1、儿童常年性变应性鼻炎患者血清特异性IgE检测与分析陈志凌1 姜莽儿1 徐建国2摘要 目的 检测并分析儿童常年性变应性鼻炎患者的特异性过敏原，探讨其在临床诊断上的意义。方法 采用免疫印迹法体外半定量检测患者14类常见过敏原特异性IgE抗体并分析阳性和强度的分布情况。 结果 201例儿童常年性鼻炎患者中173例患者至少对一种以上的过敏原呈阳性反应，阳性率86.1%，有134例患者总IgE大于200IU/ml。在检测的14类常见过敏原中，户尘螨的阳性率最高，为67.7%。结论 血清特异性IgE检测可用于寻找相变应原，为儿童常年性变应性鼻炎患者的预防、诊断及治疗提供重要依据。关键词 变应性鼻炎 ；免疫
2、球蛋白E； 免疫印迹法； 变应原变应性鼻炎（Allergic Rhinitis,AR）是指接触变应原后由IgE介导的，多种免疫细胞和细胞因子等参与的鼻黏膜慢性炎症反应性疾病。SIgE存在于人血清中, 是机体对变应原致敏的结果。测定变应原SIgE是明确具体致敏变应原的客观指标。致敏的变应原主要分为吸入性和食入性2 大类。明确变应原有利选用相应的变应原给患者行脱敏治疗以及有助于动态观察治疗的效果。我科采用免疫印迹法体外半定量检测201例儿童常年性变应性鼻炎患者血清中14类常见过敏原特异性IgE并分析其阳性和强度的分布情况，为临床制定个体化、具体化的防治方案提供依据。1 资料与方法11 病例选择 2
3、01例患者均为2006年10月2007年10月间经我科门诊诊断，符合常年性变应性鼻炎的诊断标准1的确诊患者，并进行血清特异性IgE检测，其中男性113例， 女性88例，年龄312岁，平均年龄（6.81.2）岁，病程6个月10年。12 仪器及试剂 均由德国MEDWISS公司生产，过敏原检测板包括以下14种特异性过敏原：户尘螨、矮豚草蒿、猫毛皮屑狗毛皮屑、蟑螂、点青霉分枝包霉烟曲霉、柏榆梧桐三角叶杨、律草、鸡蛋、牛奶、鱼虾蟹、牛羊肉、腰果花生黄豆、芒果、小麦。同时做阳性对照并检测血清总IgE含量。13 检测方法 Allergy Screen过敏原定量检测系统采用免疫印迹法，半定量检测人血清中过敏原
4、特异性IgE抗体。在硝酸纤维素膜表面吸附有各种特异性过敏原，加入患者血清孵育，标本中过敏原特异性IgE抗体与过敏原发生反应并结合到硝酸纤维素膜上，洗去多余未结合抗体，加入生物素标记抗人IgE抗体，与相应的特异性IgE反应后，加入碱性磷酸酶标记的链霉亲和素，孵育后加入底物显色，不同反应区颜色的深浅与血清中特异性IgE含量成正比。待试剂条干燥后，用专用阅读仪读取检测结果。14 血清特异性IgE的分级标准分级标准由MEDIWISS公司提供。根据血清中特异性IgE含量，将阳性反应强度分为6级，根据分级可以预示患者的轻度、中度或是重度过敏反应，见表1。1.5 统计学处理 全部数据输入Excel 建数据库
5、,SPSS13.0 软件进行数据分析, 计数资料应用2 检验, 相关性检验采用Spearman 相关分析。2 结果21 变应性鼻炎患者过敏原特异性IgE检测结果 201例患者173例患者至少对一种过敏原呈阳性反应，阳性率为86.1% ，其中在患者血清检出8种变应原者3例，58种11例，24例107例，1种52例。血清总IgE浓度小于100IU/rnl 46例，介于100200IU/ml之间有21例，大于200IU/ml有134例。表1 血清特异性IgE的分级标准特异性IgE含量（IU/ml） 分级 特异性IgE水平 临床预示100 6 极高 特别严重的过敏2. 2 过敏原特异性 IgE阳性分布
6、 173例变应性鼻炎患者过敏原分布及血清特异性IgE级别分布见表2。对14类常见过敏原的检测结果表明吸入类变应原中尘螨是诱发变应性鼻炎的主要过敏原，其次动物毛皮屑、矮豚草蒿等。户尘螨阳性率高而且阳性反应最强，常引起患者中、重度过敏反应，136例阳性患者中，血清特异性Ig E含量3级以上100例，占72.5%,甚至有4例浓度超过了100 IU/ rnl 。而在食物性变应原中牛羊肉阳性率最高，其次是牛奶和小麦，值得注意的是小麦中有6例为重度过敏。吸入类与食物类变应原的关系 儿童吸入类变应原SIgE的总阳性率为% 食入性变应原SIgE的总阳性率为% 其中吸入类阴性而食物类阳性的有 例，占 %。2组总
7、阳性率比较差异有统计学意义( P . 0101) 表2 201例儿童变应性鼻炎患者血清特异性IgE阳性分布变应原 阳性例数 阳性率（%） 特异性IgE阳性级别分布 12级 34级 56级吸入类变应原尘螨 136 67.7 36 80 20动物毛皮屑* 40 19.9 37 3 0矮豚草蒿 26 12.9 23 3 0多价霉菌* 18 8.96 10 7 1蟑螂 6 2.99 4 2 0多价草粉* 6 2.99 6 0 0律草 1 0.5 1 0 0 食物类变应原牛羊肉 64 31.8 54 10 0牛奶 36 17.9 35 1 0小麦 30 14.9 10 14 6鸡蛋 13 6.47 12
8、 1 0鱼虾蟹 12 5.97 4 8 0腰果花生黄豆 11 5.47 10 1 0芒果 2 1 0 2 0注: 尘螨包括户尘螨和粉尘螨* 动物皮毛屑包括猫、狗毛皮屑；*多价霉菌包括点青霉、分枝包霉、烟曲霉；*多价草粉包括柏、榆、梧桐、三角叶杨。2.3 变应性鼻炎合并哮喘与变应原的关系 变应性鼻炎合并哮喘患儿为65%。合并结膜炎组患儿变应原数量高于单纯变应性鼻炎组, 差异有统计学意义( t = 3.06, P 0.05) ; 与变应原种类无关( 2 = 4.88, P = 0.3) 。表3 阳性例数 吸入类 食物类鼻炎组合并哮喘组3 讨论变应性鼻炎是一种严重影响患者生活质量的慢性疾病,近30年
9、来在全球范围内其发病率呈逐年上升的趋势。儿童的发病率为 ？2001年WHO 发表的规范文件变应性鼻炎及其对哮喘的影响( allergic rhinitis impact on asthma, ARIA) 中明确指出变应性鼻炎的治疗体系分为避免接触变应原、药物治疗、特异性免疫治疗( specific immunotherapy ,SIT) 、患者教育及外科治疗5个方面。SIT 目前被认为是惟一可以影响变应性疾病自然进程的病因治疗方法,并可防止变应性鼻炎发展成哮喘或产生其他新的过敏。然而无论是避免接触变应原还是进行SIT 都必须预先明确变应原。由于地理环境和气候的不同,各地诱发变应性鼻炎发病的变应
10、原差异亦较大。因此明确特定区域的常见变应原分布特征，初步评价变应性鼻炎患者的过敏状态,对本地区变应性鼻炎患者的防治均有重要的临床意义。测定变应原的方法可分为体内诊断和体外诊断, 前者包括皮肤试验和激发试验, 后者有血清和鼻分泌物的特异性IgE 测定。目前, 皮肤试验仍是临床上用以检测致敏性变应原最常用的方法, 鼻激发试验其阳性率较皮肤试验高。但皮肤试验、鼻粘膜激发试验因为是在体内或鼻腔进行试验, 故有发生局部和全身性过敏反应的危险。而免疫印迹法是近年发展起来的一种快速、准确、敏感性高的特异性IgE检测方法。因其不在患者体内进行, 所以克服了体内诊断法上述的危险, 同时避免了医师判断皮试分析结果
11、时的主观性误差，能更及时地为特异性脱敏治疗提供可靠依据和客观的指标。本方法测定灵敏、可靠、安全,可作为过敏原筛选行之有效的体外诊断方法之一,特别适用于小儿和易引起过敏性休克的患者。我们对杭州地区201例儿童变应性鼻炎患者进行了特异性IgE检测，结果发现其中173例患者对至少一种过敏原过敏，阳性率86.1%。在纳入检测的14类常见过敏原中,户尘螨阳性率最高,达67.7%，而且反应程度强，其中引起中重度过敏(3级以上)者达73.5%，说明尘螨是杭州地区变应性鼻炎的最重要过敏原。此外，牛羊肉、猫狗毛皮屑、牛奶、小麦也是诱发变应性鼻炎的主要过敏原。由于成人以吸入性变应原致敏为主, 临床上对于变应性鼻炎
12、患者, 往往只是检查吸入性变应原而忽略了食入性变应原的检测。本文研究结果发现儿出现以上情况可能与婴幼儿户外活动较少, 接触吸入性变应原次数比较少尚未引起明显过敏反应有关。本文研究的201例变应性鼻炎患者总IgE大部分大于200 IU/ rnl，但有的特异性IgE浓度并不高，尤其是其中12例14类过敏原均为阴性的患者总IgE也大于200 IU / rnl。这是由于能引起变态反应的物质数以千计，它们存在于空气、食物、饮料、药物、甚至可接触到的日用品中，引起患者过敏反应的不是这14类常见过敏原时，就会发生特异性IgE阴性但总IgE水平升高。此时，有条件的可在进行常规脱敏治疗的同时继续查找引起过敏反应
13、的过敏原。本研究还发现大部分变应性鼻炎患者对两种以上的过敏原呈阳性反应，最多达8种，这提示单一变应原脱敏治疗可能效果不佳，采用联合特异性脱敏治疗是否会提高治疗效果，有待进一步研究。ARIA指出变应性鼻炎主要为慢性呼吸道炎症性疾病，变应性鼻炎是哮喘发生的危险因素之一。上下呼吸道炎症反应的一致性和相关性,强调变应性鼻炎和支气管哮喘是同一个疾病实体,在诸多方面(如流行病学、组织解剖学、生理学、病理学、免疫学、临床学和治疗学)有共同性 2 。文献证实患变应性鼻炎的儿童同样增加哮喘的发病率8, 58% 85%哮喘患者先有鼻炎后有哮喘或哮喘和鼻炎同时发生9。表明更应该对该人群加强干预, 积极治疗变应性鼻炎
14、, 并进行哮喘的预防性治疗, 以减缓和防止哮喘的发生。参考文献1中华耳鼻咽喉科分会.变应性鼻炎诊断标准及疗效评定标准J.中华耳鼻咽喉科杂志，1998, 33(3):134.2. Bousquet J , Van Cauwenberge P , Khaltaev N , et al.Allergic rhinitis and it s impact on asthma. J AllergyClin Immunol , 2001 ,108 (5 Suppl) :S147 - 334.3.Bousquet J , Lockey R , Malling H J . Allergen immunothe
15、rapy : therapeutic vaccines for allergic diseases. AWHO position paper. J Allergy Clin Immunol , 1998 ,102 :558 - 562.3.中华耳鼻咽喉头颈外科杂志编辑委员会, 中华医学会耳鼻咽喉头颈外科分会- 变应性鼻炎的治疗原则和推荐方案( 2004, 兰州) J . 中华耳鼻咽喉头颈外科杂志,2005, 40( 3) : 166- 167.8. Burgess JA, Walters EH, Byrnes GB, et al. Childhood allergic rhinitis predicts asthma incidence and persistence to middle age: longitudinal study J . J Allergy Clin Immunol,2007, 120( 4) : 863- 869.9. 赵京. 过敏性鼻炎与过敏性哮喘 J . 实用儿科临床 杂志, 2004, 19( 12) : 1020- 1022.5 / 5
