1、o 离心分离是除过滤之外的另一种非常有效的固-液分离方法。o 它是利用惯性离心力和物质的沉降系数或浮力密度的不同而进行的一项分离、浓缩或提炼操作。o 优点：优点：离心分离对那些固体颗粒很小或液体粘度很大，过滤速率很慢，甚至难以过滤的悬浮液的分离十分有效，对那些忌用助滤剂或助滤剂使用无效的悬浮液的分离也能得到满意的结果。o 缺点：缺点：分离得到的是浆状物而不是干的滤饼，另外，离心设备复杂，价格昂贵。（沉降分离是不彻底的分离）（沉降分离是不彻底的分离）o 离心沉降：离心沉降：利用固液两相的相对密度差进行悬浮液分离的操作。o 离心过滤：离心过滤：利用离心力并通过过滤介质进行悬浮液分离的操作。o 离心
2、分离和超离心：离心分离和超离心：利用不同溶质颗粒在液体中各部分分布的差异，分离不同相对密度液体的操作。离心分离形式离心分离形式5.1 离心沉降离心沉降5.1.1 离心沉降的原理离心沉降的原理离心沉降离心沉降，指当悬浮液静置时，密度较大的固体颗，指当悬浮液静置时，密度较大的固体颗粒在重力的作用下逐渐下沉。当固体粒子在无限连粒在重力的作用下逐渐下沉。当固体粒子在无限连续流体中沉降时，受到两种力的作用，一种是连续续流体中沉降时，受到两种力的作用，一种是连续流体对它的浮力，另一种是流体对运动粒子的粘滞流体对它的浮力，另一种是流体对运动粒子的粘滞力。当这两种力达到平衡时，固体粒子将保持匀速力。当这两种力
3、达到平衡时，固体粒子将保持匀速运动。运动。对直径为对直径为d d的球形粒子的球形粒子(大多数生化分离上处理的对象都可大多数生化分离上处理的对象都可以看成为球形粒子以看成为球形粒子)，作用在它上面的浮力，作用在它上面的浮力FgFg可以表示为：可以表示为：d为粒子直径；为粒子直径；0 0和和分别为粒子和流体的密度；分别为粒子和流体的密度；g为重力为重力加速度加速度,V为粒子体积。为粒子体积。根据根据Stockes定律，悬浮在介质中的球形粒子所受的粘滞力定律，悬浮在介质中的球形粒子所受的粘滞力Fi可表示为：可表示为：式中式中 为连续流体的粘度为连续流体的粘度；u为粒子的运动速度为粒子的运动速度；CD
4、为阻滞为阻滞系数系数；A为粒子在运动方向上的投影面积为粒子在运动方向上的投影面积。其中其中CD不是常数，不是常数，它取决于雷诺数它取决于雷诺数Re的变化的变化,对于球形粒子，根据实验得知：对于球形粒子，根据实验得知：对于生化溶质来说，可以满足对于生化溶质来说，可以满足Rel l的要求，所以：的要求，所以：当粒子以匀速运动沉降时，当粒子以匀速运动沉降时，Fg=Ff，故最终匀速沉降速率为：，故最终匀速沉降速率为：从上式可知，从上式可知，最终沉降速率与粒子直径的平方成正比，与粒子最终沉降速率与粒子直径的平方成正比，与粒子和流体的密度差成正比，而与流体的粘度成反比；也就是说粒和流体的密度差成正比，而与
5、流体的粘度成反比；也就是说粒子的沉降速度仅仅是液体性质及粒子本身特性的函数子的沉降速度仅仅是液体性质及粒子本身特性的函数。如果粒子在离心力场中沉降，则重力加速度如果粒子在离心力场中沉降，则重力加速度g应换成离心加应换成离心加速度速度2r ，即：，即：式中式中 为旋转角速度为旋转角速度(rad/s)，r为粒子离转轴中心的距离。为粒子离转轴中心的距离。上式是离心沉降的基本公式，上式是离心沉降的基本公式，从式中可知沉降速度与从式中可知沉降速度与 的二的二次方成正比，因此只要根据要求改变或提高次方成正比，因此只要根据要求改变或提高 ，使粒子作快，使粒子作快速旋转，就可获得比重力沉降或过滤时高得多的分离
6、效果速旋转，就可获得比重力沉降或过滤时高得多的分离效果。可用离心分离因数可用离心分离因数Fr，(又称离心力强度又称离心力强度)来定量评价：来定量评价：Fr表示了粒子在离心机中产生的离心加速度与自由下降表示了粒子在离心机中产生的离心加速度与自由下降的加速度之比：的加速度之比：Fr 越大，越有利于分离越大，越有利于分离。5.1.2 离心沉降的设备离心沉降的设备 根据其离心力大小，可分为根据其离心力大小，可分为低速离心机、低速离心机、高速离心机和超离心机高速离心机和超离心机。生化分离用离心机。生化分离用离心机一般为冷却式，可在低温下操作，称为一般为冷却式，可在低温下操作，称为冷冻冷冻离心机离心机。按
7、离心机的作用方式：按离心机的作用方式：n 斜角式斜角式n 平抛式平抛式n 管式管式n 蝶式蝶式n 螺旋式螺旋式n 多室多室离心机的种类与用途离心机的种类与用途（1 1）斜角式离心机）斜角式离心机v是一类结构最简单的实验室常用离心机，是一类结构最简单的实验室常用离心机，v指离心管腔与转轴成一定倾角的转子；指离心管腔与转轴成一定倾角的转子；v角度越大，沉降越结实，分离效果越好，角度越大，沉降越结实，分离效果越好，v角度越小，颗粒沉降距离短，沉降速度快，但分离效果差。角度越小，颗粒沉降距离短，沉降速度快，但分离效果差。v颗粒在角转子中沉降时，先沿离心颗粒在角转子中沉降时，先沿离心 力方向撞向离心管，
8、然后再沿管壁力方向撞向离心管，然后再沿管壁 滑向管底，因此管的一侧会出现颗滑向管底，因此管的一侧会出现颗 粒沉积。粒沉积。结构稳定，结构稳定，可装载较多的样品可装载较多的样品使用较高的转速。使用较高的转速。加速或减速时，对样品有搅动。加速或减速时，对样品有搅动。特点特点(2)(2)瓶式离心机瓶式离心机v瓶式离心机又称平抛式离心机，是一类结构简瓶式离心机又称平抛式离心机，是一类结构简单的实验室常用的低中速离心机，转速一般在单的实验室常用的低中速离心机，转速一般在 3000-6000rpm3000-6000rpm。v离心管，静止时垂直挂在转头上，旋转时随着离心管，静止时垂直挂在转头上，旋转时随着转
9、子转动，从垂直悬吊上升到水平位置（约转子转动，从垂直悬吊上升到水平位置（约200-200-800rpm800rpm）。）。v优点：优点：v瓶式离心机颗粒在水平转子中的沉降是沿管子瓶式离心机颗粒在水平转子中的沉降是沿管子 轴向移动，样品便于收集。轴向移动，样品便于收集。v受振动和变速搅乱后对流现象小，受振动和变速搅乱后对流现象小，v缺点：缺点：v但转头结构复杂，最高转速相对要低但转头结构复杂，最高转速相对要低v容量也小一些。容量也小一些。平抛式离心机转子平抛式离心机转子（）管式离心机（）管式离心机（tubular-bowl centrifugetubular-bowl centrifuge）o
10、管式离心机：分为液管式离心机：分为液-液分离液分离的连续式管式离心机和的连续式管式离心机和液液-固固分离的间歇式管式离心机分离的间歇式管式离心机。o 管式离心机具有一个细长而高管式离心机具有一个细长而高速旋转的转鼓，速旋转的转鼓，o 转鼓内装有纵向平板，转鼓内装有纵向平板，o 其下部有进料口。上部有重液其下部有进料口。上部有重液液相出口。液相出口。管式离心机工作原理管式离心机工作原理o 待处理的物料在一定压力（待处理的物料在一定压力（3 310104 4 PaPa左右）下左右）下由进料管经底部空心轴进入鼓内，由进料管经底部空心轴进入鼓内，o 靠挡板分布于鼓的四周，并使料液迅速达到与靠挡板分布于
11、鼓的四周，并使料液迅速达到与转鼓相同的角速度。转鼓相同的角速度。o 转鼓带动物料高速旋转，在离心力下，悬浮液转鼓带动物料高速旋转，在离心力下，悬浮液沿转鼓内壁向上流动的，料液在离心力场的作沿转鼓内壁向上流动的，料液在离心力场的作用下因其密度差的存在而分离。用下因其密度差的存在而分离。o 澄清后的液相流动到转鼓上部的排液口排出。澄清后的液相流动到转鼓上部的排液口排出。o 比重大的固体微粒逐渐沉积在转鼓内壁形成比重大的固体微粒逐渐沉积在转鼓内壁形成 沉渣层，达到一定数量后，停机人工清除。沉渣层，达到一定数量后，停机人工清除。Tubular bowl管式离心机特点：管式离心机特点：o 结构简单，可提
12、供较大离心力，转速高，离心力强结构简单，可提供较大离心力，转速高，离心力强度高达度高达15000-6500015000-65000。o 管状离心机可以冷却，有利蛋白质分离管状离心机可以冷却，有利蛋白质分离o 间歇操作，须定时拆卸、清洗间歇操作，须定时拆卸、清洗o 适用于于分离乳浊液及含细颗粒的稀悬浮液，适用适用于于分离乳浊液及含细颗粒的稀悬浮液，适用于固含量低于于固含量低于1%1%，颗粒度小于，颗粒度小于5 5微米，黏度大的悬浮微米，黏度大的悬浮液澄清或固液两相密度差较小的分离。液澄清或固液两相密度差较小的分离。（4）多室式离心机）多室式离心机multichamber centrifuge o
13、 多室式离心机的转鼓内有若干同心多室式离心机的转鼓内有若干同心圆筒组成的环状分离室。圆筒组成的环状分离室。o 加长了被分离液体的流程，使液层加长了被分离液体的流程，使液层减薄，增加了沉降面积，减少了沉减薄，增加了沉降面积，减少了沉降距离。降距离。o 同时还有粒度筛分的作用，悬浮液同时还有粒度筛分的作用，悬浮液中的粗颗粒沉降到靠近内部的分离中的粗颗粒沉降到靠近内部的分离室壁上，细颗粒则沉降到靠近外部室壁上，细颗粒则沉降到靠近外部的室壁上，澄清的分离液经溢流排的室壁上，澄清的分离液经溢流排出。出。o 常用于抗菌素液液萃取分离，果常用于抗菌素液液萃取分离，果汁和酒类饮料的澄清等。汁和酒类饮料的澄清等
14、。（5）碟片式离心机）碟片式离心机disk-bowl centrifugedisk-bowl centrifugeo 是在管式离心机的基础上发展起来的，在转鼓中是在管式离心机的基础上发展起来的，在转鼓中加入了许多重迭的碟片，缩短了颗粒的沉降距离，加入了许多重迭的碟片，缩短了颗粒的沉降距离，提高了分离效率。提高了分离效率。o 是生物工业中应用最为广泛的一种离心机是生物工业中应用最为广泛的一种离心机 o 有一个密封的转鼓，内装十至上百有一个密封的转鼓，内装十至上百 个锥顶角为个锥顶角为60100锥形碟片。锥形碟片。o 碟片间的距离一般为碟片间的距离一般为0.5-2.5mm，与被分离物料的性质有关。
15、与被分离物料的性质有关。碟片式离心机工作原理碟片式离心机工作原理o 当悬浮液在动压头的作用下，经中当悬浮液在动压头的作用下，经中心管流入高速旋转的碟片之间的间心管流入高速旋转的碟片之间的间隙时，便产生了惯性离心力，隙时，便产生了惯性离心力，o 其中密度较大的固体颗粒在离心力其中密度较大的固体颗粒在离心力作用下向上层碟片的下表面运动，作用下向上层碟片的下表面运动，而后在离心力作用下被向外甩出，而后在离心力作用下被向外甩出，沿碟片下表面向转子外围下滑，沿碟片下表面向转子外围下滑，o 而液体则由于密度小，在后续液体而液体则由于密度小，在后续液体的推动下沿着碟片的隙道向转子中的推动下沿着碟片的隙道向转
16、子中心流动，然后沿中心轴上升，从套心流动，然后沿中心轴上升，从套管中排出，达到分离的目的管中排出，达到分离的目的 碟片式离心机类型碟片式离心机类型o 人工排渣的碟片离心机（间歇式）人工排渣的碟片离心机（间歇式）碟片上不开孔，只有一个清液排出口。沉积在转鼓内壁上碟片上不开孔，只有一个清液排出口。沉积在转鼓内壁上的沉渣，间歇排出。只适用于固体颗粒含量很少的悬浮液。的沉渣，间歇排出。只适用于固体颗粒含量很少的悬浮液。o 喷嘴排渣的碟片离心机（连续式）喷嘴排渣的碟片离心机（连续式）当固体颗粒含量较多时，可采用具有喷嘴排渣的碟式离当固体颗粒含量较多时，可采用具有喷嘴排渣的碟式离心沉降机。在有特殊形状内壁
17、的转鼓壁上开设若干喷嘴心沉降机。在有特殊形状内壁的转鼓壁上开设若干喷嘴 图5.3 碟式分离机转鼓及物料流动示意图图5.4 喷嘴排渣碟式离心机o 活门（活塞）排渣的碟片离心机活门（活塞）排渣的碟片离心机 这种离心机利用活门启闭排渣孔这种离心机利用活门启闭排渣孔进行断续自动排渣。进行断续自动排渣。操作时，由位于转鼓底部的环板操作时，由位于转鼓底部的环板状活门的上下移动来控制排渣。状活门的上下移动来控制排渣。图5.5 环阀(活塞)排渣碟式分离机示意因o 活门（活塞）排渣的喷嘴碟片离心机活门（活塞）排渣的喷嘴碟片离心机 这是近年来开发的机型，它和相同直径的活塞机相这是近年来开发的机型，它和相同直径的活
18、塞机相似，其速度可增加似，其速度可增加23%30%，故可使分离因素，故可使分离因素达达15000 左右，可用于酶制剂，疫苗和胰岛素等生左右，可用于酶制剂，疫苗和胰岛素等生产中分离物的澄清。产中分离物的澄清。（6）螺旋式离心机）螺旋式离心机scroll-type centrifugescroll-type centrifuge连续操作的沉降设备，转鼓内有可旋转的螺旋输连续操作的沉降设备，转鼓内有可旋转的螺旋输送器，其转数比转鼓的转数稍低。送器，其转数比转鼓的转数稍低。螺旋式离心机有立式和卧式两种，其中后者又称螺旋式离心机有立式和卧式两种，其中后者又称卧螺机，是用的较多的一种。卧螺机，是用的较多的
19、一种。螺旋式离心机工作原理螺旋式离心机工作原理v转鼓与螺旋以一定差速同向高速旋转，悬浮液通过螺旋输送转鼓与螺旋以一定差速同向高速旋转，悬浮液通过螺旋输送器的空心轴进入机内中部，由进料管连续引入螺旋内筒，加器的空心轴进入机内中部，由进料管连续引入螺旋内筒，加速后进入转鼓。速后进入转鼓。v在离心力场作用下，固相物沉积在转鼓壁上形成沉渣层。输在离心力场作用下，固相物沉积在转鼓壁上形成沉渣层。输料螺旋将沉积的固相物连续不断定推至转鼓锥端，经排渣口料螺旋将沉积的固相物连续不断定推至转鼓锥端，经排渣口排出机外，较轻的液相物则形成内层液环，由转鼓大端溢流排出机外，较轻的液相物则形成内层液环，由转鼓大端溢流口
20、连续溢出转鼓，经排液口排出机外。口连续溢出转鼓，经排液口排出机外。卧式螺旋离心机卧式螺旋离心机卧式螺旋卸料沉降离心机螺旋式特点v卧螺机是一种全速旋转，连续进料，分离和卸卧螺机是一种全速旋转，连续进料，分离和卸料的离心机。料的离心机。v最大离心力强度可达最大离心力强度可达60006000v操作温度可达操作温度可达300300v操作压力一般为常压操作压力一般为常压v常用于胰岛素，细胞色素，胰酶的分离等。常用于胰岛素，细胞色素，胰酶的分离等。5.1.3 5.1.3 离心沉降的计算离心沉降的计算（1）管式离心机管式离心机假设某典型粒子位于距离心机底部假设某典型粒子位于距离心机底部z及离转轴及离转轴r处
21、的位置上。这处的位置上。这一位置是在液体表面半径一位置是在液体表面半径R1和离心管半径和离心管半径R0之间。粒子在运转之间。粒子在运转的离心机中沿着的离心机中沿着z和和r两个方向运动，其中在两个方向运动，其中在z方向上的运动方向上的运动,是是由离心机底部进入料液的对流作用引起的，粒子在由离心机底部进入料液的对流作用引起的，粒子在Z-axis 上的上的移动速度：移动速度：式中：式中：Q为料液流量，上式意味着忽略为料液流量，上式意味着忽略在在z方向上重力场的影响，实际上，由方向上重力场的影响，实际上，由于管式离心机的高转速，重力作用确实于管式离心机的高转速，重力作用确实是可以忽略的。是可以忽略的。
22、z方向上的运动速度随方向上的运动速度随Q的增加而加大，而与粒子所处位置无的增加而加大，而与粒子所处位置无关，因此它是常数关，因此它是常数。图图4.7 4.7 管式离心机工管式离心机工作示意图作示意图已知粒子在重力场中的沉降速率为：已知粒子在重力场中的沉降速率为：结合上两式，可得到：结合上两式，可得到：为了获得粒子在离心机中的运动轨迹，将为了获得粒子在离心机中的运动轨迹，将式式1 1除以除以式式2 2，则得到：，则得到：从上式可知，若从上式可知，若g g很大，粒子将迅速到达管壁，凡是沉降到很大，粒子将迅速到达管壁，凡是沉降到管壁的粒子才有可能被除去；而当管壁的粒子才有可能被除去；而当Q Q 很大
23、时，粒子就很难到很大时，粒子就很难到达管壁，不易除去。达管壁，不易除去。式式1式式2式式3粒子在粒子在r-axis 上的移动速度可表示为：上的移动速度可表示为：系统内的粒子很多，在生产上关注的是那些难以除去的粒子，即指那些在rR1处进入离心机,及在出口旁，即z H处，接近筒壁(r=R0)的粒子。即:最难分离的粒子在入口：Z=0，r=R1;在出口：Z=H,r=R0。对这些难以去除的粒子，按进入和离开对这些难以去除的粒子，按进入和离开的边界条件将式的边界条件将式3 3进行积分得进行积分得:在大多数管式离心机中，由于液层很薄，所以R0接近于R1，因此上式可简化如下：上式给出了粒子在离心机中获得分离时
24、最大流速与粒子性质(g)和离心机特性(H、R0、R1及)的函数关系，如果超过这一流量，粒子会在未到达筒壁时便由筒的上端溢出，而不能除去。（2）碟片式离心机（略）碟片式离心机（略）（3）卧螺式离心机（略）卧螺式离心机（略）5.2 离心过滤离心过滤o 5.2.1 离心过滤的原理o 离心过滤是将料液送入有孔的转鼓并利用离心力场进行过滤的过程。兼有离心和过滤的双重作用。o 操作时，以离心力作为推动力，在具有过滤介质的有孔转鼓中加入悬浮液，固体粒子截留在过滤介质上，液体穿过滤饼层而流出，最后完成滤液和滤饼分离的过滤操作。5.2.2 离心过滤设备离心过滤设备o（1）间歇式离心过滤机）间歇式离心过滤机o 间
25、歇式离心过滤机通常在减速的情况下由刮刀卸料，或者停机抽出转鼓套筒或滤布进行卸料。实验室用过滤离心机 SGZ型三足式刮刀卸料自动离心机型三足式刮刀卸料自动离心机o（2）连续式离心过滤机）连续式离心过滤机o 连续式离心过滤机常见的有活塞推料活塞推料和振动振动卸料卸料两种方法。o 活塞推料式离心机借助活塞的往返运动带动推料盘进行脉动式卸料。o 振动卸料振动卸料式离心机是利用离心力和轴向激振力等的综合作用进行固液分离的。筛篮内的物料在离心力作用下脱水，在轴向激振力作用下由小端向大端脉动性地移动。脱水后的物料从筛篮大端落人卸料室，进人排料槽，离心液则由机壳收集，由排出室排出。o 连续沉降连续沉降-过滤式
26、螺旋卸料离心机过滤式螺旋卸料离心机是利用离心沉降原理进行固液分离，固体通过螺旋推料器上的叶片推至转鼓小端排渣口排出，液相则通过转鼓大端的溢流孔溢出。如此不断循环，以达到连续分离的目的。卧式螺旋沉降离心机(卧式螺旋卸料沉降离心过滤)5.2.3 离心过滤的计算离心过滤的计算o（1）Grace方程o（2）Storrow方程5.3 离心机的选用离心机的选用o 根据经验5.4 离心机在生物工业中的应用离心机在生物工业中的应用o 在生物工业中离心机通常用来处理液相粘度在12mPa.s，固液密度差为0.1g/ml和粒子大小为0.5100m的悬浮液，其中的固形物，例如细胞碎片、絮凝废水的细菌和蛋白质沉淀，大多
27、是形状不规则、性软、易碎的物质。被加工的物质，例如酶可能是热和氧敏感的。o 如当蛋白质纯化需采用色层分离纯化步骤时，则常常要求离心操作能提供澄清的上清液。o 碟片式离心机在应用中是受欢迎的设备，它们备有密封和蒸汽灭菌等多种型式，配有温度控制，并且有些型号能在物料流量达2000L/h下，回收尺寸为0.5m 的粒子。1发酵罐；2离心机；3搅拌混和罐；4高压匀浆机；5超滤器；6凝胶过滤器；7透析器牛生长激素牛生长激素(BGH)的分离提取工艺的分离提取工艺5.55.5 超离心分离法超离心分离法 根据物质的沉降系数、质量和形状的不同，根据物质的沉降系数、质量和形状的不同，应用强大的离心力，将混合物中各组分分离、应用强大的离心力，将混合物中各组分分离、浓缩、提纯的方法。浓缩、提纯的方法。应用应用:此法主要用于病毒、细胞颗粒体等的此法主要用于病毒、细胞颗粒体等的制备，对分子量较小的酶或蛋白质分离效果制备，对分子量较小的酶或蛋白质分离效果一般不佳，分辨率不高而且费时。一般不佳，分辨率不高而且费时。超离心技术的分类超离心技术的分类（1 1）制备性超离心）制备性超离心 离子差速离心（差速离心法）离子差速离心（差速离心法）一般密度梯度离心法（分级区带离心）一般密度梯度离心法（分级区带离心）等密度离心法等密度离心法（2 2）分析性超离心）分析性超离心（3 3）超离心设备）超离心设备
