1、1仿制药有关物质研究仿制药有关物质研究的常见问题分析的常见问题分析罗金文罗金文 浙江省食品药品检验所浙江省食品药品检验所 2主要内容主要内容 一、前言一、前言 二、有关物质检查研究的基本要求二、有关物质检查研究的基本要求 三、审评中发现的主要问题三、审评中发现的主要问题 四、小结四、小结3一、前一、前 言言仿制药（仿制药（generic medicinesgeneric medicines）应与原研产品）应与原研产品（innovative medicinesinnovative medicines）质量一致、临床可）质量一致、临床可替代。替代。仿制药是仿仿制药是仿“产品产品”而不是仿而不是仿“
2、标准标准”。仿制药质量研究的要点：仿制药质量研究的要点：研究项目的全面性研究项目的全面性检测方法的科学性、可行性检测方法的科学性、可行性限度的合理性限度的合理性4质量研究主要问题分布质量研究主要问题分布（对（对20002000个品种的统计）个品种的统计）5二、有关物质检查研究的二、有关物质检查研究的基本要求基本要求6相关技术指导原则相关技术指导原则化学药物杂质研究的技术指导原则化学药物杂质研究的技术指导原则化学药物质量控制分析方法验证技术指导原则化学药物质量控制分析方法验证技术指导原则已有国家标准化学药品研究技术指导原则（修订中）已有国家标准化学药品研究技术指导原则（修订中）ANDAsANDA
3、s：Impurities in Drug SubstancesImpurities in Drug Substances，FDAFDAANDAsANDAs：Impurities in Drug ProductsImpurities in Drug Products，FDAFDAQ2A Text on Validation of Analytical ProceduresQ2A Text on Validation of Analytical ProceduresQ2B Validation of Analytical ProceduresQ2B Validation of Analytical
4、 Procedures：MethodologyMethodologyQ3A Q3A （R R）Impurities in New Drug SubstancesImpurities in New Drug SubstancesQ3B Q3B （R R）Impurities in New Drug ProductsImpurities in New Drug Products7有关物质检查研究的原则性要求有关物质检查研究的原则性要求建立合适的分析方法建立合适的分析方法进行充分的方法验证进行充分的方法验证确定合理的限度要求确定合理的限度要求 化学药物杂质研究的技术指导原则化学药物杂质研究的技术指导
5、原则等等8毒理研究毒理研究 杂质杂质控制控制限度确定限度确定 数据积累数据积累和分析和分析 临床试验临床试验 分析方法的建立与验证分析方法的建立与验证9有关物质检查研究的基本思路有关物质检查研究的基本思路分析杂质谱：可能的杂质分析杂质谱：可能的杂质原料药生产过程中可能引入的工艺杂质原料药生产过程中可能引入的工艺杂质原料药贮存过程中可能产生的降解产物原料药贮存过程中可能产生的降解产物制剂生产、贮存过程中可能产生的降解产物制剂生产、贮存过程中可能产生的降解产物建立检查方法：基础和经验建立检查方法：基础和经验明确杂质检查的目标（基于杂质谱分析）明确杂质检查的目标（基于杂质谱分析）了解常用方法（例如了
6、解常用方法（例如HPLCHPLC、TLCTLC、GCGC、CECE等）的特点等）的特点了解杂质和药物的特性了解杂质和药物的特性10进行充分的方法验证：定量试验和限度试验进行充分的方法验证：定量试验和限度试验定量试验关注准确度、精密度、专属性、定量限、定量试验关注准确度、精密度、专属性、定量限、线性、范围、耐用性线性、范围、耐用性限度试验关注专属性、检测限、耐用性限度试验关注专属性、检测限、耐用性确定杂质限度：核心是杂质的安全性确定杂质限度：核心是杂质的安全性相关技术指导原则的要求（决策树）相关技术指导原则的要求（决策树）被仿制药的质量标准、杂质种类和水平被仿制药的质量标准、杂质种类和水平论证杂
7、质安全性的相关文献资料论证杂质安全性的相关文献资料11http:/www.fda.gov/cder/guidance/index.htm12ANDAs：Impuritiesin Drug SubstancesANDAs：Impurities in Drug Products13 三、审评中发现的主要问题三、审评中发现的主要问题（案例分析）（案例分析）14有关物质检查研究中存在的主要问题有关物质检查研究中存在的主要问题未进行有关物质（包括异构体检查、未进行有关物质（包括异构体检查、内酰胺抗生素内酰胺抗生素聚合物）检查研聚合物）检查研究究所用方法不可行，不能有效检出药品中存在的杂质；或未进行充分的
8、所用方法不可行，不能有效检出药品中存在的杂质；或未进行充分的检查方法比较、优选和验证研究，提供的研究资料不能证明方法的可检查方法比较、优选和验证研究，提供的研究资料不能证明方法的可行性行性忽视方法的系统适用性试验，检测时色谱条件控制等存在问题，导致忽视方法的系统适用性试验，检测时色谱条件控制等存在问题，导致试验数据不可靠试验数据不可靠研究结果显示杂质水平高于已上市产品，药品质量不符合已上市同品研究结果显示杂质水平高于已上市产品，药品质量不符合已上市同品种质量标准的规定种质量标准的规定杂质限度的确定缺乏充分依据，忽视杂质的归属和安全性论证杂质限度的确定缺乏充分依据，忽视杂质的归属和安全性论证其他
9、问题，例如未提供有关物质检查方法学研究图谱等其他问题，例如未提供有关物质检查方法学研究图谱等15问题一：未根据药品特点开展问题一：未根据药品特点开展有关物质检查研究有关物质检查研究16 化学药物杂质研究的技术指导原则化学药物杂质研究的技术指导原则杂质研究是药品研发的一项重要内容。杂质研究是药品研发的一项重要内容。由于药品在临床使用中产生的不良反应除了与药品由于药品在临床使用中产生的不良反应除了与药品本身的药理活性有关外，有时与药品中存在的杂质本身的药理活性有关外，有时与药品中存在的杂质也有很大关系。规范地进行杂质的研究，并将其控也有很大关系。规范地进行杂质的研究，并将其控制在一个安全、合理的限
10、度范围之内，将直接关系制在一个安全、合理的限度范围之内，将直接关系到上市药品的质量及安全性到上市药品的质量及安全性。17有关物质：即有机杂质，包括工艺中引入的有关物质：即有机杂质，包括工艺中引入的杂质和降解产物，化学结构一般与活性成份杂质和降解产物，化学结构一般与活性成份类似或具渊源关系。类似或具渊源关系。 手性化合物在生产或贮存过程中可能产手性化合物在生产或贮存过程中可能产生的异构体，头孢类抗生素在生产或贮存过生的异构体，头孢类抗生素在生产或贮存过程可能发生聚合而产生的多聚物等也应参照程可能发生聚合而产生的多聚物等也应参照杂质研究技术指导原则的要求进行相应研究。杂质研究技术指导原则的要求进行
11、相应研究。18原料药为有机化合物时，应考虑对原料药和制剂开原料药为有机化合物时，应考虑对原料药和制剂开展有关物质检查研究，并视质量考察和稳定性研究展有关物质检查研究，并视质量考察和稳定性研究结果决定是否订入质量标准结果决定是否订入质量标准提出豁免有关物质检查研究应有充分理由提出豁免有关物质检查研究应有充分理由L上市产品质量标准中未收载有关物质检查上市产品质量标准中未收载有关物质检查K没有合适方法用于有关物质检查（？）没有合适方法用于有关物质检查（？）J充分的文献充分的文献/ /试验数据支持，结合科学推论试验数据支持，结合科学推论19案例分析案例分析1 1：布洛芬缓释胶囊：布洛芬缓释胶囊CPCP
12、：原料药采用：原料药采用TLCTLC法，制剂均未规定有关物法，制剂均未规定有关物质检查质检查USPUSP、BPBP：原料药、片剂、口服混悬液均采用：原料药、片剂、口服混悬液均采用HPLCHPLC法检查有关物质（法检查有关物质（USPUSP制剂、制剂、BPBP口服混悬口服混悬液主要针对液主要针对4-isobutylacetophenone4-isobutylacetophenone）未进行有关未进行有关物质研究？物质研究？LL20案例分析案例分析2 2：复方硫酸新霉素滴眼液：复方硫酸新霉素滴眼液采用自建采用自建TLCTLC法对硫酸新霉素有关物质检查进法对硫酸新霉素有关物质检查进行了简单研究，即判
13、定无合适方法用于本品有行了简单研究，即判定无合适方法用于本品有关物质检查关物质检查检索检索CPCP、BPBP、USPUSP等收载的硫酸新霉素、地塞等收载的硫酸新霉素、地塞米松磷酸钠原料药、相关制剂发现，有成熟方米松磷酸钠原料药、相关制剂发现，有成熟方法可对硫酸新霉素已知杂质新霉胺、新霉素法可对硫酸新霉素已知杂质新霉胺、新霉素C C以及地塞米松磷酸钠有关物质进行检查以及地塞米松磷酸钠有关物质进行检查 主要成份：硫酸新霉素与地塞米松磷酸钠主要成份：硫酸新霉素与地塞米松磷酸钠 KKLL21案例分析案例分析3 3：甘油磷酸钠注射液：甘油磷酸钠注射液主要问题：未对有关物质进行研究主要问题：未对有关物质进
14、行研究结构分析：主要降解产物是甘油和游离磷酸盐结构分析：主要降解产物是甘油和游离磷酸盐质量控制：原料药控制了甘油和游离磷酸盐；质量控制：原料药控制了甘油和游离磷酸盐；制剂控制了游离磷酸盐制剂控制了游离磷酸盐安全性：甘油可作为注射用溶剂，安全性较好安全性：甘油可作为注射用溶剂，安全性较好J22问题二：分析方法选择不当，问题二：分析方法选择不当，未进行方法的比较、优选研究，未进行方法的比较、优选研究，所用方法不能有效检出药品中的杂质所用方法不能有效检出药品中的杂质 23 化学药物杂质研究的技术指导原则化学药物杂质研究的技术指导原则分析方法的选择直接关系到杂质测定结果的专属性分析方法的选择直接关系到
15、杂质测定结果的专属性与准确性，因此，在进行杂质研究时首要问题是选与准确性，因此，在进行杂质研究时首要问题是选择合适的杂质分析方法。择合适的杂质分析方法。应根据药物及杂质的理化性质、化学结构、杂质的应根据药物及杂质的理化性质、化学结构、杂质的控制要求等确定适宜的检测方法。由于各种分析方控制要求等确定适宜的检测方法。由于各种分析方法均具有一定的局限性，因此在进行杂质分析时，法均具有一定的局限性，因此在进行杂质分析时，应注意不同原理的分析方法间的相互补充与验证。应注意不同原理的分析方法间的相互补充与验证。24应优先选择专属性、灵敏度更好的方法应优先选择专属性、灵敏度更好的方法新的分析技术在不断出现，
16、现有技术在不断改进，当认为这些新新的分析技术在不断出现，现有技术在不断改进，当认为这些新技术能提供更进一步的质量保证或经过证明其合理性，就应予以技术能提供更进一步的质量保证或经过证明其合理性，就应予以采用。采用。 ICH Q6AICH Q6A有多种方法可供选择时，应注意比较各种方法的优缺点，通过对有多种方法可供选择时，应注意比较各种方法的优缺点，通过对比各种方法对样品（以及影响因素比各种方法对样品（以及影响因素/ /破坏试验样品、原料药粗品破坏试验样品、原料药粗品等）的检查结果，优选专属性、灵敏度更好的方法。等）的检查结果，优选专属性、灵敏度更好的方法。充分考虑各种分离、检测技术的工作原理和局
17、限性充分考虑各种分离、检测技术的工作原理和局限性充分考虑检测目标的理化性质、化学结构，例如，充分考虑检测目标的理化性质、化学结构，例如，杂质的极性、紫外吸收等杂质的极性、紫外吸收等25案例分析案例分析4：氟哌利多注射液：氟哌利多注射液BP 2007：HPLC（0.25 for single，0.5 for total）USP 28：HPLC（2.0 for total）申报品种：参照原料药采用申报品种：参照原料药采用TLCTLC（除主斑点（除主斑点外不得有其他杂质斑点）外不得有其他杂质斑点）26提供的试验数据显示：提供的试验数据显示：光照光照1010天含量（天含量（UVUV法）下降法）下降10
18、10，未检出杂质斑点，未检出杂质斑点影响因素试验、加速试验和长期留样试验样品均未影响因素试验、加速试验和长期留样试验样品均未检出杂质斑点检出杂质斑点 未考察未考察TLCTLC法的检测灵敏度法的检测灵敏度参照参照USPUSP标准将有关物质检查方法修订为标准将有关物质检查方法修订为HPLCHPLC法，法，研究结果显示所用原料药杂质含量高达研究结果显示所用原料药杂质含量高达7.67.6（采（采用用TLCTLC法未检出杂质斑点）法未检出杂质斑点）结论：结论：TLC法不可行，应采用法不可行，应采用HPLC法法 LL27案例分析案例分析5：阿奇霉素：阿奇霉素28背景情况背景情况近年，近年，USP、EP/B
19、P不断更新阿奇霉素原料药有关物质检测不断更新阿奇霉素原料药有关物质检测方法和要求，控制越来越严格，阿奇霉素已成为目前杂质控方法和要求，控制越来越严格，阿奇霉素已成为目前杂质控制最为严格的化学药品之一制最为严格的化学药品之一 ；中国药典阿奇霉素标准仍采用中国药典阿奇霉素标准仍采用TLC法控制有关物质；法控制有关物质；大多数申报品种采用大多数申报品种采用TLC法，破坏试验中仅检出两个杂质斑法，破坏试验中仅检出两个杂质斑点、稳定性考察中基本未检出杂质斑点；点、稳定性考察中基本未检出杂质斑点；有数据显示，有数据显示，HPLC法考察法考察14家国产阿奇霉素原料药，其中家国产阿奇霉素原料药，其中86的杂质
20、总量已超过的杂质总量已超过2.0%，最高可达，最高可达6.8，即使总杂质，即使总杂质不超过不超过2.0%，有些特定杂质也不符合，有些特定杂质也不符合USP31及及BP2008的规的规定；定；36个厂家个厂家79批次注射用阿奇霉素杂质总量批次注射用阿奇霉素杂质总量2.0%的仅占的仅占32%，个别品种杂质总量高达，个别品种杂质总量高达20%。 29认识和行动认识和行动国家局国家局20072007年以国食药监办年以国食药监办20073342007334号文颁布了阿奇号文颁布了阿奇霉素大容量注射液的修订标准（批件号：霉素大容量注射液的修订标准（批件号：XGB2007-008XGB2007-008、XG
21、B2007-009XGB2007-009），采用），采用HPLCHPLCUVUV法检测，控制最大杂质法检测，控制最大杂质3.03.0，其他任一杂质，其他任一杂质1.01.0，总杂质，总杂质5.05.0；考虑到考虑到TLCTLC法的灵敏度和专属性较差，建议采用法的灵敏度和专属性较差，建议采用HPLCHPLC法法进行阿奇霉素及其制剂的有关物质检查；同时，阿奇进行阿奇霉素及其制剂的有关物质检查；同时，阿奇霉素中可能存在的杂质较多，杂质控制难度大，在对霉素中可能存在的杂质较多，杂质控制难度大，在对原料药中的工艺杂质和降解产物严格控制的前提下，原料药中的工艺杂质和降解产物严格控制的前提下，制剂可采用经验
22、证的方法重点控制制剂生产和贮存过制剂可采用经验证的方法重点控制制剂生产和贮存过程中可能产生的降解杂质例如程中可能产生的降解杂质例如N-N-去甲基阿奇霉素、去甲基阿奇霉素、N-N-氧化物阿奇霉素等。氧化物阿奇霉素等。30案例分析案例分析6：复方托吡卡胺滴眼液：复方托吡卡胺滴眼液 主要问题：主要问题：托吡卡胺、盐酸肾上腺素有关物托吡卡胺、盐酸肾上腺素有关物质检查均采用质检查均采用TLC法，破坏试验未见杂质斑法，破坏试验未见杂质斑点，方法是否可行？点，方法是否可行？ 主要成份：托吡卡胺与盐酸去氧肾上腺素主要成份：托吡卡胺与盐酸去氧肾上腺素 31文献查证文献查证两主药有关物质检查方法均与中国药典收载的
23、相应两主药有关物质检查方法均与中国药典收载的相应原料药检查方法相同；原料药检查方法相同；托吡卡胺有关物质检查的托吡卡胺有关物质检查的TLCTLC条件与英国药典收载条件与英国药典收载的托吡卡胺滴眼液有关物质检查相同；的托吡卡胺滴眼液有关物质检查相同；盐酸去氧肾上腺素有关物质检查的盐酸去氧肾上腺素有关物质检查的TLCTLC条件也与英条件也与英国药典收载的盐酸去氧肾上腺素滴眼液有关物质检国药典收载的盐酸去氧肾上腺素滴眼液有关物质检查一致；查一致；中国药典收载的托吡卡胺滴眼液、美国药典收载的中国药典收载的托吡卡胺滴眼液、美国药典收载的托吡卡胺眼用溶液以及盐酸去氧肾上腺素眼用溶液托吡卡胺眼用溶液以及盐酸
24、去氧肾上腺素眼用溶液均未规定有关物质检查；同品种注册标准中也未规均未规定有关物质检查；同品种注册标准中也未规定有关物质检查。定有关物质检查。 32 研究情况：研究情况：制剂在酸、碱、氧化等条件下加热回流制剂在酸、碱、氧化等条件下加热回流20至至40分钟，未见降解产物斑点；原料药在酸、碱、分钟，未见降解产物斑点；原料药在酸、碱、氧化等条件下灼烧氧化等条件下灼烧20至至30分钟，出现明显杂质斑点，分钟，出现明显杂质斑点，能够和主斑点较好分离。能够和主斑点较好分离。 结论：结论：有关物质检查方法为国内外普遍采用的公认方有关物质检查方法为国内外普遍采用的公认方法，有较充分依据；验证工作较规范，受破坏条
25、件限法，有较充分依据；验证工作较规范，受破坏条件限制，制剂破坏试验未出现杂质斑点，但原料药破坏试制，制剂破坏试验未出现杂质斑点，但原料药破坏试验、制剂光照影响因素试验等可以说明所用方法的专验、制剂光照影响因素试验等可以说明所用方法的专属性，灵敏度亦能满足检测要求。属性，灵敏度亦能满足检测要求。 42J33问题三：未进行充分的验证研究，问题三：未进行充分的验证研究，提供的研究资料不能证明方法的可行性提供的研究资料不能证明方法的可行性34 化学药物杂质研究的技术指导原则化学药物杂质研究的技术指导原则杂质检测方法的验证应参照相关的技术指导原则进杂质检测方法的验证应参照相关的技术指导原则进行，重点在于
26、专属性和灵敏度的验证。行，重点在于专属性和灵敏度的验证。专属性系指在其它成分可能共存的情况下，采用的专属性系指在其它成分可能共存的情况下，采用的方法能准确测定出被测杂质的特性。检测限是反映方法能准确测定出被测杂质的特性。检测限是反映分析方法灵敏度的一个重要指标，所用分析方法的分析方法灵敏度的一个重要指标，所用分析方法的检测限一定要符合质量标准中对杂质限度的要求，检测限一定要符合质量标准中对杂质限度的要求，最低检测限不得大于该杂质的报告限度。最低检测限不得大于该杂质的报告限度。35应进行全面、充分的方法学验证应进行全面、充分的方法学验证原料药专属性：中间体、粗品的分离度考察，破原料药专属性：中间
27、体、粗品的分离度考察，破坏试验等坏试验等制剂专属性：制剂的破坏试验，辅料干扰试验，制剂专属性：制剂的破坏试验，辅料干扰试验，原料药的破坏试验（必要时）等原料药的破坏试验（必要时）等如能获得杂质，采用杂质加入试验考察专属性；如能获得杂质，采用杂质加入试验考察专属性；不能获得杂质时，峰纯度检查是验证专属性的重不能获得杂质时，峰纯度检查是验证专属性的重要方法要方法辅料辅料/ /溶剂干扰：计算时如需扣除辅料溶剂干扰：计算时如需扣除辅料/ /溶剂峰，溶剂峰，应提供充分依据应提供充分依据36对公认方法（例如药典收载方法）进行修订时应有对公认方法（例如药典收载方法）进行修订时应有充分的修订依据，并进行修订前
28、后方法的比较验证充分的修订依据，并进行修订前后方法的比较验证有关物质检查检测波长的选择应充分考虑杂质的最有关物质检查检测波长的选择应充分考虑杂质的最大吸收波长，必要是应采用二极管阵列检测器等手大吸收波长，必要是应采用二极管阵列检测器等手段段在只有在只有1或或2条降低途径且仅产生几个稳定降解产物条降低途径且仅产生几个稳定降解产物时，要注意质量平衡（时，要注意质量平衡（mass balance）情况）情况应提供方法学验证、样品检测的相应色谱图应提供方法学验证、样品检测的相应色谱图37案例分析案例分析7：注射用盐酸左布比卡因：注射用盐酸左布比卡因2 2，6 6二甲基苯胺为（左）布比卡因的毒性降二甲基
29、苯胺为（左）布比卡因的毒性降解产物解产物BP2007BP2007（布比卡因注射液）：对照品比色法，（布比卡因注射液）：对照品比色法，400ppm400ppm上市同品种：上市同品种：HPLCHPLC杂质对照品法，杂质对照品法，0.010.01研制产品：有关物质检查研究中未针对该已知研制产品：有关物质检查研究中未针对该已知杂质进行验证杂质进行验证CH3CH3NNCH3OHCH3CH3NH2LL38国家药品标准：国家药品标准：HPLCHPLC自身对照法，自身对照法，C18C18柱，柱，甲醇水（甲醇水（1010：9090），），250nm250nm 欧洲药典：（欧洲药典：（1 1）杂质）杂质A A，2
30、05nm205nm；（；（2 2）杂质）杂质B B，215nm215nm；（；（3 3）杂质）杂质C C和其他杂质，和其他杂质，210nm210nm应注意分析两种方法的优缺点应注意分析两种方法的优缺点应注意验证所用方法是否可以有效检出已知杂应注意验证所用方法是否可以有效检出已知杂质质A A、B B、C C、E E以及其他可能存在的工艺杂质以及其他可能存在的工艺杂质案例分析案例分析8：奥沙利铂：奥沙利铂39案例分析案例分析9：注射用阿魏酸钠：注射用阿魏酸钠中国药典（原料药）：中国药典（原料药）：C18C18柱，水柱，水- -甲醇甲醇- -醋酸醋酸（6969：3030：1.51.5）为流动相，检测
31、波长）为流动相，检测波长322nm 322nm 研制产品（无辅料）：研制产品（无辅料）：C18C18柱，水柱，水- -甲醇甲醇- -醋酸醋酸（5959：4040：1.51.5）为流动相，检测波长）为流动相，检测波长322nm322nm未对两种色谱条件进行详细的对比研究未对两种色谱条件进行详细的对比研究40 同品种光照试验同品种光照试验研制产品光照试验研制产品光照试验5天天10天天41文献及研究信息：文献及研究信息：阿魏酸钠对光不稳定阿魏酸钠对光不稳定同品种研究资料显示，采用药典色谱条件在紧邻主峰后能同品种研究资料显示，采用药典色谱条件在紧邻主峰后能够检出明显的光降解产物峰够检出明显的光降解产物
32、峰本品有关物质检查的主峰出峰时间提前，可能导致光降解本品有关物质检查的主峰出峰时间提前，可能导致光降解产物峰与主峰不能有效分离产物峰与主峰不能有效分离未进行光破坏试验，光照影响因素试验显示未进行光破坏试验，光照影响因素试验显示1010天后，含量天后，含量下降下降3.8%3.8%，有关物质仅增加，有关物质仅增加0.5%0.5%评价意见：评价意见：光降解产物为本品的主要降解产物，现光降解产物为本品的主要降解产物，现有研究资料不能证明所用方法可以有效检出光降解有研究资料不能证明所用方法可以有效检出光降解产物产物LL42问题四：系统适用性不符合要求，问题四：系统适用性不符合要求，色谱系统、操作等存在问
33、题，色谱系统、操作等存在问题，导致试验数据不可靠导致试验数据不可靠43 化学药物质量控制分析方法验证技术指导化学药物质量控制分析方法验证技术指导原则原则、ICH Q2BICH Q2B等等系统适用性试验是许多分析方法的必要组成部分系统适用性试验是许多分析方法的必要组成部分System suitability testing is essential for System suitability testing is essential for the assurance of the quality performance of the assurance of the quality perf
34、ormance of the chromatographic systemthe chromatographic system色谱方法对仪器设备的依赖程度较高，因此所有色谱色谱方法对仪器设备的依赖程度较高，因此所有色谱方法均应对色谱系统进行必要的验证，并将系统适用方法均应对色谱系统进行必要的验证，并将系统适用性作为分析方法的组成部分性作为分析方法的组成部分44分析方法中应包括适当的系统适用性要求分析方法中应包括适当的系统适用性要求 HPLCHPLC色谱系统的适用性试验通常包括理色谱系统的适用性试验通常包括理论板数、分离度、重复性和拖尾因子等四个论板数、分离度、重复性和拖尾因子等四个指标。其中，
35、分离度和重复性是系统适用性指标。其中，分离度和重复性是系统适用性试验中更具实用意义的参数。试验中更具实用意义的参数。 中国药典中国药典20052005年版年版45检测样品前要对色谱系统进行适用性试验，检测样品前要对色谱系统进行适用性试验，并应符合要求并应符合要求 系统适用性不符合要求，则试验结果无效；如系统适用性不符合要求，则试验结果无效；如适用性达不到要求，可对色谱分离条件作适当的调适用性达不到要求，可对色谱分离条件作适当的调整。整。对于试验中色谱图、数据等出现的异常情况，应注对于试验中色谱图、数据等出现的异常情况，应注意分析原因并加以解决意分析原因并加以解决 例如例如“鬼峰鬼峰”、保留时间
36、漂移、分离度变差、保留时间漂移、分离度变差、色谱峰拖尾、色谱峰分叉等。色谱峰拖尾、色谱峰分叉等。46案例分析案例分析10：盐酸左氧氟沙星：盐酸左氧氟沙星 国家药品标准（注射液、氯化钠注射液等）有国家药品标准（注射液、氯化钠注射液等）有关物质检查系统适用性试验要求关物质检查系统适用性试验要求 取左氧氟沙星对照品的水溶液取左氧氟沙星对照品的水溶液(1-1000)10ml(1-1000)10ml置一试管中，用日光灯置一试管中，用日光灯(3500lx)(3500lx)照射照射3 3小时，取小时，取此液此液10ul10ul注入液相色谱仪，记录色谱图，相对注入液相色谱仪，记录色谱图，相对于主峰保留时间约为
37、于主峰保留时间约为1.21.2倍处应能检测到杂质峰倍处应能检测到杂质峰 47申报品种申报品种1 1：盐酸左氧氟沙星氯化钠注射液：盐酸左氧氟沙星氯化钠注射液主要问题：有关物质检查参照国家药品标准建立，主要问题：有关物质检查参照国家药品标准建立，但流动相比例有较大改变（由但流动相比例有较大改变（由3：1调整为调整为1：1）。未进行系统适用性试验，光照破坏试验）。未进行系统适用性试验，光照破坏试验（4500lx光照数天）未见明显杂质峰，同时工艺光照数天）未见明显杂质峰，同时工艺研究资料显示研究资料显示051013批样品在批样品在4500lx下放置下放置10天，有关物质亦未检出。天，有关物质亦未检出。
38、评价意见：上述研究资料提示有关物质检查方法评价意见：上述研究资料提示有关物质检查方法不可行，检查结果不可靠。不可行，检查结果不可靠。LL48申报品种申报品种2 2：盐酸左氧氟沙星注射液：盐酸左氧氟沙星注射液色谱条件：参照英国药典氧氟沙星原料药色谱条件：参照英国药典氧氟沙星原料药系统适用性试验：理论板数系统适用性试验：理论板数主要问题：包括光照（阳光下照射主要问题：包括光照（阳光下照射1 1天）在内的各天）在内的各种破坏条件下，原料药、制剂均未见明显降解；光种破坏条件下，原料药、制剂均未见明显降解；光照照1010天含量约下降天含量约下降3 3，但有关物质仅增加，但有关物质仅增加0.10.1；未按
39、英国药典要求进行相应的系统适应性试验，也未按英国药典要求进行相应的系统适应性试验，也未对所用方法和国家药品标准中收载方法进行比较未对所用方法和国家药品标准中收载方法进行比较研究。研究。评价意见：试验结果提示所用方法可能难以有效检评价意见：试验结果提示所用方法可能难以有效检出光降解产物；根据现有资料，无法判断检查方法出光降解产物；根据现有资料，无法判断检查方法的可行性、检查结果的可靠性。的可行性、检查结果的可靠性。LL49案例分析案例分析11：注射用头孢唑林钠：注射用头孢唑林钠检查方法：中国药典检查方法：中国药典20052005年版年版主要问题：部分主要问题：部分HPLCHPLC图谱主峰前有一较
40、大的未图谱主峰前有一较大的未知峰（上市产品中无此峰），峰高呈现无规律知峰（上市产品中无此峰），峰高呈现无规律变化，未对该异常峰进行合理解释，也未作为变化，未对该异常峰进行合理解释，也未作为杂质峰积分杂质峰积分50评价意见：无法判断检查结果的可靠性评价意见：无法判断检查结果的可靠性LL51问题五：杂质水平高于已上市产品，问题五：杂质水平高于已上市产品，缺少杂质的安全性论证，缺少杂质的安全性论证，杂质限度的确定缺乏充分依据杂质限度的确定缺乏充分依据52 化学药物杂质研究的技术指导原则化学药物杂质研究的技术指导原则对于仿制已有国家标准的药品，可以根据已对于仿制已有国家标准的药品，可以根据已有的标准制
41、订相应的杂质限度。如果该标准有的标准制订相应的杂质限度。如果该标准中未规定杂质的限度，应与上市同品种药品中未规定杂质的限度，应与上市同品种药品进行全面的质量对比研究，分析其杂质的种进行全面的质量对比研究，分析其杂质的种类与含量，根据研究的结果，以及稳定性考类与含量，根据研究的结果，以及稳定性考察的结果，决定是否需要在质量标准中对杂察的结果，决定是否需要在质量标准中对杂质进行控制。质进行控制。53由于工艺或处方的不同导致在研产品与已上由于工艺或处方的不同导致在研产品与已上市同品种产品的杂质种类不同，仿制产品中市同品种产品的杂质种类不同，仿制产品中新杂质含量高于附件新杂质含量高于附件1 1或或2
42、2规定的合理限度，规定的合理限度，或在研产品的杂质含量明显高于已上市的同或在研产品的杂质含量明显高于已上市的同品种产品的杂质实测值。为了保证产品的安品种产品的杂质实测值。为了保证产品的安全性，应考虑优化产品的处方与制备工艺，全性，应考虑优化产品的处方与制备工艺，将杂质的含量降到规定的质控限度以内。如将杂质的含量降到规定的质控限度以内。如仍不能达到要求，则应做必要的安全性研究。仍不能达到要求，则应做必要的安全性研究。545556对比研究是论证杂质安全性的对比研究是论证杂质安全性的“捷径捷径”采用相同的经充分验证的分析方法对研制产品和采用相同的经充分验证的分析方法对研制产品和已上市产品进行杂质对比
43、考察，如研制产品中的已上市产品进行杂质对比考察，如研制产品中的杂质均出现在上市产品中，且各杂质含量不高于杂质均出现在上市产品中，且各杂质含量不高于上市产品，可以认为杂质安全性得到论证。上市产品，可以认为杂质安全性得到论证。对比研究的前提是上市品的杂质已得到充分研究对比研究的前提是上市品的杂质已得到充分研究和论证，且需注意对比样品的生产日期差异。和论证，且需注意对比样品的生产日期差异。57上市产品的质量标准以及可靠的科学文献也上市产品的质量标准以及可靠的科学文献也是论证杂质安全性的重要依据是论证杂质安全性的重要依据各国药典例如各国药典例如CPCP、USPUSP、BP/EPBP/EP、JPJP以及
44、上市产品的以及上市产品的质量标准等质量标准等其他能够论证杂质安全性的科学文献，例如药物代其他能够论证杂质安全性的科学文献，例如药物代谢研究文献等谢研究文献等如上述方法不可行，则应进行必要的安全性如上述方法不可行，则应进行必要的安全性试验试验采用含有杂质的原料药或制剂采用含有杂质的原料药或制剂采用分离的杂质单体采用分离的杂质单体58案例分析案例分析12：罗库溴铵：罗库溴铵收载于收载于BP/EPBP/EP： 杂质杂质A A不得过不得过0.20.2；杂质；杂质B B、C C均不得过均不得过0.30.3；杂质杂质D D、E E、F F、G G、H H均不得过均不得过0.10.1；其他单一；其他单一杂质
45、不得过杂质不得过0.10.1；总杂质不得过；总杂质不得过1.51.5国内有注射国内有注射液进口，无液进口，无原料药上市原料药上市59品种品种1 1品种品种2 2色谱条件色谱条件与与BP/EPBP/EP基本一致基本一致流动相比例有调整流动相比例有调整实测结果实测结果最大杂质约最大杂质约2.12.1，总杂质约总杂质约2.62.6最大杂质约最大杂质约1.71.7，总杂质约总杂质约2.42.4限度要求限度要求单个杂质单个杂质3.03.0，总，总杂质杂质5.05.0最大杂质最大杂质3.5%3.5%，总，总杂质杂质5.05.0 评价意见：评价意见：有关物质实测结果超出了有关物质实测结果超出了BP/EPBP
46、/EP同品种同品种的限度规定，但未提供相关资料证明杂质的安全的限度规定，但未提供相关资料证明杂质的安全性。质量标准中有关物质限度过宽，限度设定缺性。质量标准中有关物质限度过宽，限度设定缺乏充分依据。乏充分依据。LL60案例分析案例分析13：注射用呋布西林钠：注射用呋布西林钠国家药品标准抗生素第一册（国家药品标准抗生素第一册（8989年）年） 除吸碘物外未对其他有关物质进行控制，除吸碘物外未对其他有关物质进行控制，含量测定采用酸碱滴定法含量测定采用酸碱滴定法CHCONHCONHCONHONSCH3CH3COONaO61品种品种1品种品种2色谱条件色谱条件参考文献自建参考文献自建参考文献自建参考文
47、献自建实测结果实测结果最大杂质约最大杂质约2020，总杂质约总杂质约4040最大杂质约最大杂质约2020，总杂质约总杂质约3838含量测定含量测定酸碱滴定酸碱滴定酸碱滴定酸碱滴定 评价意见：评价意见：杂质含量高，未对杂质进行充分的安杂质含量高，未对杂质进行充分的安全性论证，全性论证，不能保证药品的安全性；同时，含量不能保证药品的安全性；同时，含量测定方法的专属性较差，含量测定结果不能真实测定方法的专属性较差，含量测定结果不能真实反映药品中活性成份的含量，无法保证临床给药反映药品中活性成份的含量，无法保证临床给药剂量的准确性。剂量的准确性。LL62案例分析案例分析14：注射用顺苯磺阿曲库铵：注射
48、用顺苯磺阿曲库铵BP/EPBP/EP收载有苯磺酸阿曲库铵原料药，收载有苯磺酸阿曲库铵原料药，USPUSP收载收载有苯磺酸阿曲库铵原料药、注射液有苯磺酸阿曲库铵原料药、注射液国内已有苯磺酸阿曲库铵注射液、顺苯磺阿曲国内已有苯磺酸阿曲库铵注射液、顺苯磺阿曲库铵注射液等上市库铵注射液等上市63文献分析：文献分析：原料药引入、制剂生产和贮存过程中产原料药引入、制剂生产和贮存过程中产生的杂质较多。生的杂质较多。研制情况：研制情况：制剂有关物质检查方法直接套用原料药制剂有关物质检查方法直接套用原料药方法，未针对制剂生产和贮存过程中产生的杂质进方法，未针对制剂生产和贮存过程中产生的杂质进行充分研究验证；未和
49、已上市同品种注射剂进行杂行充分研究验证；未和已上市同品种注射剂进行杂质对比研究，也未进行详细的杂质归属研究。质对比研究，也未进行详细的杂质归属研究。评价意见：评价意见：现有研究资料无法证明所用有关物质检现有研究资料无法证明所用有关物质检查方法可以有效检出药品中可能存在的杂质，同时查方法可以有效检出药品中可能存在的杂质，同时杂质限度确定也缺乏依据。杂质限度确定也缺乏依据。64案例分析案例分析15：间苯三酚注射液：间苯三酚注射液加速试验和室温留样试验条件下有关加速试验和室温留样试验条件下有关物质均呈明显上升趋势物质均呈明显上升趋势药品中的单个杂质达到药品中的单个杂质达到2 2本品和市售品的杂质对比
50、研究结果显本品和市售品的杂质对比研究结果显示二者的杂质种类不同示二者的杂质种类不同 65评价意见：评价意见：现有研究结果不能证明本品中所含杂质的现有研究结果不能证明本品中所含杂质的安全性。由于未对本品中含量较高的杂质进行归属研安全性。由于未对本品中含量较高的杂质进行归属研究并论证其安全性，自拟的杂质限度缺乏依据。究并论证其安全性，自拟的杂质限度缺乏依据。LL样品留样样品留样9 9月月市售品市售品66案例分析案例分析16：乙酰半胱氨酸：乙酰半胱氨酸英国药典、国家药品标准等收载乙酰半胱氨英国药典、国家药品标准等收载乙酰半胱氨酸注射液：酸注射液： 色谱条件、限度相同，二乙酰胱氨酸不得过色谱条件、限度
