1、全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材临床生物化学检验实验指导临床生物化学检验实验指导 （第二版）（第二版）1贵阳医学院医学检验系贵阳医学院医学检验系黄海黄海实验实验 27 临床生化检验方法学评价试验临床生化检验方法学评价试验 .全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材临床生物化学检验实验指导临床生物化学检验实验指导 （第二版）（第二版）实验实验27 临床生化检验方法学评价试验临床生化检验方法学评价试验2实验目的实验目的 v掌握：掌握：方法学评价试验的原理和基本方法方法学评价试验的原理和基本方法及统计分析及统计分析 v熟悉：熟悉
2、：方法学评价试验的具体操作。方法学评价试验的具体操作。.全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材临床生物化学检验实验指导临床生物化学检验实验指导 （第二版）（第二版）实验实验27 临床生化检验方法学评价试验临床生化检验方法学评价试验3一、重复性实验一、重复性实验二、回收试验二、回收试验 三、干扰试验三、干扰试验四、方法比较试验四、方法比较试验五、方法性能决定图绘制五、方法性能决定图绘制六、最低检测限实验六、最低检测限实验.全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材临床生物化学检验实验指导临床生物化学检验实验指导 （第二版）（第二版）
3、实验实验27 临床生化检验方法学评价试验临床生化检验方法学评价试验4实验原理实验原理 批内重复性试验是指在同一条件下（用同样的批内重复性试验是指在同一条件下（用同样的方法，同一种试剂和标准品，同一台仪器，在同一方法，同一种试剂和标准品，同一台仪器，在同一实验室由同一人操作，并保持实验期间准确度不变）实验室由同一人操作，并保持实验期间准确度不变）对同一标本在尽可能短的时间内进行对同一标本在尽可能短的时间内进行m轮，每轮轮，每轮n次重复测定，以获得批内精密度数据的试验方法。次重复测定，以获得批内精密度数据的试验方法。其结果能反映测定方法的随机误差大小。其结果能反映测定方法的随机误差大小。一、重复性
4、实验一、重复性实验.全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材临床生物化学检验实验指导临床生物化学检验实验指导 （第二版）（第二版）实验实验27 临床生化检验方法学评价试验临床生化检验方法学评价试验5试剂与器材试剂与器材 1.标本标本 采用血糖浓度约为采用血糖浓度约为6.7mmol/L的血清的血清 标本（收集无溶血、无脂浊、无肝炎病毒标本（收集无溶血、无脂浊、无肝炎病毒 污染的人混合血清或动物血清）。污染的人混合血清或动物血清）。2.GOD-POD试剂盒。试剂盒。.全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材临床生物化学检验实验指导临床
5、生物化学检验实验指导 （第二版）（第二版）实验实验27 临床生化检验方法学评价试验临床生化检验方法学评价试验6操作步骤操作步骤 将血清标本用将血清标本用GOD-POD法作法作5轮，每轮，每轮轮4次血糖测定，即可获得次血糖测定，即可获得20个测定数据。个测定数据。.全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材临床生物化学检验实验指导临床生物化学检验实验指导 （第二版）（第二版）实验实验27 临床生化检验方法学评价试验临床生化检验方法学评价试验7计算计算1.检验检验20次测定数据中的离群值次测定数据中的离群值 如存在异常值如存在异常值时应剔除。对小样本测定来讲，可采用时
6、应剔除。对小样本测定来讲，可采用Grubbs检验，检验，该方法是最合理的检验方法该方法是最合理的检验方法。.全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材临床生物化学检验实验指导临床生物化学检验实验指导 （第二版）（第二版）实验实验27 临床生化检验方法学评价试验临床生化检验方法学评价试验8计算计算 用用Grubbs检验准则，检验离群值的统检验准则，检验离群值的统计学公式是：计学公式是：SdG式中，式中，Xd为离群值；为离群值；X为包括离群值在内为包括离群值在内的测定值的均数；的测定值的均数；s为包括离群值在内的测为包括离群值在内的测定值的标准差定值的标准差.全国高等
7、医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材临床生物化学检验实验指导临床生物化学检验实验指导 （第二版）（第二版）实验实验27 临床生化检验方法学评价试验临床生化检验方法学评价试验9 如计算的如计算的G值大于系数表中相应显著水平的值大于系数表中相应显著水平的a和和测定次数测定次数n时的临界值时的临界值Ga.n，则将，则将Xd作为异常值舍弃，作为异常值舍弃，可按下列三种情况来处理：可按下列三种情况来处理：（1）只有一个离群值的情况：设有）只有一个离群值的情况：设有n个测定数个测定数（X1X2X3X4Xn）其中）其中X1为离群值，即可为离群值，即可利用上述公式，直接对利用上述公
8、式，直接对X1进行检验。进行检验。计算计算.全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材临床生物化学检验实验指导临床生物化学检验实验指导 （第二版）（第二版）实验实验27 临床生化检验方法学评价试验临床生化检验方法学评价试验10（2）如果离群值是两个或两个以上，但都分布）如果离群值是两个或两个以上，但都分布在均数在均数X的同一侧，例如的同一侧，例如X1、X2都是离群值，则都是离群值，则首先检验最内侧的一个数据（首先检验最内侧的一个数据（X2），即通过检验），即通过检验G2来决定来决定X2是否应该放弃。如果是否应该放弃。如果X2应该放弃，应该放弃，X1自然也应该放弃。
9、如果自然也应该放弃。如果X2不应舍去，则再检验不应舍去，则再检验X1。但在检验但在检验X1时测定次数不应作为少了一次。时测定次数不应作为少了一次。计算计算.全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材临床生物化学检验实验指导临床生物化学检验实验指导 （第二版）（第二版）实验实验27 临床生化检验方法学评价试验临床生化检验方法学评价试验11（3）如果离群值有两个或两个以上。而且又分）如果离群值有两个或两个以上。而且又分布于均数两侧，例如布于均数两侧，例如X1和和Xn都属于离群值，则分都属于离群值，则分别检验别检验X1和和Xn，是否应该舍去。如果一个数据决，是否应该舍去
10、。如果一个数据决定舍去，那么再检验另一个数据时，测定次数应定舍去，那么再检验另一个数据时，测定次数应该作为减少一次来处理；而且此时应该选择该作为减少一次来处理；而且此时应该选择99%的置信水平。的置信水平。计算计算.全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材临床生物化学检验实验指导临床生物化学检验实验指导 （第二版）（第二版）实验实验27 临床生化检验方法学评价试验临床生化检验方法学评价试验122.按照批内精密度的计算公式计算按照批内精密度的计算公式计算5轮每轮轮每轮4次测定次测定值的平均数值的平均数(X)、标准差、标准差(s)和变异系数（和变异系数（CV%）。）
11、。）测定轮数（每轮测定值均数之和批内均数m/mSw2iS）批内标准差（2is1)(S22nii（1）（2）式中为式中为5 轮各次测定值的方差，即：公式轮各次测定值的方差，即：公式%100/Sw%CV（批内均数批内标准差）变异系数.全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材临床生物化学检验实验指导临床生物化学检验实验指导 （第二版）（第二版）实验实验27 临床生化检验方法学评价试验临床生化检验方法学评价试验13 首先计算出每轮测定值的均数、标准差（首先计算出每轮测定值的均数、标准差（Si）及方差及方差S1、S2、S3、S4，并将数值填入表，并将数值填入表27-1内，
12、内，再将再将5轮轮Si总和代入公式即可算出批内标准差总和代入公式即可算出批内标准差Sw。最后计算出变异系数（最后计算出变异系数（CV%）表表27-1 批内重复性试验的数据处理批内重复性试验的数据处理X测定测定批数批数每轮测定次数（每轮测定次数（n）及测定值（）及测定值（Xi）XiSiSi2123412345 合计合计.全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材临床生物化学检验实验指导临床生物化学检验实验指导 （第二版）（第二版）实验实验27 临床生化检验方法学评价试验临床生化检验方法学评价试验14注意事项注意事项血糖的医学决定水平值为血糖的医学决定水平值为2.8
13、mmol/L、6.7 mmol/L和和8.9mmol/L。分析物浓度应选择。分析物浓度应选择医学决定水平才更具价值。医学决定水平才更具价值。2.用于评价方法精密度的变异系数应该是剔除离用于评价方法精密度的变异系数应该是剔除离群值后的计算结果。群值后的计算结果。.全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材临床生物化学检验实验指导临床生物化学检验实验指导 （第二版）（第二版）实验实验27 临床生化检验方法学评价试验临床生化检验方法学评价试验15评价评价 批内不精密度的判断限是批内不精密度的判断限是1/4允许误差范围。允许误差范围。批间不精密度的判断限是批间不精密度的判
14、断限是1/3允许误差范围。允许误差范围。允许误差范围可以根据允许误差范围可以根据CLIA88规定的能力规定的能力比对试验的比对试验的TEa确定。确定。返回本实验目录返回本实验目录.全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材临床生物化学检验实验指导临床生物化学检验实验指导 （第二版）（第二版）实验实验27 临床生化检验方法学评价试验临床生化检验方法学评价试验16实验原理实验原理 二、回收试验二、回收试验 回收试验是用以发现分析方法比例系统误回收试验是用以发现分析方法比例系统误差的有效评价方法。差的有效评价方法。即通过测定即通过测定GOD-POD法测定血糖的回收率，法
15、测定血糖的回收率，能较确切地判断该分析方法比例系统误差的有无能较确切地判断该分析方法比例系统误差的有无或大小，从而评价方法的准确性。或大小，从而评价方法的准确性。.全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材临床生物化学检验实验指导临床生物化学检验实验指导 （第二版）（第二版）实验实验27 临床生化检验方法学评价试验临床生化检验方法学评价试验17试剂与器材试剂与器材 80mmol/L葡萄糖标准液葡萄糖标准液生理盐水生理盐水3.GOD-POD试剂盒试剂盒4.血清标本血清标本 收集无肝炎病毒、无溶血、无脂浊的收集无肝炎病毒、无溶血、无脂浊的人混合血清，先用人混合血清，先
16、用GOD-POD法测定血糖浓度，法测定血糖浓度，再用生理盐水稀释血糖浓度至再用生理盐水稀释血糖浓度至2.2mmol/L备用。备用。.全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材临床生物化学检验实验指导临床生物化学检验实验指导 （第二版）（第二版）实验实验27 临床生化检验方法学评价试验临床生化检验方法学评价试验18操作步骤操作步骤 1.样品制备样品制备基础样品：血清基础样品：血清0.9ml+0.1ml生理盐水。生理盐水。回收样品回收样品：血清：血清0.9ml+0.01ml 80mmol/L葡萄糖标准液葡萄糖标准液+0.09ml生理盐水。生理盐水。回收样品回收样品：血
17、清：血清0.9ml+0.06ml 80mmol/L葡萄糖标准液葡萄糖标准液+0.04ml生理盐水。生理盐水。回收样品回收样品：血清：血清0.9ml+0.09ml 80mmol/L葡萄糖标准液葡萄糖标准液+0.01ml生理盐水。生理盐水。2.血糖浓度测定血糖浓度测定 按按GOD-POD法测定各制备样品的血糖浓度，法测定各制备样品的血糖浓度，每份样品作双份检测，结果取平均值每份样品作双份检测，结果取平均值.全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材临床生物化学检验实验指导临床生物化学检验实验指导 （第二版）（第二版）实验实验27 临床生化检验方法学评价试验临床生化检验
18、方法学评价试验19计算计算 1.加入浓度计算加入浓度计算2.回收量计算回收量计算2.回收率计算回收率计算将各项计算结果填入表将各项计算结果填入表27-2。）生理盐水（）标准液量（）血清量（）标准液量（标准液浓度）加入浓度（mlmlmlmlmmol基础样品测得值回收样品测得值回收量%100%加入浓度回收量）回收率（.全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材临床生物化学检验实验指导临床生物化学检验实验指导 （第二版）（第二版）实验实验27 临床生化检验方法学评价试验临床生化检验方法学评价试验20表表27-2 回收试验的数据处理回收试验的数据处理样品样品测定浓度测定浓
19、度（mmol/L）加入浓度加入浓度（mmol/L）回收浓度回收浓度（mmol/L）回收率回收率（%）基础样品基础样品回收样品回收样品回收样品回收样品回收样品回收样品平均回收率平均回收率.全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材临床生物化学检验实验指导临床生物化学检验实验指导 （第二版）（第二版）实验实验27 临床生化检验方法学评价试验临床生化检验方法学评价试验21注意事项注意事项1.标本加入标准液后，总浓度应在该方法的分析标本加入标准液后，总浓度应在该方法的分析 范围内。最好使被测标本的浓度达到医学决定水范围内。最好使被测标本的浓度达到医学决定水 平，血糖测定的
20、医学决定水平为平，血糖测定的医学决定水平为2.8 mmol/L、6.7 mmol/L、8.9mmol/L。2.纯标准品溶液的加入体积不得超过血清样品的纯标准品溶液的加入体积不得超过血清样品的 10%，若稀释过大，误差将发生改变。，若稀释过大，误差将发生改变。3.准确加量是本试验最主要的技术关键。准确加量是本试验最主要的技术关键。.全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材临床生物化学检验实验指导临床生物化学检验实验指导 （第二版）（第二版）实验实验27 临床生化检验方法学评价试验临床生化检验方法学评价试验22评价评价 一般检验方法，要求回收率在一般检验方法，要求回
21、收率在95105%之间，最理想的回收率应为之间，最理想的回收率应为100%返回本实验目录返回本实验目录.全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材临床生物化学检验实验指导临床生物化学检验实验指导 （第二版）（第二版）实验实验27 临床生化检验方法学评价试验临床生化检验方法学评价试验23三、干扰试验三、干扰试验实验原理实验原理 干扰试验是测定特异性和干扰两者引干扰试验是测定特异性和干扰两者引起的误差。干扰物浓度一定时，产生的误起的误差。干扰物浓度一定时，产生的误差是恒定系统误差，误差的实际大小随干差是恒定系统误差，误差的实际大小随干扰物的浓度而异。扰物的浓度而异。.
22、全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材临床生物化学检验实验指导临床生物化学检验实验指导 （第二版）（第二版）实验实验27 临床生化检验方法学评价试验临床生化检验方法学评价试验24三、干扰试验三、干扰试验实验原理实验原理 选用尿酸作选用尿酸作GOD-POD法测定血糖的干扰试法测定血糖的干扰试验，尿酸可疑和验，尿酸可疑和GOD反应生成的反应生成的H2O2发生反应，发生反应，使部分使部分H2O2不能参与第二步不能参与第二步POD的耦联反应，从的耦联反应，从而降低显色强度，产生负的测定误差。而降低显色强度，产生负的测定误差。尿酸对该反应有干扰，但不是尿酸被测定。尿酸对
23、该反应有干扰，但不是尿酸被测定。干扰试验既用于检测某方法的特异性，也用干扰试验既用于检测某方法的特异性，也用于检测干扰物质对方法的干扰作用，以评价分析于检测干扰物质对方法的干扰作用，以评价分析方法的准确性。方法的准确性。.全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材临床生物化学检验实验指导临床生物化学检验实验指导 （第二版）（第二版）实验实验27 临床生化检验方法学评价试验临床生化检验方法学评价试验25试剂与器材试剂与器材1.血清标本血清标本 收集血糖浓度为收集血糖浓度为6.7mmol/L的混合血清的混合血清（要求同回收试验）。（要求同回收试验）。2.9.0mmol
24、/L尿酸标准液。尿酸标准液。3.GOD-POD试剂盒。试剂盒。.全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材临床生物化学检验实验指导临床生物化学检验实验指导 （第二版）（第二版）实验实验27 临床生化检验方法学评价试验临床生化检验方法学评价试验26操作步骤操作步骤1.样品制备样品制备 基础样品：血清基础样品：血清0.9ml+蒸馏水蒸馏水0.1ml 干扰样品干扰样品：血清：血清0.9ml+9.0mmol/L尿酸标准液尿酸标准液 0.05ml+蒸馏水蒸馏水0.05ml 干扰样品干扰样品：血清：血清0.9ml+9.0mmol/L尿酸标准液尿酸标准液0.1ml 尿酸样品：蒸
25、馏水尿酸样品：蒸馏水0.9ml+9.0mmol/L尿酸标准液尿酸标准液0.1ml2.GOD-POD法测定各样品血糖。法测定各样品血糖。.全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材临床生物化学检验实验指导临床生物化学检验实验指导 （第二版）（第二版）实验实验27 临床生化检验方法学评价试验临床生化检验方法学评价试验27计算计算1.干扰物加入值计算干扰物加入值计算 2.干扰值计算干扰值计算3.干扰率计算干扰率计算）蒸馏水量（）干扰物溶液量（）血清量（）干扰物溶液量（干扰物溶液浓度干扰物加入值mlmlmlml基础样品测定值干扰样品测定值）干扰值（L/mmol%100/%
26、基础值干扰值）干扰率（.全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材临床生物化学检验实验指导临床生物化学检验实验指导 （第二版）（第二版）实验实验27 临床生化检验方法学评价试验临床生化检验方法学评价试验28将各项计算结果填入表将各项计算结果填入表27-3内内表表27-3 干扰试验的数据处理干扰试验的数据处理样样 品品葡萄糖测定值葡萄糖测定值（mmol/L）加入尿酸值加入尿酸值（mmol/L）干扰值干扰值（mmol/L）干扰率干扰率（%）基础样品基础样品干扰样品干扰样品干扰样品干扰样品尿酸样品尿酸样品.全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业
27、规划教材临床生物化学检验实验指导临床生物化学检验实验指导 （第二版）（第二版）实验实验27 临床生化检验方法学评价试验临床生化检验方法学评价试验29注意事项注意事项1.可疑干扰物浓度可疑干扰物浓度 加入可疑干扰物的浓度应加入可疑干扰物的浓度应明显高于通常所见浓度的上限，最好达到明显高于通常所见浓度的上限，最好达到病理标本的最高值，尿酸升高的变动范围病理标本的最高值，尿酸升高的变动范围在在0.42mmol/L0.9mmol/L之间。之间。2.干扰物对测定的影响与被分析物浓度无关，干扰物对测定的影响与被分析物浓度无关，而与干扰物本身的浓度有关，所以产生的而与干扰物本身的浓度有关，所以产生的误差是恒
28、定系统误差。误差是恒定系统误差。3.其他注意事项与回收试验相同。其他注意事项与回收试验相同。.全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材临床生物化学检验实验指导临床生物化学检验实验指导 （第二版）（第二版）实验实验27 临床生化检验方法学评价试验临床生化检验方法学评价试验30评价评价 偏差偏差Bias允许误差（允许误差（EA）的临界值，）的临界值，表明由于干扰物引起的偏差对临床诊断和表明由于干扰物引起的偏差对临床诊断和治疗不产生不良影响，是可以被接受的。治疗不产生不良影响，是可以被接受的。血血2.8mmol/、6.7 mmol/和和8.9mmol/L时时的的EA为
29、为0.56mmol/L。返回本实验目录返回本实验目录.全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材临床生物化学检验实验指导临床生物化学检验实验指导 （第二版）（第二版）实验实验27 临床生化检验方法学评价试验临床生化检验方法学评价试验31四、方法比较试验四、方法比较试验实验原理实验原理 用两种方法同时检测一批样本，计算出两种用两种方法同时检测一批样本，计算出两种方法间测定结果的差异，用以估计试验方法在检方法间测定结果的差异，用以估计试验方法在检测样本时可能引入的误差。当选择准确度已知的测样本时可能引入的误差。当选择准确度已知的常规方法作为比较方法时，部分误差来自比较
30、方常规方法作为比较方法时，部分误差来自比较方法，其他部分误差则来自试验方法。若选择准确法，其他部分误差则来自试验方法。若选择准确度高的参考方法作为比较方法，可把方法间的任度高的参考方法作为比较方法，可把方法间的任何分析误差都归于试验方法。何分析误差都归于试验方法。本实验以本实验以HK法测定血糖的参考方法作对比法测定血糖的参考方法作对比来评价来评价GOD-POD法测定血糖的总系统误差。法测定血糖的总系统误差。.全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材临床生物化学检验实验指导临床生物化学检验实验指导 （第二版）（第二版）实验实验27 临床生化检验方法学评价试验临床生
31、化检验方法学评价试验32试剂与器材试剂与器材1.GOD-POD法试剂盒法试剂盒2.HK法试剂试剂盒法试剂试剂盒3.血清标本血清标本40份份 （其浓度尽可能覆盖线性范围）。（其浓度尽可能覆盖线性范围）。.全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材临床生物化学检验实验指导临床生物化学检验实验指导 （第二版）（第二版）实验实验27 临床生化检验方法学评价试验临床生化检验方法学评价试验33操作步骤操作步骤1.取取40份血清标本，每份标本用份血清标本，每份标本用GOD-POD和和HK两种方法，分别作双份测定。两种方法，分别作双份测定。2.每次（天）测定每次（天）测定8个标本
32、，双份测定时第一个标本，双份测定时第一次按顺序次按顺序1，2.7，8，第二，第二8，7.2，1，共测试，共测试5次（天）。并计算两法各自的次（天）。并计算两法各自的测定结果。测定结果。.全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材临床生物化学检验实验指导临床生物化学检验实验指导 （第二版）（第二版）实验实验27 临床生化检验方法学评价试验临床生化检验方法学评价试验34计算计算1.将实验结果作散点图，图中以将实验结果作散点图，图中以x轴代表比较方法的轴代表比较方法的测定值，测定值，y轴代表实验方法的测定值，在坐标纸上轴代表实验方法的测定值，在坐标纸上作图应散布于整个测
33、定范围之内。作图应散布于整个测定范围之内。通过散点图可以观察到，测定数据的分布趋势，若通过散点图可以观察到，测定数据的分布趋势，若所有测定值在坐标图中大致呈所有测定值在坐标图中大致呈45角的直线分布，角的直线分布，提示被实验方法与比较方法的测定结果之间存在密提示被实验方法与比较方法的测定结果之间存在密切的相关关系；若呈明显的曲线分布，虽然在统计切的相关关系；若呈明显的曲线分布，虽然在统计学上可按照非线性资料处理，但在这种情况下，实学上可按照非线性资料处理，但在这种情况下，实验方法被采用的可能性极小。验方法被采用的可能性极小。.全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划
34、教材临床生物化学检验实验指导临床生物化学检验实验指导 （第二版）（第二版）实验实验27 临床生化检验方法学评价试验临床生化检验方法学评价试验35计算计算2.如果如果x、y之间呈直线关系，可作直线回归的之间呈直线关系，可作直线回归的统计处理，计算：统计处理，计算：回归方程回归方程y=a+bx和相关系数和相关系数r。其结果可以显示实验方法的测定结果有无系其结果可以显示实验方法的测定结果有无系统误差存在。统误差存在。截距截距a反映恒定系统误差的大小；反映恒定系统误差的大小；斜率斜率b反映比例系统误差的大小；反映比例系统误差的大小；相关系数相关系数r反映两种方法相关性的密切程度。反映两种方法相关性的密
35、切程度。.全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材临床生物化学检验实验指导临床生物化学检验实验指导 （第二版）（第二版）实验实验27 临床生化检验方法学评价试验临床生化检验方法学评价试验36 在评价一个实验方法时，最理想的情况是回归在评价一个实验方法时，最理想的情况是回归直线呈直线呈45角通过零点，这时角通过零点，这时a=0，b（x/y比值）比值）=1.0，表明恒定系统误差和比例系统误差均不存在。，表明恒定系统误差和比例系统误差均不存在。但但x和和y都会有随机误差，都会有随机误差，a和和b只是估计值，会有所只是估计值，会有所波动，只要偏离程度比较小，该方法就能用
36、于临床波动，只要偏离程度比较小，该方法就能用于临床检验的常规分析。检验的常规分析。计算计算.全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材临床生物化学检验实验指导临床生物化学检验实验指导 （第二版）（第二版）实验实验27 临床生化检验方法学评价试验临床生化检验方法学评价试验373.根据计算出的回归方程的根据计算出的回归方程的a、b值，可以计算候选值，可以计算候选方法系统误差（方法系统误差（SE）的大小，并与不同医学决定水）的大小，并与不同医学决定水平（平（Xc）的允许误差（）的允许误差（EA）作比较，对被评价方法）作比较，对被评价方法的系统误差的可接受性作出判断。的系
37、统误差的可接受性作出判断。SE的可接受性判的可接受性判断指标为断指标为 EAXcbXca 血糖测定的血糖测定的Xc=2.8 mmol/L、6.7mmol/L、8.9mmol/L时，时，Barnett提出的提出的EA值为值为0.56mmol/L。计算计算.全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材临床生物化学检验实验指导临床生物化学检验实验指导 （第二版）（第二版）实验实验27 临床生化检验方法学评价试验临床生化检验方法学评价试验382rr12nrt作相关分析作相关分析 在方法比较试验中，相关系数（在方法比较试验中，相关系数（r）可作为被评价方法可否被接受的一项统计
38、学指可作为被评价方法可否被接受的一项统计学指标。对相关系数还应作相关系数的标。对相关系数还应作相关系数的t检验。检验。相关系数（相关系数（r）的）的t检验统计学公式是：检验统计学公式是：计算计算.全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材临床生物化学检验实验指导临床生物化学检验实验指导 （第二版）（第二版）实验实验27 临床生化检验方法学评价试验临床生化检验方法学评价试验391nn/)d(d1nddS222d）（）差值标准差（nsdtd1n）自由度（5.方法比较试验的数据属于配对资料，因而可作配方法比较试验的数据属于配对资料，因而可作配对对t检验，其统计学公式是：
39、检验，其统计学公式是：式中式中:d代表候选方法与参考方法测定值的差值代表候选方法与参考方法测定值的差值(或正或负或正或负)；d为差值之平均值；为差值之平均值；n为配对数。为配对数。计算计算.全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材临床生物化学检验实验指导临床生物化学检验实验指导 （第二版）（第二版）实验实验27 临床生化检验方法学评价试验临床生化检验方法学评价试验40 在计算在计算t值公式中的分子部分是两种方法的偏差值公式中的分子部分是两种方法的偏差值，表明方法间系统误差的大小。值，表明方法间系统误差的大小。分母是平均偏差标准误，反映方法比较实验中分母是平均偏差
40、标准误，反映方法比较实验中随机误差的大小。随机误差的大小。因此因此t值时方法比较试验中系统误差和随机误值时方法比较试验中系统误差和随机误差的比值。差的比值。计算计算.全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材临床生物化学检验实验指导临床生物化学检验实验指导 （第二版）（第二版）实验实验27 临床生化检验方法学评价试验临床生化检验方法学评价试验41注意事项注意事项1.选择试验样品选择试验样品 一般作一般作40100例，包括常规工作中可能例，包括常规工作中可能遇到的整个分析范围（其中遇到的整个分析范围（其中25%的标本低于的标本低于参考范围下限，参考范围下限，50%标
41、本在参考范围之内，标本在参考范围之内，25%标本高于参考范围），选择合适的样品标本高于参考范围），选择合适的样品分析范围比增加样品的数目更为重要。分析范围比增加样品的数目更为重要。.全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材临床生物化学检验实验指导临床生物化学检验实验指导 （第二版）（第二版）实验实验27 临床生化检验方法学评价试验临床生化检验方法学评价试验42注意事项注意事项2.试验方法试验方法 一般每个样品用两种方法各测一次，最一般每个样品用两种方法各测一次，最好每个样品用两种方法各测定两次，在做双好每个样品用两种方法各测定两次，在做双份第二次测定时，标本顺序
42、应全部倒过来，份第二次测定时，标本顺序应全部倒过来，最好在最好在4h内完成。内完成。3.对比方法对比方法 对比方法的选择十分重要，一般应选参对比方法的选择十分重要，一般应选参考方法或决定性方法，这样方法间的任何分考方法或决定性方法，这样方法间的任何分析误差都可归于被评价的候选方法。析误差都可归于被评价的候选方法。返回本实验目录返回本实验目录.全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材临床生物化学检验实验指导临床生物化学检验实验指导 （第二版）（第二版）实验实验27 临床生化检验方法学评价试验临床生化检验方法学评价试验43五、方法性能决定图绘制五、方法性能决定图绘制
43、实验原理实验原理 准确度和精密度是检测系统的两大最主要的性能指准确度和精密度是检测系统的两大最主要的性能指标，二者结合就是总误差（标，二者结合就是总误差（total error，TE）。）。当当TE小于允许总误差（小于允许总误差（allowable total error，TEa）时，则检测系统的性能合格。时，则检测系统的性能合格。当当TE大于大于TEa时，则检测系统的性能不可接受。时，则检测系统的性能不可接受。.全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材临床生物化学检验实验指导临床生物化学检验实验指导 （第二版）（第二版）实验实验27 临床生化检验方法学评价试验
44、临床生化检验方法学评价试验44五、方法性能决定图绘制五、方法性能决定图绘制实验原理实验原理目前，有三种计算误差目前，有三种计算误差TE的方式的方式（bias代表不准确度，代表不准确度，s或或CV代表不精密度）：代表不精密度）：（1）TE=bias+2sTEa；或：；或：TE%=bias%+2CV%TEa%（2）TE=bias+3sTEa；或：；或：TE%=bias%+3CV%TEa%（3）TE=bias+4sTEa；或：；或：TE%=bias%+4CV%TEa%.全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材临床生物化学检验实验指导临床生物化学检验实验指导 （第二版）
45、（第二版）实验实验27 临床生化检验方法学评价试验临床生化检验方法学评价试验45 应用应用Westgard方法决定图（方法决定图（method decision chart,MDC），将不准确度和不精密），将不准确度和不精密度以图像的形式表达，在图上与要求的质量作度以图像的形式表达，在图上与要求的质量作比较，结果简单明了。比较，结果简单明了。根据以上几次的实验结果，应用根据以上几次的实验结果，应用MDC，可以对葡萄糖氧化酶法可以对葡萄糖氧化酶法(GOD-POD法法)的性能的性能作一综合性的评价。作一综合性的评价。五、方法性能决定图绘制五、方法性能决定图绘制实验原理实验原理.全国高等医药院校医学
46、检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材临床生物化学检验实验指导临床生物化学检验实验指导 （第二版）（第二版）实验实验27 临床生化检验方法学评价试验临床生化检验方法学评价试验46操作步骤操作步骤1.实验数据采用前面实验的结果。实验数据采用前面实验的结果。重复性试验中得到的重复性试验中得到的CV作为横坐标，然后利用方法作为横坐标，然后利用方法比对实验中得到的回归方程比对实验中得到的回归方程y=a+bx，以重复性实验中，以重复性实验中标本均值为标本均值为Y值，求出对应的值，求出对应的X值，计算：值，计算：XXbXaXXY%偏倚.全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学
47、检验专业规划教材临床生物化学检验实验指导临床生物化学检验实验指导 （第二版）（第二版）实验实验27 临床生化检验方法学评价试验临床生化检验方法学评价试验47操作步骤操作步骤2.取坐标纸，按图取坐标纸，按图27-1所示作图。所示作图。首先确定分析质量要求，以总允许误差首先确定分析质量要求，以总允许误差TEa表示。表示。本实验血糖的本实验血糖的TEa是是10%，在坐标纸上定义，在坐标纸上定义y轴为轴为允许不准确度（偏倚允许不准确度（偏倚%），从），从0到到Tea，最大刻度，最大刻度10%；定义定义x轴为允许不精密度（轴为允许不精密度（%，即，即CV），从），从0到到0.5 TEa，即最大刻度为，即
48、最大刻度为5%。.全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材临床生物化学检验实验指导临床生物化学检验实验指导 （第二版）（第二版）实验实验27 临床生化检验方法学评价试验临床生化检验方法学评价试验48 从从y轴的轴的TEa（10）到）到x轴的轴的0.5TEa（5.0）即）即过（过（0，10.0；5.0，0）两点画一直线，为）两点画一直线，为偏倚偏倚+2s线线。从从y轴的轴的TEa（10）到）到x轴的轴的0.33TEa（3.3）即）即过（过（0，10.0；3.3，0）两点画一条线，为）两点画一条线，为偏倚偏倚+3s线线。从从y轴的轴的TEa（10）到）到x轴的轴的0
49、.25TEa（2.5）即）即过（过（0，10.0；2.5，0）两点画一直条线，为）两点画一直条线，为偏倚偏倚+4s线线。这三条分别把图划分成四个部分。这三条分别把图划分成四个部分。从上到下，分别代表性从上到下，分别代表性能差区能差区、临界性能区、临界性能区、性能良好区性能良好区和和性能优秀区性能优秀区。.全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材临床生物化学检验实验指导临床生物化学检验实验指导 （第二版）（第二版）实验实验27 临床生化检验方法学评价试验临床生化检验方法学评价试验493.方法性能判定的不同水平结果方法性能判定的不同水平结果 观察方法观察方法决定图上
50、操作点的位置，判断方法性能。决定图上操作点的位置，判断方法性能。四种可能分别为：四种可能分别为：性能差性能差，表明该测定方法不能满足质量，表明该测定方法不能满足质量要求，对于常规操作不能被接受。要求，对于常规操作不能被接受。操作步骤操作步骤.全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材临床生物化学检验实验指导临床生物化学检验实验指导 （第二版）（第二版）实验实验27 临床生化检验方法学评价试验临床生化检验方法学评价试验50 临界性能临界性能，表明该性能尽管能满足临床，表明该性能尽管能满足临床要求，但很可能失控，日常操作中，需要全要求，但很可能失控，日常操作中，需要全
