1、第三章第三章 消毒灭菌与病原微生物消毒灭菌与病原微生物实验室生物安全实验室生物安全第一节消毒灭菌的常用术语灭菌灭菌: 杀死物体上杀死物体上所有微生物所有微生物的方法。的方法。消毒消毒：杀死杀死物体上或环境中的物体上或环境中的病原微生物病原微生物的方法，的方法， 并不一定并不一定 能杀死含芽胞的细菌或非病原微生能杀死含芽胞的细菌或非病原微生 物。物。 消毒剂消毒剂-用于消毒的药品。用于消毒的药品。防腐防腐：防止或抑制防止或抑制体外体外细菌生长细菌生长繁殖繁殖的方法。的方法。清洁清洁：通过除去尘埃和一切污秽以通过除去尘埃和一切污秽以减少减少微生物数量微生物数量 的过程。的过程。 无菌无菌：无活菌存
2、在。无活菌存在。 无菌操作无菌操作：防止细菌进入人体或其他物品的操作技术。：防止细菌进入人体或其他物品的操作技术。第二节第二节消毒灭菌的方法消毒灭菌的方法（一）热力灭菌法（一）热力灭菌法 高温对细菌有明显的致死作用高温对细菌有明显的致死作用- 蛋白质变性；蛋白质变性；核酸断裂。核酸断裂。 有有干热灭菌干热灭菌和和湿热灭菌湿热灭菌两大类，在同一两大类，在同一温度下，前者比后者的效力大。温度下，前者比后者的效力大。 *湿热中菌体蛋白较易凝固。湿热中菌体蛋白较易凝固。 *湿热的穿透力比干热大。湿热的穿透力比干热大。 *湿热的蒸汽有潜热存在。湿热的蒸汽有潜热存在。物理消毒灭菌法干热灭菌干热灭菌 干热的
3、杀菌作用是通过脱水、干燥干热的杀菌作用是通过脱水、干燥 和大分子变性。和大分子变性。 1.1.焚烧法：直接点燃或在焚烧炉内焚烧。是一种彻底的灭焚烧法：直接点燃或在焚烧炉内焚烧。是一种彻底的灭 菌方法。菌方法。 适用于废弃物品或动物尸体。适用于废弃物品或动物尸体。 2.2.烧灼法：直接用火焰灭菌。烧灼法：直接用火焰灭菌。 适用于接种环，试管口等的灭菌。适用于接种环，试管口等的灭菌。 3.3.干烤法：将物品置干烤箱内，加热至干烤法：将物品置干烤箱内，加热至160160170170 ，2 2h h。 适用于高温下不变质、不损坏、不蒸发的物品。适用于高温下不变质、不损坏、不蒸发的物品。 4.4.红外线
4、：利用电磁波的热效应灭菌。红外线：利用电磁波的热效应灭菌。1 11010 m m波长的热波长的热 效应最强。适用于医疗器械的灭菌。效应最强。适用于医疗器械的灭菌。湿热灭菌湿热灭菌 1.巴氏消毒法：巴氏消毒法：用较低温度杀灭液体中的病原用较低温度杀灭液体中的病原 微生物或特微生物或特 定的微生物，而仍保持物品中所需的不耐定的微生物，而仍保持物品中所需的不耐 热成分不被破坏的消毒方法。热成分不被破坏的消毒方法。 61.162.8 ，30min; 71.7 ,1530s 用于牛乳制品、酒类等的消毒。用于牛乳制品、酒类等的消毒。 2.煮沸法煮沸法: 100 水浴，水浴，30min。食具、刀剪等消毒。食
5、具、刀剪等消毒。 3.流动蒸气消毒法：流动蒸气消毒法： 100 汽浴，汽浴，30min。 4.间歇蒸汽灭菌法间歇蒸汽灭菌法： 100 汽浴，汽浴，30min/次。次。 5.高压蒸汽灭菌法：高压蒸汽灭菌法：121.3 汽浴（汽浴（103.4kPa)，1520min。 培养基、生理盐水、手术敷料等培养基、生理盐水、手术敷料等 耐高温、耐湿物品的灭菌。耐高温、耐湿物品的灭菌。 （二）辐射杀菌法（二）辐射杀菌法 紫外线杀菌紫外线杀菌 波长波长200200300300nmnm的紫外线有杀菌作用，的紫外线有杀菌作用， 其中以其中以265265266266nmnm最强。最强。 杀菌机制：杀菌机制：形成形成T
6、 TT T, ,干扰干扰DNADNA的复制与转录。的复制与转录。 杀菌作用特点：杀菌作用特点：穿透力弱，表面消毒。穿透力弱，表面消毒。 适用范围：适用范围：手术室、传染病房、细菌实验室手术室、传染病房、细菌实验室 的空气消毒的空气消毒, ,或不耐热物品的表面消毒。或不耐热物品的表面消毒。电离辐射电离辐射：高速电子、射线、高速电子、射线、 射线等。射线等。 杀菌机制杀菌机制：产生游离基，破坏：产生游离基，破坏DNADNA。 应用范围应用范围：一次性医用塑料制品；食品。：一次性医用塑料制品；食品。微波微波：波长为波长为1 1mmmm到到1 1m m左右的电磁波，左右的电磁波，可穿透可穿透 玻璃、塑
7、料薄膜与陶瓷等物质，不能玻璃、塑料薄膜与陶瓷等物质，不能 穿透金属表面。穿透金属表面。 检验室用品、非金属器械、无菌病室检验室用品、非金属器械、无菌病室 的食品用具、药杯及其它用品的消毒。的食品用具、药杯及其它用品的消毒。（三）滤过除菌法（三）滤过除菌法 用物理阻留的方法将液体或空气中的细用物理阻留的方法将液体或空气中的细菌除去，以达到无菌的目的。菌除去，以达到无菌的目的。抽气（四）干燥与低温抑菌法（四）干燥与低温抑菌法 干燥干燥可使菌体内的水分逸出，使细菌生命可使菌体内的水分逸出，使细菌生命 活动停止。活动停止。 低温低温可使细菌的新陈代谢减慢，影响细菌可使细菌的新陈代谢减慢，影响细菌 的生
8、长。的生长。 冷冻真空干燥法冷冻真空干燥法一、化学消毒剂的杀菌机制一、化学消毒剂的杀菌机制 促进菌体蛋白质变性或凝固。促进菌体蛋白质变性或凝固。 如酚类、醇类、重金属盐类、酸碱类、醛类等。如酚类、醇类、重金属盐类、酸碱类、醛类等。 干扰细菌的酶系统和代谢。干扰细菌的酶系统和代谢。 如氧化剂、重金属盐类。如氧化剂、重金属盐类。 损伤菌细胞膜，降低菌细胞的表面张力并增损伤菌细胞膜，降低菌细胞的表面张力并增 加其通透性，胞外液体内渗，致使细胞破裂。加其通透性，胞外液体内渗，致使细胞破裂。 如酚类表面活性剂、脂溶剂等。如酚类表面活性剂、脂溶剂等。化学消毒灭菌法二、消毒剂的主要种类二、消毒剂的主要种类
9、酚类酚类石炭酸、来苏、洗必泰等石炭酸、来苏、洗必泰等 醇类醇类-乙醇（乙醇（707075%75%）、异丙醇。）、异丙醇。 重金属盐类重金属盐类-硝酸银、汞硝酸银、汞 氧化剂氧化剂-过氧化氢、高锰酸钾、过氧乙酸、过氧化氢、高锰酸钾、过氧乙酸、 碘酒、漂白粉、次氯酸等。碘酒、漂白粉、次氯酸等。 表面活性剂表面活性剂-新洁尔灭、杜灭芬新洁尔灭、杜灭芬 烷化剂烷化剂-甲醛、还氧乙烷、戊二醛等。甲醛、还氧乙烷、戊二醛等。 染料染料-龙胆紫龙胆紫 酸碱类酸碱类-醋酸醋酸 用时需进入无菌组织的物品。所有这些物品都应该灭菌。用时不进入无菌组织但接触黏膜的器械。采用消毒即可。 只接触未损伤皮肤但不进入无菌组织和
10、不接触黏膜的物品。 一般用后清洗、消毒即可。第四节第四节 影响消毒灭菌效果的因素影响消毒灭菌效果的因素一、消毒剂的性质、浓度与作用时间一、消毒剂的性质、浓度与作用时间二、微生物的种类与数量二、微生物的种类与数量三、温度三、温度 四、酸碱度四、酸碱度五、有机物五、有机物第五节第五节 病原微生物实验室生物安全病原微生物实验室生物安全 级别级别处理对象处理对象一级一级对人体、动植物或环境危害较低，不具有对健康成人、动植对人体、动植物或环境危害较低，不具有对健康成人、动植物致病的致病因子物致病的致病因子。二级二级对人体、动植物或环境具有中等危害或具有潜在危险的致病对人体、动植物或环境具有中等危害或具有
11、潜在危险的致病因子，对健康成人、动植物和环境不会造成严重危害，因子，对健康成人、动植物和环境不会造成严重危害，具具有有有效的预防和治疗措施有效的预防和治疗措施。三级三级对人体、动植物或环境具有高度危险性，主要通过气溶胶使对人体、动植物或环境具有高度危险性，主要通过气溶胶使人类传染上严重的甚至是致命的疾病，或对动植物和环境具人类传染上严重的甚至是致命的疾病，或对动植物和环境具有高度危害的致病因子。通常有预防治疗措施有高度危害的致病因子。通常有预防治疗措施。四级四级 对人体、动植物或环境具有高度危险性，通过气溶胶途径传对人体、动植物或环境具有高度危险性，通过气溶胶途径传播或传播途径不明或未知的危险的致病因子。没有预防治疗播或传播途径不明或未知的危险的致病因子。没有预防治疗措施措施。 感染的控制感染的控制包括定期检查实验室的生物包括定期检查实验室的生物安全防护、病原微生物菌（毒）种和样本的安全防护、病原微生物菌（毒）种和样本的保存和使用、安全操作、实验室排放的废水保存和使用、安全操作、实验室排放的废水和废气以及其他废物处置等实施情况。和废气以及其他废物处置等实施情况。
