1、实验室生物安全实验室生物安全眼科学国家重点实验室眼科学国家重点实验室 实验室意外事故频发实验室意外事故频发n2009年年10月月 北京理工大学爆炸北京理工大学爆炸 实验室内实验室内5人均受伤人均受伤 原因：厌氧培养箱调试时发生气体爆炸原因：厌氧培养箱调试时发生气体爆炸n2008年年7月月 云南省微生物研究所实验室突发爆炸云南省微生物研究所实验室突发爆炸 1名博士研究生受伤名博士研究生受伤 原因：收集实验废料时操作不当引发爆炸原因：收集实验废料时操作不当引发爆炸 n2011年年6月月 实验室办公室被盗实验室办公室被盗 笔记本一台，相机一部，财物若干笔记本一台，相机一部，财物若干 原因：外来人员趁
2、周末入室盗窃原因：外来人员趁周末入室盗窃实验室常见意外实验室常见意外u溢出和泼洒溢出和泼洒u针头和注射器刺伤针头和注射器刺伤u锐器、碎玻璃割伤锐器、碎玻璃割伤u动物咬伤、抓伤动物咬伤、抓伤u火灾、爆炸火灾、爆炸u紫外线损伤紫外线损伤u中毒中毒 无安全意识无安全意识穿白褂到处走穿白褂到处走戴手套随意开门柄、接电话戴手套随意开门柄、接电话 台面台面/ /器皿不清洁器皿不清洁 实验后不收拾实验后不收拾针头等尖利物品不放入利器盒针头等尖利物品不放入利器盒实验室生物安全实验室生物安全u实验动物生物安全实验动物生物安全u化学品生物安全化学品生物安全u临床实验室生物安全临床实验室生物安全u病原微生物实验室安
3、全病原微生物实验室安全u基因工程生物安全基因工程生物安全u放射性实验生物安全放射性实验生物安全实验动物的分级实验动物的分级 一级：普通级动物一级：普通级动物 大动物（比格犬、恒河猴、小型猪等）大动物（比格犬、恒河猴、小型猪等） 豚鼠、家兔豚鼠、家兔 二级：清洁级动物二级：清洁级动物 豚鼠、家兔豚鼠、家兔 大、小鼠均为二级以上大、小鼠均为二级以上 三级：无特定病原体（三级：无特定病原体（SPFSPF）动物）动物 豚鼠、家兔豚鼠、家兔 大、小鼠大、小鼠 四级：无菌级动物四级：无菌级动物 裸鼠、无菌豚鼠、无菌大小鼠裸鼠、无菌豚鼠、无菌大小鼠实验动物使用过程生物安全的相关因素实验动物使用过程生物安全的
4、相关因素u动物因素动物因素 l完整的资料完整的资料l品种、品系、遗传背景或其来源清楚品种、品系、遗传背景或其来源清楚l微生物检测状况微生物检测状况l质量合格证号、生产许可证号质量合格证号、生产许可证号u实验环境和设施的配备实验环境和设施的配备l隔离检疫室、饲养室、实验处置室、储存室等隔离检疫室、饲养室、实验处置室、储存室等u实验操作者因素实验操作者因素l严格做好防护，穿工作服、戴帽子、手套、口罩严格做好防护，穿工作服、戴帽子、手套、口罩动物实验安全注意事项动物实验安全注意事项u不同级别的动物在相应的环境中进行实验不同级别的动物在相应的环境中进行实验l不得将普通级动物带进屏障环境中实验不得将普通
5、级动物带进屏障环境中实验l不得将带出屏障环境的实验动物，再带回屏障环境不得将带出屏障环境的实验动物，再带回屏障环境u特殊改造的实验室特殊改造的实验室l涉及传染性、中毒性、放射性、致癌性、致突变或涉及传染性、中毒性、放射性、致癌性、致突变或致畸性动物实验致畸性动物实验实验动物废弃物处理实验动物废弃物处理u无污染的实验动物尸体无污染的实验动物尸体l及时装入专用塑料袋密封后，当天送回动物中心，及时装入专用塑料袋密封后，当天送回动物中心，不得随意丢弃不得随意丢弃 u已污染或具有危险性的动物尸体及组织已污染或具有危险性的动物尸体及组织l按规定收集、分离、包装标识后，当天送回动物中按规定收集、分离、包装标
6、识后，当天送回动物中心，统一运输到特定场所焚烧心，统一运输到特定场所焚烧被动物咬了怎么办？被动物咬了怎么办？u凡不能确定伤人动物是否健康，应立即对受伤部位进行彻底清洗和凡不能确定伤人动物是否健康，应立即对受伤部位进行彻底清洗和消毒，越早越好，消毒，越早越好，24-4824-48小时内小时内 uSPFSPF级动物咬伤，建议注射破伤风及流行性出血热抗毒素级动物咬伤，建议注射破伤风及流行性出血热抗毒素u彻底冲洗彻底冲洗l肥皂水、清水、碘制剂或乙醇等，冲洗肥皂水、清水、碘制剂或乙醇等，冲洗2020分钟分钟u严格消毒严格消毒l2 23 3碘酒或碘酒或7575酒精涂于伤口酒精涂于伤口u酌情处置酌情处置l未
7、伤及大血管的伤口不要缝合及包扎未伤及大血管的伤口不要缝合及包扎l较大伤口或比较严重的浅部伤口，清创消毒后，先用狂犬病免疫血清或较大伤口或比较严重的浅部伤口，清创消毒后，先用狂犬病免疫血清或球蛋白浸润伤口，数小时后（不低于球蛋白浸润伤口，数小时后（不低于2 2小时）再予缝合包扎小时）再予缝合包扎l伤口深而大者伤口深而大者 放置引流条，并使用抗生素和破伤风抗毒素以控制感染放置引流条，并使用抗生素和破伤风抗毒素以控制感染u接种疫苗接种疫苗 l越早越好。已受伤一段时间而未接种狂犬病疫苗者，也应按接种程序接越早越好。已受伤一段时间而未接种狂犬病疫苗者，也应按接种程序接种疫苗种疫苗化学品生物安全化学品生物
8、安全危险化学品标志危险化学品标志危险化学品的分类危险化学品的分类u爆炸品爆炸品 受热、受压或撞击时产生爆炸或燃烧，如叠氮钠、受热、受压或撞击时产生爆炸或燃烧，如叠氮钠、TNTu压缩和液化气体压缩和液化气体 受热、撞击或强烈震动时，导致容器破裂爆炸或气瓶阀门松动漏气，酿成火灾或受热、撞击或强烈震动时，导致容器破裂爆炸或气瓶阀门松动漏气，酿成火灾或 中毒，如氧气泄漏时可能引起火灾；氮气、二氧化碳泄露可能引起窒息中毒，如氧气泄漏时可能引起火灾；氮气、二氧化碳泄露可能引起窒息u氧化剂和有机过氧化物氧化剂和有机过氧化物 高温、摩擦、撞击等易燃烧，甚至爆炸，如硝酸盐等高温、摩擦、撞击等易燃烧，甚至爆炸，如
9、硝酸盐等u易燃液体易燃液体 乙醚、乙醇、乙醛、苯、甲醇等乙醚、乙醇、乙醛、苯、甲醇等u易燃固体易燃固体 自燃和遇湿易燃，如金属钠、红磷等自燃和遇湿易燃，如金属钠、红磷等u有毒品有毒品 通过呼吸道、皮肤和消化道进入体内，引起刺激、过敏、缺氧、昏迷和麻醉、致癌、通过呼吸道、皮肤和消化道进入体内，引起刺激、过敏、缺氧、昏迷和麻醉、致癌、 致畸、致突致畸、致突 变、尘肺等变、尘肺等u腐蚀品腐蚀品 强酸（浓盐酸、浓硫酸）、强碱（氢氧化钠）或其他腐蚀品（氯化铜、甲醛溶液）强酸（浓盐酸、浓硫酸）、强碱（氢氧化钠）或其他腐蚀品（氯化铜、甲醛溶液）u放射性物品放射性物品 钋、镭、钴等，高毒甚至剧毒钋、镭、钴等，
10、高毒甚至剧毒化学品的储存化学品的储存u在适宜的温度和湿度下储存化学品，须在适宜的温度和湿度下储存化学品，须远离高热源远离高热源，如如烤箱烤箱；避免阳光直射，如靠近窗台；避免阳光直射，如靠近窗台u定期目测原料和包装容器：颜色、是否溢出、腐蚀等定期目测原料和包装容器：颜色、是否溢出、腐蚀等u不得将化学品存放在实验台上，防止被碰倒不得将化学品存放在实验台上，防止被碰倒u不得将化学品存放在地面上，即使是临时放置也不允许不得将化学品存放在地面上，即使是临时放置也不允许u不能将通风橱用作化学品的存放地，以免破坏通风橱的不能将通风橱用作化学品的存放地，以免破坏通风橱的通风效果通风效果u不得将易漏有害性或腐蚀
11、性化学品存放在视力水平以上不得将易漏有害性或腐蚀性化学品存放在视力水平以上的药品架上的药品架上危险就在你身边危险就在你身边! ! 核酸技术：核酸技术：u 强诱变剂，嵌入碱基分子中导致错配，高致癌性强诱变剂，嵌入碱基分子中导致错配，高致癌性u 赛百盛称赛百盛称“未发现其有致癌作用未发现其有致癌作用”，但有报道其与吖啶橙（强，但有报道其与吖啶橙（强 致癌剂高度相似其安全性有待进一步评价）致癌剂高度相似其安全性有待进一步评价）u 潜在致癌物质，吸入时毒性最强，潜在致癌物质，吸入时毒性最强，使用时应戴口罩，通风橱中使用时应戴口罩，通风橱中 进行进行u 含有苯酚，毒性和刺激性，皮肤接触后立即用大量去垢剂
12、和水含有苯酚，毒性和刺激性，皮肤接触后立即用大量去垢剂和水 冲洗冲洗u 致癌剂，易挥发，损害肝和肾致癌剂，易挥发，损害肝和肾溴化乙锭（溴化乙锭（EBEB）Golden view焦碳酸二乙酯焦碳酸二乙酯（DEPC）Trizol /Tri-reagent氯仿（三氯甲烷）氯仿（三氯甲烷）危险就在你身边危险就在你身边! ! 蛋白技术：蛋白技术： Western blotu 中等毒性物质，可致癌，累积毒性，不易排毒，主要引起神经中等毒性物质，可致癌，累积毒性，不易排毒，主要引起神经、u 生殖与发育的毒性生殖与发育的毒性u 有毒，影响中枢神经系统，切勿吸入粉末有毒，影响中枢神经系统，切勿吸入粉末u 对黏膜
13、、上呼吸道组织、眼睛和皮肤有极大危害性，吸入可致命对黏膜、上呼吸道组织、眼睛和皮肤有极大危害性，吸入可致命u 强神经毒性，防止误吸，操作时快速，存放时密封强神经毒性，防止误吸，操作时快速，存放时密封 丙烯酰胺丙烯酰胺NN-NN-亚甲双丙烯酰胺亚甲双丙烯酰胺过硫酸铵（过硫酸铵（APSAPS）四甲基乙烯二胺四甲基乙烯二胺（TEMED ）危险就在你身边危险就在你身边! ! 蛋白技术：蛋白技术： Western blotu吸入、咽下或皮肤吸收而危害健康吸入、咽下或皮肤吸收而危害健康u 吸入、咽下或皮肤吸收而致命吸入、咽下或皮肤吸收而致命u 有毒，刺激性，高热分解放出有毒气体造成眼睛的严重损伤有毒，刺激
14、性，高热分解放出有毒气体造成眼睛的严重损伤u 神经麻醉作用，引起脑水肿神经麻醉作用，引起脑水肿二硫苏糖醇二硫苏糖醇（DTT ）苯甲基磺酰氟苯甲基磺酰氟（PMSF）十二烷基硫酸钠十二烷基硫酸钠（SDS）甲醇甲醇危险就在你身边危险就在你身边! ! 蛋白技术：免疫组化蛋白技术：免疫组化u 毒性非常大，可因吸入、咽下或皮肤吸收，操作时应非常小心毒性非常大，可因吸入、咽下或皮肤吸收，操作时应非常小心u 微毒类，主要是对中枢神经系统的麻醉作用，能刺激眼睛微毒类，主要是对中枢神经系统的麻醉作用，能刺激眼睛 u 毒性，危害不可逆性，吸入或皮肤吸收，应在通风橱操作毒性，危害不可逆性，吸入或皮肤吸收，应在通风橱操
15、作u 毒性大，致癌，腐蚀性，易挥发，也通过皮肤吸收毒性大，致癌，腐蚀性，易挥发，也通过皮肤吸收叠氮钠叠氮钠（NaN3）丙酮丙酮吉姆萨吉姆萨（Giemsa）甲醛（福尔马林）甲醛（福尔马林）危险就在你身边危险就在你身边! ! 细胞培养技术：细胞培养技术：u对皮肤有极强的渗透性，与蛋白质疏水基团对皮肤有极强的渗透性，与蛋白质疏水基团作用，导致蛋白质变性，具有血管和肝肾毒作用，导致蛋白质变性，具有血管和肝肾毒性，吸入高挥发浓度可致头痛，晕眩性，吸入高挥发浓度可致头痛，晕眩二甲基亚砜二甲基亚砜（DMSO）临床实验室生物安全临床实验室生物安全u临床样本均具有不同程度的潜在传染性临床样本均具有不同程度的潜在
16、传染性l血液传播性病原体（如血液传播性病原体（如HBV和和HIV）的操作应在）的操作应在BSL-2下进行下进行l应由受过培训的人员采集患者的血样应由受过培训的人员采集患者的血样l操作时应戴手套及眼睛和粘膜的保护装置操作时应戴手套及眼睛和粘膜的保护装置l血液和血清应当小心吸取，不能倾倒血液和血清应当小心吸取，不能倾倒l适当的消毒剂来清洗喷溅和溢出的标本适当的消毒剂来清洗喷溅和溢出的标本l感染性废物应经过灭菌和焚烧处理感染性废物应经过灭菌和焚烧处理病原微生物实验室安全病原微生物实验室安全生物安全实验室的分级生物安全实验室的分级u一级生物安全实验室（一级生物安全实验室（BSL-1）l对健康成年人已知
17、无致病作用的微生物对健康成年人已知无致病作用的微生物u二级生物安全实验室（二级生物安全实验室（BSL-2）l对人或环境具有中等潜在危害的微生物对人或环境具有中等潜在危害的微生物u三级生物安全实验室（三级生物安全实验室（BSL-3）l主要通过呼吸道使人传染上严重甚至致死性疾病的微生物，主要通过呼吸道使人传染上严重甚至致死性疾病的微生物，已有预防疫苗已有预防疫苗u四级生物安全实验室（四级生物安全实验室（BSL-4）l对人具有高度危险性，尚无有效疫苗或治疗方法的微生物对人具有高度危险性，尚无有效疫苗或治疗方法的微生物 u所存在的危害是所存在的危害是潜在的潜在的u应了解基因工程基本原理、实验目的及所操
18、作应了解基因工程基本原理、实验目的及所操作生物的属性生物的属性u充分认识所用菌种、受体、载体、目的基因、充分认识所用菌种、受体、载体、目的基因、基因操作方法和基因工程产品的安全性基因操作方法和基因工程产品的安全性u生物材料和垃圾排放以前需生物材料和垃圾排放以前需高压消毒高压消毒基因工程实验室操作注意事项基因工程实验室操作注意事项基因工程生物安全基因工程生物安全放射性实验室生物安全放射性实验室生物安全放射性物质的危害放射性物质的危害u急性放射病急性放射病u皮肤放射损伤皮肤放射损伤u凝血、造血功能障碍凝血、造血功能障碍u癌症癌症u遗传性疾病遗传性疾病放射性实验室基本防护规程放射性实验室基本防护规程
19、u放射性核素实验应在符合防护要求的专门实验室放射性核素实验应在符合防护要求的专门实验室和专用工作台进行和专用工作台进行u连续从事放射性操作连续从事放射性操作1个月以上应配带剂量仪个月以上应配带剂量仪u遇到少量放射性液体溅洒在手脚等情况时，立即遇到少量放射性液体溅洒在手脚等情况时，立即用吸水材料吸干，再用湿布由外向里反复擦洗用吸水材料吸干，再用湿布由外向里反复擦洗u短半衰期的放射性废物主要用放置衰变法处理短半衰期的放射性废物主要用放置衰变法处理u长半衰期的放射性废物采用焚烧法或埋存法处理长半衰期的放射性废物采用焚烧法或埋存法处理 实验室不具备放射性核素实验条件实验室不具备放射性核素实验条件常用仪
20、器使用的注意事项常用仪器使用的注意事项 离心机离心机u在装载离心管后应在装载离心管后应正确平衡正确平衡u离心管应始终牢固盖紧离心管应始终牢固盖紧u放置好离心管后盖上盖子才可开始离心放置好离心管后盖上盖子才可开始离心u离心机放置高度应使实验人员能看到离离心机放置高度应使实验人员能看到离心机内部心机内部u有危险性的微生物，必须使用可封口的有危险性的微生物，必须使用可封口的离心桶离心桶常用仪器使用的注意事项常用仪器使用的注意事项 磁力搅拌器磁力搅拌器u烧杯、瓶子应确保没有裂缝烧杯、瓶子应确保没有裂缝u搅拌时用盖子或保鲜膜封盖搅拌时用盖子或保鲜膜封盖u有毒物品应在通风橱中进行有毒物品应在通风橱中进行u
21、因玻璃容易破碎，故建议使用塑料容器因玻璃容易破碎，故建议使用塑料容器常用仪器使用的注意事项常用仪器使用的注意事项 高压蒸汽消毒锅高压蒸汽消毒锅u灭菌条件组合灭菌条件组合l134oC 3min，126oC 10min，121oC 15min，115oC 25minu注意事项注意事项l受过培训的人员负责消毒和日常维护受过培训的人员负责消毒和日常维护l物品应放在空气能排出并具有良好渗透性的容器中，包装稍物品应放在空气能排出并具有良好渗透性的容器中，包装稍松散松散l待温度下降到待温度下降到80oC 以下后才可打开门取出物品以下后才可打开门取出物品常用仪器使用的注意事项常用仪器使用的注意事项 冰箱与冰柜
22、冰箱与冰柜u应定期除霜及清洁，清理出破碎的物品应定期除霜及清洁，清理出破碎的物品u清理时应戴厚橡胶手套，必要时进行面部防护清理时应戴厚橡胶手套，必要时进行面部防护u储存在冰箱内的容器应标明内装物品的名称，储存在冰箱内的容器应标明内装物品的名称，日期和储存者日期和储存者u不能放置易燃物品不能放置易燃物品u应当保存一份冻存物品的清单应当保存一份冻存物品的清单常用仪器使用的注意事项常用仪器使用的注意事项 超净工作台超净工作台u提前提前3030分钟开台内紫外灯杀菌后，再提前分钟开台内紫外灯杀菌后，再提前2020分钟开风机分钟开风机 u工作台面上，不要存放不必要的物品，以工作台面上，不要存放不必要的物品
23、，以保持工作区内的洁净气流正常流动，不受保持工作区内的洁净气流正常流动，不受干扰干扰 常用仪器使用的注意事项常用仪器使用的注意事项 微波炉微波炉u运转时，运转时，人需保持人需保持1米以上的距离，切忌用眼睛观察运米以上的距离，切忌用眼睛观察运转情况，转情况，以免受到微波等的损害以免受到微波等的损害u加热结束，戴好防护手套再取出加热后的物品加热结束，戴好防护手套再取出加热后的物品u不可将金属容器和带金银边的器皿放入炉中加热不可将金属容器和带金银边的器皿放入炉中加热，应选，应选择耐热玻璃制品、陶瓷制品或微波炉专用盛器择耐热玻璃制品、陶瓷制品或微波炉专用盛器注意：请遵守执行注意：请遵守执行u带回实验室
24、的动物应及时处理，不得长时间留在实验室，严带回实验室的动物应及时处理，不得长时间留在实验室，严格防止实验动物逃出格防止实验动物逃出u使用一次性注射器，用过的针头禁止折弯、剪断等，使用一次性注射器，用过的针头禁止折弯、剪断等，禁止用禁止用手直接操作手直接操作u感染性物质不能使用移液管反复吹吸混合感染性物质不能使用移液管反复吹吸混合u细胞培养房废弃物应及时处理细胞培养房废弃物应及时处理u废弃物应经过高压灭菌后在其他地方焚烧后再处理，或在指废弃物应经过高压灭菌后在其他地方焚烧后再处理，或在指定垃圾场掩埋定垃圾场掩埋u污染的器械应完全浸泡在盛有适当消毒液的防碎容器中污染的器械应完全浸泡在盛有适当消毒液
25、的防碎容器中u生物安全柜在使用中不能打开玻璃观察挡板生物安全柜在使用中不能打开玻璃观察挡板u操作有毒物品应在通风橱中进行操作有毒物品应在通风橱中进行注意：请遵守执行注意：请遵守执行u工作期间必须穿专用白大褂、戴防护手套，必要时工作期间必须穿专用白大褂、戴防护手套，必要时 戴穿防护服、防护镜、头部保护罩等戴穿防护服、防护镜、头部保护罩等u实验结束后收拾、清洁台面，洗手实验结束后收拾、清洁台面，洗手u不得将实验室有毒（或可疑有毒）物品带入办公室，不得将实验室有毒（或可疑有毒）物品带入办公室，不得戴手套在办公室接听电话，使用电脑等不得戴手套在办公室接听电话，使用电脑等u不得在实验室进食不得在实验室进食 遇到问题，不知如何处理时，一定立即向知遇到问题，不知如何处理时，一定立即向知情同学请教或老师汇报，不能擅自处理情同学请教或老师汇报，不能擅自处理Thank you！
