1、药用植物立比草药用植物立比草的内生真菌及其的内生真菌及其抗药性研究抗药性研究 李洋李洋 吴凯吴凯 罗微罗微张俊张俊 高平安高平安w摘要wEndophytic fungi were isolated from healthy tissues of Lippia sidoides Cham.(Verbenaceae),from 480 fragments of leaves(240)and stems(240),a total of 203 endophytic fungi were isolated,representing 14 species belonging to the groups
2、Ascomycota,Coelomycetes and Hyphomycetes.Endophytic colonization was greater in leaves(50.4%)than in stems(35.4%).Colletotrichumwgloeosporiodes had the maximum colonization frequencyw(12.3%),followed by Alternaria alternata(7.08%),wGuignardia bidwelli(6.87%)and Phomopsis archeri(5.41%).w 内生真菌是从健康的利比
3、草（马鞭草科）中分离。（内生真菌是从健康的利比草（马鞭草科）中分离。（240240个叶子组织，个叶子组织，240240个茎段，总共个茎段，总共480480个组织中分离出个组织中分离出203203个真菌）真菌从属于个真菌）真菌从属于1414个菌种，个菌种，其中子囊菌，腔胞菌，以及丝孢菌。炭疽菌是分布最大的真菌（其中子囊菌，腔胞菌，以及丝孢菌。炭疽菌是分布最大的真菌（12.3%12.3%），），接下来是交链格孢（接下来是交链格孢（7.08%7.08%），葡萄球黑腐病（），葡萄球黑腐病（6.87%6.87%），阿切尔拟茎点），阿切尔拟茎点霉菌（霉菌（5.41%5.41%）wSome species
4、showed specificity for the host tissue:Curvularia pallescens,Dreschlera dematioidea,G.bidwellii,Microascus desmosporum,Peacilomyces variotti,Periconia byssoides and Ulocladium oudemansii were only isolated from leaves while Fusarium lateritium and Phoma tracheiphila were only isolated from stems.wTh
5、rough a preliminary screening and fermentation assay,16 isolateswwhere found to produce antimicrobial metabolites against bacterial and fungi.The diversity and role of endophytes in medicinal plants is briefly discussed.In conclusion,endophytic fungi from L.sidoides have pharmaceutical potential and
6、 can be seen as an attractive source of biologically active compounds.w一些菌种在寄主植物中表现出独特的分布特点：苍白弯孢霉，一些菌种在寄主植物中表现出独特的分布特点：苍白弯孢霉，Dreschlera dematioidea，葡萄球黑腐病菌，葡萄球黑腐病菌，Microascus desmosporum,拟青霉，黑团孢，奥德曼细基格孢只能从叶子中分离，拟青霉，黑团孢，奥德曼细基格孢只能从叶子中分离，而砖红镰孢霉而砖红镰孢霉，桔茎点霉，桔茎点霉 只能从茎中分离，通过初步筛选以及发酵产物只能从茎中分离，通过初步筛选以及发酵产物分析
7、，分析，16种分离的真菌发现产生抗菌性代谢产物来抑制细菌和真菌，在药种分离的真菌发现产生抗菌性代谢产物来抑制细菌和真菌，在药用植物中内生真菌的差异以及作用进行了简短的讨论。用植物中内生真菌的差异以及作用进行了简短的讨论。w总之，从立比草中分离的内生真菌在药物学上有很大的潜力，可以被看做总之，从立比草中分离的内生真菌在药物学上有很大的潜力，可以被看做颇具吸引了的生物活性化合物颇具吸引了的生物活性化合物立比草的药用特性立比草的药用特性 立比草属于南美，中美和非立比草属于南美，中美和非洲生长的马鞭草科，有大洲生长的马鞭草科，有大约约200200种不同的种类。它产种不同的种类。它产生的香精油含有高含量
8、的生的香精油含有高含量的成分麝香和香芹酚。许多成分麝香和香芹酚。许多药理学家测试确认它可作药理学家测试确认它可作为传统药物来治疗感染性为传统药物来治疗感染性疾病。它的叶子和花制成疾病。它的叶子和花制成的茶叶能够作为防腐剂治的茶叶能够作为防腐剂治疗刀伤和烧伤的抗感染药疗刀伤和烧伤的抗感染药物物w内生真菌与寄生植物的关系内生真菌与寄生植物的关系w 寄主植物健康组织和细胞内的内生真菌寄主植物健康组织和细胞内的内生真菌一般不引起任何明显的疾病症状，他们能够一般不引起任何明显的疾病症状，他们能够建立起一种共生的关系，研究表明内生真菌建立起一种共生的关系，研究表明内生真菌给他们的寄主提供一些利益，比如帮助
9、他们给他们的寄主提供一些利益，比如帮助他们抵抗有害昆虫，病原体甚至家禽。因此，植抵抗有害昆虫，病原体甚至家禽。因此，植物的药物学特性物的药物学特性可能来自于其产生的具有生可能来自于其产生的具有生物活性的次级代谢产物。物活性的次级代谢产物。这些产物可能是极这些产物可能是极其罕见的重要的有机物。因此内生真菌被视其罕见的重要的有机物。因此内生真菌被视为对农业，工业，医药领域新的有用的天然为对农业，工业，医药领域新的有用的天然的具有活性的产品的重要来源。的具有活性的产品的重要来源。研究目的研究目的 分离内生真菌分离内生真菌 确定各真菌的分布频率确定各真菌的分布频率 评价他们产生的抗菌化合物的潜力评价他
10、们产生的抗菌化合物的潜力w实验过程实验过程w一一.真菌分布率的计算真菌分布率的计算w 立比草植物材料表面进行消毒及灭菌。立比草植物材料表面进行消毒及灭菌。w 茎和叶在流动的水龙头下冲洗，茎和叶在流动的水龙头下冲洗，70%酒精下浸泡酒精下浸泡1min，NaClO浸泡浸泡4min，再在，再在70%乙醇中浸泡乙醇中浸泡30S，最后用灭菌的蒸馏水洗，最后用灭菌的蒸馏水洗3次。次。通过取最后一滴的冲洗水滴到含有通过取最后一滴的冲洗水滴到含有TSA皮氏培养皮氏培养基中来确定灭菌效率基中来确定灭菌效率。（为什么用这种培养基）。（为什么用这种培养基）w w 表面消毒后，将样品叶子切成表面消毒后，将样品叶子切成
11、0.5cm，茎切成，茎切成w0.5的碎片，在无菌条件下转接到含的碎片，在无菌条件下转接到含SAB的皮氏的皮氏 培养基培养基（添加了四环素（添加了四环素100g/mL和氯霉素和氯霉素100g/mL来抑制杂菌来抑制杂菌生长）中。生长）中。（为什么用这种培养基）（为什么用这种培养基）w 30培养培养30天。每天进行观察，将所有出现的真菌都天。每天进行观察，将所有出现的真菌都进行分离后，再培养在进行分离后，再培养在PDA上供进一步鉴定，真菌的分布频上供进一步鉴定，真菌的分布频率考虑了分离得到的菌株率考虑了分离得到的菌株Ni数和总的细菌数数和总的细菌数Nf。（为什（为什么用这种培养基，怎样将所有真菌分离
12、，如么用这种培养基，怎样将所有真菌分离，如何准确确定分离真菌）何准确确定分离真菌）w FC%=Ni/Nf100%注释（查找个培养基的作用查找个培养基的作用）wSAB培养基培养基=沙氏琼脂培养基沙氏琼脂培养基 组成（组成（g/L 蛋蛋白胨白胨 10；葡萄糖葡萄糖 1010；琼脂；琼脂 1515；pH 5.6pH 5.6）wPDA培养基培养基=马铃薯葡萄糖琼脂培养基马铃薯葡萄糖琼脂培养基 组成组成（g/L 马铃薯马铃薯 200；葡萄糖；葡萄糖 20；琼脂；琼脂 15；pH 6.0pH 6.0）wTSATSA培养基培养基=大豆酪蛋白琼脂培养基大豆酪蛋白琼脂培养基 组成组成（g/L 蛋白胨蛋白胨 5
13、5；胰蛋白胨；胰蛋白胨 5 5；次氯酸钠；次氯酸钠 1515；琼脂；琼脂 1515；pH 5.6pH 5.6）w二二.内生真菌的鉴定内生真菌的鉴定w 利用菌落的宏观特性（颜色，外观，黏度，利用菌落的宏观特性（颜色，外观，黏度，和色素沉淀）以及他们的微观特性（植物形和色素沉淀）以及他们的微观特性（植物形态和生物结构），在鉴定时，待鉴定的真菌态和生物结构），在鉴定时，待鉴定的真菌需要先在需要先在PDA,SAB和液体培养基在和液体培养基在282下培养下培养30天。天。w三三.目标微生物目标微生物（为什么用这些菌）（为什么用这些菌）w作为本次实验抗菌活性目标微生物的细菌是作为本次实验抗菌活性目标微生物
14、的细菌是金黄色葡萄球菌，枯草杆菌，大肠杆菌，肺金黄色葡萄球菌，枯草杆菌，大肠杆菌，肺炎杆菌，铜绿假单胞菌，真菌则是白色念珠炎杆菌，铜绿假单胞菌，真菌则是白色念珠菌，糠秕马拉色霉菌，深红毛癣菌菌，糠秕马拉色霉菌，深红毛癣菌 w四四.抗菌活性的筛选抗菌活性的筛选w每种真菌在每种真菌在PDA皮氏培养基表面皮氏培养基表面30 下培下培养养7天，平板上用被火烧热后的塞子钻孔天，平板上用被火烧热后的塞子钻孔（直径（直径6）取菌落并转移到预先铺有细菌，）取菌落并转移到预先铺有细菌，白色念珠菌和深红毛癣菌及糠秕马拉色菌的白色念珠菌和深红毛癣菌及糠秕马拉色菌的0.5%橄榄油的橄榄油的SAB培养基上。接有细菌的培
15、养基上。接有细菌的皮氏培养皿在皮氏培养皿在37 下培养下培养24 h，真菌在，真菌在30 下培养下培养48h，通过可视法检测抑制环来确，通过可视法检测抑制环来确认抗菌活性。认抗菌活性。w五，发酵产物检测五，发酵产物检测w 利用扩散分析对上面筛选显示生长最好的菌株利用扩散分析对上面筛选显示生长最好的菌株进行进一步检测。通过生长着培养菌的进行进一步检测。通过生长着培养菌的5个塞子个塞子（直径（直径6）和）和50mlPDB烧瓶来准备预接种菌。烧瓶来准备预接种菌。所有的培养物都在所有的培养物都在282，转速为，转速为180r/min的的摇床上培养。摇床上培养。w将将10ml的培养物分别转接到的培养物分
16、别转接到90mlPDA，ME，EPM的的500ml烧瓶中，烧瓶在同样条件下培养烧瓶中，烧瓶在同样条件下培养96h,每隔每隔24h,将将1ml的发酵液在的发酵液在225g下离心下离心15min。利用培养皿扩散法测定利用培养皿扩散法测定30L浮在上面的物质抗菌浮在上面的物质抗菌活性。活性。注释PDB 马铃薯葡萄糖肉汤马铃薯葡萄糖肉汤 组成（组成（g/L 马铃薯马铃薯 200，葡萄糖，葡萄糖 20；pH 6.0pH 6.0）ME 麦芽浸膏汤麦芽浸膏汤 组成（组成（g/L 麦芽提取物麦芽提取物 20）EMP （eurimycin production medium）泛）泛霉素培养基霉素培养基 组成（组
17、成（g/L 大豆粉大豆粉20；葡萄糖；葡萄糖 20,；碳酸钙；碳酸钙 2；氯化钠；氯化钠 5）实验结果和讨论实验结果和讨论 表面灭菌的效率是通过微生物在接种表面灭菌的效率是通过微生物在接种30天天后增加的减少量来确定，从植物组织中真后增加的减少量来确定，从植物组织中真菌的产物是在菌的产物是在48h后被首次发现的后被首次发现的真菌的分布特性真菌的分布特性 总共总共203种分离的内生真菌是从被分析种分离的内生真菌是从被分析的的480块植物碎片中分离的（块植物碎片中分离的（240片叶子和片叶子和240块茎碎片），分布率为块茎碎片），分布率为42.29%。w 在叶片和茎块中真菌群落中有所不同。其中在叶
18、片和茎块中真菌群落中有所不同。其中121种（种（50.41%）真菌从叶片中获得，）真菌从叶片中获得，83种种（41.2%）从茎块中获得）从茎块中获得w 这些被分离的菌种能够被确认从属于下列这些被分离的菌种能够被确认从属于下列14种菌种属于子囊菌，腔胞菌，以及丝孢菌，炭疽种菌种属于子囊菌，腔胞菌，以及丝孢菌，炭疽菌是被分离出来频率最大的菌种（菌是被分离出来频率最大的菌种（12.3%），接），接下来是交链格孢（下来是交链格孢（7.08%），葡萄球黑腐菌），葡萄球黑腐菌（6.87%），阿切尔拟茎点霉菌（），阿切尔拟茎点霉菌（5.41%）这这些分离的菌中显示是没有生殖结构的则属于无孢些分离的菌中显示是
19、没有生殖结构的则属于无孢菌类菌类，立比草组织中分离的内生真菌的数目及其比例立比草组织中分离的内生真菌的数目及其比例叶子叶子茎茎总数总数N N%N N%N N%交链格孢交链格孢7 72.912.91272711.211.234347.087.08链格孢菌链格孢菌1 10.410.411 10.410.412 20.410.41胶孢炭疽菌胶孢炭疽菌 424217.517.517177.087.08595912.312.3棒孢菌棒孢菌 2 20.830.832 20.410.41苍白弯孢霉苍白弯孢霉1 10.410.411 10.20.2德氏德氏 dematioidea dematioidea 3
20、31.251.253 30.620.62砖红镰孢霉砖红镰孢霉 5 52.082.085 51.041.04葡萄球黑腐病菌葡萄球黑腐病菌333313.713.733336.876.87microascus desmosporummicroascus desmosporum2 20.830.832 20.410.41拟青霉拟青霉 1 10.410.411 10.20.2黑团孢黑团孢 2 20.830.832 20.410.41桔茎点霉桔茎点霉 8 83.33.38 81.661.66阿切尔拟茎点霉阿切尔拟茎点霉 10104.164.1616166.66.626265.415.41奥德曼细基格孢奥德
21、曼细基格孢 1 10.410.411 10.20.2无孢霉群无孢霉群 16166.66.68 83.33.324245 5totaltotal12112150.4150.41838335.435.4203203空格表示没有真菌w 一些核心的内生菌种比如交链菌，炭疽一些核心的内生菌种比如交链菌，炭疽菌，拟茎点霉，以及球座菌总是从任意给定菌，拟茎点霉，以及球座菌总是从任意给定的寄主中分离出来以外，还有一系列次要的的寄主中分离出来以外，还有一系列次要的菌种均能每次在数百个样品中被分发现一到菌种均能每次在数百个样品中被分发现一到两次。包括两次。包括细极链格孢念珠菌，棒孢霉，苍细极链格孢念珠菌，棒孢霉，
22、苍白弯孢霉，多变拟毒霉，亚麻色黑团孢霉以白弯孢霉，多变拟毒霉，亚麻色黑团孢霉以及奥德曼细单格孢及奥德曼细单格孢这些只能从小部分样品中这些只能从小部分样品中被分离出来。通常稀有的和次要的真菌菌种被分离出来。通常稀有的和次要的真菌菌种分离的数目与取样的次数有关。分离的数目与取样的次数有关。w 分生聚集体趋向于分布在特定的组织中，分生聚集体趋向于分布在特定的组织中，例如葡萄球黑腐病菌仅能从立比草的叶子中例如葡萄球黑腐病菌仅能从立比草的叶子中获得，桔茎点霉仅能从茎中获得，以及炭疽获得，桔茎点霉仅能从茎中获得，以及炭疽菌和交链格孢能从叶和茎中获得。菌和交链格孢能从叶和茎中获得。w不同植物组织就像分开的小
23、环境，甚至一不同植物组织就像分开的小环境，甚至一种植物相关的习性是一种动态的环境。这些种植物相关的习性是一种动态的环境。这些植物寄主与内生真菌以及致病微生物相联系，植物寄主与内生真菌以及致病微生物相联系，寄主植物的年龄，生长海拔以及生长方位寄主植物的年龄，生长海拔以及生长方位 都能够影响内生真菌聚集体以及菌群出现的都能够影响内生真菌聚集体以及菌群出现的频率。频率。w真菌抗菌性分析真菌抗菌性分析w所有从立比草中分离的真菌都被提取出来在所有从立比草中分离的真菌都被提取出来在固体培养基上进行了抗菌性分析。固体培养基上进行了抗菌性分析。w（一）（一）203种内生真菌中有种内生真菌中有16种真菌在培养种
24、真菌在培养基上对目标微生物产生了从基上对目标微生物产生了从12到到30mm不等不等的抑菌圈。的抑菌圈。w从叶子上分离的虽然只有一小部分菌种，但从叶子上分离的虽然只有一小部分菌种，但是有较广的活性光谱，以及抑制革兰氏阳性是有较广的活性光谱，以及抑制革兰氏阳性菌和阴性菌的能力。菌和阴性菌的能力。w这可以来解释传统药物中利用立比草叶子来这可以来解释传统药物中利用立比草叶子来简要治疗细菌和真菌感染的传染性疾病。简要治疗细菌和真菌感染的传染性疾病。w活性光谱活性光谱w（二）从立比草叶片中提取的香精油以高含（二）从立比草叶片中提取的香精油以高含量的百里香酚和香芹酚而著名。这些物质显量的百里香酚和香芹酚而著
25、名。这些物质显示出很强的抗药活性。特别是对于扛细菌和示出很强的抗药活性。特别是对于扛细菌和真菌的医学重要性。可杀灭的菌种如下真菌的医学重要性。可杀灭的菌种如下w假丝酵母和狗小孢霉假丝酵母和狗小孢霉。w传染性皮肤病传染性皮肤病w 生龋齿的链球菌和白色念珠菌酵母生龋齿的链球菌和白色念珠菌酵母w二斑叶螨，二斑叶螨是世界上比较严重的二斑叶螨，二斑叶螨是世界上比较严重的 大棚蔬菜害虫。大棚蔬菜害虫。w埃及伊蚊的幼虫埃及伊蚊的幼虫w内生真菌的有抗菌活性的菌被限制在四种菌：内生真菌的有抗菌活性的菌被限制在四种菌：交链格菌交链格菌(9)，阿切尔拟茎点霉，阿切尔拟茎点霉（2），），D.dematioidea(2
26、)，炭疽菌（，炭疽菌（11），还有），还有另外两种类型显示出生物活性，但是不能产另外两种类型显示出生物活性，但是不能产生生殖结构因此被称为无孢菌丝类（生生殖结构因此被称为无孢菌丝类（2）（括号里的数字表明每种表现出对于生物抗（括号里的数字表明每种表现出对于生物抗性活性的菌的数目）性活性的菌的数目）w通过发酵液中内生真菌在预先接种的培养基通过发酵液中内生真菌在预先接种的培养基上抑菌圈的大小来测定它们抗菌活性上抑菌圈的大小来测定它们抗菌活性w通过发酵液中内生真菌在预先接种的培养基通过发酵液中内生真菌在预先接种的培养基上抑菌圈的大小来测定它们抗菌活性上抑菌圈的大小来测定它们抗菌活性内生真菌内生真菌培
27、养基培养基 时间时间PHPH 抑菌圈（抑菌圈（mmmm）SASABSBSKPKPMFMFTR TR 交链格孢交链格孢EMPEMP96967.287.281717ntntntntntntntnt交链格孢交链格孢MEME72726.346.341717ntntntntntntntnt交链格孢交链格孢MEME72725.985.9825251818ntntntntntnt交链格孢交链格孢MEME96965.625.62-交链格孢交链格孢MEME72726.026.022525ntntntntntntntnt交链格孢交链格孢MEME96966.196.19-交链格孢交链格孢MEME72726.656.
28、651515ntntntntntntntnt交链格孢交链格孢MEME72726.226.221717ntntntntntntntntdrechslera drechslera dematioideadematioidea MEME72725.135.131717ntntntntntnt-drechslera drechslera dematioidea dematioidea PDBPDB96967.327.321515ntnt-阿切尔拟茎点阿切尔拟茎点霉霉PDBPDB72725.25.21818ntntntntntnt无孢霉群无孢霉群MEME96966.366.36ntntntnt1313-
29、ntnt无孢霉群无孢霉群PDBPDB96964.714.7115151313-ntnt-无孢霉群无孢霉群PDBPDB48486.026.02-注释wnt=not tested;-=nt=not tested;-=无活性；无活性；SA=SA=金黄色葡金黄色葡萄球菌萄球菌;BS=;BS=枯草杆菌枯草杆菌;KP=;KP=肺炎杆菌肺炎杆菌;wMF=MF=糠秕马拉色菌糠秕马拉色菌;TR=;TR=深红毛癣菌深红毛癣菌w将将16种内生真菌发酵产物进行进一步分析。种内生真菌发酵产物进行进一步分析。w10种表现出抗微生物活性，他们中种表现出抗微生物活性，他们中90%表表现出对于金黄色葡萄球菌的抗性，现出对于金黄
30、色葡萄球菌的抗性，30%对枯对枯草杆菌有抗性，草杆菌有抗性，10%对肺炎杆菌有抗性。这对肺炎杆菌有抗性。这些抑菌圈的直径范围在些抑菌圈的直径范围在13mm到到25mm之间。之间。w但是没有内生真菌表现出对于糠秕马拉色菌但是没有内生真菌表现出对于糠秕马拉色菌和深红毛癣菌的抗菌活性。和深红毛癣菌的抗菌活性。w在发酵产物鉴定中的参数：像在发酵产物鉴定中的参数：像PH,生产时间，生产时间，和培养基组成进行分析表明麦芽浸膏汤和培养基组成进行分析表明麦芽浸膏汤（ME）w（7296h)以及以及ph57是对于微生物产活性是对于微生物产活性化合物最好的培养条件。这些培养条件，搅化合物最好的培养条件。这些培养条件
31、，搅动以及温度能够增加或减少真菌发酵的产的动以及温度能够增加或减少真菌发酵的产的具有生物活性化合物的产量。培养温度，培具有生物活性化合物的产量。培养温度，培养基组成，以及通气量也会影响内生真菌产养基组成，以及通气量也会影响内生真菌产化合物的数目，组成。化合物的数目，组成。w因此，更加深入的检测需要去评估这些菌种因此，更加深入的检测需要去评估这些菌种的生物活性。的生物活性。延伸研究延伸研究w 在另外一些药性植物的研究中，交链格在另外一些药性植物的研究中，交链格孢，交链孢霉，炭疽菌和拟茎点霉也被分离孢，交链孢霉，炭疽菌和拟茎点霉也被分离出来，并且发现他们对于细菌金黄色葡萄球出来，并且发现他们对于细
32、菌金黄色葡萄球菌，耐甲氧西林金葡萄球菌，大肠杆菌和苦菌，耐甲氧西林金葡萄球菌，大肠杆菌和苦草杆菌具有抗性。草杆菌具有抗性。w 还有从蒙古蒿茎内分离的胶孢炭疽菌作还有从蒙古蒿茎内分离的胶孢炭疽菌作为一种内生菌，它产生的一种抗菌代谢物被为一种内生菌，它产生的一种抗菌代谢物被称为炭疽酸称为炭疽酸，能抑制枯草杆菌，金黄色葡，能抑制枯草杆菌，金黄色葡萄球菌，以及植物性病源真菌麦根腐长蠕孢。萄球菌，以及植物性病源真菌麦根腐长蠕孢。w。w 拟茎点霉从药用植物鸡冠刺桐中分拟茎点霉从药用植物鸡冠刺桐中分离，产生的抗生素命名为离，产生的抗生素命名为phomol,它它表现出抗真菌，抗细菌和较弱的细胞表现出抗真菌，抗
33、细菌和较弱的细胞毒素的活性毒素的活性w 不形成孢子孢子的真菌菌丝体是从药用不形成孢子孢子的真菌菌丝体是从药用植物喜树中分离的，这是一种重要的生物活植物喜树中分离的，这是一种重要的生物活性物质来抑制金黄色葡萄球菌，枯草杆菌，性物质来抑制金黄色葡萄球菌，枯草杆菌，大肠杆菌，白色念珠菌。大肠杆菌，白色念珠菌。w 内生真菌的天然产物能够抑制或杀死大内生真菌的天然产物能够抑制或杀死大量有害的微生物，包括植物致病菌，细菌，量有害的微生物，包括植物致病菌，细菌，真菌，病毒，和影响动物和人的原生动物。真菌，病毒，和影响动物和人的原生动物。w 但是在体外培养时，这些菌种能够表现但是在体外培养时，这些菌种能够表现
34、出抗菌性但是不产生生物活性化合物。出抗菌性但是不产生生物活性化合物。w 当这些菌在体外生长时，一些真菌能够当这些菌在体外生长时，一些真菌能够持续地产生生物活性物质，或者在一定反应持续地产生生物活性物质，或者在一定反应时间后会停止，因此醋精内生真菌在体外生时间后会停止，因此醋精内生真菌在体外生长时持续合成化合物的因素需要进一步研究长时持续合成化合物的因素需要进一步研究w 内生真菌产生天然的具有生物活性的化内生真菌产生天然的具有生物活性的化合物可能会为人类提供新的选择来发展抗致合物可能会为人类提供新的选择来发展抗致病菌的药物。它可能成为治理人类，植物，病菌的药物。它可能成为治理人类，植物，动物的新药的有效资源。动物的新药的有效资源。w 这篇研究表明立比草的内生真菌因其具这篇研究表明立比草的内生真菌因其具有产生抗生素化合物的有效药的潜力，需要有产生抗生素化合物的有效药的潜力，需要更加深入的用化学分析法来研究它们产生的更加深入的用化学分析法来研究它们产生的活性化合物，并且去发现更多的里碧草中的活性化合物，并且去发现更多的里碧草中的真菌的真菌的 作用，去了解这些内生真菌个与这作用，去了解这些内生真菌个与这种药用植物的利益。种药用植物的利益。
