1、第第1节节 重组重组DNA技术的基本工具技术的基本工具第第3 3章章 基因工程基因工程提取提取抗虫基因抗虫基因棉花细胞棉花细胞苏云金芽孢杆菌苏云金芽孢杆菌( (有抗虫特征有抗虫特征) ) 普通棉花普通棉花 ( (无抗虫特征无抗虫特征) )与载体与载体DNADNA拼接，导入拼接，导入( (含抗虫基因含抗虫基因) ) 棉花植株棉花植株( (有抗虫特征有抗虫特征) )培育抗虫棉的简要过程培育抗虫棉的简要过程基因工程实例：基因工程实例：基因工程的概念：基因工程的概念： 基因工程是指按照人们的愿望，通过基因工程是指按照人们的愿望，通过转基因等技术转基因等技术，赋予生物，赋予生物新的遗传特性新的遗传特性，
2、创造出更符合人们需要的，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物制新的生物类型和生物制品品。从技术操作层面看，由于基因工程是在。从技术操作层面看，由于基因工程是在DNADNA分子水平分子水平上进行设上进行设计和施工的，因此又叫计和施工的，因此又叫重组重组DNADNA技术技术。1.1.别名：别名：2.2.原理：原理：3.3.操作对象：操作对象：4.4.操作水平：操作水平：5.5.结果：结果：重组重组DNADNA技术技术基因基因分子水平分子水平基因重组基因重组赋予生物新的遗传特性，创造出更符合人们需要的赋予生物新的遗传特性，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物制品新的生物类型和生物制品科技探索
3、之路基因工程的诞生和发展基因工程的诞生和发展1944年，艾弗里等人通过肺炎链球菌的转化实验，不仅艾弗里等人通过肺炎链球菌的转化实验，不仅证明了遗传物质是证明了遗传物质是DNADNA，还证明了，还证明了DNADNA可以在同种生物的不同个体之间转移可以在同种生物的不同个体之间转移。1950年，埃特曼发明了一种测定氨基酸序列的方法。埃特曼发明了一种测定氨基酸序列的方法。2 2年后，桑格年后，桑格首次完成首次完成了对胰岛素氨基酸序列的测定了对胰岛素氨基酸序列的测定。1958年，梅塞尔森和斯塔尔用实验证明了梅塞尔森和斯塔尔用实验证明了DNADNA的半保留复制的半保留复制。随后不久，克。随后不久，克里克里
4、克提出中心法则提出中心法则。1953年，沃森和克里克沃森和克里克建立了建立了DNADNA双螺旋结构模型双螺旋结构模型并提出了并提出了遗传物质自我复遗传物质自我复制制的假说。的假说。1961年，尼伦伯格和马太尼伦伯格和马太破译了第一个编码氨基酸的密码子。破译了第一个编码氨基酸的密码子。截至截至19661966年年，6464个密码子均被个密码子均被成功成功破译破译。1967年，科学家发现，科学家发现，在细菌拟核在细菌拟核DNADNA之外的质粒有自我复制能力，并可之外的质粒有自我复制能力，并可以在细菌细胞间转移以在细菌细胞间转移。1970年，科学家在细菌中发现了科学家在细菌中发现了第一个限制性第一个
5、限制性内切内切核酸酶（简称限制酶）核酸酶（简称限制酶）。20世纪70年代初，多种限制酶、多种限制酶、DNADNA连接酶和逆转录酶连接酶和逆转录酶被相继发现。这被相继发现。这些发现为些发现为DNADNA的切割、连接以及功能基因的获得创造了条件。的切割、连接以及功能基因的获得创造了条件。1972年，伯格首先在体外进行了伯格首先在体外进行了DNADNA改造改造的研究的研究，成功，成功构建了第一个体外重构建了第一个体外重组组DNADNA分子分子。1973年，科学家证明科学家证明质粒可以作为基因工程的载体质粒可以作为基因工程的载体，构建重组，构建重组DNADNA，导入受，导入受体细胞，使外源基因在原核细
6、胞中成功表达，并实现体细胞，使外源基因在原核细胞中成功表达，并实现物种间的基因交流。物种间的基因交流。至至此，基因工程正式问世。此，基因工程正式问世。1977年，桑格等科学家发明了桑格等科学家发明了DNADNA序列分析的方法，为基因序列图的绘制提序列分析的方法，为基因序列图的绘制提供了可能供了可能。此后，。此后，DNADNA合成仪的问世为合成仪的问世为体外合成体外合成DNADNA提供了方便提供了方便。1982年，第一个基因工程药物第一个基因工程药物- -重组人胰岛素重组人胰岛素被批准上市。基因工程药物成被批准上市。基因工程药物成为世界各国研究和投资开发的热点。为世界各国研究和投资开发的热点。1
7、983年，科学家采用科学家采用农杆菌转化法农杆菌转化法培育出世界上培育出世界上第一例转基因烟草第一例转基因烟草。此后，。此后，基因工程进入了迅速发展的阶段基因工程进入了迅速发展的阶段。1985年，穆里斯等人发明了穆里斯等人发明了PCRPCR，为，为获取目的基因获取目的基因提供了有效手段提供了有效手段。1990年，人类基因组计划人类基因组计划启动。启动。20032003年，该计划年，该计划的的测序任务顺利完成测序任务顺利完成。21世纪以来，科学家发明了多种高通量测序技术，可以实现低成本测定大科学家发明了多种高通量测序技术，可以实现低成本测定大量核酸序列，加速了人们对基因组序列的了解量核酸序列，加
8、速了人们对基因组序列的了解。2013年，华人科学家张锋及其团队首次报道利用最新的华人科学家张锋及其团队首次报道利用最新的基因组编辑技术基因组编辑技术CRISPRCRISPR（成簇规律间隔短回文重复）技术编辑了哺乳动物基因组（成簇规律间隔短回文重复）技术编辑了哺乳动物基因组。该技。该技术术可以实现对特定基因的定点插入、敲除或替换可以实现对特定基因的定点插入、敲除或替换。1984年，我国科学家朱作言领导的团队培育出世我国科学家朱作言领导的团队培育出世界上界上第一条转基因鱼第一条转基因鱼。从社会中来 番木瓜容易受番木瓜环斑病毒的侵袭。当番木番木瓜容易受番木瓜环斑病毒的侵袭。当番木瓜被这种病毒感染后，
9、产量会大大下降。科学家瓜被这种病毒感染后，产量会大大下降。科学家通过精心设计，用通过精心设计，用“分子工具分子工具”培育出了转基因培育出了转基因番木瓜，它可以抵御番木瓜环斑病毒。番木瓜，它可以抵御番木瓜环斑病毒。 DNADNA双螺旋的直径只有双螺旋的直径只有2nm,2nm,对如此微小的分子对如此微小的分子进行操作，是一项非常精细的工作，更需要专门进行操作，是一项非常精细的工作，更需要专门的的“分子工具分子工具”。那么，科学家究竟用到了哪些。那么，科学家究竟用到了哪些“分子工具分子工具”？这些？这些“分子工具分子工具”各具有什么特各具有什么特征呢？征呢？转基因番木瓜转基因番木瓜( (左）与非转基
10、左）与非转基因番木瓜因番木瓜( (右）右）工具工具分子手术刀分子手术刀分子缝合针分子缝合针分子运输车分子运输车限制性内切核酸酶：限制性内切核酸酶：DNADNA连接酶：连接酶：载体：载体：准确切割准确切割DNA分子分子将将DNADNA片段连接起来片段连接起来将体外重组好的将体外重组好的DNADNA分子导入受体细胞分子导入受体细胞培育转基因番木瓜培育转基因番木瓜“分子手术刀分子手术刀”准确切割准确切割DNA分子分子“分子缝合针分子缝合针”“分子运输车分子运输车”将将DNA片片段连接起段连接起来来将体外重组好的将体外重组好的DNA分子导入受体分子导入受体细胞细胞一、限制性内切核酸酶一、限制性内切核酸
11、酶“分子手术刀分子手术刀”1.1.简称：简称：限制酶限制酶2.2.来源：来源：主要是从主要是从原核生物原核生物中分离纯化出来的。中分离纯化出来的。3.3.作用：作用： 识别双链识别双链DNADNA分子的特定核苷酸序列分子的特定核苷酸序列，并且，并且使每一条链使每一条链中特定部位的磷酸二酯键断开中特定部位的磷酸二酯键断开。4.4.作用部位：作用部位： 特定部位的磷酸二酯键特定部位的磷酸二酯键ATCGTAGC5353磷磷酸酸二二酯酯键键5.5.识别序列：识别序列： 大多数限制酶的大多数限制酶的识识别序列别序列由由6 6个核苷酸个核苷酸组成，也有组成，也有少数限制酶的识别序列由少数限制酶的识别序列由
12、4 4个个、8 8个个或或其他数量其他数量的核苷酸组成。的核苷酸组成。EcoREcoR5 5G-A-A-T-T-CG-A-A-T-T-C3 33 3C-T-T-A-A-G5C-T-T-A-A-G5SmaSma5 5C-C-C-G-G-GC-C-C-G-G-G3 33 3G-G-G-C-C-C5G-G-G-C-C-C56.6.限制酶的命名：限制酶的命名： 用生物属名的头一个字母与种加词的头两个字母用生物属名的头一个字母与种加词的头两个字母，组成了，组成了3 3个字母的略个字母的略语，语，以此来表示这个酶是从哪种生物中分离出来的以此来表示这个酶是从哪种生物中分离出来的。例如，一种限制酶是从。例如，
13、一种限制酶是从大肠杆菌大肠杆菌( Escherichia coli)( Escherichia coli)的的R R型菌株型菌株分离来的，就用字母分离来的，就用字母EcoREcoR表示；如表示；如果它是从大肠杆菌果它是从大肠杆菌R R型菌株中分离出来的第一种限制酶，则进一步表示成型菌株中分离出来的第一种限制酶，则进一步表示成EcoRIEcoRI。7.7.切割结果：切割结果： DNA DNA分子经限制酶切割产生的分子经限制酶切割产生的DNADNA片段末端通常有两片段末端通常有两种形式种形式_和和_黏性末端黏性末端平末端平末端当限制酶在它识别序列的当限制酶在它识别序列的_将将DNADNA分子的两条
14、链分别切开时，产生的是分子的两条链分别切开时，产生的是_；当限制酶在它识别序列的当限制酶在它识别序列的_切开切开时，产生的是时，产生的是_；中轴线两侧中轴线两侧黏性末端黏性末端中轴线处中轴线处平末端平末端黏性末端黏性末端黏性末端黏性末端2022-1-11 实例实例1EcoR1EcoR限制酶：限制酶： 识别序列识别序列为为GAATTCGAATTC， 切割部位切割部位为为GAGA之间的磷酸之间的磷酸二酯键二酯键。 实例实例2Sma2Sma限制酶限制酶： 识别序列识别序列为为CCCGGGCCCGGG 切割部位切割部位为为CGCG之间的磷之间的磷酸二酯键酸二酯键。形成黏性末端形成黏性末端平末端平末端形
15、成平末端形成平末端课堂练习：写出下列限制酶切割形成的黏性末端课堂练习：写出下列限制酶切割形成的黏性末端BamH_ EcoRBamH_ EcoR_Hind_ Bgl _ Hind_ Bgl _ GATCGATCAATTAATTAGCTAGCTGATCGATC思考：你从中发现什么现象了？思考：你从中发现什么现象了？不同的限制酶可能切割形成相同的黏性末端不同的限制酶可能切割形成相同的黏性末端你能根据所掌握的知识，推测限制酶存在于原核生物中你能根据所掌握的知识，推测限制酶存在于原核生物中的主要作用是什么吗？的主要作用是什么吗？ 原核生物容易受到自然界原核生物容易受到自然界外源外源DNADNA的入侵的入
16、侵，所以它在，所以它在长长期的进化期的进化过程中形成了一套完善的过程中形成了一套完善的防御机制防御机制。限制酶就。限制酶就是它的一种防御性工具。当外源是它的一种防御性工具。当外源DNADNA入侵时，它会利用限入侵时，它会利用限制酶来制酶来切割外源切割外源DNADNA，使之失效使之失效，以，以保证自身安全保证自身安全。 所以，简单来说：限制酶在原核生物中起到的作用为：所以，简单来说：限制酶在原核生物中起到的作用为： 切割外源切割外源DNADNA、使之失效，以保证自身安全、使之失效，以保证自身安全试推测限制酶为什么不会切割自身的试推测限制酶为什么不会切割自身的DNADNA？原核生物中不存在该酶的识
17、别序列或识别序列已被修饰原核生物中不存在该酶的识别序列或识别序列已被修饰二、分子缝合针二、分子缝合针DNADNA连接酶连接酶1.1.作用：作用： 将将两个两个DNADNA片段连接起来片段连接起来，恢复恢复被限制酶切开的被限制酶切开的磷酸二酯键磷酸二酯键。G C T T A A A A T T C GG C T T A A A A T T C GDNADNA连接酶和连接酶和DNADNA聚合酶是一回事吗？为什么？聚合酶是一回事吗？为什么？ A A T A A T T T G GC CA AA AT TT TA AA AT TT TDNA聚合酶DNA聚合酶DNA聚合酶DNA聚合酶种类种类DNADNA
18、聚合酶聚合酶DNADNA连接酶连接酶不不同同点点作用作用实质实质作用结果作用结果模板模板相同点相同点催化单个核苷酸催化单个核苷酸加到已有加到已有核苷酸片段的核苷酸片段的3末端的羟末端的羟基上，形成磷酸二酯键基上，形成磷酸二酯键催化两个催化两个DNADNA片段片段之之间形成磷酸二酯键间形成磷酸二酯键催化催化形成与模板链互补形成与模板链互补的的DNADNA链链，形成新的双链，形成新的双链DNADNA分子分子催化具有互补黏性末端或催化具有互补黏性末端或平末端的平末端的DNADNA片段连接起片段连接起来，来，形成重组形成重组DNADNA分子分子需要需要不需要不需要化学本质都是蛋白质化学本质都是蛋白质都
19、是催化形成磷酸二酯键都是催化形成磷酸二酯键DNADNA连接酶和连接酶和DNADNA聚合酶功能比较聚合酶功能比较2.2.分类：分类：种类种类EcoliEcoli DNADNA连接酶连接酶T4 DNAT4 DNA连接酶连接酶来源来源功能特功能特性性相同点相同点大肠杆菌大肠杆菌T4T4噬菌体噬菌体只能将只能将具有具有互补黏性末端互补黏性末端的的DNADNA片段片段连接起来连接起来，不能，不能连接具有平末端的连接具有平末端的DNADNA片段片段既可以连接双链既可以连接双链DNADNA片段互补片段互补的黏性末端，又可以连接双的黏性末端，又可以连接双链链DNADNA片段的平末端（但连接片段的平末端（但连接
20、平末端的效率相对较低）平末端的效率相对较低）恢复恢复的都是的都是磷酸二酯键磷酸二酯键三、三、基因进入受体细胞的载体基因进入受体细胞的载体“分子运输车分子运输车”1.1.作用：作用：将外源基因送入受体细胞将外源基因送入受体细胞2.2.种类：种类：质粒质粒、噬菌体噬菌体和和动植物病毒动植物病毒等。等。种类种类用途用途不同点不同点质粒、噬菌体质粒、噬菌体植物病毒植物病毒动物病毒动物病毒将外源基因导入大肠杆菌等将外源基因导入大肠杆菌等受体细胞受体细胞将外源基因导入植物细胞将外源基因导入植物细胞将外源基因导入动物细胞将外源基因导入动物细胞来源不同，在大小、结来源不同，在大小、结构、复制方式以及可以构、复
21、制方式以及可以插入外源插入外源DNADNA片段的大片段的大小也有很大差别小也有很大差别3.3.作为载体需具备的条件作为载体需具备的条件（1 1）有一个至多个限制酶切割位点有一个至多个限制酶切割位点，供外源供外源DNADNA片段（基因）插入其中片段（基因）插入其中。（2 2）能）能在细胞中进行自我复制在细胞中进行自我复制或或整合到受体整合到受体DNADNA上，上，随受体随受体DNADNA同步复制同步复制。（3 3）常有特殊的标记基因（常有特殊的标记基因（如四环素抗性基因、氨苄青霉素抗性基因等）如四环素抗性基因、氨苄青霉素抗性基因等），便于重组便于重组DNADNA分子的筛选分子的筛选。利用标记基因
22、进行筛选示例：利用标记基因进行筛选示例：4.4.最常用的运载体最常用的运载体质粒质粒（1 1）质粒的化学本质：）质粒的化学本质： 质粒是一种质粒是一种_的、的、结构简结构简单单的、独立于的、独立于_或或_之外，并具有之外，并具有自自我复制我复制能力的能力的_分子分子裸露裸露真核细胞细胞核真核细胞细胞核原核细胞拟核原核细胞拟核DNADNA环状双链环状双链DNADNA（2 2）基因工程中使用质粒的特点：）基因工程中使用质粒的特点： 在基因工程操作中，真正被用在基因工程操作中，真正被用作载体的质粒，都是作载体的质粒，都是天然质粒的基天然质粒的基础上础上进行过进行过_的；的；这些质这些质粒上常有粒上常
23、有特殊的标记基因，特殊的标记基因，便于便于_；人工改造人工改造重组重组DNADNA分子的筛选分子的筛选重组重组DNADNA分子分子 TATCGTACGATAGGTACTTAA TATCGTACGATAGGTACTTAA ATAGCATGCTATCCATGATAGCATGCTATCCATG AATTCGGCATAC AATTCGGCATAC GCCGTATGGCCGTATGTCCTAGTCCTAGAGGATCTTAAAGGATCTTAAGAGCCATACTTAAGAGCCATACTTAAAATTCTCGGTATGAATTCTCGGTATG AATTCCATAC AATTCCATAC GGTATG
24、GGTATGGAGCCATACTTAAGAGCCATACTTAAAATTCTCGGTATGAATTCTCGGTATG重组重组DNADNA分子分子1.1.剪刀和透明胶条分别代表哪种剪刀和透明胶条分别代表哪种“分子工具分子工具”？剪刀代表限制酶；透明胶条代表剪刀代表限制酶；透明胶条代表DNADNA连接酶连接酶。2.2.你制作的黏性末端的碱基能不能互补配对你制作的黏性末端的碱基能不能互补配对? ?如果不能，如果不能，可能是什么原因造成的？可能是什么原因造成的？如果制作的黏性末端的碱基不能互补配对，如果制作的黏性末端的碱基不能互补配对，可能是剪切位点可能是剪切位点或连接位点选得不对或连接位点选得不对，
25、也，也可能是其他原因可能是其他原因。3.3.你插入的你插入的DNADNA片段能称得上一个基因吗？片段能称得上一个基因吗？不能，因为基因的长度一般在不能，因为基因的长度一般在100100个碱基对以上。个碱基对以上。DNADNA的粗提取与鉴定的粗提取与鉴定1.1.实验原理：实验原理：（1 1）DNADNA不溶于酒精不溶于酒精，但，但某些蛋白质溶于酒精某些蛋白质溶于酒精。（2 2）DNADNA在不同浓度的在不同浓度的NaClNaCl溶液中溶解度不同溶液中溶解度不同，能，能溶于溶于2mol/L 2mol/L NaClNaCl溶液溶液。（3 3）在一定温度下，）在一定温度下，DNADNA遇遇二苯胺试剂二
26、苯胺试剂会呈现会呈现蓝色蓝色。 DNA DNA、RNARNA、蛋白质和脂质等在物理和化学性质方面存在、蛋白质和脂质等在物理和化学性质方面存在差异差异，可以利用这些差异，可以利用这些差异，选用适当的物理或化学方法去除选用适当的物理或化学方法去除其他成分，对其他成分，对DNADNA进行提取进行提取。 DNA DNA含量相对较高含量相对较高的生物组织，如的生物组织，如新鲜洋葱新鲜洋葱、香蕉、菠、香蕉、菠菜、菜花和猪肝等菜、菜花和猪肝等 不能选择不能选择哺乳动物成熟的红细胞哺乳动物成熟的红细胞，因为哺乳动物成熟的红细胞中，因为哺乳动物成熟的红细胞中没有细胞核和线粒体没有细胞核和线粒体，几乎，几乎不含不
27、含DNADNA二、材料用具二、材料用具1.1.选材：选材：注意：注意：2.2.试剂：试剂：研磨液研磨液体积分数为体积分数为95%95%的酒精的酒精2mol/L 2mol/L 的的NaClNaCl溶液溶液二苯胺试剂二苯胺试剂蒸馏水蒸馏水含有含有NaClNaCl、EDTAEDTA、SDSSDS、TrisTris和和HClHCl析出析出DNADNA溶解溶解DNADNA鉴定鉴定DNADNA，要现配现用，要现配现用三、方法步骤：三、方法步骤：取材、研磨取材、研磨过滤或离心取上清液过滤或离心取上清液预冷酒精析出预冷酒精析出DNADNA或离心收集沉淀中的或离心收集沉淀中的DNADNANaClNaCl溶液溶解
28、溶液溶解DNADNA并鉴定并鉴定 抑制核酸水解酶的活性，进而抑制抑制核酸水解酶的活性，进而抑制DNADNA降解；降解；抑制抑制DNADNA分子运动，使分子运动，使DNADNA易形成沉淀析出；易形成沉淀析出；1.1.取材、研磨：取材、研磨： 称取称取30g30g洋葱，洋葱，切碎切碎，然后放入，然后放入研钵研钵中，倒入中，倒入10mL10mL 研磨液研磨液，充分充分研磨研磨研磨的目的：研磨的目的： 破碎细胞，使核物质容易溶解在研磨液中破碎细胞，使核物质容易溶解在研磨液中2.2.过滤或离心取上清液：过滤或离心取上清液： 在漏斗中垫上在漏斗中垫上纱布纱布，将洋葱研磨液，将洋葱研磨液过滤过滤到烧杯中，在
29、到烧杯中，在44冰箱中放置冰箱中放置几分几分钟钟后，再后，再取上清液取上清液。 也可也可直接直接将研磨液将研磨液倒入塑料离心管倒入塑料离心管中，中，1500r/min1500r/min的转速下离心的转速下离心5min5min，再，再取上清液取上清液放入烧杯中。放入烧杯中。上清液中除上清液中除DNADNA之外，可能含有哪些杂质？之外，可能含有哪些杂质？可能含有核蛋白、多糖等杂质可能含有核蛋白、多糖等杂质低温放置几分钟的作用：低温放置几分钟的作用：3.3.预冷酒精析出预冷酒精析出DNADNA或离心收集沉淀中的或离心收集沉淀中的DNADNA 在上清液中加入在上清液中加入体积相等体积相等的、的、预冷预
30、冷的的酒精溶液酒精溶液( (体积分数为体积分数为95%95%) )，静置，静置2 2- -3min3min，溶液中出现的溶液中出现的白色丝状物就是粗提取的白色丝状物就是粗提取的DNADNA。用玻璃棒。用玻璃棒沿一个方向搅拌沿一个方向搅拌，卷起丝，卷起丝状物，并用状物，并用滤纸吸去滤纸吸去上面的上面的水分水分； 或将溶液倒入或将溶液倒入塑料离心管塑料离心管中，在中，在10000r/min10000r/min的转速下离心的转速下离心5min5min，弃上清液，弃上清液，将管底的将管底的沉淀物沉淀物( (粗提取的粗提取的DNA)DNA)晾干晾干。搅拌时应搅拌时应轻缓、并沿一个方向：轻缓、并沿一个方向
31、：减少减少DNADNA断裂，断裂，以便获得较完整的以便获得较完整的DNADNA分子分子4.4.NaClNaCl溶液溶解溶液溶解DNADNA并鉴定并鉴定 取两支取两支20mL20mL的试管，各加入的试管，各加入2mol/L2mol/L的的NaClNaCl溶液溶液5mL5mL。将。将丝状丝状物或沉淀物物或沉淀物溶于其中溶于其中一支一支试管的试管的NaCINaCI溶液中。向溶液中。向两支两支试管中各试管中各加入加入4mL4mL的的二苯胺试剂二苯胺试剂。混合均匀后，将试管。混合均匀后，将试管置于沸水中加热置于沸水中加热5min5min。待试管。待试管冷却冷却后，比较两支试管中溶液后，比较两支试管中溶液
32、颜色的变化颜色的变化。实验组实验组对照对照组组水浴水浴加热加热结果分析与评价结果分析与评价1.1.你提取出白色丝状物或沉淀物了吗你提取出白色丝状物或沉淀物了吗？用二苯胺试剂鉴定的结果？用二苯胺试剂鉴定的结果如何？如何？ 观察提取的观察提取的DNADNA的颜色，的颜色，如果不是白色丝状物，说明如果不是白色丝状物，说明DNADNA中的杂质较多中的杂质较多。二苯胺试剂鉴定二苯胺试剂鉴定呈现蓝色说明实验基本成功呈现蓝色说明实验基本成功；如果不呈现蓝色，可能的原如果不呈现蓝色，可能的原因有所提取的因有所提取的DNADNA含量低，或者在实验操作过程中出现了失误含量低，或者在实验操作过程中出现了失误等。等。
33、2.2.你能分析出粗提取的你能分析出粗提取的DNADNA中可能含有哪些杂质吗？中可能含有哪些杂质吗？可能仍然可能仍然含有核蛋白、多糖等杂质含有核蛋白、多糖等杂质。3.3.与其他同学提取的与其他同学提取的DNADNA进行比较，看看实验结果有何不同，分析产进行比较，看看实验结果有何不同，分析产生差异的原因。生差异的原因。 本实验本实验可以采取分组的方式进行。可以选取不同的实验材料可以采取分组的方式进行。可以选取不同的实验材料；也可以查也可以查阅资料了解阅资料了解其他提取其他提取DNADNA的方法，对同种材料采用不同的方法的方法，对同种材料采用不同的方法。最后从多方。最后从多方面比较实验结果，如面比较实验结果，如DNADNA的纯度、的纯度、DNADNA的颜色、二苯胺试剂显色的深浅等，的颜色、二苯胺试剂显色的深浅等，看看哪种实验材料、哪种提取方法的效果更好。看看哪种实验材料、哪种提取方法的效果更好。
