1、时间：45分钟满分：100分一、选择题(7小题，每小题2分，共14分)1下列关于灭菌和消毒的说法不正确的是()A灭菌是指杀灭物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子B消毒和灭菌的条件、结果、方法是相同的C接种环用灼烧法灭菌D常用灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌等答案B解析灭菌是指杀灭物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子，消毒只能杀死部分微生物，不能杀死芽孢和孢子。2大多数微生物的扩大培养，利用的都是牛肉膏蛋白胨固体培养基。下表所示牛肉膏蛋白胨培养基的成分及含量。相关叙述错误的是()成分牛肉膏蛋白胨氯化钠琼脂蒸馏水含量5 g10 g5 g20 g1000 mL(定容体积)A.该培养基为微生
2、物提供维生素的有牛肉膏、蛋白胨B该培养基为微生物提供氮源的有牛肉膏、蛋白胨C该培养基为微生物提供碳源的有牛肉膏、蛋白胨D该培养基能为微生物提供无机盐的只有NaCl答案D解析牛肉膏为微生物提供碳源、氮源、维生素以及磷酸盐等，其中磷酸盐属于无机盐。3能够测定样品活菌数的方法是()A稀释涂布平板法B直接计数法C质量法 D比浊法答案A解析直接计数法是利用特定的计数板，在显微镜下计算一定容积量样品中微生物的数量，不能区分死菌与活菌；质量法是用于微生物生长测定的一种方法，有湿重法和干重法，也可以通过测蛋白质和DNA含量反映细胞的物质质量；比浊法是在一定范围内，悬液中细胞浓度与浑浊度成正比，即与光密度成正比
3、，菌越多，光密度越大；活菌在适宜培养基和良好生长条件下通过生长形成菌落，此法又称活菌计数法，可采用稀释涂布平板法接种。4使用液体选择培养基培养纤维素分解菌的目的是()用液体选择培养基可获得大量纤维素分解菌用液体培养基便于稀释涂布平板纤维素分解菌只能在液体培养基中生长用液体培养基可鉴别纤维素分解菌A BC D答案A解析使用液体选择培养基培养纤维素分解菌，一方面可以获得大量纤维素分解菌，另一方面便于稀释涂布平板。纤维素分解菌也可以在固体培养基上生长；鉴别纤维素分解菌使用的是固体培养基。52016苏州质检分离土壤中分解尿素的细菌，对培养基的要求是()选项尿素琼脂糖葡萄糖硝酸盐ABCD注“”表示加入，
4、“”表示不加。答案C解析分离土壤中分解尿素的细菌，培养基中要有碳源，且尿素作为唯一的氮源，不能添加硝酸盐。6下列关于微生物培养基的叙述，错误的是()A制备固体培养基，可以在液体培养基中加入凝固剂琼脂B微生物在固体培养基表面生长形成的菌落，可以用肉眼观察到C所有培养基都含有相同的水、碳源、氮源和无机盐等四类物质D培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加维生素答案C解析微生物在固体培养基上生长，可以形成肉眼可见的菌落；培养不同的微生物，所需配方存在差异；培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加维生素。7.研究者从冰川土样中分离获得了具有较高脂肪酶活性的青霉菌菌株，为了在此基础上获得脂肪酶活性更高的菌株，最可行的做
5、法是()A用紫外线照射青霉菌菌株，再进行筛选B将青霉菌菌株与能高效水解蛋白质的菌株混合培养，再进行筛选C将能高效水解蛋白质的菌株的基因导入青霉菌菌株，再进行筛选D设置培养基中各种营养成分的浓度梯度，对青霉菌菌株分别培养，再进行筛选答案A解析基因突变是不定向的，紫外线处理后再进行筛选有可能获得脂肪酶活性更高的菌株。二、非选择题(8小题，共86分)8(13分)某学校打算开辟一块食用菌栽培基地，以丰富学生的劳动技术课内容。首先对食用菌实验室进行清扫和消毒处理，准备食用菌栽培所需的各种原料和用具，然后从菌种站购来各种食用菌菌种。请回答下列问题：(1)牛肉膏蛋白胨固体培养基配方如下：牛肉膏蛋白胨NaCl
6、琼脂蒸馏水5.0 g10.0 g5.0 g20.0 g定容至1000 mL其中提供氮源的是_；提供碳源的主要物质是_。(2)微生物在生长过程中对各种成分所需量不同，配制培养基时各成分要有合适的_。在烧杯中加入琼脂后要不停地_，防止_。(3)将配制好的培养基分装到试管中，加棉塞后若干个试管一捆，包上牛皮纸并用皮筋勒紧放入_中灭菌，压力100 kPa，温度_，时间_。灭菌完毕拔掉电源，待锅内压力自然降到0时，将试管取出。如果棉塞上沾有培养基，此试管应_。(4)使用高压蒸汽灭菌锅时注意，先向锅内倒入_。把锅内水加热煮沸并将其中原有冷空气彻底排出后将锅密闭。(5)从一支试管向另一支试管接种时注意，接种
7、环要在酒精灯_(填“内”或“外”)焰灭菌，并且待接种环_后蘸取菌种，试管口不能离开酒精灯火焰附近，将接种的试管在适温下培养，长成菌落后放入_冰箱中保藏。答案(1)牛肉膏、蛋白胨牛肉膏(2)比例用玻棒搅拌琼脂糊底引起烧杯破裂(3)高压蒸汽灭菌锅121 1530 min废弃(4)适量水(5)外冷却4解析凡能提供所需氮元素的物质为氮源，牛肉膏、蛋白胨均含氮元素。在配制培养基时营养要协调，按所培养微生物对各种成分的需求确定；在加入琼脂后，要不断搅拌，防止琼脂糊底而导致烧杯破裂。玻璃器皿的灭菌应用高压蒸汽灭菌锅，在压力为100 kPa、温度为121 条件下，灭菌1530 min。酒精灯外焰温度高，灭菌效
8、果好。灼烧冷却后再蘸取菌种，否则会烫死菌种，造成实验失败。9. 2016江苏南京质检(12分)烧伤病人容易感染绿脓杆菌，引起化脓性感染，比阿培南、美罗培南、头孢菌素和碳青霉烯类抗生素都是非常经典的抗绿脓杆菌的药物。临床使用抗生素前，有时需要做细菌耐药实验。实验时，从病人身上获取少量样本，按照一定的实验步骤操作，以确定该病人体内的绿脓杆菌对不同抗生素的敏感性。 (1)获取绿脓杆菌单菌落：配制适于绿脓杆菌生长的培养基，培养基中的营养成分一般含有_、氮源、生长因子、水和无机盐，调节pH至7，灭菌处理，待培养基冷却至50 时，在_附近倒平板。经过选择培养、鉴别等步骤获得单菌落。(2)检测绿脓杆菌对不同
9、抗生素的敏感性：取该单菌落适当稀释，用_法接种于固体培养基表面，使其均匀生长，布满平板。将分别含等剂量的比阿培南、美罗培南、头孢菌素和碳青霉烯类抗生素的相同大小的小滤纸圆片均匀置于该平板上的不同位置，适宜条件培养一段时间，结果是含不同抗生素的滤纸片周围均出现透明圈，这说明绿脓杆菌对上述抗生素_；含头孢菌素的滤纸片周围的透明圈比含美罗培南的小，这说明_；含比阿培南、碳青霉烯类的滤纸片周围的透明圈也比含美罗培南的小，且比阿培南透明圈中出现了一个菌落，请推测此菌落产生的可能原因：一是_，二是_。(3)根据上述实验结果，为达到抗绿脓杆菌的目的，对于该患者来说最好应选用抗生素_。答案(1)碳源酒精灯火焰
10、(2)涂布平板敏感绿脓杆菌对头孢菌素的敏感性比美罗培南弱杂菌污染抗比阿培南的绿脓杆菌(或绿脓杆菌产生耐药性突变)形成的菌落(3)美罗培南解析(1)培养绿脓杆菌的培养基中营养成分一般含有碳源、氮源、生长因子、水和无机盐。接种时要进行无菌操作，需待培养基冷却至50 时，在酒精灯火焰附近倒平板。(2)检测绿脓杆菌对不同抗生素的敏感性：应取该单菌落适当稀释，用涂布平板法接种于固体培养基表面，使其均匀生长，布满平板。将分别含等剂量的比阿培南、美罗培南、头孢菌素和碳青霉烯类抗生素的相同大小的小滤纸圆片均匀置于该平板上的不同位置，如果绿脓杆菌对上述抗生素敏感，含不同抗生素的滤纸片周围均出现透明圈。含头孢菌素
11、的滤纸片周围的透明圈比含美罗培南的小，说明绿脓杆菌对头孢菌素的敏感性比美罗培南弱；含比阿培南、碳青霉烯类的滤纸片周围的透明圈也比含美罗培南的小，且比阿培南透明圈中出现了一个菌落，可能原因是杂菌污染或抗比阿培南的绿脓杆菌形成的菌落。(3)绿脓杆菌对美罗培南敏感，对于该患者来说最好应选用抗生素美罗培南。102016湖南长沙调研(10分)研究被石油污染过的土壤中细菌数量，并从中筛选出能分解石油的细菌。为了分离和纯化高效分解石油的细菌，科研人员利用被石油污染过的土壤进行如图A所示的实验。(1)配置好的培养基通常可以使用_法灭菌。与步骤中培养基成分相比，步骤中培养基成分的最大区别是_。(2)接种细菌常用
12、的方法有_。若经过过程后获得的结果为图B所示，则所操作方法如图_所示。(3)步骤后取样测定石油含量的目的是_。对步骤中某瓶中细菌计数的方法有两种，一种方法是_，其菌落数可代表活菌数；另一种方法是_， 该方法需要借助一块特殊的载玻片，其名称为_。答案(1)高压蒸汽灭菌石油是唯一碳源(2)平板划线法和稀释涂布平板法甲(3)筛选出分解石油能力最好的细菌稀释涂布平板法显微镜直接计数(血球计数板计数法)血细胞计数板(血球计数板)解析(1)培养基灭菌用高压蒸汽灭菌，为筛选出能分解石油的细菌，所以石油是唯一碳源。(2)接种细菌常用的方法有平板划线法和稀释涂布平板法。图B为平板划线法，如图甲所示。(3)步骤进
13、一步操作是为筛选出分解石油能力最好的细菌，微生物计数可用稀释涂布平板法和血球计数板计数法。112015江苏高考模拟(9分)回答下列关于微生物和酶的问题。高温淀粉酶在大规模工业生产中有很大的实用性。研究者从热泉中筛选了高效产生高温淀粉酶的嗜热菌，其筛选过程如下图所示。(1)过程称为_，号培养基称为_7777777777777777777777777777777777777777777777777777777777777777777777777777777777777777777777777777777777777777777777777777777777777777777777777777777
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