1、姚艳平姚艳平2002009 9年年9 9月月微生物基础知识培训微生物知识概述药品微生物污染的途径药品微生物污染的危害药品微生物污染的控制洁净室及其控制2009年的主要问题微生物的定义微生物是一切肉眼看不见或看不清微生物是一切肉眼看不见或看不清楚的微小生物的总称。包括细菌、楚的微小生物的总称。包括细菌、真菌、原生动物、病毒和一些藻类真菌、原生动物、病毒和一些藻类等。等。微生物的特征微生物的特征典型细菌形态微生物的特征微生物的特征大肠杆菌化脓性链球菌典型菌落特征微生物的特征微生物的特征金黄色葡萄球菌曲霉菌典型菌落特征体积小，面积大体积小，面积大吸收多，转化快吸收多，转化快生长旺，繁殖快生长旺，繁殖
2、快适应强，易变异适应强，易变异分布广，种类多分布广，种类多微生物的五大共性药品微生物污染的途径药品的生境特征适合微生物生长，因此药品易药品的生境特征适合微生物生长，因此药品易发生微生物污染。主要的污染途径如下：发生微生物污染。主要的污染途径如下： 原辅料原辅料 生产环境：空气生产环境：空气 水：药品配置、容器洗涤水：药品配置、容器洗涤 设备容器及包装材料设备容器及包装材料 操作人员：最大污染源操作人员：最大污染源药品微生物污染的途径人体身上的微生物人体外层皮肤每平方厘米可有人体外层皮肤每平方厘米可有1x101x106 6个微生物。个微生物。每毫升唾液中含有每毫升唾液中含有1x101x109 9
3、个微生物个微生物每毫升鼻涕中含有每毫升鼻涕中含有1x101x106 6个微生物个微生物打喷嚏产生的气溶胶中（无遮拦）含有一百万打喷嚏产生的气溶胶中（无遮拦）含有一百万个微生物。个微生物。人类分泌物中每克含有人类分泌物中每克含有1x101x101212个微生物。个微生物。药品微生物污染的途径=0.5um颗粒数（/p.min)一般工作服白色无菌工作服全包式洁净工作服静站339x103113x1035.6x103静坐302x103112x1037.45x103腕上下运动2980 x103300 x10318.7x103上身前屈2240 x103540 x10324.2x103腕自由运动2240 x1
4、03289x10320.5x103脱帽1310 x103/头上下左右631x103151x10311.2x103上身扭动850 x103267x10314.9x103屈身3120 x103605x10337.3x103踏步2300 x103860 x10344.8x103步行2920 x1031010 x10356x103人不同衣着、不同动作时的产尘药品微生物污染的途径人员人员表面表面空气空气产品产品药品微生物污染的危害药品污染的危害药品污染的危害微生物感染，造成败血病及内毒素中毒等，微生物感染，造成败血病及内毒素中毒等， 可能导致死亡。可能导致死亡。较大微粒污染可能直接造成血管堵塞，引起局较
5、大微粒污染可能直接造成血管堵塞，引起局部缺水而萎缩或水肿，或形成血栓，导致血管部缺水而萎缩或水肿，或形成血栓，导致血管闭塞和静脉炎等。闭塞和静脉炎等。药品微生物污染的控制药品微生物污染的控制微生物污染控制分为三个阶段：灭菌前生物负荷的控制灭菌过程控制：灭菌的有效性并防止二次污染灭菌后的污染控制灭菌前生物负荷的控制灭菌前生物负荷的控制从哪些方面控制灭菌前的生物负荷 生产环境生产环境 人员人员 原辅料原辅料 包装材料包装材料 混料到灭菌时限的控制混料到灭菌时限的控制问题：问题：1.为什么进行灭菌前生产工序的时限控制？控制微生物及细菌内毒素。2.PD产品和IV产品灭菌前的时限要求是多少？PD 27h
6、oursIV 24hours灭菌工艺验证灭菌工艺验证热分布试验热穿透试验生物指示剂挑战性试验灭菌工艺控制灭菌工艺控制日常的灭菌工艺必须严格按照灭菌验证确定的方式进行，对任何的偏差需记录并评估，出现关键偏差时产品须废弃。已灭菌产品和未灭菌产品的隔离已灭菌产品和未灭菌产品的隔离保证已灭菌与非灭菌产品不会混淆的方法 双门式灭菌器(非灭菌进，已灭菌出) 物理隔离 已灭菌产品和未灭菌产品的隔离已灭菌产品和未灭菌产品的隔离 每台灭菌车必须带有可变色的指示剂 核对装载数量，确认进出灭菌锅的数量相等。包装容器密封完整性验证，防止灭菌中及灭菌后产品在有效期内的污染。方法：对灌有培养基的模拟产品进行微生物侵入实验
7、容器密封完整性容器密封完整性广州百特产品过程管理与控制流程图广州百特产品过程管理与控制流程图非注射用水注射用水原材料称量混料灌装外袋包装灭菌装箱产品/系统放行调节软袋印刷对洁净区（100级、10000级、100000级和300000级）每月进行动态监控和每季度进行静态的环境监控，监控内容包括浮游菌、微粒和表面微生物。 灭菌设备验证、校正、维护和检查、灭菌程序验证、放置化学指示剂、冷却介质监控、连续灭菌过程监控、灭菌参数双重复核系统，关键参数控制、已灭菌产品和未灭菌产品隔离灭菌前生产工序的时限控制污染菌总数、耐热菌检查包装密封完整性验证及检查每日微生物限度及热原检查每周微生物限度检查供应商控制失
8、败化学初始检查通过污染菌检查超限度调查，超标微生物鉴定过滤器完整性检查监控数据定期进行趋势分析，环境微生物分类，控制其耐热性不超过生物指示剂的耐热性药品微生物污染的控制污染控制的手段污染控制的手段消毒和灭菌消毒和灭菌 洁净是指清除所有较大的、看得见的杂质。洁净是指清除所有较大的、看得见的杂质。 消毒系指用物理或化学方法杀灭或除去病原微生消毒系指用物理或化学方法杀灭或除去病原微生物的繁殖体的手段。消毒不能杀死芽孢等全部微物的繁殖体的手段。消毒不能杀死芽孢等全部微生物。生物。 灭菌系指用物理或化学等方法杀灭或除去灭菌系指用物理或化学等方法杀灭或除去所有所有致致病和非致病微生物繁殖体和芽胞的手段。病
9、和非致病微生物繁殖体和芽胞的手段。问题：灭菌和消毒的区别？问题：灭菌和消毒的区别？1.杀灭微生物完全性的差异。杀灭微生物完全性的差异。2. 2. 方法上的差异。灭菌的方法有多样性，而消方法上的差异。灭菌的方法有多样性，而消毒则常常是借助化学物质。毒则常常是借助化学物质。药品微生物污染的控制各类代表性的液体消毒剂分类主要品种杀菌效果分级含氯消毒剂过氧化物类醛类次氯酸钠、次氯酸钙、漂白粉过氧乙酸、过氧化氢、臭氧、二氧化氯、过氧戊二醛甲醛、多聚甲醛、戊二醛高效（或中效)高效高效含碘类醇类酚类碘酊、碘伏乙醇、异丙醇煤酚皂溶液、氯代二甲苯酚中效中效中效季铵盐类其他苯扎溴铵、苯扎氯铵氯已定、高锰酸钾低效低
10、效药品微生物污染的控制影响消毒剂活性的因素温度、浓度、酸碱度、微生物的种类和数量、有机物质、其他物理化学因素。消毒液的使用原则对消毒液的使用应有标准操作规程和定期监控，消毒液要定期更换，容器也应彻底清洁处理。药品微生物污染的控制问题：1.70%酒精和90%酒精哪一个消毒效果好？ 70%酒精2.为什么70%的酒精使用前过滤？ 除去酒精中含有的微生物药品微生物污染的控制3 3.我们为什么要降低次氯酸钠溶液的浓度？ 人员安全、防止耐药性和保证消毒效果4 4.我们更换使用的三种消毒液是什么？ 酒精和次氯酸钠，施特白药品微生物污染控制常用的灭菌方法常用的灭菌方法物理方法物理方法化学方法化学方法热湿热或干
11、热湿热或干热气体灭菌：气体灭菌：甲醛甲醛、戊二酸醛、戊二酸醛环氧乙烷环氧乙烷辐射电离辐射电离辐射非电离辐射非电离辐射过滤常将空气或液体中的微生物常将空气或液体中的微生物及杂质用不同材料制成的薄及杂质用不同材料制成的薄膜滤器过滤得到无菌、无杂膜滤器过滤得到无菌、无杂质的空气和液体。质的空气和液体。洁净室及其控制洁净室及其控制洁净室洁净室对粒子污染加以控制对粒子污染加以控制、其其建造建造和和使用的方式使用的方式使得使得进入进入、产生和滞留于室内的粒子达到最少，且温产生和滞留于室内的粒子达到最少，且温度度、湿度和压力及其他相关参数按需要受控的房、湿度和压力及其他相关参数按需要受控的房间。间。洁净度：
12、洁净度：洁净环境内单位体积空气中含大于或等于某一粒洁净环境内单位体积空气中含大于或等于某一粒径的悬浮粒子（包括活性和非活性）的允许统计径的悬浮粒子（包括活性和非活性）的允许统计数。数。中国中国GMP(2000GMP(2000年版）医药工业洁净环境控制标准年版）医药工业洁净环境控制标准洁净室及其控制洁净级别尘粒最大允许数/m3微生物最大允许数=0.5um=5um浮游菌(CFU/m3)沉降菌(CFU/皿）(90mmx0.5h)100级10，000级100，000级30，000级=3,500=350,000=3,500,000=10,500,0000=2,000=20,000=60,000=5=10
13、0=500=10,000=1=3=10=15洁净室及其控制洁净室及其控制我国洁净室/区的验收和检测的参考标准 级别项目100级10000级100，000级300，000级温度相对湿度（）噪声（分贝）照度(勒克司）18-2445%-65%=300风速（每秒米）垂直单向流=0.3水平单向流=0.4=0.35=0.25=0.2换气次数（次h)_=20=15=12压差(帕斯卡）在10000级内=10=5=5悬浮粒子同上表浮游菌沉降菌影响洁净室洁净度的主要因素影响洁净室洁净度的主要因素 空调送风质量送风量洁净室内温湿度洁净室内的活动（人员活动、机器运转等）洁净室气流形式洁净室及其控制洁净室及其控制洁净室
14、及其控制洁净室内人员控制要求洁净室内人员控制要求 遵守相关的进入和更衣规程遵守相关的进入和更衣规程( (SOP-GE-002)SOP-GE-002) 保持个人卫生保持个人卫生 对进入的外来人员进行培训对进入的外来人员进行培训20092009年主要存在的问题年主要存在的问题洁净区内不符合规范的操作 手指表面微生物超标 高效过滤器损坏导致环境超标 HD混料间霉菌超标不按规定进行清洁消毒导致微生物超标存在的问题存在的问题OOLs Summary in Micro-lab(2009.1-2009.9)微生物室微生物室OOL情况总结情况总结(2009.1-2009.9)From Jan to Sep 2
15、009, the total OOLs count in Micro-lab is 12 and the details is as the table-1. 从从2009年年1月至月至2009年年9月，月，微生物室负责的所有测试项目共发生超限度微生物室负责的所有测试项目共发生超限度12次次, 具体的超标情况如表具体的超标情况如表1。表表1-2009年年1月至月至2009年年9月微生物测试超标情况总结月微生物测试超标情况总结超标号码超标号码描述描述根本原因根本原因纠正纠正/预防措施预防措施状态状态OOLM09001无菌室更衣无菌室更衣间环境超限度。间环境超限度。清洁过程不符合清洁程序，清洁过程
16、不符合清洁程序，使清洁不彻底使清洁不彻底重新培训员工重新培训员工 完成完成OOLM09002Minicap洁用水、附件清洁用水洁用水、附件清洁用水超限度。超限度。1、春节期间长时间停产，、春节期间长时间停产，管路滞留水时间太长，生管路滞留水时间太长，生产前放水不彻底。产前放水不彻底。2、春、春节期间多介质管路进行了节期间多介质管路进行了改造。改造。全厂停产超过全厂停产超过48小时以上，生产前车小时以上，生产前车间内所有多介质使用点按间内所有多介质使用点按SOP-MA-001进行放水。进行放水。 完成完成OOLM09003HD下混料间箱子、称量房门表下混料间箱子、称量房门表面微生物超限度。面微生
17、物超限度。清洁不彻底清洁不彻底重新划分清洁区域，有专人负责各自重新划分清洁区域，有专人负责各自区域的清洁。区域的清洁。完成完成OOLM09004无菌室缓冲间空气微生物超标。无菌室缓冲间空气微生物超标。高效过滤器边框泄漏高效过滤器边框泄漏重新将高效过滤器边框密封重新将高效过滤器边框密封完成完成OOLM09005Minicap生产线清洁用水超标。生产线清洁用水超标。HD线停产线停产3天以上，天以上，HD洗手水管道内滞留水时间洗手水管道内滞留水时间太长，交叉污染。太长，交叉污染。在在HD洗手水管路与通往车间多介质洗手水管路与通往车间多介质水管路连接处安装止回阀。水管路连接处安装止回阀。 完成完成OO
18、LM09006CanceledNANANA表表1-2009年年1月至月至2009年年9月微生物测试超标情况总结（续）月微生物测试超标情况总结（续）超标号码超标号码描述描述根本原因根本原因纠正纠正/预防措施预防措施状态状态OOLM09007G0906004和和G0906039批无菌批无菌度测试有霉菌生长。度测试有霉菌生长。滤杯污染。滤杯污染。停用泰林滤杯，更换为停用泰林滤杯，更换为Millpore滤杯滤杯完成完成OOLM09008压缩空气压缩空气1#2#3#主气源露点超标。主气源露点超标。2空压机高压转子磨损，空压机高压转子磨损，同时后端冷却效果差。同时后端冷却效果差。维修维修2空压机。空压机。
19、完成完成OOLM090091#灭菌柜循环水超措施限度灭菌柜循环水超措施限度取样阀表面和内部生锈取样阀表面和内部生锈更换取样阀更换取样阀完成完成OOLM090101EDI出口、洗衣房纯化水超出口、洗衣房纯化水超措施限度措施限度没按正常程序取样、洗衣没按正常程序取样、洗衣房纯化水管路消毒不彻底。房纯化水管路消毒不彻底。重新培训所有取样人员。培训消毒人员，重新培训所有取样人员。培训消毒人员，在洗衣房安装排水管。在洗衣房安装排水管。完成完成OOLM09011GS0908004批无菌度测试有霉批无菌度测试有霉菌生长。菌生长。滤杯污染。滤杯污染。停用泰林滤杯，更换为停用泰林滤杯，更换为Millpore滤杯
20、滤杯完成完成OOLM09012多介质水微生物超措施限度多介质水微生物超措施限度自由氯控制滞后，非受控自由氯控制滞后，非受控的多介质水管路回流污染的多介质水管路回流污染1.更改自动加氯装置探头位置更改自动加氯装置探头位置2.洁净间铺设一条独立的管路。洁净间铺设一条独立的管路。未完成未完成表表1-2009年年1月至月至2009年年9月微生物测试超标情况总结（续）月微生物测试超标情况总结（续）超标号码超标号码描述描述根本原因根本原因纠正纠正/预防措施预防措施状态状态OOLM09013G0909091、G0909092无无菌度测试失败菌度测试失败人员操作污染人员操作污染取样箱每次使用前用次氯取样箱每次使用前用次氯消毒，样品放入传递窗前消毒，样品放入传递窗前用次氯消毒，无菌室区域用次氯消毒，无菌室区域每班用次氯消毒每班用次氯消毒未完成未完成谢谢！
