因素，以及最适测定
33、条件选择与条件的优化。 8 测定酶浓度的样本来自不同的组织和器官，但以血清和血浆最为常用，特别是血清，既可避免抗凝剂的影响，又可防止抗凝时因振摇所致的溶血。 临床酶学测定之前，标本的采集、处理与贮存应注意：防止 溶血、合理使用抗凝剂、适宜的温度、减少副反应干扰。此外，采集各种体液样本的器皿质地和洁净度，采血部位，以及血清中过量的胆红素、脂质，样品制备过程中的振摇等，均影响酶活性测定。 9 用自动生物化学分析仪测定酶活性，通常采用公式进行计算。当条件固定时， 理论 K 值为常数。 由于仪器等诸多因素的影响， 在临床实际工作中，均需用校准物 定期检查和校正实际测定 K 值。 10 转氨酶的测定方法
34、有许多种，以往多用比色法如赖氏法 （Reitman-Frankel） 、金氏法 （King） 和改良穆氏法 （Mohun） ，其中以赖氏法最常用，由于此法操作简便、经济，一些小型实验室仍在使用。目前，国内外实验室多采用IFCC推荐的连续监测方法对 ALT 进行测定。 ALT主要用于肝脏疾病的诊断。 由于肝细胞中ALT浓度比血液高约7000倍，只要有1/1000肝细胞中的ALT进入血液就足以使血中ALT升高1倍，故此酶是 反映 肝损伤的一个很灵敏指标。 但应特别注意的是，重症肝炎时由于大量肝细胞坏死， 血中ALT可仅轻度增高，临终时常明显下降，但 胆红素却进行性升高，出现所谓“酶胆分离”现象，常
35、是肝坏死的前兆。 11 CK 的测定方法有比色法、紫外分光光度法和荧光法等。由于以磷酸肌酸为底物的逆向反应速度为正向反应速度的6倍，所以采用逆向反应进行测定较为普及。如肌酸显色法和酶偶联法，其中后者最常用，为国内外测定 CK 的参考方法。CK 同工酶 多用电泳和免疫抑制法测定，但两法均会受溶血和巨CK的干扰，免疫抑制法还会受到CK-BB的干扰。因此现在推荐用免疫化学方法直接测定 CK-MBmass ，可不受溶血和巨CK的干扰。CK 同工酶亚型 （CK-MM 亚型 和 CK-MB亚型 ）多用琼脂糖凝胶高压电泳和等电聚焦电泳等。 CK 及其同工酶和亚型是目前临床上测定次数最多的酶，主要用于心肌、骨
36、骼肌和脑疾患的诊断和鉴别诊断及预后判断。 12 ACP 的测定多是利用磷酸苯二钠法和磷酸对硝基酚法等在酸性条件下测定 ACP 。国外多推荐使用磷酸百里酚酞为底物的比色法，因为前列腺ACP对此底物亲合力高，测定结果基本能反映ACP含量高低。不同方法参考值也不同。此外还可通过用 L- 酒石酸这类抑制剂鉴别和估量 PAP 活性。由于 ACP 不稳定，酶活性测定困难，目前已发展一些免疫学方法特异而灵敏地测定 ACP 特别是 PAP 。 总ACP升高可作为前列腺癌、骨疾病或网状内皮系统疾病的诊断指标。 13 临床上测定血液AMY主要用于诊断急性胰腺炎，常在腹痛后 23 h 开始升高（也有延至12 h 后
37、升高者），多在1224 h 达峰值，25 d 恢复正常。 峰 值 一般为4 ULN 6 ULN ，最高可达40倍。此值愈高，急性胰腺炎的可能性就愈大， 但 高低和疾病预后关系不大，但 若持续性升高达数周，常提示胰腺炎有反复，或有并发症发生。尿 AMY 约于发病后1224 h 开始升高，下降也比血液 AMY 慢，因此在急性胰腺炎后期测定尿 AMY 更有价值。 唾液腺疾病如腮腺炎患者血AMY也可升高，但临床 表现迥异 ，且主要为S-AMY升高，有别于胰腺炎以P-AMY升高为主。 第三章血浆蛋白质与含氮化合物的生物化学检验 一、单项选择题 1. 下列物质属于含氮化合物 的是：（ ） A. 蛋白质 B
38、. 氨基酸 C. 嘌呤核苷酸 D. 嘧啶核苷酸 E. 以上都是 2. 临床上血清总蛋白的首选最方便、最实用的常规方法是 ：( ) A. 凯氏定氮法 B. 双缩脲法 C. 酚试剂法 D. 紫外分光光度法 E. 染料结合法 3. 正常血清蛋白电泳上显示的宽区带主要成分是 : ( ) A. 转铁蛋白 B. 结合珠蛋白 C. 免疫球蛋白 D. 血 色 素结合蛋白 E. 铜蓝蛋白 4. 下列血浆蛋白质中哪些 不属于 运输载体类：（ ） A. 血浆脂蛋白 B. 转铁蛋白 C. 铜蓝蛋白 D. 结合珠蛋白 E. 1 -抗胰蛋白酶 5. 下列关于清蛋白说法 错误 的是：（ ） A. 由肝实质细胞合成 B. 血
39、浆中含量最多的蛋白质 C. 维持血浆胶体渗透压的主要蛋白 D. 在血浆中 的 半寿期1 0d E. 唯一一种不 含糖 的血浆蛋白质 6. 临床上检测血清蛋白的最常用方法是：（ ） A. 溴甲酚绿法 B. 电泳法 C. 免疫扩散法 D. 免疫比浊法 E. 电化学测定法 7. 下列关于 1 -抗胰蛋白酶 说法， 错误 的是：（ ） A. 分子量 约 为5 2kD B. 发挥作用时与pH高低无关 C. 醋酸纤维素薄膜电泳中位于 1 区带 D. 主要由肝细胞合成 E. 人血浆中主要的丝氨酸蛋白酶的抑制剂 8. 关于 2 -巨球蛋白 ，下列说法 错误 的是：（ ） A. 属于急性时相反应蛋白 B. 血 浆中分子
