1、1实验01-1 植物组织中自由水和束缚水含量的测定一、实验原理 将植物组织浸入高浓度（低水势）蔗糖溶液中并达到平衡后，自由水可全部扩散到外部糖液中，导致外部糖液的质量增加，同时浓度降低。用浓度降低了的糖液的质量减去原来高浓度糖液的质量即得到来自植物组织中的自由水的质量。以植物组织的总含水量减去自由水含量，便可得到束缚水的含量。2二、材料、设备与试剂（一）实验材料 油菜（二）设备 打孔器；移液器；手持测糖仪等。（三）试剂 蔗糖溶液（60g/100g）3三、实验步骤（一）植物组织总含水量的测定4 (1)取带密封皮头的干燥注射器于电子天平上准确称质量：W1。(2)用打孔器打取小叶圆片50片(植物材料
2、的选取同上)，装入注射器中，带皮头称质量为W2。(3)用注射器吸入约5mL蔗糖溶液，带上密封皮头再准确称质量为W3。(4)抽拉注射器进行减压处理1小时。(5)手持测糖仪分别测定蔗糖原液浓度（C1）和注射器中糖液浓度（C2）。（二）植物组织中自由水含量的测定5自由水的含量(%)=四、结果计算6注意事项：1.清洗植物组织后应注意用吸水纸擦干其表面的游离水分。2.植物组织与外部溶液之间达到充分平衡。7一、实验原理 将植物组织分别放在一系列浓度递增的溶液中，当找到某一浓度的溶液与植物组织之间水分保持动态平衡时，则可认为该溶液的水势（渗透势）等于植物组织的水势。由于溶液浓度是已知的，可以根据公式计算出溶
3、液的渗透势()，即代表植物组织的水势(w)。8二、材料、设备与试剂（一）实验材料 油菜（二）设备 打孔器；青霉素小瓶；带橡皮管的注射针头等。（三）试剂 1.0.05mol/kg、0.10mol/kg、0.15mol/kg、0.20mol/kg、0.25mol/kg、0.30mol/kg蔗糖溶液。2.甲烯蓝粉末。9三、实验步骤10三、实验步骤11 3.经一定时间后，用注射针头吸取各瓶蓝色糖液少许，将针头插入对应浓度的无色糖液中部，小心地放出少量液流，观察蓝色液流的升降动向（用待测浓度清洗针头)。12注意事项：1.叶片表面不能有游离水分。2.植物组织与外液之间达到平衡。3.往乙组溶液（白色）中释放
4、蓝色液流时，不可震动小瓶。根系活力的测定根系活力的测定(TTC法法)植物生理生化教研室 曾汉来 2012.03.12一、实验目的一、实验目的H2O无机盐提供合成所需能量;合 成 氨 基 酸 和 植 物 激 素（ABA、CTK、GA等）根的生长情况和活力水平直接影响地上部的生长测定根系活力，为植物生长状况、营养供应研究提供依据。理解植物根系活力的内涵理解植物根系活力的内涵掌握掌握TTC法测根系活力的原理与方法法测根系活力的原理与方法二、实验原理二、实验原理氯化三苯基四氮唑（TTC）的标准氧化电位为80mV的氧化还原物质，获得H的能力强。溶于水为无色溶液，还原后即生成红色而不溶于水的三苯基甲腙（T
5、TF）。生成的TTF比较稳定，不会被空气中的氧自动氧化，可用分光光度法定量测定。TTCTTF根系活力脱氢酶活性丙二酸碘乙酸琥珀酸延胡索酸苹果酸 促进抑制（无色，溶于水）（红色，不溶于水）三、实验材料三、实验材料 水培或砂培小麦、玉米等植物根系。水培或砂培小麦、玉米等植物根系。四、实验步骤四、实验步骤制作制作TTC标准曲线标准曲线吸取不同量的 TTC加入10mL容量瓶Na2S2O4TTC全部还原乙酸乙酯乙酸乙酯定容0.25mL0.50mL1.00mL1.50mL2.00mLTTC含量（g）2550100150200乙酸乙酯作参比，测定485nm下光密度值，绘制标准曲线四、实验步骤四、实验步骤测定
6、根系活力测定根系活力0.2-0.3g根尖样品(2-3cm长)0.4TTC、磷酸缓冲液各5ml 根充分浸没于溶液中37下暗保温40-60min加入1mol/L硫酸2ml取出根吸干水分与34ml乙酸乙酯在研钵内磨碎红色提取液移入试管且用乙酸乙酯定容到10ml空白试验作参比测485nm下吸光度空白实验：根样品先加硫酸，其他操作相同。查标准曲线，TTC还原量(mg)五、实验结果五、实验结果TTC还原能力（mg/g(根鲜重)/h）四氮唑还原量（mg）根重（g）时间(h)六、思考题六、思考题 1.1.植物的根系活力与地上部分的关系植物的根系活力与地上部分的关系?2.2.本实验中为什么要用磷酸缓冲液和本实验
7、中为什么要用磷酸缓冲液和3737处理？处理？3.3.测定根系活力时最好选择根的哪个部位？测定根系活力时最好选择根的哪个部位？为什么？为什么？4.4.本实验的根系活力指标的实质是什么？本实验的根系活力指标的实质是什么？5.5.对对TTCTTC的特性及显色反应原理要清楚。的特性及显色反应原理要清楚。环境因素对光合作用的影响环境因素对光合作用的影响 植物生理生化教研室 曾汉来 2012.03.12实验目的实验目的 观察体验光照强度、温度和二氧化碳浓度观察体验光照强度、温度和二氧化碳浓度对光合作用强度（速率）的影响。对光合作用强度（速率）的影响。实验原理多种酶参与上表皮下表皮植物本身：光合器官发育状况
8、、发育时期外因：光照强度、光质等CO2浓度温度水影响光合作用的因素矿质元素病虫、污染等 植物光合作用强度受光强、二氧化碳浓度、温度等环境条植物光合作用强度受光强、二氧化碳浓度、温度等环境条件的影响；件的影响；以植物叶片为材料时利用减压渗入法排除细胞间隙空气，以植物叶片为材料时利用减压渗入法排除细胞间隙空气，充以水分，可使叶片沉于水中；充以水分，可使叶片沉于水中；光合作用放出氧气，光合作用放出氧气，O O2 2在水中溶解度很小，而在细胞间和在水中溶解度很小，而在细胞间和叶表面积累，结果使原来下沉的叶片上浮，根据上浮时间叶表面积累，结果使原来下沉的叶片上浮，根据上浮时间长短即能比较光合作用强弱。长
9、短即能比较光合作用强弱。实验原理实验材料和试剂 材料:小白菜健壮、叶龄相同的新鲜成熟叶片 无CO2水：冷开水（少CO2）饱和CO2水：0.5%NaHCO3水实验步骤实验步骤1.选取健壮、叶龄相同的新鲜成熟叶片,用直径为1cm的打孔器(避开叶脉)打下小圆片50片。置于注射器中,加水减压，至圆片全部下沉为止,在烧杯中用水进行检查，选下沉叶圆选下沉叶圆片放在暗处备用。？片放在暗处备用。？减压减压取理效果2.取取4 4只锥形瓶编号只锥形瓶编号,其中其中1 1号加号加40ml40ml冷开水冷开水,2,2、3 3、4 4号加入号加入40mlNaHCO40mlNaHCO3 3水。各放入水。各放入1010个叶
10、圆片（快速！）个叶圆片（快速！）。按如下处理：。按如下处理：瓶号瓶号 光照光照 温度温度 二氧化碳二氧化碳 放置位置放置位置 1 1 强强 室温室温 -灯光下灯光下 2 2 弱弱 室温室温 +室内避光室内避光 3 3 强强 低温低温 +灯光下冰灯光下冰盘中盘中 4 4 强强 室温室温 +灯光下灯光下实验结果实验结果小圆片开始上浮结果记录：结果记录：4 4号瓶中小圆片全部上浮时（约号瓶中小圆片全部上浮时（约5-8min)5-8min)，统计其它各处理小圆片上浮数量，统计其它各处理小圆片上浮数量，或某一定时间内各处理上浮的小圆片个数。或某一定时间内各处理上浮的小圆片个数。结论与分析结论与分析比较不
11、同条件下光合作用的强弱。根据结果分析光强、温度和二氧化碳对光合作用的影响。实验实验3-1 红外线红外线CO2气体分析仪（气体分析仪（CB-1101）法测定植物光合速率）法测定植物光合速率一、实验目的 理解植物光合速度测定的方法 掌握红外线CO2分析仪测定植物光合速率的原理 了解红外线CO2分析仪的操作方法本实验利用本实验利用CO2的变化的变化来测定。来测定。二、实验原理 许多由异原子组成的气体分子对红外线都有特异的吸收带。CO2的红外吸收带有四处，其吸收峰分别在2.69m、2.77m、4.26m和14.99m处，其中只有4.26m的吸收带不与H2O的吸收带重叠，红外仪内设置仅让4.26m红外光
12、通过的滤光片，当该波长的红外光经过含有CO2的气体时，能量就因CO2的吸收而降低，降低的多少与CO2的浓度有关，并服从朗伯-比尔定律。分别供给红外仪含与不含CO2的气体，红外仪的检测器便可通过检测红外光能量的变化而输出反映CO2浓度的电讯号。采用开放式气路系统：该系统用双气室IRGA,以气泵为动力，将流经同化室前的空气（参比气）泵入一个气室，流经同化室后的空气（样本气）泵入另一个气室（分析气室），最后将气体排空，由仪器指示参比气和样本气的CO2浓度差，根据流量、同化室中叶片的面积，求出叶片的光合速率。泵流量计 进气样品IRGA（C2）参比IRGA(C1)叶室参比室排气 植物材料植物材料：小白菜
13、或者甘蓝型油菜：小白菜或者甘蓝型油菜 仪器：仪器：CB-1101红外线红外线CO2气体分析仪气体分析仪三、材料三、材料与主要仪器与主要仪器CB-1101CB-1101操作面板及气路图四、实验步骤四、实验步骤1、仪器组装及调零：、仪器组装及调零：，打开电源预热5 min打开气泵开关用碱石灰管分别连接面板上的“OUT”和“IN”。利用CO2调零调零调试仪器。调试仪器。2、样品测定：、样品测定：将叶片正确放入叶室，并封闭叶室。将叶片正确放入叶室，并封闭叶室。打开开路开关按下初测按钮待数值稳定后按下测终按钮待数值稳定后按下完成按钮记录测定结果【需要记录起始CO2浓度浓度C1、测定完成后、测定完成后CO
14、2浓度浓度C2，叶面温，叶面温度度t，气体流速，气体流速V】五、原始记录五、原始记录 V，C1，C2，S，t V为气体流速，单位 L/min;C1，C2为测定启始和反应完成后的CO2浓度，单位 L/L；S为光合测定的叶面积，单位为m2，本实验固定为6.510-4 m2；P为气压，单位 bar；t为同化室叶片表面温度，单位。S六、结果计算六、结果计算Pn-净光合速率（单位为molm-2s-1）Pn(mmol CO2/m2S)=V(C1-C2)273P60S22.4(273+t)1.013七、分析讨论七、分析讨论1、测定时为何需要从高空采气？、测定时为何需要从高空采气？2、计算的结果为净光合速率，
15、为什么？、计算的结果为净光合速率，为什么？3、本方法是否可以用于测定植物的呼吸速率，、本方法是否可以用于测定植物的呼吸速率，如果要测定呼吸速率操作过程中应注意什么？如果要测定呼吸速率操作过程中应注意什么？4、如果要测定植物的实际光合速率，应如何、如果要测定植物的实际光合速率，应如何操作？操作？5、结合结合自已的自已的植物光合速率结果进行分析讨植物光合速率结果进行分析讨论。论。实验实验3-2 叶绿素含量的测定叶绿素含量的测定一、实验目的二、实验原理1、吸光度具有加和性：混和溶液在某一波长下的吸光度为各组分在该波长下吸光度之和。不同组分在某波长下具有不同的吸光系数。2、叶绿素在红光区具有最大吸收峰
16、，但在不同溶剂下有不同的最大吸收峰波长 在95%乙醇中，叶绿素a和叶绿素b的最大吸收峰的波长分别为665 nm和649nm，两者的浓度可根据以下方程组计算求得：Ca=13.95A6656.88A649 Cb=24.96A6497.32A665三、三、实验实验材料材料与仪器与仪器 实验材料实验材料：小白小白菜叶片或油菜叶片菜叶片或油菜叶片 主要仪器：分光光度计主要仪器：分光光度计四、实验步骤称取叶片称取叶片0.050.1g，剪碎或撕剪碎或撕碎后碎后放入放入10mL刻度试管中，加入刻度试管中，加入56mL 95%乙醇，置乙醇，置80水浴锅中，至组织水浴锅中，至组织完全完全变变白，取出冷却白，取出冷
17、却。用用95%乙醇定容至乙醇定容至10mL，摇匀。以摇匀。以95%乙醇为空白，在波长乙醇为空白，在波长665nm、649nm下测定吸光度。下测定吸光度。五、原始数据记录五、原始数据记录 A665，A649，W，V六六、结果计算结果计算Ca (mg/L)=13.95A665 6.88A649 Cb (mg/L)=24.96A649 7.32A665 叶绿素总浓度叶绿素总浓度(mg/L)=Ca +Cb 叶绿素的比值叶绿素的比值=Ca Cb=CVNW1000叶绿叶绿素的素的含量(mg/g)七、分析讨论七、分析讨论1、结合叶绿素的比值和叶绿素的含量进行分结合叶绿素的比值和叶绿素的含量进行分析讨论。析讨
18、论。2、叶绿素在蓝光区也有吸收峰，为何不用蓝、叶绿素在蓝光区也有吸收峰，为何不用蓝光波长进行比色测定？光波长进行比色测定？实验实验4-1 微量定容测压法微量定容测压法测定植物的呼吸速率测定植物的呼吸速率一、原理一、原理:1.在密闭、定温及固定体积的系统中，在密闭、定温及固定体积的系统中，当气体被吸收时，气体分子减少，压力降低。当气体被吸收时，气体分子减少，压力降低。相反，当产生气体时，压力上升。压力的变相反，当产生气体时，压力上升。压力的变化可以用微量检压计测出，并可据此计算气化可以用微量检压计测出，并可据此计算气体吸收或释放的数量。因此，微量检压计可体吸收或释放的数量。因此，微量检压计可用以
19、研究呼吸作用、光合作用及与用以研究呼吸作用、光合作用及与O2、CO2及其它气体交换相关的反应如某些酶的活性及其它气体交换相关的反应如某些酶的活性等。等。一、原理一、原理:2.由于在呼吸过程中吸收氧气和产生二由于在呼吸过程中吸收氧气和产生二氧化碳是同时进行的，所以从压力计上所观氧化碳是同时进行的，所以从压力计上所观察到的压力变化是氧的吸收量和二氧化碳释察到的压力变化是氧的吸收量和二氧化碳释放量的总结果。若在反应瓶中加入碱液（如放量的总结果。若在反应瓶中加入碱液（如氢氧化钾），呼吸时所产生的二氧化碳被碱氢氧化钾），呼吸时所产生的二氧化碳被碱吸收，则可由压力的变化计算出氧的吸收量。吸收，则可由压力的
20、变化计算出氧的吸收量。二、材料、仪器设备二、材料、仪器设备及试剂及试剂（一）材料：萌发的小（一）材料：萌发的小麦种子。麦种子。（二）仪器设备：（二）仪器设备：1.1.瓦瓦布格呼吸计（微量呼吸布格呼吸计（微量呼吸检压计）；检压计）；2.2.移液管；移液管；3.3.量筒；量筒；4.4.小镊子；小镊子；5.5.橡皮筋；橡皮筋；6.6.吸水纸吸水纸二、材料、仪器设备及试剂二、材料、仪器设备及试剂（三）试剂：（三）试剂：1.201.20KOHKOH；2.2.凡士林；凡士林；3.Brodie3.Brodie氏溶液：氏溶液：NaCl 23gNaCl 23g，牛胆酸，牛胆酸钠钠5g5g，溶于，溶于500ml5
21、00ml水中，另加少许染料水中，另加少许染料（酸性品红）使溶液染色，并加数滴浓（酸性品红）使溶液染色，并加数滴浓麝香草酚乙醇溶液作为防腐剂麝香草酚乙醇溶液作为防腐剂。三、三、实验步骤实验步骤（一）种子吸氧量的测定（测压计用）（一）种子吸氧量的测定（测压计用）1.1.种子处理：种子处理：取发芽小麦种子取发芽小麦种子6-86-8粒，用吸水纸将种子粒，用吸水纸将种子表面水分吸干，称其鲜重（表面水分吸干，称其鲜重（W W）。）。用排水法测定其体积（用排水法测定其体积（V V种子种子）：取）：取10ml10ml量量筒，内盛约筒，内盛约5ml5ml的水，将种子充分放入量筒的水，将种子充分放入量筒内，二次水
22、分体积之差即为种子体积。内，二次水分体积之差即为种子体积。将种子取出，再次用吸水纸吸干附在种子将种子取出，再次用吸水纸吸干附在种子外表的水分，将种子放入反应瓶的底部，并外表的水分，将种子放入反应瓶的底部，并往反应瓶底部加入往反应瓶底部加入0.5ml0.5ml水。水。三、三、实验步骤实验步骤2.2.反应瓶及压力计处理：反应瓶及压力计处理：在中央小槽内加入在中央小槽内加入2020KOH 0.2mlKOH 0.2ml，用以，用以吸收吸收COCO2 2。为了增大吸收。为了增大吸收COCO2 2的能力，可将的能力，可将1cm1cm2cm2cm滤纸折叠后插入中央小槽内，并在滤纸折叠后插入中央小槽内，并在中
23、央小槽口上涂少量凡士林，防止碱液逸出。中央小槽口上涂少量凡士林，防止碱液逸出。侧管的玻璃棒涂以凡士林后塞紧。压力计侧管的玻璃棒涂以凡士林后塞紧。压力计口亦涂上凡士林和反应瓶连接，转动反应瓶，口亦涂上凡士林和反应瓶连接，转动反应瓶，使封口凡士林呈透明为止，然后用橡皮筋将使封口凡士林呈透明为止，然后用橡皮筋将反应瓶固定在压力计上。反应瓶固定在压力计上。三、三、实验步骤实验步骤3.3.压力计及反应瓶与水槽间温度的平衡：将压力计及反应瓶与水槽间温度的平衡：将压力计固定在水槽上，并打开压力计活塞。压力计固定在水槽上，并打开压力计活塞。设置恒温水槽温度，启动水槽搅拌装置并启设置恒温水槽温度，启动水槽搅拌装
24、置并启动转盘振荡，使压力计平衡动转盘振荡，使压力计平衡101015min15min。在。在此过程中要注意检查反应瓶是否漏气。此过程中要注意检查反应瓶是否漏气。三、三、实验步骤实验步骤4.4.测定与读数：当反应瓶内温度与水槽温度测定与读数：当反应瓶内温度与水槽温度平衡后，停止振荡，将压力计上的活塞关闭平衡后，停止振荡，将压力计上的活塞关闭并重新开始振荡，记录开始时间。每隔并重新开始振荡，记录开始时间。每隔15min15min记录压力计左侧毛细管记录压力计左侧毛细管BrodieBrodie液面高液面高度（度（h ）。读数时暂停振荡，并将压力计）。读数时暂停振荡，并将压力计的右管液面调至的右管液面调
25、至150mm150mm处，记录左管液面高处，记录左管液面高度，共计四次（共度，共计四次（共1h1h）。）。三、三、实验步骤实验步骤（二）空白实验与测压计压力值校正（二）空白实验与测压计压力值校正 由于压力计左管口与大气相通，实验时由于压力计左管口与大气相通，实验时室内气压或水槽温度微小变化对读数均有影室内气压或水槽温度微小变化对读数均有影响，为此，必须进行校正。响，为此，必须进行校正。校正方法：反应瓶中除不加种子外，校正方法：反应瓶中除不加种子外，其他处理、测定及读数与测压计完全相同其他处理、测定及读数与测压计完全相同（即空白实验，作温压计用）；由测压计（即空白实验，作温压计用）；由测压计读数
26、与温压计读数的差值求得测压计的实际读数与温压计读数的差值求得测压计的实际压力值（校正值）。压力值（校正值）。四、四、结果计算结果计算（一）反应瓶常数（一）反应瓶常数（k，l l/mm）计算：）计算：其中，其中，V Vg gV V总总V Vf fV V种子种子 (l)l)V总：反应瓶（至连接的压力计右侧臂150mm处）的总体积（可根据反应瓶出厂编号查知）；Vf：反应瓶中液体体积（本实验中包括加入的KOH和水的体积）；V种子：实验所用种子体积；T：实验体系的绝对温度；：压力为1atm、温度为T时气体（本实验为O2）的溶解度（可查表获知）；P0：以Brodie液表示的标准压力（约为10000mm）。
27、四、结果计算四、结果计算（二）呼吸速率计算：（样品耗氧的）呼吸速率（l/gh）h h K/Wt。其中，h hK为根据实际压力差值（h，mm）求出的氧气的吸收量（l）；W为鲜样品质量（g）；t为反应时间（h）五、分析讨论五、分析讨论主要注意事项：1.1.操作中切勿对种子造成物理或化学损伤；操作中切勿对种子造成物理或化学损伤；2.2.压力计为精密玻璃仪器，须防止损坏；压力计为精密玻璃仪器，须防止损坏；3.3.压力计与反应瓶编号要配套一致；压力计与反应瓶编号要配套一致；4.4.压力计及反应瓶必需保证气密性良好；压力计及反应瓶必需保证气密性良好；5.5.压力计读数时应暂停振荡，且不可将活塞压力计读数时
28、应暂停振荡，且不可将活塞打开，也不可将压力计从水槽上卸下。打开，也不可将压力计从水槽上卸下。思考题：思考题：1.1.本实验中为什么要设计温压计？本实验中为什么要设计温压计？2.2.反应瓶常数反应瓶常数k k与哪些因素有关？本实验是如与哪些因素有关？本实验是如何满足其条件的？何满足其条件的？实验4-2 小篮子法（广口瓶法）测定植物呼吸速率一、原理 植物呼吸时会放出CO2，一定量的植物样品在单位时间内放出CO2的数量，即可作为该样品的呼吸速率。植物呼吸过程中放出的CO2可用氢氧化钡溶液吸收，呼吸过程结束后用已知浓度的草酸溶液滴定剩余的碱液，从空白和样品二者消耗草酸溶液之差即可计算出呼吸过程中释放的
29、CO2的量。二、材料、设备仪器及试剂（一）材料：发芽的小麦种子。（二）仪器设备：1.呼吸测定装置；2.天平；3.钟表；4.酸式及碱式滴定管；5.温度计（三）试剂：1）0.05mol/L 左右的Ba(OH)2：Ba(OH)2 8.6g溶于1000ml蒸馏水中；2）144 mol/L 草酸溶液：准确称取重结晶的H2C2O42H2O 2.8651g溶于蒸馏水中并定容至1000ml（每ml相当于1mg CO2）；3）酚酞指示剂：1g酚酞溶于100ml 95乙醇中，贮于滴瓶中。三、实验步骤 1.取500ml广口瓶一个，瓶口用打有三孔的橡皮塞塞紧，一孔插一盛碱石灰的干燥管，使呼吸过程中能进入无CO2的空气
30、，一孔插温度计，另一孔直径约1cm，供滴定用，平时用一小橡皮塞塞紧，瓶塞下面挂一铁丝纱小篮，以便装植物样品，整个装置即为广口瓶呼吸测定装置。三、实验步骤 2.向广口瓶内加入0.05mol/L 的Ba(OH)2溶液20ml，立即塞紧橡皮塞（不带小篮），充分摇动广口瓶2min，使瓶内CO2全部被吸收，拔出小橡皮塞，加入酚酞指示剂2滴后摇匀，把滴定管插入孔中，用标准草酸溶液进行空白滴定，直到红色刚刚消失为止。记录滴定所用草酸的量（V0，ml）三、实验步骤 3.倒出瓶中废液，用无CO2的蒸馏水（煮沸过的）洗净后，重加上述Ba(OH)2溶液20ml。称取5g左右的发芽小麦种子（称前须擦干种子表面水分），
31、装入小篮子中，挂于橡皮塞下，塞紧瓶塞并开始记录时间，经过2030min，其间轻轻摇动数次（以破坏溶液表面的BaCO3薄膜，利于充分吸收CO2）。到预订时间后，打开塞子，将装有植物材料的小篮子迅速取出，向瓶内加入2滴酚酞指示剂，立即塞紧塞子，摇匀后用草酸滴定，方法如前。记录滴定所用草酸的量（Vs，ml）。四、结果计算 样品的呼吸速率（mg CO2/gh）（V0Vs）1/(Wt)式中，V0：空白滴定用去的草酸量（ml）；Vs：样品滴定用去的草酸量（ml）；W：样品鲜重（g）；t：测定时间（h）。1表示滴定所用每毫升144mol/L 的草酸相当于1mgCO2。五、分析讨论主要注意事项：1.操作过程中
32、应防止实验人员口中呼出的气体进入广口瓶；2.应避免对植物材料造成理化损伤；3.摇动广口瓶时应小心，防止小篮子掉入碱液中。思考题：在本实验中要准确测定呼吸速率，还需要注意哪些方面的问题？77实验05-01 植物种子生命力的快速测定 在农业生产中，种子是最基本的生产资料，只有具有生命力的种子才能发芽、成苗。因此，测定种子的生命力特别是种子活力是生产中最为关心的问题之一。78 TTC法 一、实验原理 TTC(2,3,5-三苯基氯化四氮唑)的氧化态是无色的，可被氢还原成不溶于水的红色三苯甲腙(TTF)：应用TTC溶液浸泡种子，使之渗入种胚细胞内，如果种胚具有生命力，其中的脱氢酶就可以将TTC作为受氢体
33、使之还原成为三苯甲腙而呈红色，根据种胚着色情况可鉴定种子的生命力。79二、材料、设备与试剂（一）实验材料 小麦、玉米种子 （二）设备 1.小烧杯；2.刀片；3.镊子；4.温箱（三）试剂 0.5 g/100mL TTC溶液 80三、实验步骤81 根据种胚的染色情况判断种子活力并统计死活种子的百分率。五、注意事项染色结束后要立即进行鉴定，因放久会褪色。四、结果记录与分析82 染料染色法 一、实验原理 有生命力的种子胚细胞的原生质膜具有半透性，有选择吸收外界物质的能力，染料一般不能进入细胞内，胚部不染色；丧失生命力的种子，其胚部细胞原生质膜丧失了选择吸收能力，染料可自由进入细胞内使胚部染色。因此，可
34、根据种子胚部是否被染色来判断种子的生命力。83二、材料、设备与试剂（一）实验材料 小麦、玉米种子 （二）设备 1.小烧杯；2.刀片；3.镊子。（三）试剂 5%红墨水 84三、实验步骤85 根据种胚的染色情况判断种子活力并统计死活种子的百分率。五、注意事项 染料的浓度要适当，染色时间不能太长(如用红墨水染色，只需510min即可)，否则不易区别染色与否。四、结果记录与分析86实验05-02 谷物淀粉含量测定（旋光法）淀粉不仅是重要的营养物质，也是重要的工业原料之一。测定淀粉含量对于鉴定农产品品质和改进农业技术具有重要意义。87一、实验原理 淀粉在盐酸的作用下可水解成葡萄糖，葡萄糖具有旋光性，根据
35、旋光性的大小可计算出淀粉含量。二、材料、设备与试剂（一）材料 小麦面粉 （二）设备 旋光仪、天平、水浴锅、容量瓶、试管等（三）试剂 1.12%HCl；30%硫酸锌；15%亚铁氰化钾 88三、实验步骤 干滤纸过滤，收集滤干滤纸过滤，收集滤液液89 ：样品旋光度；：小麦面粉比旋光度（+182.7）；L：测定管长度（dm）；W：样品质量（g）四、结果计算100100%20=WLD）样品淀粉含量（20D90 五、注意事项 1、面粉水解时从水浴沸腾开始计时，以保证淀粉被充分水解；必要时，可以KI-I2试剂检测淀粉是否水解完全；2、定容时如溶液中泡沫较多，可加1-2滴乙醇消除泡沫。91实验6-1 脯氨酸含
36、量的测定一、目的二、原理 当用磺基水杨酸提取植物样品时，脯氨酸便游离于磺基水杨酸的溶液中。加入酸性茚三酮加热处理后，溶液即成红色，再用甲苯处理，则色素全部转移至甲苯中，色素的深浅即表示脯氨酸含量的高低。在520 nm 波长下比色，用回归方程计算出脯氨酸含量。AB5 mL实验流程AB 吸取上清吸取上清2 mL分别称取分别称取0.5 g冷却冷却加加4ml甲苯甲苯再次煮沸再次煮沸30minA520水稻幼苗水稻幼苗A、常温处理常温处理B、40处理处理处理处理30 min沸水浴沸水浴10 min后，冷却。后，冷却。各吸取各吸取2 mL各吸取各吸取2 mLX VT W VS 106 1000 99实验6-
37、2 植物抗逆性鉴定（电导仪法）一、目的二、原理 在正常情况下，细胞膜对物质具有选择透性能力。在高温或低温、干 旱、盐渍、病原菌侵染后，细胞膜遭到破坏，膜透性增大，从而使细胞内的电解质外渗，植物细胞浸提液的电导率增大。膜透性增大的程度与逆境胁迫程度和植物抗逆性的强弱有关。比较不同作物或同一作物不同品种在相同胁迫温度下膜透性的增大程度，即可比较作物间或品种间的抗逆性强弱。因此，电导法目前已成为一种鉴定植物抗逆性强弱的标准方法。电导率电导率的计算公式：的计算公式：K=G x Q,G 为电导，为电导，Q为电极常数。为电极常数。操作步骤：操作步骤：1.温度设定：温度设定：25。2.选择最低量程和校正档，
38、选择最低量程和校正档，旋转常旋转常数旋钮，进行电极常数调节。数旋钮，进行电极常数调节。3.选择适宜量程，测定电导率。选择适宜量程，测定电导率。注意：注意：电极不要接触管底部或管壁。电极不要接触管底部或管壁。处理电导率处理电导率对照电导率对照电导率100100八、注意事项八、注意事项序号序号周次周次实验项目名称实验项目名称1 13 31 1 植物组织自由水与束缚水含量测定植物组织自由水与束缚水含量测定2-2-植物组织水势测定植物组织水势测定-小液流法小液流法2 25 56 6 植物根系活力测定（植物根系活力测定（TTCTTC法）法）10 10 环境因子对光合作用的影响环境因子对光合作用的影响3
39、37 716-16-红外红外COCO2 2分析法测光合速率分析法测光合速率12 12 叶绿素含量测定叶绿素含量测定4 49 921 21 微量测压法测定种子的呼吸速率微量测压法测定种子的呼吸速率22 22 小篮子法测定植物的呼吸速率小篮子法测定植物的呼吸速率5 5151534 34 淀粉含量的测定（旋光法）淀粉含量的测定（旋光法）36 36 种子活力的快速鉴定（种子活力的快速鉴定（TTCTTC、红墨水法）、红墨水法）6 6171759 59 植物抗逆性快速测定植物抗逆性快速测定-脯氨酸含量测定脯氨酸含量测定61 61 电导法快速测定植物的抗逆性电导法快速测定植物的抗逆性20122012年春年春 植物生理学实验课程植物生理学实验课程20122012年春年春 植物生理学实验课程考试题型植物生理学实验课程考试题型一、名词解释：一、名词解释：二、填空题：二、填空题：三、判断题：三、判断题：四、问答题：四、问答题：五、分析说明与设计题：五、分析说明与设计题：
