1、肠道杆菌肠道杆菌学习学习要求要求名词解释：肥达反应名词解释：肥达反应掌握大肠埃希菌的致病性与卫生学意义掌握大肠埃希菌的致病性与卫生学意义掌握志贺菌属和沙门菌属致病物质、所掌握志贺菌属和沙门菌属致病物质、所致疾病致疾病1第1页，共50页。共同特性共同特性n 1 1、G G-，杆菌，无芽胞，多数有鞭毛、菌毛，杆菌，无芽胞，多数有鞭毛、菌毛，少数有荚膜。少数有荚膜。n 2 2、营养要求低营养要求低，普通平板上生长良好。普通平板上生长良好。n 3 3、生化反应活泼生化反应活泼n 鉴别肠道致病菌与非致病菌鉴别肠道致病菌与非致病菌乳糖发酵试验乳糖发酵试验 肠道致病菌肠道致病菌阴性阴性，不分解乳糖，不分解乳
2、糖 肠道非致病菌肠道非致病菌阳性阳性，分解乳糖，分解乳糖2第2页，共50页。共同特性共同特性n4 4、抗原结构抗原结构：菌体菌体(O)O)抗原抗原 鞭毛鞭毛(H)H)抗原抗原 荚膜或包膜荚膜或包膜(K)K)抗原抗原n5 5、抵抗力抵抗力：不强：不强n6 6、变异：极易变异，毒力、菌落、变异：极易变异，毒力、菌落、抗原、耐药性变异。抗原、耐药性变异。3第3页，共50页。n血清型表示方式：血清型表示方式：O O：K K：H H n 例：例：O O111111：K K5858：H H2 2 4第4页，共50页。一、大肠一、大肠埃希菌埃希菌代表菌：代表菌：大肠杆菌大肠杆菌（E.E.colicoli）n
3、 正常正常菌群；菌群；n 宿主免疫力下降或细菌侵入肠外组织或宿主免疫力下降或细菌侵入肠外组织或器官时可器官时可引起引起肠外感染肠外感染；某些强毒力菌；某些强毒力菌株可致株可致肠内感染肠内感染；n大肠埃希菌数大肠埃希菌数被作为环境与食品被作为环境与食品卫生检卫生检测指标测指标。5第5页，共50页。大肠杆菌大肠杆菌(E.coliE.coli)一一、生物学性状生物学性状多数有周鞭多数有周鞭毛，能运动毛，能运动有普通菌毛有普通菌毛和性菌毛和性菌毛生化反应：生化反应：IMViCIMViC试验试验+-+-6第6页，共50页。IMViC试验试验1、吲哚试验、吲哚试验大肠杆菌大肠杆菌色氨酸色氨酸 吲哚吲哚+试
4、剂试剂 玫瑰吲哚玫瑰吲哚2、甲基红试验、甲基红试验3、VP实验实验4、枸橼酸盐利用试验、枸橼酸盐利用试验总结：总结：IMViC试验试验 大肠杆菌大肠杆菌+-产气杆菌产气杆菌-+VP吲哚吲哚甲基红甲基红7第7页，共50页。E.coli colonies on EMB Agar(伊红美蓝琼脂伊红美蓝琼脂)E.coli cells8第8页，共50页。一、致病性一、致病性n(一一)致病物质致病物质n1 1、P P菌毛：菌毛：n2 2、粘附因子、粘附因子n3 3、蛋白类毒素、蛋白类毒素:引起腹泻引起腹泻n4 4、LPSLPS和荚膜等和荚膜等9第9页，共50页。(二二)所所致疾病致疾病 1 1、肠外感染肠
5、外感染n原因：原因：大肠杆菌：大肠杆菌：寄居部位改变寄居部位改变 在肠外组织或器官引起化脓性感染。在肠外组织或器官引起化脓性感染。n常见常见病：病：泌尿系统感染泌尿系统感染（尿道炎、膀胱炎、（尿道炎、膀胱炎、肾盂肾炎等）。肾盂肾炎等）。腹膜炎、胆囊炎腹膜炎、胆囊炎 新生儿脑膜炎、败血症等新生儿脑膜炎、败血症等(婴幼儿婴幼儿 和老年人和老年人)n2 2、肠内感染肠内感染：10第10页，共50页。菌株菌株 致病机制致病机制 所致疾病所致疾病肠产毒型肠产毒型 菌毛和肠毒素菌毛和肠毒素 婴幼儿和旅游者腹泻婴幼儿和旅游者腹泻肠侵袭型肠侵袭型 与痢疾类似与痢疾类似 较大儿童和成人腹泻较大儿童和成人腹泻肠致
6、病型肠致病型 损害微绒毛损害微绒毛 婴幼儿腹泻婴幼儿腹泻肠出血型肠出血型 Vero Vero毒素毒素 急性出血性肠炎急性出血性肠炎肠集聚型肠集聚型 肠凝集耐热毒素肠凝集耐热毒素 婴儿持续性腹泻婴儿持续性腹泻各类肠道杆菌的比较各类肠道杆菌的比较11第11页，共50页。E.coli 0157E.coli 0157型型n20192019年年4 4月，美国食品和药物管理局数字，美国月，美国食品和药物管理局数字，美国8 8个州个州暴发大肠杆菌感染，造成至少暴发大肠杆菌感染，造成至少1 1人死亡，人死亡，5050人住院治人住院治疗。认定可能与居民吃了袋装的菠菜有关疗。认定可能与居民吃了袋装的菠菜有关。因為
7、這些因為這些食物中含有食物中含有O157O157型的型的 E.coliE.coli。n這種這種O157O157型的型的E.coliE.coli會產生毒素，造成腸道流血。會產生毒素，造成腸道流血。患者通常可在一週內復原。但約有患者通常可在一週內復原。但約有7%7%的患者會有嚴重的患者會有嚴重的失血，甚至會因而致死。的失血，甚至會因而致死。nO O157157，20192019年（日本）感染万人年（日本）感染万人nNews 25th January 2019 News 25th January 2019 E.coli E.coli O157:H7 genome sequencesO157:H7 g
8、enome sequencescompleted12第12页，共50页。三、三、微生物学检查微生物学检查1 1、肠外感染：肠外感染：标本采集：标本采集：中段尿、血液、脓液、脑脊液中段尿、血液、脓液、脑脊液。涂片革兰染色镜检涂片革兰染色镜检 分离培养鉴定：分离培养鉴定：标本标本肉汤肉汤血平板血平板IMViCIMViC试验试验(+-)(+-)2 2、肠内感染肠内感染 粪便或排泄物粪便或排泄物鉴别培养基鉴别培养基鉴定鉴定肠毒素肠毒素及血清型检查及血清型检查13第13页，共50页。SS培养基培养基14第14页，共50页。志贺菌属志贺菌属(痢疾杆菌痢疾杆菌)引起引起细菌性痢疾细菌性痢疾，通称通称痢疾杆菌
9、痢疾杆菌；15第15页，共50页。抗原与分类根据根据O抗原分类抗原分类菌种群型亚型痢疾志贺菌痢疾志贺菌 A110福氏志贺菌福氏志贺菌B16，X，Y变种鲍氏志贺菌鲍氏志贺菌C115宋内志贺菌宋内志贺菌D116第16页，共50页。致病性与免疫性致病性与免疫性1 1、致病物质致病物质n菌毛菌毛：细菌通过菌毛粘附于回肠末端细菌通过菌毛粘附于回肠末端及结肠粘膜的上皮细胞表面，穿入细及结肠粘膜的上皮细胞表面，穿入细胞内繁殖胞内繁殖炎症炎症n内毒素内毒素：使肠粘膜通透性增加：使肠粘膜通透性增加n外外毒素毒素：志贺毒素，：志贺毒素，VeroVero毒素毒素17第17页，共50页。致病机理致病机理 痢疾杆菌痢疾
10、杆菌胃胃小肠小肠 粘附回、结肠粘膜粘附回、结肠粘膜上皮细胞上皮细胞进行细胞内进行细胞内繁殖繁殖 炎症炎症 局部：坏死、炎症局部：坏死、炎症粘液脓血便粘液脓血便 内毒素内毒素 刺激肠壁植物神经刺激肠壁植物神经腹痛，里急后重腹痛，里急后重毒素毒素 吸收入血吸收入血毒血症（毒血症（发热，休克）发热，休克）外毒素外毒素：毒性强，：毒性强，A A群产生群产生，具有具有 神经毒性、细胞毒性、肠毒性神经毒性、细胞毒性、肠毒性 菌毛菌毛18第18页，共50页。2 2、所致疾病所致疾病n细菌性痢疾细菌性痢疾-菌痢菌痢n传染源：传染源：病人、带菌者病人、带菌者。n传染途径：传染途径：粪粪-口口。n症状：症状：（1
11、 1）急性急性菌痢：菌痢：发发热、腹痛腹泻、里急后重、脓血粘液便热、腹痛腹泻、里急后重、脓血粘液便（2 2）急性中毒型急性中毒型菌痢：菌痢：多见于儿童，全身中毒症状明显，多见于儿童，全身中毒症状明显，肠道症状不明显肠道症状不明显 （3 3）慢性慢性菌痢菌痢：急性急性治疗不彻底转为慢性治疗不彻底转为慢性19第19页，共50页。三、三、微生物学检查微生物学检查n标本取脓血粘便，标本取脓血粘便，新鲜，新鲜，不与尿混合，不与尿混合，立即立即送检送检选择或鉴别培养基选择或鉴别培养基生化反应鉴定生化反应鉴定血清学鉴定。血清学鉴定。n急性中毒型菌痢取肛急性中毒型菌痢取肛门门拭拭子子。20第20页，共50页。
12、沙门菌属沙门菌属(SalmonellaSalmonella)n 仅仅少数对人致病，引起：少数对人致病，引起：n 伤寒伤寒n 副副伤寒伤寒n 食物中毒食物中毒n 败血败血症症21第21页，共50页。伤寒杆菌的鞭毛 图片由微生物学教研室提供22第22页，共50页。伤寒杆菌电镜照片伤寒杆菌电镜照片 23第23页，共50页。一、一、生物学性状生物学性状n培养与生化反应培养与生化反应n对胆盐和煌绿的耐受性比其他肠道菌强对胆盐和煌绿的耐受性比其他肠道菌强n葡萄糖分解试验：鉴别伤寒、副伤寒杆菌葡萄糖分解试验：鉴别伤寒、副伤寒杆菌nH H2 2S S试验：鉴别副伤寒甲、乙杆菌试验：鉴别副伤寒甲、乙杆菌n抗原构
13、造与分类抗原构造与分类 成分成分 相应抗体相应抗体 菌体菌体(O)O)抗原抗原：脂多糖脂多糖 IgMIgM 鞭毛鞭毛(H)H)抗原抗原:蛋白质蛋白质 IgGIgG ViVi（毒力抗原）（毒力抗原）-检查伤寒带菌者检查伤寒带菌者24第24页，共50页。n1 1、菌体抗原菌体抗原cell wall Ocell wall On（O O抗原）抗原）脂多糖脂多糖稳定、耐热，特异性稳定、耐热，特异性低，为沙门菌共有，低，为沙门菌共有，n2 2、鞭毛抗原鞭毛抗原flagella Hflagella Hn（H H抗原）抗原）蛋白质蛋白质不稳定，不耐热，不稳定，不耐热，特异性高，可鉴别伤寒杆菌与副伤寒杆菌及副特
14、异性高，可鉴别伤寒杆菌与副伤寒杆菌及副伤寒杆菌的分型伤寒杆菌的分型nO O抗体抗体，IgMIgM，早现早退，早现早退H H抗体抗体，IgGIgG，迟现迟退，迟现迟退25第25页，共50页。n3 3、表面抗原表面抗原capsular Vicapsular Vi（ViVi抗原）抗原）n与毒性有关：抗吞噬作用，与致病性与毒性有关：抗吞噬作用，与致病性有关有关n新分离菌才有新分离菌才有ViVi抗体抗体：体内有菌时产生，无菌时消失，：体内有菌时产生，无菌时消失，可作为伤寒带菌者指标可作为伤寒带菌者指标26第26页，共50页。二、二、致病性与免疫性致病性与免疫性1 1、致病物质致病物质n侵袭侵袭力力n菌毛
15、、菌毛、ViVi抗原抗原n内毒素内毒素：大部分内毒素引起大部分内毒素引起WBCWBC但但伤寒杆菌伤寒杆菌内毒素引起内毒素引起WBCWBC n肠毒素肠毒素：水样腹泻水样腹泻27第27页，共50页。n肠肠热症（即伤寒、副伤寒）热症（即伤寒、副伤寒）：n伤寒杆菌伤寒杆菌伤寒伤寒n甲、乙、丙型副伤寒杆菌甲、乙、丙型副伤寒杆菌副伤寒副伤寒n传染源：传染源：病人，带菌者病人，带菌者n传染途径：传染途径：粪粪-口途径口途径2 2、所致疾病所致疾病-（1 1）肠热症肠热症 28第28页，共50页。伤寒沙门菌伤寒沙门菌小肠小肠肠系膜淋巴结肠系膜淋巴结初次菌血症初次菌血症肝脾、骨髓肝脾、骨髓的巨噬的巨噬C内内繁殖
16、繁殖菌血症菌血症发热、发热、肾和其肾和其他器官他器官感染感染胆囊胆囊集合淋巴结溃疡集合淋巴结溃疡和炎症和炎症腹泻腹泻，肠，肠出血出血，肠，肠穿孔穿孔胆囊炎或胆囊炎或带菌状态带菌状态淋巴结淋巴结胸导管胸导管胆汁胆汁胆汁胆汁29第29页，共50页。胃胃淋巴管淋巴管胸导管胸导管发热、全身不适乏发热、全身不适乏力，血培（力，血培（+）出）出现抗体现抗体病菌病菌小肠粘膜上皮，巨噬小肠粘膜上皮，巨噬C C吞噬吞噬肠壁、肠壁、肠系膜淋巴结肠系膜淋巴结 血流（第次菌血症血流（第次菌血症bacteriomiabacteriomia）第第1 1周周30第30页，共50页。第第4周周 恢复期恢复期肝脾肿大肝脾肿大皮
17、肤玫瑰疹皮肤玫瑰疹菌菌-肾肾-尿尿（尿检菌）尿检菌）菌菌-胆囊胆囊-粪便（粪检菌）粪便（粪检菌）小肠肠壁小肠肠壁超敏反应超敏反应 肠坏死、穿孔肠坏死、穿孔持续发热，相对缓脉，持续发热，相对缓脉，WBCWBC下降，表情淡漠、下降，表情淡漠、全身中毒症状全身中毒症状全身、器官和组织全身、器官和组织 再次入血（第次菌血症）再次入血（第次菌血症）第第2 2、3 3周周31第31页，共50页。持续高热和相对缓脉持续高热和相对缓脉32第32页，共50页。玫瑰疹玫瑰疹33第33页，共50页。34第34页，共50页。n带菌问题带菌问题carriercarrier：3-5%3-5%的人病后可随粪的人病后可随粪便
18、排菌，成为伤寒带菌者（传染源）便排菌，成为伤寒带菌者（传染源）值得注意值得注意35第35页，共50页。鼠伤寒杆菌，猪霍乱杆菌，鼠伤寒杆菌，猪霍乱杆菌，肠炎杆菌肠炎杆菌等等污染食物污染食物引起引起 多为集体食物中毒多为集体食物中毒 细菌一般不入血细菌一般不入血 潜伏期潜伏期4-244-24h h，呕吐，呕吐，腹痛，腹泻，发热腹痛，腹泻，发热。（二）（二）所致疾病所致疾病2 2、食物中毒、食物中毒36第36页，共50页。常常由猪霍乱杆菌、丙型副伤寒、鼠伤寒由猪霍乱杆菌、丙型副伤寒、鼠伤寒及肠炎杆菌引起及肠炎杆菌引起症状：症状：进入血流进入血流-高热、寒战、厌食、高热、寒战、厌食、贫血贫血 进入组织
19、器官进入组织器官广泛感染，脑膜炎、广泛感染，脑膜炎、骨髓炎、胆囊炎、肾盂肾炎、心内膜炎、骨髓炎、胆囊炎、肾盂肾炎、心内膜炎、（二）（二）所致疾病所致疾病3 3、败血症、败血症37第37页，共50页。n主要由鼠伤寒杆菌引起主要由鼠伤寒杆菌引起n多见于多见于2 2岁以下婴幼儿，夏秋多发岁以下婴幼儿，夏秋多发（二）（二）所致疾病所致疾病4 4、婴幼儿腹泻、婴幼儿腹泻（三）免疫力（三）免疫力伤寒或副伤寒病后可获牢固免疫力（伤寒或副伤寒病后可获牢固免疫力（细胞细胞免疫为主免疫为主）血液中抗体增高可辅助诊断伤寒副伤寒血液中抗体增高可辅助诊断伤寒副伤寒38第38页，共50页。三、三、微生物学检查微生物学检查
20、n病原菌病原菌检查：检查：n肠热症肠热症根据病程不同，取标本根据病程不同，取标本n1W1W 取血取血，1-1-3 3W W取取骨髓液，骨髓液，2W2W起粪便，起粪便，3W3W起取尿液起取尿液n分离分离培养与鉴定培养与鉴定n 血、骨髓液血、骨髓液增菌增菌SSSS培养基培养基EMBEMB鉴别培养基鉴别培养基373724h24h无色半透明乳糖不发酵菌落无色半透明乳糖不发酵菌落双糖或双糖或三糖培养基三糖培养基生化反应玻片凝集试验生化反应玻片凝集试验39第39页，共50页。血清学诊断（血清学诊断（肥达试验肥达试验widal testwidal test）*原理：原理：已知抗原测未知抗体，定量凝集试验已知
21、抗原测未知抗体，定量凝集试验用已知的伤寒杆菌用已知的伤寒杆菌H H抗原抗原 伤寒杆菌伤寒杆菌O O抗原抗原 +患者血清患者血清甲、乙、丙型副伤寒杆菌甲、乙、丙型副伤寒杆菌H H抗原抗原测定病人血清中相应抗体及其测定病人血清中相应抗体及其含量，以辅助诊断伤寒、副伤寒。含量，以辅助诊断伤寒、副伤寒。（概念）（概念）40第40页，共50页。O（菌体）抗原凝集试验（菌体）抗原凝集试验41第41页，共50页。H（鞭毛）抗原凝集试验（鞭毛）抗原凝集试验42第42页，共50页。43第43页，共50页。我国标准我国标准 广州地区广州地区n伤寒杆菌伤寒杆菌O O 1:80 1:80 1:160 1:160n伤寒
22、杆菌伤寒杆菌H H 1:160 1:160 1:160 1:160n甲型伤寒副杆菌甲型伤寒副杆菌H H 1:80 1:80 1:160 1:160n乙型伤寒副杆菌乙型伤寒副杆菌H H 1:80 1:80 1:160 1:160结果判断结果判断若两次试验效价上升或超过若两次试验效价上升或超过4倍则更有意义倍则更有意义44第44页，共50页。Example of widal test入院后第入院后第4天天入院后第入院后第12天天TH1：801：80TO1：401：160TA（甲）（甲）1：401：160TB（乙）（乙）1：401：20TC（丙）（丙）1：401：2045第45页，共50页。四、四、
23、防治原则防治原则nViVi荚膜多糖荚膜多糖疫苗。疫苗。46第46页，共50页。其他肠道杆菌其他肠道杆菌n克雷伯菌属克雷伯菌属:肺炎克雷伯菌是引起肺炎克雷伯菌是引起社区感染和医院社区感染和医院感染感染的重要病原菌。的重要病原菌。n变形杆菌属变形杆菌属：有鞭毛、运动活泼，具有迁徙生：有鞭毛、运动活泼，具有迁徙生长现象的长现象的G阴性杆菌，可引起食物中毒和泌尿系阴性杆菌，可引起食物中毒和泌尿系统感染等；某些菌株与立克次体有共同抗原成统感染等；某些菌株与立克次体有共同抗原成分，因此临床上常用变形杆菌分，因此临床上常用变形杆菌OX19、OX2、OXk代替立克次体抗原与斑疹伤寒或恙虫病患者血清作代替立克次
24、体抗原与斑疹伤寒或恙虫病患者血清作凝集试验（凝集试验（外斐试验外斐试验），协诊立克次体病。），协诊立克次体病。47第47页，共50页。小结小结n肠道杆菌肠道杆菌是人类肠道中的一大群革兰阴性杆菌，无芽是人类肠道中的一大群革兰阴性杆菌，无芽胞，多数有鞭毛。胞，多数有鞭毛。n大肠埃希菌大肠埃希菌多为条件致病菌，能引起多为条件致病菌，能引起肠外感染肠外感染。致。致病性大肠埃希菌引起病性大肠埃希菌引起肠内感染肠内感染。在卫生学上常以。在卫生学上常以大肠菌群数大肠菌群数和和细菌总数细菌总数作为饮水、食品等被粪便作为饮水、食品等被粪便污染的指标。污染的指标。n志贺菌志贺菌细菌性痢疾的病原菌，分细菌性痢疾的病
25、原菌，分四四群。我国以福氏群。我国以福氏志贺菌最常见。志贺菌最常见。n菌痢分为：急性菌痢、慢性菌痢、中毒性痢疾菌痢分为：急性菌痢、慢性菌痢、中毒性痢疾48第48页，共50页。小结小结n沙门菌可引起沙门菌可引起伤寒及副伤寒、食物中毒、伤寒及副伤寒、食物中毒、败血症、婴幼儿腹泻败血症、婴幼儿腹泻等。等。n带菌者带菌者对伤寒及副伤寒的流行有一定意对伤寒及副伤寒的流行有一定意义。义。n肥达反应肥达反应可作为伤寒及副伤寒的辅助诊可作为伤寒及副伤寒的辅助诊断。断。49第49页，共50页。Key wordsn沙门氏菌内毒素伤寒副伤寒二次沙门氏菌内毒素伤寒副伤寒二次菌血症细胞免疫食物中毒、败血症菌血症细胞免疫食物中毒、败血症肥达反应肥达反应n志贺菌痢疾杆菌（不入血流）细菌志贺菌痢疾杆菌（不入血流）细菌性痢疾内毒素菌毛外毒素性痢疾内毒素菌毛外毒素n大肠埃希菌肠内感染大肠埃希菌肠内感染 肠外感染卫生肠外感染卫生细菌学指示菌细菌学指示菌50第50页，共50页。
