1、海南大学环境与植物保护学院 周安文环境监测实验 环境科学实验教学示范中心第1页，共105页。海南大学环境与植物保护学院 周安文试验一 水体理化指标的测定 水的物理化学性质与水温有密切关系，水中溶解性气体的溶解度、水生生物和微生物活动、化学和生物化学反应速度及盐度、pH值等都受水温变化的影响。颜色、浊度等是反映水体外观的指标，浑浊、有颜色的水体可减弱水体的透光性，影响水生生物生长。pH值是水体常用的水质指标之一。第2页，共105页。海南大学环境与植物保护学院 周安文n目的目的 1.了解水体理化指标的内容；2.掌握水温、色度、浊度、pH的测定方法；3.熟练仪器的操作使用。第3页，共105页。海南大
2、学环境与植物保护学院 周安文n实验内容实验内容1.水温的测定；2.铂钴比色法测定水体色度；3.便携式浊度法测定浊度；4.便携式pH计测定水体pH值。第4页，共105页。海南大学环境与植物保护学院 周安文n仪器仪器1.水温计，颠倒水温计2.便携式浊度仪3.便携式pH计4.比色管，烧杯n试剂试剂 1.浊度标准溶液 2.铂钴标准溶液 3.标准pH缓冲溶液第5页，共105页。海南大学环境与植物保护学院 周安文n原理 1.pH：便携式pH计法 以玻璃电极为指示电极，以Ag/AgCl等为参比电极合在一起组成的pH复合电极。利用pH复合电极电动势随氢离子活动变化而发生偏移来测定水样的pH值。2.色度：铂钴比
3、色法 用氯铂酸钾与氯化钴配成的标准系列，与水样进行目视比色。第6页，共105页。海南大学环境与植物保护学院 周安文3、浊度：便携式浊度仪 根据ISO7027国际标准设计进行测量，利用一束红外线穿过含有待测样品的样品池，光源为具有890nm波长的高发射强度的红外二极管，以确保使样品颜色引起的干扰达到最小。传感器处在发射光线垂直的位置上，它测量样品中悬浮颗粒散射的光量，微电脑处理器将该值转化为浊度值第7页，共105页。海南大学环境与植物保护学院 周安文n步骤步骤一）水温的测定 1、水温计法测定浅层水温 将水温计插入一定深度的水中，放置5min后，迅速提出水面并读数。2、颠倒温度计法测定深层水温 将
4、颠倒水温计装在采水器上，沉入预定深度水层，感温57min后，提出水面后立即读数。第8页，共105页。海南大学环境与植物保护学院 周安文二）pH值的测定 1.按照仪器说明进行准备。2.选用与水样pH值相差不超过2个pH单位的标准溶液校准仪器。3.水样的测定 先用蒸馏水仔细冲洗电极，再用水样冲洗，然后将电极浸入水样中，待读数稳定后记录pH值。第9页，共105页。海南大学环境与植物保护学院 周安文三）色度 1.配置标准色列；2.水样的测定 （1）分取50.0ml澄清透明水样于比色管中，如水样色度较大，可酌情少取水样，用水稀释至50.0ml。（2）将水样于标准色列进行目视比较。观测时，可将比色管置于白
5、瓷板或白纸上，使光线从管底向上透过液柱，目光自管口垂直向下观察。记下与水样色度相同的铂钴标准色列的色度。第10页，共105页。海南大学环境与植物保护学院 周安文四）浊度：便携式浊度仪 1.开机，仪器预热30s；2.按下cal键，用标准浊度液对仪器进行校准；3.标定比色杯，并套上标定环，使标定环上的白色标记与仪器上的箭头对准；4.测定水样 取下比色杯，打开遮光帽，将水样缓慢倒入杯中，注意不要产生气泡，盖上盖帽，将杯外表擦干净，插入比色槽，将标定环上标记与仪器上箭头对准，按测定键，待读数稳定后，记录数值。第11页，共105页。海南大学环境与植物保护学院 周安文n注意事项注意事项 1.测定水温时，读
6、数要快。2.测定色度时，若水样浑浊处理，可采用澄清法、离心法、0.45um滤膜过滤法处理后再测定；若以上方法均不能去除浑浊物，则测定所得色度为表色。第12页，共105页。海南大学环境与植物保护学院 周安文 试验二试验二 化学需氧量的测定化学需氧量的测定 化学需氧量（COD），是在一定的条件下，采用一定的强氧化剂处理水样时，所消耗的氧化剂的量。水中的还原性物质有各种有机物、亚硝酸盐、硫化物、亚铁盐等。但主要的是有机物。因此，化学需氧量（COD）又往往作为衡量水中有机物质含量多少的指标。化学需氧量越大，说明水体受有机物的污染越严重。化学需氧量（COD）的测定，随着测定水样中还原性物质以及测定方法的
7、不同，其测定值也有不同。目前应用最普遍的是酸性高锰酸钾氧化法与重铬酸钾氧化法。第13页，共105页。海南大学环境与植物保护学院 周安文n目的 1.掌握化学需氧量的测定原理和方法。2.熟悉冷凝回流操作过程。第14页，共105页。海南大学环境与植物保护学院 周安文n原理原理 强酸性溶液中，准确加入过量的重铬酸钾标准溶液，加热回流，将水样中还原性物质(主要是有机物)氧化，过量的重铬酸钾以试亚铁灵作指示剂，用硫酸亚铁铵标准溶液回滴，根据所消耗的重铬酸钾标准溶液量来计算水样化学需氧量。第15页，共105页。海南大学环境与植物保护学院 周安文n二、仪器二、仪器1500mL全玻璃回流装置。2加热装置（电炉）
8、。325mL或50mL酸式滴定管、锥形瓶、移液管、容量瓶等。n三、试剂三、试剂1重铬酸钾标准溶液(C1/6K2Cr2O7=0.2500mol/L)2试亚铁灵指示液3硫酸亚铁铵标准溶液C(NH4)2Fe(SO4)26H2O0.1mol/L第16页，共105页。海南大学环境与植物保护学院 周安文n步骤步骤1.取20.00mL混合均匀的水样（或适量水样稀释至20.00mL）置于250mL磨口的回流锥形瓶中，准确加入10mL 重铬酸钾标准溶液及数粒小玻璃珠或沸石，连接磨口回流冷凝管，从冷凝管上口慢慢地加入30mL硫酸-硫酸银溶液，轻轻摇动锥形瓶使溶液混匀，加热回流2h(自开始沸腾计时)。2.冷却后，用
9、90.00mL水冲洗冷凝管壁，取下锥形瓶。溶液总体积不得少于140mL，否则因酸度太大，滴定终点不明显。第17页，共105页。海南大学环境与植物保护学院 周安文3溶液再度冷却后，加3滴试亚铁灵指示液，用硫酸亚铁铵标准溶液滴定，溶液的颜色由黄色经蓝绿色至红褐色即为终点，记录硫酸亚铁铵标准溶液的用量。4测定水样的同时，取20.00mL重蒸馏水，按同样操作步骤作空白实验。记录硫酸亚铁铵标准溶液的用量。第18页，共105页。海南大学环境与植物保护学院 周安文n六、计算六、计算 CODCr(O2，mg/L)=81000(V0-V1)C/V式中：C硫酸亚铁铵标准溶液的浓度(mol/L)；V0滴定空白时硫酸
10、亚铁铵标准溶液用量(mL)；V1滴定水样时硫酸亚铁铵标准溶液用量(mL)；V水样的体积(mL)；8氧（1/2O）摩尔质量（g/mol第19页，共105页。海南大学环境与植物保护学院 周安文n注意事项注意事项1.使用0.4g硫酸汞络合氯离子的最高量可达40mg，如取用20.00mL水样，即最高可络合2000mg/L氯离子浓度的水样。若氯离子的浓度较低，也可少加硫酸汞，使保持硫酸汞:氯离子=10:1(W/W)。若出现少量氯化汞沉淀，并不影响测定。2.对于化学需氧量小于50mg/L的水样，应改用0.0250mol/L重铬酸钾标准溶液。回滴时用0.01mol/L硫酸亚铁铵标准溶液。3水样加热回流后，溶
11、液中重铬酸钾剩余量应为加入量的1/54/5为宜。第20页，共105页。海南大学环境与植物保护学院 周安文4水样取用体积可在10.0050.00mL范围内，但试剂用量及浓度需按下表进行相应调整，也可得到满意的结果。水样取用量和试剂用量表水样体积（mL）0.25000mol/LK2Cr2O7溶液（mL）H2SO4-Ag2SO4溶液（mL）HgSO4(g)(NH4)2Fe(SO4)2(mol/L)滴定前总体积（mL）10.020.030.040.050.05.010.015.020.025.015304560750.20.40.60.81.00.0500.1000.1500.2000.2507014
12、0210280350第21页，共105页。海南大学环境与植物保护学院 周安文n思考题：本试验方法存在哪些优缺点？目前在测定工业废水COD 中多采用哪些方法，与本试验方法相比，有何特点。第22页，共105页。海南大学环境与植物保护学院 周安文试验三 水中六价铬的测定 铬（Cr）的化合物常见的价态有三价和六价。在水体中，六价铬一般以CrO42-、H CrO4-两种阴离子形式存在，受水中pH值、有机物、氧化还原物质、温度及硬度等条教案的影响，三价格和六价铬的化合物可以互相转化。第23页，共105页。海南大学环境与植物保护学院 周安文n目的：目的：1.掌握水中Cr6+的测定 2.熟悉分光光度计的使用，
13、标准曲线的绘制n原理原理 在酸性溶液中，六价铬离子与二苯碳酰二肼反应，生成紫红色化合物，其最大吸收波长为540nm，吸光度与浓度的关系符合比尔定律。如果测定总铬，需先用高锰酸钾将水样中的三价铬氧化为六价，再用本法测定。第24页，共105页。海南大学环境与植物保护学院 周安文n仪器仪器1.分光光度计2.比色皿（1cm、3cm）。3.2.50mL 具塞比色管，移液管，容量瓶等。第25页，共105页。海南大学环境与植物保护学院 周安文n试剂试剂1.丙酮。2.（11）硫酸3.（11）磷酸4.0.2（m/V）氢氧化钠溶液5.氢氧化锌共沉淀剂6.4（m/V）高锰酸钾溶液7.铬标准贮备液8.铬标准使用液9.
14、20（m/V）尿素溶液10.2（m/V）亚硝酸钠溶液11.二苯碳酰二肼溶液：第26页，共105页。海南大学环境与植物保护学院 周安文n步骤步骤1.水样预处理（1）对不含悬浮物、低色度的清洁地面水，可直接进行测定。（2）如果水样有色但不深，可进行色度校正。即另取一份试样，加入除显色剂以外的各种试剂，以2mL 丙酮代替显色剂，用此溶液为测定试样溶液吸光度的参比溶液。（3）对浑浊、色度较深的水样，应加入氢氧化锌共沉淀剂并进行过滤处理。第27页，共105页。海南大学环境与植物保护学院 周安文（4）水样中存在次氯酸盐等氧化性物质时，干扰测定，可加入尿素和亚硝酸钠消除。（5）水样中存在低价铁、亚硫酸盐、硫
15、化物等还原性物质时，可将Cr6+还原为Cr3+，此时，调节水样pH 值至8，加入显色剂溶液，放置5min 后再酸化显色，并以同法作标准曲线。第28页，共105页。海南大学环境与植物保护学院 周安文 2.标准曲线的绘制：取9 支50mL 比色管，依次加入0、0.20、0.50、1.00、2.00、4.00、6.00、8.00 和10.00mL 铬标准使用液，用水稀释至标线，加入11 硫酸0.5mL 和11 磷酸0.5mL，摇匀。加入2mL 显色剂溶液，摇匀。5 10min 后，于540nm 波长处，用1cm 或3cm 比色皿，以水为参比，测定吸光度并作空白校正。以吸光度为纵坐标，相应六价铬含量为
16、横坐标绘出标准曲线。第29页，共105页。海南大学环境与植物保护学院 周安文3.水样的测定：取适量（含Cr6+少于50g）无色透明或经预处理的水样于50mL 比色管中用水稀释至标线，测定方法同标准溶液。进行空白校正后根据所测吸光度从标准曲线上查得Cr6+含量。4.空白试验：以蒸馏水代替水样，做全程空白试验。第30页，共105页。海南大学环境与植物保护学院 周安文n计算计算 Cr6+（mg/L）=m/V 式中：m从标准曲线上查得的Cr6+量（g）；V水样的体积（mL）。第31页，共105页。海南大学环境与植物保护学院 周安文n注意事项注意事项1用于测定铬的玻璃器皿不应用重铬酸钾洗液洗涤。2Cr6
17、+与显色剂的显色反应一般控制酸度在0.05-0.3mol/L（1/2H2SO4）范围，以0.2mol/L时显色最好。显色前，水样应调至中性。显色温度和放置时间对显色有影响，在15时，5-15min颜色即可稳定。第32页，共105页。海南大学环境与植物保护学院 周安文实验四实验四 高锰酸盐指数的测定高锰酸盐指数的测定 以高锰酸钾溶液为氧化剂测得的化学耗氧量，以前称为锰法化学耗氧量。我国新的环境水质标准中，已把该值改称高锰酸盐指数，而仅将酸性重铬酸钾法测得的值称为化学需氧量。国际标准化组织(ISO)建议高锰酸钾法仅限于测定地表水、饮用水和生活污水，不适用于工业废水。n目的目的 掌握高锰酸盐指数的测
18、定原理和方法 第33页，共105页。海南大学环境与植物保护学院 周安文n 原理原理 样品中加入已知量的高锰酸钾和硫酸，在沸水浴中加热30min，高锰酸钾将佯品中的某些有机物和无机还原性物质氧化，反应后加入过量的草酸钠还原剩余的高锰酸钾，再用高锰酸钾标准溶液回滴过量的草酸钠。通过计算得到样品中高锰酸盐指数。其化学反应式如下：4MnO4-+5C(有机物)+12H2O=4Mn2+5CO2+6H2O 4MnO4-+5C2O42-+16H+=2Mn2+10CO2+8H2O第34页，共105页。海南大学环境与植物保护学院 周安文n仪器仪器 1.水浴或相当的加热装置：有足够的容积和功率。2.酸式滴定管，25
19、mL。注：新的玻璃器皿必须用酸性高锰酸钾溶液清洗干净。第35页，共105页。海南大学环境与植物保护学院 周安文n试剂试剂1.不含还原性物质的水2.硫酸(H2SO4)：密度为1.84gmL。3.硫酸（13）溶液4.500gL氢氧化钠溶液5.0.100 0mo1 L草酸钠C(1/2Na2C2O4)标准贮备液6.0.010 0mo1L草酸钠C(1/2Na2C2O4)标准溶液7.0.1mo1L高锰酸钾C(1/2KMnO4)标准贮备液8.0.01mo1L高锰酸钾C(1/2KMnO4)标准溶液第36页，共105页。海南大学环境与植物保护学院 周安文n测定步骤测定步骤1.取100mL充分混匀的水样(若水样有
20、机物含量较高，可取适量水样以蒸馏水稀释至100mL)置于锥形瓶中。加入5mL(1+3)H2SO4，摇匀。2.用移液管加入0.0100mol/L KMnO410.00mL溶液，摇匀，立即放入沸水浴中加热 30min(从水浴重新沸腾起计时)。沸水浴液面要高于瓶内溶液的液面。如加热过程中红色明显减退，需将水样稀释后重做。3.取下锥形瓶，趁热加入 0.0100mol/L Na2C2O4标准溶液10.00mL，摇匀。立即用0.0100mol/L KMnO4溶液滴定至微红色，记录KMnO4溶液的用量V1。第37页，共105页。海南大学环境与植物保护学院 周安文4.在滴定至终点后的水样中，趁热加入0.010
21、0mol/L Na2C2O4 10.00mL 标准溶液，摇匀。立即用0.0100mol/L KMnO4溶液滴定至微红色，记录KMnO4溶液的用量V。校正系数K=10.00/V5.如水样用蒸馏水稀释时，应同时另取100mL蒸馏水，按步骤13进行空白滴定，记录消耗溶液的体积为V0。第38页，共105页。海南大学环境与植物保护学院 周安文n计算（1）水样不经稀释 （2）水样经稀释 式中：f稀释的水样中含水的比重 V2 分取水样量（ml）第39页，共105页。海南大学环境与植物保护学院 周安文n注意事项注意事项1.高锰酸钾法是条件实验，测定应严格按规定条件进行操作，否则实验结果不能进行比较。2.所取水
22、样，要求在测定中回滴过量的Na2C2O4标准溶液时所消耗KMnO4溶液的体积在46mL左右，如果所消耗体积过大或过小，都需要重新再取适量的水样进行测定。第40页，共105页。海南大学环境与植物保护学院 周安文n思考题 在测定高锰酸盐指数时要注意什么物质对测定的影响，如何消除该物质对测定结果的影响？第41页，共105页。海南大学环境与植物保护学院 周安文试验五 氨氮的测定氨氮的测定 氨氮的测定方法，通常有纳氏比色法、苯酚-次氯酸盐（或水杨酸-次氯酸盐）比色法和电极法等。纳氏试剂比色法具有操作简便、灵敏等特点，但钙、镁、铁等金属离子、硫化物、醛、酮类，以及水中色度和混浊等干扰测定，需要相应的预处理
23、。苯酚-次氯酸盐比色法具灵敏、稳定等优点，干扰情况和消除方法同纳氏试剂比色法。电极法通常不需要对水样进行预处理和具测量范围宽等优点。氨氮含量较高时，可采用蒸馏-酸滴定法。第42页，共105页。海南大学环境与植物保护学院 周安文n目的：目的：1.掌握纳氏试剂法测定氨氮的原理，预处理方法和测定方法。2.熟悉分光光度计的使用，标准曲线的绘制。第43页，共105页。海南大学环境与植物保护学院 周安文n原理原理 氨氮是指游离态的氨或铵离子形式存在的氨。在强碱性条件下氨氮是指游离态的氨或铵离子形式存在的氨。在强碱性条件下氨或铵离子能同纳氏试剂反应氨或铵离子能同纳氏试剂反应生成棕色胶态化合物，其色度与氨氮含
24、量成正比，通常可在波长410425nm 范围内测其吸光度，计算其含量。本法最低检出浓度为0.025mg/L，测定上限为2mg/Ln仪器仪器 1.分光光度计 2.50ml比色管 第44页，共105页。海南大学环境与植物保护学院 周安文n试剂试剂1.无氨水2.1mol/L 盐酸溶液。3.1mol/L 氢氧化纳溶液。4.纳氏试剂5.酒石酸钾钠溶液6.铵标准贮备溶液7.铵标准使用溶液 8.10%（m/V）硫酸锌溶液9.25%氢氧化钠溶液10.硫酸，=1.84。第45页，共105页。海南大学环境与植物保护学院 周安文n步骤步骤1.水样预处理 取100mL水样于具塞量筒或比色管中，加入1mL10%硫酸锌溶
25、液和0.10.2mL25氢氧化钠溶液，调节pH值10.5左右，混匀。放置使沉淀，用经无氨水充分洗涤过的中速滤纸过滤，弃去初滤液20mL。对工业废水，可采取蒸馏预处理。第46页，共105页。海南大学环境与植物保护学院 周安文2.标准曲线的绘制 吸取0、0.50、1.00、3.00、5.00、7.00 和10.0mL 铵标准使用液于50mL 比色管中，加水至标线，加1.0mL 酒石酸钾钠溶液，混匀。加1.5mL 纳氏试剂，混匀。放置10min 后，在波长420nm 处，用光程20mm 比色皿，以水为参比，测定吸光度。由测得的吸光度，减去零浓度空白管的吸光度后，得到校正吸光度，绘制以氨氮含量（mg）
26、对校正吸光度的标准曲线。第47页，共105页。海南大学环境与植物保护学院 周安文3.水样的测定 分取适量经预处理后的水样（使氨氮含量不超过0.1mg），加入50mL 比色管中，稀释至标线，加1mL 酒石酸钾钠溶液。摇匀，再加1.0mL 纳氏试剂 4.空白试验：以无氨水代替水样，作全程序空白测定。5.同时做添加回收试验，检验测定结果。第48页，共105页。海南大学环境与植物保护学院 周安文n计算：计算：由水样测得的吸光度减去空白试验的吸光度后，从标准曲线上查得氨氮含量（mg）。氨氮（N，mg/L）=m1000/V 式中：m由校准曲线查得的氨氮量（mg）；V水样体积（mL）。第49页，共105页。
27、海南大学环境与植物保护学院 周安文n注意事项注意事项1.纳氏试剂中碘化汞与碘化钾的比例，对显色反应的灵敏度有较大影响。静置后生成的沉淀应除去。2.滤纸中常含痕量铵盐，使用时注意用无氨水洗涤。所用玻璃器皿应避 免实验室空气中氨的沾污。第50页，共105页。海南大学环境与植物保护学院 周安文n思考题 1.加入酒石酸钾钠的作用是什么？2.什么是纳氏试剂？如何配制？第51页，共105页。海南大学环境与植物保护学院 周安文实验六 亚硝酸盐氮的测定 亚硝酸盐氮是氮循环的中间产物，不稳定。在水环境不同的条件下，可氧化成硝酸盐氮，也可被还原成氨。亚硝酸盐氮在水中可受微生物作用很不稳定，采集后应立即分析或冷藏抑
28、制生物影响。第52页，共105页。海南大学环境与植物保护学院 周安文n目的目的1.掌握亚硝酸盐氮的测定原理，预处理方法和测定方法。2.熟悉分光光度计的使用，标准曲线的绘制。第53页，共105页。海南大学环境与植物保护学院 周安文n原理原理 在pH2.2.5时，亚硝酸盐与对氨基苯磺酰胺反应，生成重氮盐，再与盐酸萘胺偶联生成紫红色染料，在波长540nm处有最大吸收。其颜色深浅与亚硝酸盐氮含量成正比。本法适用于饮用水、地面水、生活污水、工业废水中亚硝酸盐的测定，最低检出浓度为0.003mg/L；测定上限为0.20mg/L。第54页，共105页。海南大学环境与植物保护学院 周安文n仪器仪器 1.分光光
29、度计 2.50ml比色管n试剂试剂：1.对氨基苯磺酸溶液 2.盐酸萘胺溶液 3.醋酸钠溶液 4.亚硝酸盐氮标准溶液 5.氢氧化铝悬浮液第55页，共105页。海南大学环境与植物保护学院 周安文n步骤步骤1.预处理 水样如有颜色或悬浮物，可向每100ml水中加入2ml氢氧化铝悬浮液，搅拌，静置，过滤弃去25ml初滤液。2.取调节为中性的 50.00ml澄清水样于50毫升比色管中，入亚硝酸盐氮含量高，可酌情少取水样，用水稀释至标线。3.在一组7支50ml的比色管中，分别加入0、0.50、1.00、2.00、3.00、5.00、7.00ml亚硝酸盐标准使用液，用水稀至标线。第56页，共105页。海南大
30、学环境与植物保护学院 周安文 4.向标准管和水样中分别加入1.0ml对氨基苯磺酸溶液，密塞混匀。静置28min后，各加1ml醋酸溶液及1ml盐酸萘胺溶液，混匀，放置30min后，在2h内，于波长520nm处，用光程长10mm的比色皿，以水为参比，测量吸光度。5.以蒸馏水代替水样，做空白试验。第57页，共105页。海南大学环境与植物保护学院 周安文n计算 第58页，共105页。海南大学环境与植物保护学院 周安文n注意事项注意事项：1.显色剂有毒，避免与皮肤接触或吸入体内。2.测得水样的吸光度值，不得大于校准曲线的最大吸光度值，否则水样要预先进行稀释。第59页，共105页。海南大学环境与植物保护学
31、院 周安文实验六实验六 硝酸盐氮的测定硝酸盐氮的测定n目的目的 掌握酚二磺酸分光光度法测定水中硝酸盐氮的原理和方法。n原理原理 硝酸盐在无水情况下与酚二磺酸反应，生成硝基二磺酸酚，在碱性溶液中生成黄色化合物，进行定量测定。第60页，共105页。海南大学环境与植物保护学院 周安文n仪器仪器 1.瓷蒸发皿：75100ml容量。2.具塞比色管：50ml。3.分光光度汁：适用于测量波长410nm，并配有光程10mm和30mm的比色皿。第61页，共105页。海南大学环境与植物保护学院 周安文n试剂试剂：本标准所用试剂除另有说明外，均为分析纯试剂，实验中所用的水，均应用蒸馏水或同等纯度的水。1.发烟硫酸(
32、H2SO4SO3)2.酚二磺酸(C6H3(OH)(SO3H)2)。3.氨水(NH3H2O)4.硝酸盐氮标准溶液 5.硫酸银溶液 6.EDTA二钠溶液 7.氢氧化铝悬浮液 8.高锰酸钾溶液第62页，共105页。海南大学环境与植物保护学院 周安文n步骤步骤：1校准曲线的绘制 分别取硝酸钾标准溶液0.00、0.50、1.00、3.00、5.00、10.00ml于50ml比色管中，加3ml氨水，用水稀释至刻度，摇匀。在波长410nm处，以水为参比，测量吸光度，绘制标准曲线。第63页，共105页。海南大学环境与植物保护学院 周安文2水样的预处理 1）脱色 污染严重或色泽较深的水样，可于250ml水样中加
33、入5ml氢氧化铝悬浮液，摇匀，静置数分钟，过滤，弃去部分初滤液。2）去除氯离子 取100ml水样，根据已测定的氯离子含量，加入相当量的硫酸银溶液，充分混匀，在暗处放置5min，用慢速滤纸过滤，弃去20ml初滤液。如同时需要除带色物质，则可在加入硫酸银混匀后，再加2ml氢氧化铝悬浮液，充分振荡，放置片刻待沉淀后过滤。第64页，共105页。海南大学环境与植物保护学院 周安文3.水样得测定 取50.0ml经预处理的水样于蒸发皿中，调节至中性，置水浴上蒸发至干。加1.0mL酚二磺酸，用玻璃棒研磨，使试剂与蒸发皿内残渣充分接触，放置片刻，再研磨次，放置10min，加入约10mL水。在搅拌下加入34mL氨
34、水，使溶液呈现最深的颜色。如有沉淀，则过滤。将滤液移入50mL比色管中，稀释至标线，混匀。于波长410nm处，以水为参比，测量吸光度。第65页，共105页。海南大学环境与植物保护学院 周安文4空白试验以水代替水样，按相同步骤，进行全程序空白测定。n计算计算 硝酸盐氮(N，mgL)m1000/V式中：m从校准曲线上查得的硝酸盐氮含量（mg）V分取水样体积（mL）第66页，共105页。海南大学环境与植物保护学院 周安文n注意事项注意事项1.黄色化合物的最大吸收波长为410nm，浓度超过2mg/L时，用480nm较合适。2.氯离子浓度在10mg/L以上，影响测定结果，应用硫酸银除去氯离子，为避免银过
35、量，保留1mg/L氯离子不反应。3.如水样中亚硝酸盐氮超过0.2mg/L，则需要先将其氧化为硝酸盐氮，然后成测定结果中减去亚硝酸盐氮含量。第67页，共105页。海南大学环境与植物保护学院 周安文试验八 大气中二氧化硫的测定n目的目的：1 .掌握盐酸副玫瑰苯胺分光光度法测定大气中二氧化硫的原理和方法 2.熟悉大气采样器的使用方法 3.熟悉分光光度计的使用第68页，共105页。海南大学环境与植物保护学院 周安文n原理原理 大气中的二氧化硫被甲醛溶液吸收后，生成稳定的羟基甲基磺酸，在样品溶液中加入氢氧化钠使加成化合物分解，释放出的二氧化硫与与盐酸副玫瑰苯胺(简称PRA)作用，生成紫红色化合物，根据颜
36、色深浅，用分光光度计在577nm处进行测定。本方法适宜测定浓度范围为0.0031.07mg/m3。最低检出限为0.2g/10ml。第69页，共105页。海南大学环境与植物保护学院 周安文n仪器仪器 （1）多孔玻板吸收管，用于短时间采样；多孔玻板吸收瓶（具50ml标线），用于24h采样。（2）恒温水浴器（3）具塞比色管：10ml。（4）空气采样器 （5）分光光度计。第70页，共105页。海南大学环境与植物保护学院 周安文n试剂试剂（1）氢氧化钠溶液，C(NaOH)=1.50mol/L。(2)环已二胺四乙酸二钠溶液，C(CDTA-2Na)=0.05mol/L（3）甲醛缓冲吸收液（4）0.60（m/
37、V）氨磺酸钠溶液（5）0.05（m/V）乙二胺四乙酸二钠盐（EDTA）溶液（6）二氧化硫标准溶液 (7)0.05（m/V）PRA溶液第71页，共105页。海南大学环境与植物保护学院 周安文n步骤步骤（一）布点 以两院校区为监测对象，以功能分区法布置采样点，将整个校园分为教职工居住区、学生居住区、商业区、交通区、旅游区等区，以每个功能区的中心为采样点，兼顾周围环境为采样的影响。同时设置背景点。第72页，共105页。海南大学环境与植物保护学院 周安文（二）采样（二）采样短时间采样：根据空气中二氧化硫浓度的高低，采用内装10mL吸收液的U形多孔玻板吸收管，以0.5Lmin的流量采样。采样时吸收液温度
38、的最佳范围在2329。24h连续采样：用内装50mL吸收液的多孔玻板吸收瓶，以0.20.3Lmin的流量连续采样24h。吸收液温度须保持在2329范围。第73页，共105页。海南大学环境与植物保护学院 周安文（三）校准曲线的绘制 取14支10mL具塞比色管，分A、B两组，每组7支，分别对应编号。A组按下表配制校准溶液系列：管号0123456二氧化硫标准溶液，mL00.501.002.005.008.0010.00甲醛缓冲吸收液，mL10.009.509.008.005.002.000二氧化硫含量，g00.501.002.005.008.0010.00第74页，共105页。海南大学环境与植物保护
39、学院 周安文 B组各管加入0.05PRA溶液1.00mL，A组各管分别加入0.60氨磺酸钠溶液0.5mL和1.50mol/L氢氧化钠溶液0.5mL，混匀。再逐管迅速将溶液全部倒入对应编号并盛有PRA溶液的B管中，立即具塞混匀后放入恒温水浴中显色。显色温度与室温之差应不超过3，根据不同季节和环境条件按下表选择显色温度与显色时间：在波长557nm处，用1cm比色皿，以水为参比溶液测量吸光度。显色温度,1015202530显色时间,min402520155稳定时间,min3525201510试剂空白吸收光度A00.030.0350.040.050.06第75页，共105页。海南大学环境与植物保护学院
40、 周安文（四）样品测定样品溶液中如有混浊物。则应离心分离除去。样品放置20min.以使臭气分解。短时间采样：将吸收管中样品溶液全部移入10mL比色管中，用吸收液稀释至标线，加0.60氨磺酸钠溶液0.5mL，混匀，放置10min以除去氮氧化物的干扰，以下步骤同校准曲线的绘制。第76页，共105页。海南大学环境与植物保护学院 周安文 连续24h采样：将吸收瓶中样品溶液移入50mL容量瓶(或比色管)中，用少量吸收溶液洗涤吸收瓶，洗涤液并入样品溶液中，再用吸收液稀释至标线。吸取适量样品溶液(视浓度高低而决定取210mL)于10mL比色管中，再用吸收液稀释至标线，加0.60氨磺酸钠溶液0.5mL，混匀，
41、放置10min 以除去氮氧化物物的干扰，以下步骤同校准曲线的制。第77页，共105页。海南大学环境与植物保护学院 周安文n计算计算式中：A样品溶液的吸光度；A0试剂空白溶液的吸光度；Bs校正因子，gSO212mLA；Vt样品溶液总体积，mL；Va测定时所取样品溶液体积，mL；Vs换算成标准状况下(0，101.325kPa)的采样体积，L。第78页，共105页。海南大学环境与植物保护学院 周安文n注意事项注意事项1.温度对显色影响较大，温度越高，空白值越大。温度高时显色快，褪色也快，最好用恒温水浴控制显色温度。2.对品红试剂必须提纯后方可使用，否则，其中所含杂质会引起试剂空白值增高，使方法灵敏度
42、降低。已有经提纯合格的0.2%对品红溶液出售。3.六价铬能使紫红色络合物褪色，产生负干扰，故应避免用硫酸-铬酸洗液洗涤所用玻璃器皿，若已用此洗液洗过，则需用（1+1）盐酸溶液浸洗，再用水充分洗涤。4.用过的具塞比色管及比色皿应及时用酸洗涤，否则红色难于洗净。具塞比色管用（1+4）盐酸溶液洗涤，比色皿用（1+4）盐酸加1/3 体积乙醇混合液洗涤。第79页，共105页。海南大学环境与植物保护学院 周安文n思考题思考题n干扰测定的物质有哪些，如何消除其影响。1.测定过程中要注意哪些因素对结果的影响，如何应对？第80页，共105页。海南大学环境与植物保护学院 周安文试验九试验九 大气中氮氧化物大气中氮
43、氧化物n目的目的：1 .掌握大气中氮氧化物的测定原理和方法 2.熟悉大气采样器的使用方法 3.熟悉分光光度计的使用第81页，共105页。海南大学环境与植物保护学院 周安文n原理原理 大气中的氮氧化物主要是一氧化氮和二氧化氮。在测定大气中氮氧化物浓度时，先用三氧化铬氧化管将一氧化氮氧化成二氧化氮，二氧化氮经吸收，在水中形成亚硝酸，亚硝酸与对氨基苯磺酸起重氮反应，再与盐酸萘乙二胺偶合，生成玫瑰红偶氮染料，根据颜色的深浅，定量测定。第82页，共105页。海南大学环境与植物保护学院 周安文n仪器仪器 1.多孔玻板吸收管 2.KC-6120大气综合采样器 3.双球玻璃管（内装三氧化铬-砂子）4.比色管
44、5.分光光度计 6.气压计第83页，共105页。海南大学环境与植物保护学院 周安文n试剂试剂 1.吸收液 2.三氧化铬-砂子氧化管 3.亚硝酸钠标准溶液第84页，共105页。海南大学环境与植物保护学院 周安文n步骤步骤一）布点 以两院校区为监测对象，以功能分区法布置采样点，将整个校园分为教职工居住区、学生居住区、商业区、交通区、旅游区等区，以每个功能区的中心为采样点，兼顾周围环境为采样的影响。同时设置背景点。第85页，共105页。海南大学环境与植物保护学院 周安文（二）采样测定 1）采样 将一支内装5.00mL吸收液的多孔玻板吸收管进气口接三氧化铬-砂子氧化管，并使管口略微向下倾斜，以免当湿空
45、气将三氧化铬弄湿时污染后面的吸收液。将吸收管的出气口与空气采样器相连接。以0.20.3L/min的流量避光采样至吸收液呈微红色为止，记下采样时间，密封好采样管，带回实验室，当日测定。若吸收液不变色，应延长采样时间，采样量应不少于6L。在采样的同时，应测定采样现场的温度和大气压力，并做好记录。第86页，共105页。海南大学环境与植物保护学院 周安文2）标准曲线绘制 取7支10mL具塞比色管，按下表所列数据配制标准色列。按表中要求加好试剂后，摇匀，避开阳光直射，放置15min，用1cm比色皿，与540nm处，以水为参比，测定吸光度。管号0123456NO2标准溶液（5g/ml）00.100.200
46、.300.400.500.60吸收原液（ml）4.004.00 4.00 4.00 4.00 4.00 4.00水（ml）1.000.900.800.700.600.500.40NO2含量（g）00.51.01.52.02.53.0第87页，共105页。海南大学环境与植物保护学院 周安文3）测定 采样后，将吸收液移入比色皿中，用标准曲线的绘制方法测定吸光度。第88页，共105页。海南大学环境与植物保护学院 周安文n计算计算 式中：A为样品溶液吸光度;A0为试剂空白溶液吸光度；b为回归方程式的斜率；Vr为换算为参比状况（25，101.3kPa）下的采样体积（L）；0.76为NO2(气)转换为NO
47、2（液）的系数。第89页，共105页。海南大学环境与植物保护学院 周安文n注意事项注意事项1吸收液应避光，且不能长时间暴露在空气中，以防止光照时吸收液显色或吸收空气中的氮氧化物而使试管空白值增高。2.在使用过程中，应经常注意氧化管是否吸湿引起板结，或者变为绿色。若板结会使采样系统阻力增大，影响流量；若变成绿色，表示氧化管已失效。第90页，共105页。海南大学环境与植物保护学院 周安文试验十 总磷的测定 在天然水和废水中，磷几乎都以各种磷酸盐的形式存在，他们分为正磷酸盐，缩合磷酸盐和有机结合的磷，他们存在于溶液中，腐殖质粒子中或水生生物钟。水体中磷的含量超过0.2mg/L，可造成藻类的过度繁殖，
48、影响水质，导致水体富营养化的形成。第91页，共105页。海南大学环境与植物保护学院 周安文n目的目的1.掌握水样的消解2.掌握总磷的测定方法第92页，共105页。海南大学环境与植物保护学院 周安文n原理原理 在中性条件下用过硫酸钾使试样消解，将所含磷全部氧化为正磷酸盐。在酸性介质中，正磷酸盐与钼酸铵反应，在锑盐存在下生成磷钼杂多酸后，立即被抗坏血酸还原，生成蓝色的络合物。第93页，共105页。海南大学环境与植物保护学院 周安文n仪器仪器1.医用手提式蒸气消毒器或一般压力锅(1.11.4kgcm2)2.50mL具塞(磨口)刻度管3.分光光度计。第94页，共105页。海南大学环境与植物保护学院 周
49、安文n试剂1.（11）硫酸2.10%抗坏血酸3.钼酸盐溶液4.浊度一色度补偿液5.磷标准使用溶液第95页，共105页。海南大学环境与植物保护学院 周安文n采样采样1.采取500mL水样后加入硫酸调节样品的pH值 1；或不加任何试剂于冷处保存 注：含磷量较少的水样，不要用塑料瓶采样，因易磷酸盐吸附在塑料瓶壁上。2.取25mL样品于具塞刻度管中。取时应仔细摇匀，以得到溶解部分和悬浮部分均具有代表性的试样。如样品中含磷浓度较高，试样体积可以减少。第96页，共105页。海南大学环境与植物保护学院 周安文n分析步骤分析步骤1.消解 向25ml水样中加4mL过硫酸钾，将具塞刻度管的盖塞紧后，用一小块布和线
50、将玻璃塞扎紧(或用其他方法固定)，放在大烧杯中置于高压蒸气消毒器中加热，待压力达1.1kgcm2，相应温度为120时、保持30min后停止加热。待压力表读数降至零后，取出放冷。然后用水稀释至标线。第97页，共105页。海南大学环境与植物保护学院 周安文2.工作曲线的绘制 取7支具塞刻度管分别加入0.0，0.50，1.00，3.00，5.00，10.0，15.0mL磷酸盐标准溶液，加水至25mL。加4mL过硫酸钾，同水样做同样处理消解。以水做参比，测定吸光度。扣除空白试验的吸光度后，和对应的磷的含量绘制工作曲线。第98页，共105页。海南大学环境与植物保护学院 周安文3.显色测定 分别向各份消解
