1、 生物化学基础生物化学基础 电电 子子 课课 件件鄂东职业技术学院医药学系鄂东职业技术学院医药学系湖湖 北北 省省 黄黄 冈冈 卫卫 生生 学学 校校 高等教育出版社高等教育出版社 高等教育电子音像出版社高等教育电子音像出版社周剑周剑涛涛第二章第二章 核酸的结构和功能核酸的结构和功能 第二章第二章 核酸的结构和功能核酸的结构和功能n第一节第一节 核酸的化学组成与一级结构核酸的化学组成与一级结构n第二节第二节 DNADNA的空间结构与功能的空间结构与功能 n第三节第三节 RNARNA的结构与功能的结构与功能 n第四节第四节 核酸的主要理化性质核酸的主要理化性质 n第五节第五节 核酸的变性、复性与
2、杂交核酸的变性、复性与杂交核酸（核酸（nucleic acid）种类）种类v核酸是以核苷酸为基本组成单位的生物核酸是以核苷酸为基本组成单位的生物信息大分子。信息大分子。v根据分子中戊糖的不同，核酸分为：根据分子中戊糖的不同，核酸分为：脱氧核糖核酸脱氧核糖核酸 （deoxyribonucleic acid，DNA）核糖核酸核糖核酸 （ribonucleic acid，RNA）。核酸的分布与生物学作用核酸的分布与生物学作用n核酸是生命的物质基础。核酸是生命的物质基础。n真核细胞中，约真核细胞中，约98%的的DNA存在于存在于核染色质核染色质中，少量存在中，少量存在线粒体线粒体内。内。DNA携带生物
3、遗传携带生物遗传信息，决定生物的遗传型（信息，决定生物的遗传型（genotype）。）。约约90%的的RNA存在于存在于细胞质细胞质，参与传递，参与传递DNA的遗传信息，决定蛋白质的合成，表达的遗传信息，决定蛋白质的合成，表达各种生命现象。各种生命现象。第一节第一节 核酸的化学组成与一级结构核酸的化学组成与一级结构一、核酸的化学组成一、核酸的化学组成l核酸是多聚核苷酸（核酸是多聚核苷酸（polynucleotide）。核酸的。核酸的降解：降解：核酸核酸 核苷酸核苷酸 核苷酸核苷酸 核苷核苷 磷酸磷酸 核苷核苷 碱基碱基 戊糖戊糖 磷酸磷酸戊糖戊糖 （核糖或脱氧核糖）（核糖或脱氧核糖）碱基碱基
4、（嘌呤碱和嘧啶碱）（嘌呤碱和嘧啶碱）核苷酸核苷酸（碱基（碱基-戊糖戊糖-磷酸）磷酸）核苷核苷 （碱基（碱基-戊糖）戊糖）核酸核酸 （多核苷酸）（多核苷酸）核酸水解产物核酸水解产物核酸分子的戊糖核酸分子的戊糖D-D-核糖核糖RNA D-RNA D-脱氧核糖脱氧核糖DNADNA 核酸分子的碱基核酸分子的碱基核酸分子的主要碱基核酸分子的主要碱基 DNA与与RNA化学化学组成的异同点组成的异同点 组成成分组成成分DNADNARNARNA磷酸磷酸H3PO4H3PO4戊糖戊糖D-2-D-2-脱氧核糖脱氧核糖D-D-核糖核糖碱基碱基 腺嘌呤（腺嘌呤（A A）、鸟嘌呤（）、鸟嘌呤（G G）、）、胞嘧啶（胞嘧啶
5、（C C）、）、胸腺嘧啶（胸腺嘧啶（T T）腺嘌呤（腺嘌呤（A A）、鸟嘌呤（）、鸟嘌呤（G G）胞嘧啶（胞嘧啶（C C）、）、尿嘧啶（尿嘧啶（U U）二、核苷二、核苷（nucleoside）与核苷酸与核苷酸碱基和核糖形成的糖苷称为碱基和核糖形成的糖苷称为核苷核苷。碱基碱基与脱氧核糖连接成与脱氧核糖连接成脱氧核苷脱氧核苷。糖苷键糖苷键n嘌呤核苷嘌呤核苷含嘌呤环第含嘌呤环第9 9位氮原子（位氮原子（N9N9）与核）与核糖第糖第1 1位碳原子（位碳原子（C1C1）形成的）形成的 N9-C1N9-C1糖糖苷键苷键。n嘧啶核苷嘧啶核苷含嘧啶第含嘧啶第1 1位氮原子（位氮原子（N1N1）与核糖）与核糖第
6、第1 1位碳原子（位碳原子（C1C1）形成的）形成的 N1-C1N1-C1糖苷糖苷键。键。核苷酸核苷酸 核苷的磷酸酯称为核苷的磷酸酯称为核苷酸核苷酸。5-核苷酸核苷酸 核苷酸分子中的磷酸主要连接在核苷酸分子中的磷酸主要连接在C5位上，位上，如：如：5-腺苷酸（腺苷酸（AMP）；）；3-核苷酸核苷酸 核苷酸分子中的磷酸主要连接在核苷酸分子中的磷酸主要连接在C3位上，位上，如：如：3-腺苷酸（腺苷酸（3 AMP）；）；多多磷酸核苷磷酸核苷 如如二磷酸核苷和三磷酸核苷；二磷酸核苷和三磷酸核苷；环环磷酸核苷磷酸核苷 如如3,5-环腺苷酸（环腺苷酸（cAMP）和）和3,5-环鸟苷酸（环鸟苷酸（cGMP）
7、。）。几种形式的腺嘌呤核苷酸几种形式的腺嘌呤核苷酸 核糖核苷酸和脱氧核苷酸核糖核苷酸和脱氧核苷酸n核糖核苷酸核糖核苷酸 腺苷酸（腺苷酸（AMP）鸟苷酸（鸟苷酸（GMP）胞苷酸（胞苷酸（CMP）尿苷酸（尿苷酸（UMP）n脱氧核苷酸脱氧核苷酸 脱氧腺苷酸脱氧腺苷酸 脱氧鸟苷酸脱氧鸟苷酸 （dAMP）（dGMP）脱氧胞苷酸脱氧胞苷酸 脱氧胸苷酸脱氧胸苷酸 （dCMP）（dTMP）RNA与与DNA的基本组成单位的基本组成单位 RNADNA腺苷酸腺苷酸（一磷酸腺苷，（一磷酸腺苷，AMP）脱氧腺苷酸脱氧腺苷酸（一磷酸脱氧腺苷，（一磷酸脱氧腺苷，dAMP）鸟苷酸鸟苷酸（一磷酸鸟苷，（一磷酸鸟苷，GMP）脱氧
8、鸟苷酸脱氧鸟苷酸（一磷酸脱氧鸟苷，（一磷酸脱氧鸟苷，dGMP）胞苷酸胞苷酸（一磷酸胞苷，（一磷酸胞苷，CMP）脱氧胞苷酸脱氧胞苷酸（一磷酸脱氧胞苷，（一磷酸脱氧胞苷，dCMP）尿苷酸尿苷酸（一磷酸尿苷，（一磷酸尿苷，UMP）脱氧胸苷酸脱氧胸苷酸（一磷酸脱氧胸苷，（一磷酸脱氧胸苷，dTMP）三、核酸的一级结构三、核酸的一级结构v核酸的一级结构是指核酸分子中核酸的一级结构是指核酸分子中核苷酸的排列核苷酸的排列顺序顺序，也称为核苷酸序列或，也称为核苷酸序列或碱基序列碱基序列。v一个核苷酸一个核苷酸C3上的羟基与另一核苷酸上的羟基与另一核苷酸C5上的上的磷酸脱水缩合形成磷酸脱水缩合形成3，5-磷酸二酯
9、键磷酸二酯键。v4 种种脱氧核苷酸脱氧核苷酸按照一定顺序以磷酸二酯键相按照一定顺序以磷酸二酯键相连形成的多聚脱氧核苷酸链称为连形成的多聚脱氧核苷酸链称为DNA。v4 种种核苷酸核苷酸按照一定顺序以磷酸二酯键相连形按照一定顺序以磷酸二酯键相连形成的多聚核苷酸链则称为成的多聚核苷酸链则称为RNA。脱氧核苷酸链片段脱氧核苷酸链片段 核苷酸链方向性核苷酸链方向性脱氧核苷酸或核苷酸的连接具有严格的方向性，脱氧核苷酸或核苷酸的连接具有严格的方向性，由前一个核苷酸的由前一个核苷酸的3-OH与下一个核苷酸的与下一个核苷酸的5-磷酸基之间形成磷酸基之间形成3，5-磷酸二酯键，从而构成磷酸二酯键，从而构成一个没有
10、分支的线性大分子。一个没有分支的线性大分子。核苷酸链两末端分别称为核苷酸链两末端分别称为5末端末端和和3末端。末端。多核苷酸链的书写习惯：多核苷酸链的书写习惯：从从5末端写到末端写到3末端末端（5 3）。第二节第二节 DNA的空间结构与功能的空间结构与功能q核酸的空间结构是指核酸分子中的原子核酸的空间结构是指核酸分子中的原子和基团在空间中的排列。和基团在空间中的排列。qDNADNA的空间结构包括的空间结构包括:二级结构二级结构 三级结构三级结构DNA双双螺旋结构要点螺旋结构要点u两条反向平行的多聚脱氧核苷酸链绕同一中心两条反向平行的多聚脱氧核苷酸链绕同一中心轴，以轴，以右手螺旋右手螺旋方式盘旋
11、成方式盘旋成双螺旋结构双螺旋结构。u双螺旋的平均直径为双螺旋的平均直径为2 nm，相邻碱基之间的，相邻碱基之间的距离为距离为 0.34 nm，两个核苷酸之间的夹角是，两个核苷酸之间的夹角是36。因此，沿中心轴每。因此，沿中心轴每旋转一周有旋转一周有10 个碱个碱基对基对，螺距为，螺距为 3.4 nm。u两条链是互补链。一条链的碱基与另一链的两条链是互补链。一条链的碱基与另一链的碱基通过氢键形成碱基通过氢键形成碱基对碱基对（base pair,bp）。）。A=T G C 这种配对规律称为这种配对规律称为碱基互补规律碱基互补规律。每一碱。每一碱基对中的两个碱基称为基对中的两个碱基称为互补碱基互补碱
12、基，每个，每个DNA分分子的两条链称为子的两条链称为互补链互补链。u碱基对之间的碱基对之间的氢键氢键和碱基平面之间的和碱基平面之间的碱基堆碱基堆积力积力是维系是维系DNA双螺旋结构的稳定。双螺旋结构的稳定。二、二、DNA的超螺旋结构的超螺旋结构nDNA双螺旋结构在细胞内进一步旋转折叠，在蛋双螺旋结构在细胞内进一步旋转折叠，在蛋白质参与下组装成致密结构白质参与下组装成致密结构超螺旋结构。超螺旋结构。n真核细胞染色质真核细胞染色质:DNA双螺旋双螺旋 核小体核小体 串珠状染色质细串珠状染色质细丝丝 线圈状螺旋管线圈状螺旋管(染色质染色质纤维纤维)染色单体。染色单体。核小体核小体核小体由核小体核心和
13、连接区两部分组成核小体由核小体核心和连接区两部分组成:核小体核心核小体核心由组蛋白由组蛋白 H2A、H2B、H3、H4 各两分子组成的八聚体，各两分子组成的八聚体，DNA双螺旋链双螺旋链 缠绕在这一核心上形成缠绕在这一核心上形成核小体核心颗粒核小体核心颗粒。核小体连接区核小体连接区是由组蛋白是由组蛋白H1和大约和大约20 80 bp DNA链相连接构成。链相连接构成。由核小体核心和连接区构成的核小体彼此相由核小体核心和连接区构成的核小体彼此相连形成连形成串珠状染色质细丝串珠状染色质细丝。核小体结构示意图核小体结构示意图 三、三、DNA的功能的功能qDNA是是携带遗传信息、复制和转录的模板。携带
14、遗传信息、复制和转录的模板。q基因基因（gene）是指）是指DNA分子中的特定区段，分子中的特定区段，是遗传物质的结构和功能单位。是遗传物质的结构和功能单位。q基因组基因组（genome）代表一个生物体内全部基）代表一个生物体内全部基因和染色体组成。包含所有编码因和染色体组成。包含所有编码RNA和蛋白和蛋白质的序列以及所有的非编码序列。质的序列以及所有的非编码序列。DNA经过复制经过复制 将遗传信息传递给子代，将遗传信息传递给子代，在体内通过转录和翻译，在体内通过转录和翻译，有序合成各种有序合成各种RNA和蛋白质。和蛋白质。真核细胞基因组的结构特点真核细胞基因组的结构特点v基因有大量基因有大量
15、重复顺序重复顺序，如人，如人DNA中重复顺中重复顺序至少占序至少占20%30%；v基因基因转录产物为单顺反子转录产物为单顺反子mRNA，即一个结，即一个结构基因转录一个构基因转录一个mRNA分子，翻译成一条多分子，翻译成一条多肽链；肽链；v基因是不连续的基因是不连续的，即基因编码序列，即基因编码序列（外显子，（外显子，exon）被非编码序列被非编码序列（内含子，（内含子，intron）分分隔。例如，卵清蛋白基因有隔。例如，卵清蛋白基因有7个内含子，细个内含子，细胞色素胞色素b基因有基因有4个内含子。个内含子。DNADNA 内含子（内含子（intron）外显子（外显子（exon）真核生物断裂基因
16、真核生物断裂基因53结构基因结构基因第三节第三节 RNA的结构与功能的结构与功能vRNA比比DNA小得多，小的含数十个核苷酸，小得多，小的含数十个核苷酸，大的可含数千个核苷酸。大的可含数千个核苷酸。vRNA通常为通常为单链单链形式，但其二级或三级结形式，但其二级或三级结构中也可形成构中也可形成局部双链局部双链区。区。v三种三种RNA：信使信使RNA(messenger RNA，mRNA)转运转运RNA(transfer RNA，tRNA)核蛋白体核蛋白体RNA(ribosomal RNA，rRNA)一、一、信使信使RNA的结构与功能的结构与功能n核内合成的核内合成的mRNA初级产物大小不一，被
17、称初级产物大小不一，被称为为核内不均一核内不均一RNA(heterogeneous nuclear RNA，hnRNA)。nhnRNA在核内经过剪接成为在核内经过剪接成为成熟成熟 mRNA转移转移到细胞质中。到细胞质中。n成熟成熟mRNA由氨基酸编码区和非编码区构成。由氨基酸编码区和非编码区构成。n真核生物真核生物mRNA 的结构特点是含有：的结构特点是含有：5末端末端帽帽和和3末端多聚末端多聚A 尾尾结构。结构。真核真核mRNA 5末端末端帽结构帽结构qmRNA 5末端以末端以7-甲基鸟嘌呤甲基鸟嘌呤-三磷酸鸟苷三磷酸鸟苷(m7GpppN)为起始的结构称为为起始的结构称为5末端帽结构末端帽结
18、构(cap sequence)。qmRNA的帽结构与帽结合蛋白分子结合，其的帽结构与帽结合蛋白分子结合，其复合物对复合物对mRNA从细胞核向细胞质转运、与从细胞核向细胞质转运、与核蛋白体的结合、与翻译起始因子的结合，核蛋白体的结合、与翻译起始因子的结合，以及维持以及维持mRNA的稳定性等均有重要作用。的稳定性等均有重要作用。mRNA的帽结构的帽结构真核真核mRNA 的多聚的多聚A A尾结构尾结构 vmRNA 3末端末端多聚多聚A尾尾(poly A)由数十个至百由数十个至百余个腺苷酸连接而成余个腺苷酸连接而成。vmRNA Poly A尾结构与尾结构与poly A结合蛋白结合结合蛋白结合形成复合物
19、。形成复合物。v3末端末端poly A尾结构和尾结构和5末端帽结构共同负责末端帽结构共同负责mRNA从核内向胞质转位、维系其稳定性以从核内向胞质转位、维系其稳定性以及调控翻译起始。去除及调控翻译起始。去除poly A尾结构和帽结尾结构和帽结构是细胞内构是细胞内mRNA降解的重要步骤。降解的重要步骤。mRNA的功能的功能nmRNA转录核内转录核内DNA遗传信息，并携带至细遗传信息，并携带至细胞质指导蛋白质合成，胞质指导蛋白质合成，决定蛋白质分子中氨决定蛋白质分子中氨基酸的排列顺序。基酸的排列顺序。nmRNA分子从分子从5末端碱基序末端碱基序AUG开始，每三开始，每三个相邻核苷酸构成一个个相邻核苷
20、酸构成一个三联体密码三联体密码（triplet code）或）或密码子密码子（codon），编码肽链上的一），编码肽链上的一个氨基酸。个氨基酸。nmRNA的半衰期短，几分钟或数小时不等。的半衰期短，几分钟或数小时不等。第一第一 核苷酸核苷酸（5端端）第二核苷酸第二核苷酸 第三第三 核苷酸核苷酸 （3端端）UCAGU苯丙氨酸苯丙氨酸苯丙氨酸苯丙氨酸亮氨酸亮氨酸亮氨酸亮氨酸丝氨酸丝氨酸丝氨酸丝氨酸丝氨酸丝氨酸丝氨酸丝氨酸酪氨酸酪氨酸酪氨酸酪氨酸终止信号终止信号终止信号终止信号半胱氨酸半胱氨酸半胱氨酸半胱氨酸终止信号终止信号色氨酸色氨酸UCAGC亮氨酸亮氨酸亮氨酸亮氨酸亮氨酸亮氨酸亮氨酸亮氨酸脯氨酸
21、脯氨酸脯氨酸脯氨酸脯氨酸脯氨酸脯氨酸脯氨酸组氨酸组氨酸组氨酸组氨酸谷酰胺谷酰胺谷酰胺谷酰胺精氨酸精氨酸精氨酸精氨酸精氨酸精氨酸精氨酸精氨酸UCAGA异亮氨酸异亮氨酸异亮氨酸异亮氨酸异亮氨酸异亮氨酸甲硫氨酸甲硫氨酸苏氨酸苏氨酸苏氨酸苏氨酸苏氨酸苏氨酸苏氨酸苏氨酸天冬酰胺天冬酰胺天冬酰胺天冬酰胺赖氨酸赖氨酸赖氨酸赖氨酸丝氨酸丝氨酸丝氨酸丝氨酸精氨酸精氨酸精氨酸精氨酸UCAGG缬氨酸缬氨酸缬氨酸缬氨酸缬氨酸缬氨酸缬氨酸缬氨酸丙氨酸丙氨酸丙氨酸丙氨酸丙氨酸丙氨酸丙氨酸丙氨酸天冬氨酸天冬氨酸天冬氨酸天冬氨酸谷氨酸谷氨酸谷氨酸谷氨酸甘氨酸甘氨酸甘氨酸甘氨酸甘氨酸甘氨酸甘氨酸甘氨酸UCAG二、二、转运转运R
22、NA的结构与功能的结构与功能vtRNA一级结构一般由一级结构一般由74到到95个核苷酸组成。个核苷酸组成。富含稀有碱基。富含稀有碱基。vtRNA的二级结构形似三叶草形。的二级结构形似三叶草形。vtRNA的功能是在蛋白质合成过程中作为的功能是在蛋白质合成过程中作为携携带和转运氨基酸带和转运氨基酸的载体。的载体。tRNA三叶草形结构三叶草形结构v二氢尿嘧啶环二氢尿嘧啶环（DHU环）环）;v反密码环反密码环 环中有反密码子（环中有反密码子（anticodon）。蛋）。蛋白质生物合成时白质生物合成时tRNA依靠反密码子识别依靠反密码子识别mRNA的密码子，将氨基酸携带到肽链合成的位置；的密码子，将氨基
23、酸携带到肽链合成的位置；v胸苷假尿苷环胸苷假尿苷环（T环）环）;v氨基酸臂氨基酸臂 其其3末端有末端有CCA-OH结构，在蛋白结构，在蛋白质合成时，质合成时，3-OH与氨基酸的羧基以酯键相连。与氨基酸的羧基以酯键相连。tRNA的三叶草形结构的三叶草形结构 tRNA的倒的倒L型三级结构型三级结构 三、核蛋白体的结构与功能三、核蛋白体的结构与功能vrRNA是细胞内含量最多的是细胞内含量最多的RNA，约占，约占RNA总总量的量的80%以上。以上。vrRNA与核蛋白体蛋白（与核蛋白体蛋白（ribosomal protein）结合构成结合构成核蛋白体核蛋白体或称为或称为核糖体核糖体。vrRNA一级结构特
24、征之一是存在甲基化残基一级结构特征之一是存在甲基化残基。rRNA二级结构特征是二级结构特征是“茎茎-环环”结构结构，为核，为核蛋白体蛋白的结合与组装提供了结构基础。蛋白体蛋白的结合与组装提供了结构基础。v核蛋白体是细胞内合成蛋白质的场所。核蛋白体是细胞内合成蛋白质的场所。rRNA二级结构特征二级结构特征“茎茎-环环”结构结构核蛋白体核蛋白体亚基亚基rRNArRNA蛋白质蛋白质原核生物原核生物核蛋白体核蛋白体小亚基小亚基（30S30S）16S rRNA16S rRNA2121种种（70S70S）大亚基大亚基（50S50S）5S rRNA5S rRNA3131种种 23S rRNA23S rRNA
25、真核生物真核生物核蛋白体核蛋白体小亚基小亚基（40S40S）18S rRNA18S rRNA3333种种（80S80S）大亚基大亚基（60S60S）5.8S rRNA5.8S rRNA4949种种 5S rRNA5S rRNA 28S rRNA28S rRNA原核生物与真核生物核蛋白体的组成原核生物与真核生物核蛋白体的组成第四节第四节 核核酸的主要理化性质酸的主要理化性质一、核酸的一般性质一、核酸的一般性质u含含磷磷10%通过测定磷分析核酸含量。通过测定磷分析核酸含量。u具有较强具有较强酸性酸性 为多元酸。为多元酸。u具有具有大分子特性大分子特性 常用相对分子质量、沉降系常用相对分子质量、沉降
26、系数（数（S）、链长、碱基）、链长、碱基(b或或kilobase，kb）或碱）或碱基对数（基对数（bp)表示核酸分子大小。表示核酸分子大小。b或或kb 用于用于单股核苷酸链，单股核苷酸链，bp用于双股核苷酸链。用于双股核苷酸链。u核酸溶液的核酸溶液的黏度黏度大大 溶液黏度降低或消失意味溶液黏度降低或消失意味着核酸变性或降解。着核酸变性或降解。二、核酸的紫外吸收二、核酸的紫外吸收v核酸、核苷酸、核苷分子的最大紫外吸收值位核酸、核苷酸、核苷分子的最大紫外吸收值位于波长于波长260nm。v根据根据260nm波长处吸光度（波长处吸光度（A）值，可以计算）值，可以计算溶液中溶液中DNA或或RNA含量。含
27、量。v根据核酸根据核酸260nm与与280nm的吸光度比值的吸光度比值（A260/A280）判断核酸样品的纯度：）判断核酸样品的纯度：DNA纯品的纯品的 A260/A280 应为应为 1.8 RNA纯品的纯品的 A260/A280 应为应为 2.0第五节第五节 核酸变性、复性与杂交核酸变性、复性与杂交一、一、DNA变性变性n理化因素理化因素使使DNA双链间双链间氢键断裂氢键断裂，DNA双螺双螺旋结构松散成为单链的现象称为旋结构松散成为单链的现象称为DNA变性变性。n变性改变变性改变DNA的空间结构，不改变碱基序列。的空间结构，不改变碱基序列。n变性变性DNA在在260nm处的吸光值增加的现象称
28、为处的吸光值增加的现象称为增色效应增色效应（hyperchromic effect）。）。nDNA变性的常用方法是加热。在连续加热的过变性的常用方法是加热。在连续加热的过程中以温度对程中以温度对A260作图，所得的曲线称为作图，所得的曲线称为解链解链曲线曲线。DNA的解链曲线的解链曲线DNA的融解温度的融解温度vDNA变性时变性时，A260 达到达到50%最大吸收值的温最大吸收值的温度称为度称为解链温度解链温度（或（或融解温度融解温度 melting temperature，Tm）。）。vTm 值的高低与值的高低与DNA分子大小及碱基组成有关。分子大小及碱基组成有关。G-C碱基对碱基对含量越多
29、，含量越多，Tm 值就越高；值就越高；A-T 碱碱基对基对含量越多，含量越多，Tm值就越低。值就越低。v根据根据 Tm值可以计算值可以计算DNA分子中分子中G-C与与A-T的的相对含量。相对含量。二、二、DNA的复性的复性变性变性DNA的两条互补链，在适当条件可重新的两条互补链，在适当条件可重新配对恢复天然双螺旋构象，这一现象称为配对恢复天然双螺旋构象，这一现象称为复复性性（renaturation）。热变性的热变性的DNA经缓慢冷却后即可复性，这一经缓慢冷却后即可复性，这一过程称为过程称为退火退火（annealing）。最适宜的复性）。最适宜的复性温度一般比温度一般比Tm值约低值约低25，这
30、个温度为，这个温度为退火退火温度温度。随着随着DNA复性出现，核酸紫外吸收值降低的复性出现，核酸紫外吸收值降低的现象称为现象称为低色效应低色效应。三、三、分子杂交分子杂交vDNA变性的复性过程中，在同一溶液内不同变性的复性过程中，在同一溶液内不同种类的种类的DNA单链分子或单链分子或RNA分子可以在不同分子可以在不同的分子间形成的分子间形成杂化双链杂化双链，如：，如：不同的不同的 DNA与与DNA；DNA与与RNA；或不同；或不同的的RNA与与RNA之间，这种现象称为之间，这种现象称为分子杂交分子杂交（hybridization）。v分子杂交是很重要的分子生物学技术。分子杂交是很重要的分子生物学技术。
