1、沙门菌属沙门菌属1分类与命名 沙门菌属隶属于细菌域，变形菌门，-变形菌纲，肠杆菌目，肠杆菌科。2二、生物学性状（一）形态与染色 沙门菌属细菌为革兰阴性杆菌，菌体大小为（0.7-1.5）um x （2.0-5.0）um。 无芽孢，无荚膜（除个别菌株如鸡沙门菌等外），一般都有周鞭毛。345 （二）培养特性 沙门菌属为需氧或兼性厌氧菌，最适生长温度3537，最适pH6.87.8。能在普通培养基上生长。 在血平板上孵育24小时，可呈灰色或灰白色中等大小的圆形、湿润菌落，菌落直径24mm678 在中国蓝，麦康凯，EMB等选择性培养基上，呈透明或半透明琥珀色，边缘整齐，中等大小的菌落。9 在SS平板上形成
2、中心为黑褐色的菌落10 在HE琼脂平板上菌落呈蓝色或蓝绿色，大部分菌落中央呈黑色。 在XLD琼脂平板上菌落呈红色或中央黑色 在液体培养基中均匀混浊生长。11 （三）生化特性 可发酵葡萄糖、麦芽糖和甘露醇，除伤寒沙门菌产酸不产气外，其余沙门菌均产酸产气； 不发酵乳糖和蔗糖（亚利桑那菌除外）； 不分解尿素； 大多可产生H2S； 动力阳性； IMVIC试验结果为+-，MIU试验为+-。12IMVIC试验 I:吲哚（indol）试验 M:甲基红（methyl red）试验 V:V.P（Voges-Proskauer）试验 C:柠檬酸（citrate utilization）实验(枸橼酸盐) 作用：这4
3、个试验主要是用来快速鉴别大肠杆菌和产气肠杆菌，多用于水的细菌检查。 13 1.吲哚试验 试验菌用蛋白胨水培养基37培养24小时. 在培养液中加入乙醚1ml(使呈明显的乙醚层)充分振荡,使吲哚试剂溶于乙醚.静置片刻,待乙醚浮于培养液上面时沿管壁慢慢加入吲哚试剂10滴.呈玫瑰红的为阳性,不变色的为阴. (注:加入吲哚试剂后,不可再摇动,否则红色不明显) 2.甲基红试验 试验菌用葡萄糖蛋白胨培养基37培养24小时. 沿管壁加入M.R.(甲基红)试剂3-4滴.红的为阳性,黄的为阴性.14 3.V.P试验 试验菌用葡萄糖蛋白胨培养基37培养24小时. 加入40%KOH 10-20滴,再加入等量-茶酚,用
4、力振荡(拔去棉塞)再放入374h后再观察,仍无色产生为阴. 4.柠檬酸实验 将试验菌培养在柠檬酸盐培养基斜面上37培养24-28小时. 观察有无细菌生长与培养基颜色变化.如果含有溴麝香草酚蓝的斜面蓝色者为阳性反应,呈绿色的为阴性反应;含苯酚红的斜面如果呈红色为阳性反应,呈黄色为阴性反应.15MIU试验 为动力、吲哚及脲酶复合试验 原理：培养基为含尿素、蛋白胨的半固体培养基，指示剂为酚红。具色氨酸酶的细菌能分解色氨酸产生吲哚，加入吲哚试剂后，培养基上层的吲哚会变红；具脲酶的细菌能分解尿素产氨，使整个培养基变碱呈红色；有动力的细菌沿穿刺线扩散生长。 作用：常用于肠杆菌科细菌的鉴定。 16 （四）抗
5、原构造 沙门菌的抗原结构较复杂，主要包括菌体O抗原，鞭毛H抗原，少数的菌种有表面Vi抗原，均具有分类鉴定的意义。17 1.菌体抗原（O抗原） 化学成分是脂多糖，耐热，它刺激机体产生的抗体以IgM为主，与相应的抗体结合出现颗粒状凝集。 是沙门菌分群的依据，每个沙门菌的血清型可具有一种或树种O抗原，将具有共同O抗原成分的归为一个群。临床上常见的是AF群。18 2.鞭毛抗原（H抗原） 化学成分为蛋白质，不耐热，刺激机体产生的抗体以IgG为主，与相应抗体结合出现絮状凝集。 是沙门菌分型的依据。H抗原分两个相：第一相为特异相；第二相为沙门菌所共有，称非特异相。 仅具有一相H抗原的为单相菌，具有两相H抗原
6、的称为双相菌。19 3.表面抗原（Vi抗原） 位于菌体外层，抗原性强，相应抗体可作为筛选带菌者指标; 不耐热； 能阻止O抗原与相应抗体发生凝集反应，影响沙门菌的血清学鉴定。20 （五）抵抗力 对理化因素抵抗力弱 尤其对酸敏感 对消毒剂敏感 易产生耐药性 对胆盐和煌绿等抑制剂有抵抗力21临床意义 致病物质：菌毛、内毒素、Vi抗体 所致疾病：1.胃肠炎 2.菌血症或败血症 3.食物中毒 4.肠热症 免疫性：病后免疫力牢固，以细胞免疫为主。2223微生物学检验 标本采集： 根据不同疾病，不同病程取不同标本，最好在使用抗生素前采集。 肠热症的标本采集 第一周取血液 第23周取粪便和尿液 全程可取骨髓2
7、425检验方法血清学鉴定 首先用AF多价O血清进行玻片凝集。 再用单价O因子血清鉴定到具体的群。 再用第一相与第二相H因子血清定型。 若细菌生化反应符合沙门菌属，但与AF多价O血清不产生凝集现象，应考虑是否有表面抗原（Vi）存在，可将细菌悬液水浴加热30分钟后再进行凝集试验。26检验方法免疫学诊断 肥达反应 原理：肥达反应是用已知伤寒沙门菌O、H抗原以及甲型、乙型、丙型副伤寒沙门菌H抗原与受检者血清进行凝集试验，测定受检者血清中有无相应抗体及其效价。 意义：辅助诊断伤寒和副伤寒（肠热症）27肠热症病人血清抗体出现情况28 肥达反应结果判定： O凝集效价达到或超过1:80 H抗体效价达到或超过1:160 副伤寒H抗体效价达到或超过1:80 病程中逐周检查效价递增或恢复期达到初次效价的4倍或以上者，才有诊断意义。 O与H抗体的诊断意义： O、H效价均升高：已感染伤寒 O、H效价均低于正常值：未感染沙门菌或免疫低下 O升高、H正常：某型沙门菌感染早期 H升高、O正常：以往接种过疫苗或非特异性回忆反应2930
