1、第十一章第十一章 生物碱类药物的分析生物碱类药物的分析 第一节第一节 概述概述一、生物碱（一、生物碱（Alkaloids） 生物碱是生物体内含氮有机化合生物碱是生物体内含氮有机化合物的总称物的总称典型药物的结构 小檗碱 OH-+NOOCH3OCH3OpKb=2.5麻黄碱 CCCH3OH NHCH3HHpKb=4.42阿托品 NCH3OCOCHCH2OHpKb=4.35奎宁 NCHCH2HNCH3OCOHHpKb2=9.7pKb1=5.07士的宁 NONOpKb2=11.7pKb1=6.0NCH3OCH3OCH2OCH3OCH3罂粟碱 pKb=7.87咖啡因 NNNNCH3CH3CH3OOpKb
2、=14.15吗啡 OHOOHHNCH3pKa=9.85pKb=6.13NNNNCH3CH3OO 茶碱H二、生物碱类药物的通性二、生物碱类药物的通性1. 碱性 季铵碱脂肪胺、脂环胺芳胺、N芳杂环酰胺 小檗碱麻黄碱、阿托品罂粟碱咖啡因 吗啡具酸碱两性 2. 溶解性 游离生物碱不溶或难溶于水，能溶或易溶于有机溶剂，在稀酸中成盐而溶解 生物碱盐类易溶于水，不溶于有机溶剂 3. 旋光性 一般多为左旋体有效。 第二节第二节 鉴别试验鉴别试验一、特征鉴别反应1、双缩脲反应、双缩脲反应 侧链具有氨基醇结构侧链具有氨基醇结构 水层 兰色醚层 紫红色乙醚紫堇色OH-CuSO4+盐酸麻黄碱盐酸伪麻黄碱2、Vital
3、i反应 托烷生物碱托烷生物碱 硫酸阿托品+发烟HNO3黄色醇制KOH深紫色氢溴酸山莨菪碱3、绿奎宁反应 硫酸奎宁、硫酸奎尼丁硫酸奎宁、硫酸奎尼丁紫堇色盐酸吗啡 + 甲醛硫酸4、Marquis反应 吗啡生物碱吗啡生物碱 棕绿色兰色紫色盐酸吗啡+钼硫酸5、Frohde反应 吗啡生物碱吗啡生物碱 6、 官能团反应 吲哚生物碱吲哚生物碱 1）利血平利血平 + 新制香草醛新制香草醛玫瑰红色玫瑰红色红色绿色二甲氨基苯甲醛对利血平冰醋酸冰醋酸、硫酸 2）7、紫脲酸胺反应 黄嘌啉类生物碱黄嘌啉类生物碱 KClO3+HCl紫色消失KOH氨气蒸干紫色+咖啡因茶碱8、还原反应 吗啡与磷酸可待因的区分反应吗啡与磷酸可
4、待因的区分反应 普鲁士兰Fe3+K2Fe(CN)6吗啡 + K3Fe(CN)6二、一般鉴别反应1、沉淀反应 H+生物碱 + 生物碱沉淀试剂常用的生物碱沉淀试剂为：常用的生物碱沉淀试剂为： （1） 重金属盐类，如重金属盐类，如K2HgI4、KBiI4、 I2KI、二氯化汞等；、二氯化汞等； （2）大分子酸类，如磷钼酸、硅钨酸等。）大分子酸类，如磷钼酸、硅钨酸等。2、熔点测定3、显色反应 常用的显色试剂：浓硫酸、浓硝酸、钼硫酸、钒硫酸、硒硫酸、甲醛硫酸等 原料药原料药1 原理 水溶液中滴定突跃不明显，在非水水溶液中滴定突跃不明显，在非水介质中，碱性增强，使滴定顺利进行介质中，碱性增强，使滴定顺利进
5、行 第三节第三节 含量测定含量测定一、非水溶液滴定法（非水碱量法）一、非水溶液滴定法（非水碱量法） (1) 溶剂溶剂-酸性溶剂：酸性溶剂：冰醋酸、冰醋酸、 冰醋酸冰醋酸+醋酐、醋酐醋酐、醋酐 有机碱及其盐类及有机酸碱金属盐类：有机碱及其盐类及有机酸碱金属盐类：8pKb10 冰醋酸作溶剂冰醋酸作溶剂10pKb12 冰醋酸冰醋酸+醋酐醋酐pKb12 醋酐醋酐(2) 滴定剂：高氯酸的冰醋酸溶液高氯酸的冰醋酸溶液 或高氯酸的二氧六环溶液或高氯酸的二氧六环溶液 (3) 指示终点的方法 电位法电位法：玻璃：玻璃甘汞电极系统甘汞电极系统 指示剂法指示剂法：结晶紫、喹哪啶红等：结晶紫、喹哪啶红等 取本品约取本
6、品约 0.15g，精密称定，加醋，精密称定，加醋酐酐冰醋酸（冰醋酸（5 1）的混合液）的混合液 25ml，微，微热使溶解，放冷，加结晶紫指示液热使溶解，放冷，加结晶紫指示液 1滴，滴，用高氯酸滴定液（用高氯酸滴定液（0.1mo1/L）滴定，至溶）滴定，至溶液显液显黄色黄色，并将滴定的结果用空白试验校，并将滴定的结果用空白试验校正。每正。每 1ml 高氯酸滴定液（高氯酸滴定液（0.1mol/L）相）相当于当于 19.42mg 的的C8H10N4O2。如：如： 咖啡因咖啡因 ChP(2000)二、提取中和法二、提取中和法生物碱盐类可溶解于水，不溶于有机溶剂游离生物碱不溶于水，易溶于有机溶剂依据性质
7、中和法测定有机层（B）水层有机溶剂OH-sol过滤sol(BH+)稀酸或H2O游离生物碱或生物碱盐类1. 碱化（氨水）2. 有机溶剂提取3. 中和法测定 （1）直接滴定法直接滴定法-用于碱性较强的用于碱性较强的生物碱生物碱 终点酸滴定液滴定）（中性乙醇）残渣（，蒸干）有机层（BsolBB（2）剩余滴定法剩余滴定法 用于碱性较弱的生物碱用于碱性较弱的生物碱 终点碱滴定液滴定）（定量过量的酸标准溶液）残渣（，蒸干）有机层（HBHsolBB（3）酸滴定液返提后剩余滴定法酸滴定液返提后剩余滴定法 用于对热不稳定的生物碱用于对热不稳定的生物碱 终点碱滴定液滴定水层）水层（有机层（弃去）定量过量的酸滴定液
8、）有机层（HBHB有机层（B）水层有机溶剂OH-sol过滤sol(BH+)稀酸或H2O游离生物碱或生物碱盐类BmmmmBmB1221 )(）量（容器，干燥至恒重，称）残渣（）中器（置已知重量且恒重的容有机溶剂提取液三、提取重量法三、提取重量法在适当的pH介质中 有机相(BH+ In-)水相(BH+ In-)+HIn H+ In-+B H+ BH+四、酸性染料萃取比色法四、酸性染料萃取比色法 制剂1. 水相中水相中与酸性染料溴甲酚绿、溴麝香草酚与酸性染料溴甲酚绿、溴麝香草酚 蓝蓝（BTB）等）等反应反应 水相的最适水相的最适pH值值：如果水相：如果水相pH值过小，酸性染值过小，酸性染料几乎仍以分
9、子状态存在；如果水相料几乎仍以分子状态存在；如果水相pH值过大，值过大，则生物碱几乎全部以游离碱的形式存在。则生物碱几乎全部以游离碱的形式存在。 离子对离子对BH+In-被有机溶剂提取，使有机被有机溶剂提取，使有机相呈色。剩余的酸性染料留于水相相呈色。剩余的酸性染料留于水相2. 有机溶剂提取（有机溶剂提取（CHCl3、CH2Cl2 ）3. 比色法测定比色法测定（1）定量分离出有机提取液，脱水后，测）定量分离出有机提取液，脱水后，测定定A，求出有机碱含量，求出有机碱含量 （2）定量分离出有机提取液，脱水后，）定量分离出有机提取液，脱水后，碱化，则水相呈色，测定水相中碱化，则水相呈色，测定水相中I
10、n-的吸收的吸收度，间接求出有机碱的含量度，间接求出有机碱的含量 BH+In- + OH- B + H2O + In- （3）定量分离出有机提取液，脱水）定量分离出有机提取液，脱水后，酸化，则水相呈色，测定水相中后，酸化，则水相呈色，测定水相中HIn的吸收度，间接求出有机碱的含的吸收度，间接求出有机碱的含量量BH+In- + H+ BH+ HIn如：如： 硫酸阿托品注射液硫酸阿托品注射液 ChP（2000） 对照法比色测定对照法比色测定1 、高效液相色谱法、高效液相色谱法 反相反相 HPLC 分析生物碱类分析生物碱类 和有机含氮药物和有机含氮药物 五、色谱法五、色谱法图图1 反相反相HPLC法
11、测定胃肠宁颗粒剂盐酸小檗碱的色谱图法测定胃肠宁颗粒剂盐酸小檗碱的色谱图 见见:中药新药与临床药理中药新药与临床药理,2005,16(5):361363 不论是游离碱还是其盐类，均是不论是游离碱还是其盐类，均是以游离碱出峰以游离碱出峰衍生物生物碱游离生物碱生物碱盐衍生化碱化、有机溶剂提取2、气相色谱法、气相色谱法本章重点内容1 如何鉴别生物碱？2 生物碱类药物有哪些类别？3 如何定量测定生物碱含量？ 97：83咖啡因和茶碱的特征鉴别反应是A. 双缩脲反应B. Vitali反应C. Marquis反应D. 紫脲酸铵反应E. 绿奎宁反应 试题98：139盐酸吗啡中应检查的特殊杂质为A. 吗啡B. 阿
12、朴吗啡C. 罂粟碱D. 莨菪碱E. 其它生物碱 96：136用非水溶液滴定法测定盐酸吗啡含量时，应使用的试剂是A. 5醋酸汞冰醋酸液B. 盐酸C. 冰醋酸D. 二甲基甲酰胺E. 高氯酸 97：130非水溶液滴定法测定硫酸奎宁含量的反应条件为 A冰醋酸一醋酐为溶剂 B. 高氯酸滴定液（0.1mol/L）滴定 C1mol的高氯酸与mol的硫酸奎宁反应 D. 仅用电位法指示终点 E溴酚蓝为指示剂 99：78. 非水溶液滴定法测定硫酸奎宁原料的含量时，可以用高氯酸直接滴定冰醋酸介质中的供试品，1摩尔硫酸奎宁需要消耗高氯酸的摩尔数为 A. 1 B. 2 C. 3 D. 4 E. 5 99x：116120
13、滴定反应中 A. 被测物与HClO4的摩尔比为1 1 B. 被测物与HClO4的摩尔比为1 3 C. 两者均是 D. 两者均不是99x：116硫酸奎宁片经氯仿提取后用HClO4滴定（D）99x：117硫酸阿托品在冰醋酸中用HClO4滴定99x：118. 硫酸奎宁原料药用HClO4滴定99x：119. 磷酸可待因用HClO4滴定99x：120. 硝酸士的宁用HClO4滴定（A）（B）（A）(A)96：129. 生物碱类药物制剂的测定方法 A. 直接用有机溶剂提取后，用H2SO4标准液滴定 B. 碱化后用有机溶剂提取，再用NaOH水溶液滴定 C. 碱化后用有机溶剂提取，蒸去有机溶剂后用中性醇溶液，
14、再用H2SO4标准液滴定 D. 碱化后用有机溶剂提取，蒸去有机溶剂，再加入定量的H2SO4，再用NaOH标准液回滴 E. 酸化后，用有机溶剂提取，采用适宜方法滴定96：77. 酸件染料比色法中，水相的pH值过小，则A. 能形成离子对B. 有机溶剂提取能完全C. 酸性染料以阴离子状态存在D. 生物碱几乎全部以分子状态存在E. 酸性染料以分子状态存在 95：111115可选择的药物： A. 阿托品 B. 吗啡 C. 两者均可 D. 两者均不可 95：111. 具有酯结构 95：112. 为两性化合物 95：113. 显较强碱性 95：114. 用提取容量法测定 95：115. 用碱性染料比色法（A
15、）（B）（A）（C）（D）例15 A. 双缩脲反应 B. Marquis反应 C. 两者皆是 D. 两者皆不是 1. 盐酸麻黄碱 2. 某些生物碱类药物 3. 盐酸吗啡 4. 咖啡因 5. 硫酸奎尼丁（A）（C）（B）（D）（D）例6. 生物碱类药物的一般鉴别试验包括A. 熔点测定B. 显色反应C. 沉淀反应D. 光谱法（紫外、红外）E. 薄层色谱法 例7. 能够发生Vitali反应的药物是A. 盐酸吗啡B. 硫酸奎宁C. 磷酸可待因D. 盐酸麻黄碱E. 硫酸阿托品 例9. 检查硫酸阿托品中莨菪碱时，应采用A. 色谱法B. 红外分光法C. 旋光度法D. 显色法E. 直接检查法 例8. 用非水溶液滴定法测定二盐酸奎宁时，二盐酸奎宁和HClO4的摩尔比是A. 1 1B. 1 2C. 1 3D. 1 4E. 1 1.5 例10. 酸性染料比色法测定生物碱类药物，有机溶剂萃取测定的有色物是A. 离子对和指示剂的混合物B. 生物碱盐C. 指示剂D. 离子对E. 游离生物碱
