1、痰瘀证候与载脂蛋白痰瘀证候与载脂蛋白E E基因多态基因多态性的性的metameta分析分析 内容概述 一.Meta分析与基因多态性现状二.Meta分析方法三.痰瘀证候与apoE基因多态性Meta分析四.Meta分析在中医药研究中推广应用一.Meta分析基与因多态性现状1.MetaMeta分析历史与现状分析历史与现状 .1955年，Beecher发表了医学领域第一篇真正意义上的meta分析；.1977年，meta分析被逐步引入到RCT以及观察性的流行病学研究；.2008年Miquel Porta 把Meta分析定义为一种对单独的研究结果进行统计分析的方法，对研究结果间差异的来源进行检验，并对具有
2、足够相似性的结果进行定量合成。.目前，meta分析在医学领域应用最为广泛，应用最多的是对干预性的RCT评价，随着基因检测技术的不断进步，基因多态性相关meta分析已经越来越多。作为一种研究证据合成的方法，被公认为当前最高级别的证据。2.meta 分析优点.对具有相同研究目的的多个独立研究 结果进行定量合并和综合评价,以弥补单个研究之不足,它是一种更高逻辑形式的研究。.能针对诊断与治疗的临床问题提供可行、详细且证据充分的解答，其对改善治疗的质量、安全性和效率等的影响力。3.基因多态性研究应用现状基因多态性研究应用现状.多基因疾病的遗传风险预测.单基因疾病诊断.指导临床药物治疗4.基因多态性met
3、a分析基因模型选择.假设基因突变为A到B,则三种基因型分别为AA,AB,BB。.假定AA为野生纯合基因型，则AB为突变杂合基因型，BB为突变纯合基因型。.常用基因模型为以下5种：BB VS.AA(homozygote)AB VS.AA(heterozygote)BB+AB VS.AA(dominant model）BB VS.AB+AA(recessive model)Allele B VS.Allele A二.实施meta分析的方法 提出问题得出结论收集数据分析数据拟定研究计划提炼整理数据文献筛选与文献质量评价文献检索选择评价指标选择效应量异质性检验、模型选择、计算合并效应量亚组、偏倚性、敏
4、感性分析报告解释结论三.痰瘀证与载脂蛋白E基因多态性meta分析1.选题的背景1.1.中医临床证候的多样性和复杂体系正好是基因多态性与临床表型多样性关系最好的研究对象，疾病发生的本身是由于基因与环境交互作用的结果。1.2.随着中医痰瘀证的深入研究，在痰瘀证病症结合领域，从痰瘀证的病机、病理实质、代谢组学、蛋白组学、及基因组学研究痰瘀证候的本质已经取得了大量研究成果。1.3.Zannis于1981年根据ApoE表型提出ApoE基因模型，认为ApoE的合成是由位于一个基因位点上的三个等位基因所控制，即E2、E3和E4，每一个等位基因对应于一个主要异构体产生三种纯合子（E2/2，E3/3，E4/4）
5、和三种杂合子（E2/3，E2/4，E3/4）共六种常见表型。1.4.大量的研究证明,apoE 基因多态性能影响其他载脂蛋白、脂蛋白和血脂水平。1.5.血瘀与血管内皮损伤、微循环、毛细血管通透性、血管活性肽类、血小板功能及抗凝系统、血液流变学、血流动力学等功能异常等有关。动脉粥样化表现出典型的血瘀证,而高脂血症主要表现为痰证。但中医认为痰瘀同源,二者可以相互影响,临床上血瘀证和痰证在疾病中常兼见。2.纳入与排除标准2.1.纳入标准 入选人群符合以下诊断标准:痰瘀证诊断标准参照中药新药临床研究指导原则(2002版)，所有对照组均为健康成年人群，无高血压病、心脏病、脑血管病及内分泌病等。不对性别、年
6、龄、种族、职业、人种进行限制，试验组与对照组的基线资料应经过统计学检验且差别没有显著性。2.2.排除标准:非随机对照试验；所有未设计对照组的试验；多次发表或无法获得治疗数据的研究；历史性对照（两个不同时期进行的研究结果相比较）；动物试验及细胞组织研究；综述性研究。3.检索策略3.1.研究资料来源于已公开发表的中医痰瘀证候与ApoE基因多态性的RCT。电子检索中国知网（CNKI)、维普全文期刊数据库（VIP）、万方数据库、中国生物医学数据库（CBM），所有文献检索时间均为（从建库开始-2015年3月31日）。3.2.中文检索词以：#1中医证候、#2证型、#3痰瘀、#4痰、#5瘀、#6载脂蛋白E、
7、#7ApoE、#8多态性。中文检索式：(#1 or#2)and(#3or#4or#5)and(#6 or#7)and(#8)；3.3.根据不同数据库情况进行主题词联合关键词、自由词综合检索,确保检索的系统性和完整性。4.文献质量评价文献的选择按是否满足纳入与排除标准。对各独立研究从以下几方面进行质量评估，以考察各个研究是否存在偏倚及其影响程度：.实验设计是否科学；.研究对象的纳入标准及其基本构成特征是否明确；.处理因素及其方法是否准确；.统计方法是否恰当；.是否对本研究所存在的偏倚进行了讨论。以上5 项，满足一项为1 分，总分3 分者质量可靠。对各研究中人群的基因型分布进行Hardy-Wein
8、berg（H-W）遗传平衡检验。5.统计学方法使用Cochrane协作网提供的Rev Man5.2软件统计分析数据。对具有同一疗效指标的临床随机对照试验进行Meta分析。首先对各研究效应量进行异质性Q检验,当P0.05说明各研究同质性较好,选择固定效应模型;P0.05说明各研究同质性较差,选择随机效应模型8,并进行合并效应量估计。同时采用漏斗图对纳入研究进行分析发表偏倚分析。6.研究结果初检相关文献（n=64）基因型分布，未设计健康对照组（n=23）不能提取完整数据（n=23）相关文献（n=41）相关文献（n=15）4篇文献符合标准纳入本研究综述性文章（n=3），数据库重复发表（n=8）7.纳
9、入研究基本信息724例研究人群纳入研究，包括405 例痰瘀病人和319例健康对照组病人。8.基因型分布9.合并分析结果A:E2/2 VS E3/3基因多态性meta分析结果B:E2/2 VS E4/4基因多态性meta分析结果C:E3/3 VS E4/4基因多态性meta分析结果D:E2/2 VS E3/3+E4/4基因多态性meta分析结果E:E3/3 VS E2/2+E4/4基因多态性meta分析结果F:E4/4 VS E2/2+E3/3基因多态性meta分析结果G:E2/3 VS E2/4+E3/4基因多态性meta分析结果H:E3/4VS E2/3+E2/4基因多态性meta分析结果I
10、:E2/4 VS E2/3+E3/4基因多态性meta分析结果10.发表偏倚性研究 本项研究纳入文献只有4篇，一般小于9篇文献的研究，不建议做漏斗图分析。因此，未详细做发表偏倚性分析。11.结论 纯合子E2/2、E3/3、E4/4基因型与痰瘀证候发病有一定关系。12.本研究的不足之处 本研究的局限性在于将小样本量的数据总结做系统评价，并且无法完全分析纳入文献的发表偏倚性，这可能导致本分析结果仅有一定的代表性，还不能完全表述apoE基因型与痰瘀证的发病关系。四.Meta分析在中医药研究推广应用1.Meta分析在中医药研究的前景.循证医学方法可对中医中药治疗疾病的疗效作出客观评价；.在不增加支出的情况下提高疗效；提高工作效率；提高诊断水平；.完善中医药临床研究方法；.对中医药临床研究方法、研究质量、现状、存在的问题作出分析，促进中医药走向世界。2.当前应用的困难 当前存在的最大困难是在临床研究中设计的不严谨、前瞻性、高质量、多中心的随机对照试验的报告不多。但随着循证医学方法在中医药研究中更广泛的运用，会很大提高中医药临床研究水平。
