1、1研究背景研究背景2脂蛋白脂酶脂蛋白脂酶 (LPL)HDL游离脂肪酸和甘油游离脂肪酸和甘油能量能量apoC-IICMVLDLapoEapoA-I胆固醇磷脂CMVLDLapoE肝脏肝脏脂质代谢脂质代谢胆汁胆汁肌肉肌肉残粒残粒TGTG ：甘油三酯；：甘油三酯；CM：乳糜微粒；：乳糜微粒；HDL：高密度脂蛋白；：高密度脂蛋白；VLDL：极低密度脂蛋白；：极低密度脂蛋白；apo：载脂蛋白：载脂蛋白LDL：低密度脂蛋白：低密度脂蛋白LDLLPL内皮细胞内皮细胞3NO-1886：LPL激活剂激活剂HDL游离脂肪酸和甘油游离脂肪酸和甘油能量能量apoC-IICMVLDLapoEapoA-I胆固醇磷脂CMVL
2、DLapoE肝脏肝脏脂质代谢脂质代谢胆汁胆汁肌肉肌肉残粒残粒TGTG ：甘油三酯；：甘油三酯；CM：乳糜微粒；：乳糜微粒；HDL：高密度脂蛋白；：高密度脂蛋白；VLDL：极低密度脂蛋白；：极低密度脂蛋白；apo；载脂蛋白；载脂蛋白LDL：低密度脂蛋白：低密度脂蛋白LDLLPL内皮细胞内皮细胞NO-18864NO-1886(ibrolipim)(ibrolipim)的化学结构的化学结构4-(4-Bromo-2-cyano-phenylcarbamoyl)-benzyl-phosphonic acid diethylesterCAS 133208-93-2；Lot. No. C99H74SM由日本
3、德岛大塚制药厂新药研究实验室合成BrNHOPNOOO5关于关于NO-1886的部分研究现状的部分研究现状使脂肪组织和心肌的LPL mRNA表达和酶的活性增加 治疗高胆固醇喂养的大鼠，可抑制其冠状动脉As病变 治疗高胆固醇喂养的新西兰兔, 可提高血浆LPL活性3040%，升高HDL-C，而TG减至正常水平，有效地减少动脉粥样硬化性斑块面积 治疗高糖高脂饮食诱发糖尿病的新西兰兔和贵州小香猪，发现NO-1886降低血浆FFA、TNF-、TG，升高HDL-C，促进脂肪组织PPAR、LPL mRNA表达，抑制TNF-表达， 抑制主动脉As病变 6HDL代谢与胆固醇逆转运代谢与胆固醇逆转运ABCA1：三磷
4、酸腺苷结合盒转运体 A1；LXR：肝X受体； apo A-I：载脂蛋白 A-I； CE ：胆固醇酯；FC：游离胆固醇；LCAT ：卵磷酯胆固醇酰基转移酶；SR-BI ：B 型 I 类清道夫受体apoA-I肝脏肝脏CECECEFCFCLCATFC胆汁胆汁SR-BIapoA-IABCA1巨噬细胞巨噬细胞成熟成熟HDL新生新生HDLLXR+7提出以下的问题？提出以下的问题？高糖高脂饲料可以诱导实验动物形成糖脂代谢紊乱和AS病变，如果用高糖高脂高胆固醇饲料诱导，在高胆固醇的条件下结果又会如何？NO-1886可否抑制高脂高蔗糖高胆固醇饲料诱发的AS病变？NO-1886对参与HDL-C形成和代谢相关基因的
5、作用 ？8实验路线实验路线15只雄性广西巴马小型猪只雄性广西巴马小型猪随机分为随机分为3组组CD组组HFSCD组组HFSCDNO-1886组组检测体重、血糖、血脂、检测体重、血糖、血脂、LPL颈动脉放血处死动物颈动脉放血处死动物主动脉脂质条纹分析主动脉脂质条纹分析RT-PCR、western blot技术检测技术检测肝脏、脂肪、主动脉组织肝脏、脂肪、主动脉组织ABCA1、LXR的表达的表达肝脏肝脏SR-B的表达的表达910实验结果实验结果11第一部分第一部分 NO-1886改善糖脂代谢抑制动脉粥样硬化改善糖脂代谢抑制动脉粥样硬化病变病变 12三组动物体重的比较无统计学差异三组动物体重的比较无统
6、计学差异 三组动物体重的变化 13NO-1886升高餐后血浆升高餐后血浆LPL 三组动物餐后4h血浆LPL的比较三组动物空腹血浆LPL的比较 a：与CD组比较， P0.01；b：与HFSCD组比较，P0.01。a：与CD组比较，P0.01。 47.531.88.59.214NO-1886降低血浆葡萄糖降低血浆葡萄糖三组动物空腹血浆葡萄糖的变化 a：与CD组比较，P0.05；b：与CD组比较，P0.01；c：与HFSCD组比较，P0.05；d：与HFSCD组比较，P0.01。5.110.36.04.215NO-1886降低血浆降低血浆TG 三组动物空腹血浆TG的变化 a：与CD组比较，P0.01
7、；b：与HFSCD组比较，P0.01。2.11.116NO-1886降低血浆降低血浆FFA 三组动物空腹血浆FFA的变化 a：与CD组比较，P0.01；b：与HFSCD组比较，P0.01。0.750.3017HFSCD+NO-1886组与组与HFSCD组血浆总组血浆总胆固醇比较无统计学差异胆固醇比较无统计学差异三组动物空腹血浆TC的变化 a：与CD组比较，P0.01；b：与HFSCD组比较，P0.05。20.42.118NO-1886升高血浆升高血浆HDL-C 三组动物空腹血浆HDL-C的变化 a：与CD组比较，P0.05；b：与CD组比较，P0.01；c：与HFSCD组比较，P0.01。 2
8、.02.319HFSCDNO-1886组组TC/HDL-C 比值降低比值降低三组动物TC/HDL-C比值的变化 a：与CD组比较，P0.05；b：与CD组比较，P0.01；c：与HFSCD组比较，P0.05。11.87.820NO-1886升高血浆升高血浆apoA- 三组动物空腹血浆apoA-的变化 a：与CD组比较，P0.01；b：与HFSCD组比较，P0.05；c：与HFSCD组比较，P0.01。0.670.490.510.7321NO-1886抑制主动脉动脉粥样硬化病变抑制主动脉动脉粥样硬化病变 A：HFSCD组；B：HFSCD+NO-1886组；C：CD组。三组动物主动脉苏丹染色结果
9、A：41.8%B：13.7%C22232425第二部分 NO-1886对动脉粥样硬化小型猪肝脏、腹对动脉粥样硬化小型猪肝脏、腹壁下脂肪、主动脉胆固醇逆转运相关基因壁下脂肪、主动脉胆固醇逆转运相关基因表达的影响表达的影响26肝脏肝脏RCT相关基因相关基因mRNA的表达的表达ABCA1LXRSR-BIGAPDHHFSCD+NO-1886 HFSCD CD27腹壁下脂肪组织腹壁下脂肪组织RCT相关基因相关基因mRNA的表达的表达ABCA1LXRGAPDHHFSCD+NO-1886 HFSCD CD28主动脉主动脉RCT相关基因相关基因mRNA的表达的表达ABCA1LXRGAPDHHFSCD+NO-1
10、886 HFSCD CD29肝脏肝脏RCT相关基因蛋白的表达相关基因蛋白的表达ABCA1220KDLXR64KDSR-B82KD b-actin42KDHFSCD+NO1886 HFSCD CD30腹壁下脂肪组织腹壁下脂肪组织RCT相关基因蛋白的表达相关基因蛋白的表达ABCA1220KDLXR64KDb-actin42KDHFSCD+NO1886 HFSCD CD31主动脉主动脉RCT相关基因蛋白的表达相关基因蛋白的表达ABCA1220KDLXR64KDb-actin42KDHFSCD+NO1886 HFSCD CD32结结 论论高脂高蔗糖高胆固醇饲料可以诱导广西巴马小型猪发生动脉粥样硬化病变
11、。NO-1886可以升高apoA-改善慢性糖脂代谢紊乱，抑制广西巴马小型猪发生动脉粥样硬化病变。NO-1886可导致糖脂代谢紊乱AS小型猪肝脏、腹壁下脂肪组织、主动脉ABCA1、LXR及肝脏SR-B的表达上调。33讨 论34高胆固醇、高TG血症及低HDL-C水平是心血管疾病的重要危险因素。高脂高蔗糖高胆固醇喂养可诱导小型猪体内的脂蛋白构成发生改变，出现高甘油三酯血症、高胆固醇血症，HDL-C/TC比值降低从而易致AS。35胆固醇和胆固醇酯在巨噬细胞聚集对动脉粥样硬化形成起重要作用。 HDL的主要抗动脉粥样硬化功能： HDL将胆固醇从外周细胞转运到肝脏有关。NO-1886降低血浆中TG和FFA浓
12、度，升高HDL-C和apoA-水平，因而主动脉As的形态学改变有明显减少和减轻。36apoA-可以促进RCT，减少胆固醇在外周组织细胞的含量apoA-可以抑制LDL 的氧化含有apoA-的HDL 可调节炎症反应apoA-可抑制血管内膜的增生 apoA-激活LCAT，将胆固醇变成胆固醇酯，进入HDL 的内部，提高HDL结合胆固醇的能力 NO-1886抑制抑制AS 与升高与升高apoA-水平有关水平有关 37NO-1886改善肝脏脂代谢功能改善肝脏脂代谢功能Basso F 等研究认为ABCA1对于维持肝细胞自身的胆固醇平衡非常重要。肝脏作为体内胆固醇平衡最重要的调节器官，它本身也是HDL-C的一个
13、重要来源。 在致动脉粥样硬化饮食条件下， NO-1886上调ABCA1表达，可减轻肝细胞胆固醇负荷及胆固醇毒性，对维持肝细胞正常的脂质代谢功能极为重要。38BBTGCMR/IDLC-IICM/VLDLLPLA-ICECEFCFCLCATA-IABC1MacrophageMature HDLNascent HDLLDLRHLNO-1886+NO-1886IntestineNO-1886+SR-BNO-1886+LXR+39NO-1886促进促进RCT抑制抑制ASNO-1886使得主动脉LXR和ABCA1表达增高, 将血管平滑肌细胞及巨噬细胞内过多的胆固醇排出, 抑制平滑肌细胞和巨噬细胞的泡沫化, 减轻AS的病变面积 。NO-1886使得LXR依赖的胆固醇流出途径ABCA1表达增加, 促进脂肪组织胆固醇的流出, 抑制AS的发展。40
