1、演讲者:李雪韵演讲者:李雪韵时间:时间:2014.12.182014.12.182.2.如何检测乙肝三系?如何检测乙肝三系?3.3.乙肝三系检测有何意义?乙肝三系检测有何意义?1.1.什么是乙肝三系?什么是乙肝三系?1 1.表面抗原表面抗原(HBsAg)(HBsAg)和和表面抗体表面抗体(抗抗HBsHBs或或HBsAb)HBsAb)2 2.e e抗原抗原(HBeAg)(HBeAg)和和 e e抗体抗体(抗抗HBeHBe或或HBeAb)HBeAb)3 3.核心抗原核心抗原(HBcAg)(HBcAg)和和核心抗体核心抗体(抗抗HBcHBc或或HBcAb)HBcAb)。HBsAgHBsAg:是病毒在
2、肝细胞的表达产物,是机体感染是病毒在肝细胞的表达产物,是机体感染HBVHBV后后最最先先出现的血清学指标。感染后出现的血清学指标。感染后4-74-7周血清中出现周血清中出现HBsAgHBsAg,而后出现而后出现ALTALT异常和临床症状。异常和临床症状。HBsAgHBsAg阳性阳性可见于急性乙肝患者的潜伏期、急性期、可见于急性乙肝患者的潜伏期、急性期、慢性乙肝患者、无症状慢性乙肝患者、无症状HBsAgHBsAg携带者、部分肝硬化和肝携带者、部分肝硬化和肝癌患者的血清中和受癌患者的血清中和受HBVHBV感染的肝细胞浆中,因此感染的肝细胞浆中,因此HBsAgHBsAg是是HBVHBV感染指标之一。
3、感染指标之一。1.HBsAg1.HBsAg与与HBsHBsAbAb:HBsHBsAbAb:是是HBVHBV的特异性保护抗体,为阻断感染所必须。一的特异性保护抗体,为阻断感染所必须。一般在初次感染后般在初次感染后6-236-23周出现,见于乙肝恢复期、周出现,见于乙肝恢复期、HBVHBV既往感染和乙肝疫苗免疫后,既往感染和乙肝疫苗免疫后,反应机体对反应机体对HBVHBV具有保具有保护性免疫力护性免疫力。1.HBsAg1.HBsAg与与HBsHBsAbAb:HBeAg HBeAg抗原抗原:表示乙肝病表示乙肝病毒毒复制复制(繁殖繁殖)活跃,传染性较强活跃,传染性较强,与其密切接触,被传染的可能性较大
4、。此抗原如长与其密切接触,被传染的可能性较大。此抗原如长期存在,提示为慢性乙肝病毒携带者期存在,提示为慢性乙肝病毒携带者,临床上临床上以其以其转阴作为疗效的重要指标。转阴作为疗效的重要指标。HBeAbHBeAb:阳转后阳转后表示表示大多数病毒复制停止大多数病毒复制停止,抗抗HBeHBe阳阳转后大多数病毒复制停止转后大多数病毒复制停止。3 3.HBeAg.HBeAg和和HBeHBeAbAb2 2.HBcAg.HBcAg和和HBcHBcAbAb HBcAgHBcAg:核壳蛋白与病毒复制密切相关,核壳蛋白与病毒复制密切相关,HBcAgHBcAg阳性常阳性常表示表示DaneDane颗粒存在,具有传染性
5、,但通常颗粒存在,具有传染性,但通常HBcAgHBcAg包包裹在病毒外膜中,裹在病毒外膜中,不能直接在血清中检出。不能直接在血清中检出。临床上临床上通常检测抗通常检测抗HBcHBc而不检测而不检测HBcAgHBcAg。2 2.HBcAg.HBcAg和和HBcHBcAbAbHBcHBcAbAb:较抗较抗HBsHBs抗体产生的早,不是中和抗体,可在血抗体产生的早,不是中和抗体,可在血中持续多年不消退,是中持续多年不消退,是既往感染的既往感染的HBVHBV血清学指标血清学指标。高高滴度的抗滴度的抗HBcHBc表示现行感染表示现行感染,常与常与HBsAgHBsAg并存并存;低低水平的抗水平的抗HBcH
6、Bc表示表示既往感染既往感染,常与抗,常与抗HBsHBs并存。并存。在急性期几乎所有的感染个例都可查出抗在急性期几乎所有的感染个例都可查出抗HBcHBc,有,有时是唯一的血清学标志物。时是唯一的血清学标志物。抗抗HBeHBe抗体抗体:表示乙肝患者病情缓表示乙肝患者病情缓解稳定或趋向康复,预后解稳定或趋向康复,预后良好,传染性降低,但不良好,传染性降低,但不保证乙肝病毒已全部消失保证乙肝病毒已全部消失。3 3.HBeAg.HBeAg和抗和抗HBeHBe双抗体夹心法双抗体夹心法:HBsAg、HBeAg.属于非竞争结合测定,是检测抗原最常用的方法。属于非竞争结合测定,是检测抗原最常用的方法。原理:原
7、理:先将特异性抗体与固相载体连接,形成先将特异性抗体与固相载体连接,形成固相抗体固相抗体。加入待测标本并温育,使标本中的抗原与固相抗体充加入待测标本并温育,使标本中的抗原与固相抗体充分反分反 应,形成固相应,形成固相抗体抗原复合物抗体抗原复合物。洗涤除去其他未结合物。洗涤除去其他未结合物。加入酶标抗体并温育,使固相抗体抗原复合物与酶标加入酶标抗体并温育,使固相抗体抗原复合物与酶标抗体结合,形成抗体结合,形成固相抗体固相抗体-待测抗原待测抗原-酶标记抗体复合物酶标记抗体复合物(双抗(双抗体夹心)体夹心)洗涤去除未结合酶标记抗体洗涤去除未结合酶标记抗体 加底物显色,固相上的酶催化底物成为有色产物。
8、加底物显色,固相上的酶催化底物成为有色产物。抗抗HBeHBe抗体抗体:表示乙肝患者病情缓表示乙肝患者病情缓解稳定或趋向康复,预后解稳定或趋向康复,预后良好,传染性降低,但不良好,传染性降低,但不保证乙肝病毒已全部消失保证乙肝病毒已全部消失。3 3.HBeAg.HBeAg和抗和抗HBeHBe竞争法竞争法:HBeAbHBeAb、HBcAbHBcAb。HBcAbHBcAb:先将核心抗原包被在固相载体上形成固相抗原,然后加入待:先将核心抗原包被在固相载体上形成固相抗原,然后加入待测标本和酶标记的特异性核心抗体,此时待测标本中的测标本和酶标记的特异性核心抗体,此时待测标本中的HBcAbHBcAb与酶标与
9、酶标记记HBcAbHBcAb竞争与固相上核心抗原结合,温育后洗涤,加入底物显色,竞争与固相上核心抗原结合,温育后洗涤,加入底物显色,显色的强弱与待测标本中的显色的强弱与待测标本中的HBcAbHBcAb的含量呈反比。的含量呈反比。HBeAbHBeAb:先将:先将HBeAbHBeAb包被在固相载体上形成固相抗体,同时加入待测包被在固相载体上形成固相抗体,同时加入待测标本和中和抗原标本和中和抗原HBeAgHBeAg,此时待测标本中的,此时待测标本中的HBeAbHBeAb和固相抗体竞争结和固相抗体竞争结合中和抗原合中和抗原HBeAgHBeAg,待测标本中的,待测标本中的HBeAbHBeAb浓度越高,则
10、与固相抗体结浓度越高,则与固相抗体结合的合的HBeAgHBeAg就越少,后面步骤同就越少,后面步骤同HBcAbHBcAb。如此主要是其。如此主要是其不稳定不稳定所致,所致,如在固相上直接包被如在固相上直接包被HBeAgHBeAg,则会因为,则会因为HBeAgHBeAg向向HBcAbHBcAb的的易转变性易转变性而致而致测定误差。测定误差。注注:HBsAbHBsAb采用采用双抗原夹心法双抗原夹心法,原理同双抗体夹心。,原理同双抗体夹心。HBcAbHBeAbHBeAgHBsAbHBsAg.HBsAg:.HBsAg:阴性阴性.HBeAb:.HBeAb:阴性阴性.HBsAb:.HBsAb:阴性阴性.H
11、BeAg:.HBeAg:阴性阴性.HBcAb:.HBcAb:阴性阴性表示没有感染过乙肝表示没有感染过乙肝病毒,病毒,且且对乙肝病毒对乙肝病毒也没有抵抗力,此类也没有抵抗力,此类人群属易感人群,需人群属易感人群,需要立即接种乙肝疫苗要立即接种乙肝疫苗.HBsAg:.HBsAg:阳性阳性.HBeAb:.HBeAb:阴性阴性.HBsAb:.HBsAb:阴性阴性.HBeAg:.HBeAg:阳性阳性.HBcAb:.HBcAb:阳性阳性可为可为急性或慢急性或慢性乙肝,病毒性乙肝,病毒复制活跃,传复制活跃,传染性强染性强。.HBsAg:.HBsAg:阳性阳性.HBeAb:.HBeAb:阳性阳性.HBsAb:
12、.HBsAb:阴性阴性.HBeAg:.HBeAg:阴性阴性.HBcAb:.HBcAb:阳性阳性表示感染了乙肝病毒,表示感染了乙肝病毒,病毒复制低下,传染性病毒复制低下,传染性弱。虽然小三阳病毒复弱。虽然小三阳病毒复制慢,但小三阳有一个制慢,但小三阳有一个更可怕的特点就是容易更可怕的特点就是容易被忽视,产生被忽视,产生癌变癌变。.HBsAg:.HBsAg:阴性阴性.HBeAe:.HBeAe:阴性阴性.HBsAb:.HBsAb:阳性阳性.HBeAg:.HBeAg:阴性阴性.HBcAb:.HBcAb:阴性阴性曾感染过乙肝病毒现已康曾感染过乙肝病毒现已康复的标志,或者是接种乙复的标志,或者是接种乙肝疫
13、苗后,体内产生乙肝肝疫苗后,体内产生乙肝表面抗体,意味着人体内表面抗体,意味着人体内已存在保护性抗体,不易已存在保护性抗体,不易感染乙肝病毒。感染乙肝病毒。.HBsAg:.HBsAg:阴性阴性.HBeAb:.HBeAb:阴性阴性.HBsAb:.HBsAb:阳性阳性.HBeAg:.HBeAg:阴性阴性.HBcAb:.HBcAb:阳性阳性表示感染过乙肝病毒,现表示感染过乙肝病毒,现已完全康复,已产生保护已完全康复,已产生保护性抗体,对乙肝病毒具有性抗体,对乙肝病毒具有抵抗力,不易感染乙肝病抵抗力,不易感染乙肝病毒,是治疗乙肝最理想的毒,是治疗乙肝最理想的形成。形成。.HBsAg:.HBsAg:阴性
14、阴性.HBeAb:.HBeAb:阴性阴性.HBsAb:.HBsAb:阳性阳性.HBeAg:.HBeAg:阳性阳性.HBcAb:.HBcAb:阳性阳性乙肝恢复期,乙肝恢复期,已有免疫力。已有免疫力。.HBsAg:.HBsAg:阴性阴性.HBeAb:.HBeAb:阳性阳性.HBsAb:.HBsAb:阴性阴性.HBeAg:.HBeAg:阴性阴性.HBcAb:.HBcAb:阳性阳性既往感染,急性乙既往感染,急性乙型肝炎恢复期,基型肝炎恢复期,基本无传染性(少数本无传染性(少数仍有传染性)仍有传染性).HBsAg:.HBsAg:阴性阴性.HBeAb:.HBeAb:阴性阴性.HBsAb:.HBsAb:阴性
15、阴性.HBeAg:.HBeAg:阴性阴性.HBcAb:.HBcAb:阳性阳性HBcAgHBcAg隐性携带者或隐性携带者或窗口期,或具有乙肝窗口期,或具有乙肝病毒既往感染史。病毒既往感染史。.HBsAg:.HBsAg:阳性阳性.HBeAb:.HBeAb:阴性阴性.HBsAb:.HBsAb:阴性阴性.HBeAg:.HBeAg:阳性阳性.HBcAb:.HBcAb:阴性阴性早期早期HBV感染感染者或慢性携带者或慢性携带者活动期,传者活动期,传染性强染性强.HBsAg:.HBsAg:阳性阳性.HBeAb:.HBeAb:阴性阴性.HBsAb:.HBsAb:阳性阳性.HBeAg:.HBeAg:阴性阴性.HBcAb:.HBcAb:阴性阴性亚临床型亚临床型HBVHBV感感染早期,不同亚染早期,不同亚型型HBVHBV二次感染。二次感染。