1、1临床基础检验临床基础检验 第一章血液标本采集与处理第一章血液标本采集与处理2第一节第一节 血液标本的采集血液标本的采集n检验申请：身份证实名制挂号，真实！n采集和处理要求：LIS条码可以自动显示n标本信息完整性：采集流程控制n标本拒收：应制定标准拒收SOP文件。一、标本采集的要求一、标本采集的要求3 二、血液标本类型二、血液标本类型n全血全血：由血细胞和血浆组成，主要用于临床血液学检查，：由血细胞和血浆组成，主要用于临床血液学检查，如血细胞计数、分类和形态学检查等。如静脉、动脉、毛细如血细胞计数、分类和形态学检查等。如静脉、动脉、毛细胞血管全血。胞血管全血。n血浆血浆：为全血除去血细胞的部分
2、，适合临床生化检查，特：为全血除去血细胞的部分，适合临床生化检查，特别是内分泌激素的测定；血浆除钙离子外，含有其他全部凝别是内分泌激素的测定；血浆除钙离子外，含有其他全部凝血因子，适合血栓与止血的检查血因子，适合血栓与止血的检查n血清血清：是离体后的血液自然凝固后析出的液体部分，除纤：是离体后的血液自然凝固后析出的液体部分，除纤维蛋白原等凝血因子在凝血时消耗外，其他成分与血浆基本维蛋白原等凝血因子在凝血时消耗外，其他成分与血浆基本相同，更适用于多数临床化学和临床免疫学检查。相同，更适用于多数临床化学和临床免疫学检查。n血细胞血细胞：浓缩粒细胞，血小板等：浓缩粒细胞，血小板等第一节第一节 血液标
3、本的采集血液标本的采集4第一节第一节 血液标本的采集血液标本的采集 三、血液标本的采集方法三、血液标本的采集方法 血液标本的采集(The Collection of Blood)是是分析前分析前质控的重要环节，直接影响到检质控的重要环节，直接影响到检 验结果的准确性。验结果的准确性。Note:Note:很多因素会影响到血液标本检测很多因素会影响到血液标本检测:患者的活动情况和精神状态、药物、年龄、性别、患者的活动情况和精神状态、药物、年龄、性别、种族、标本采集的时间以及是否吸烟等种族、标本采集的时间以及是否吸烟等 根据检验项目来选择采集方法（量、抗凝、）。根据检验项目来选择采集方法（量、抗凝、
4、）。血液标本采集后应立即送检，并尽快进行检查。血液标本采集后应立即送检，并尽快进行检查。5（一）皮肤采血法（一）皮肤采血法（skin puncture for bloodcollection)以前叫毛细血管采血法以前叫毛细血管采血法 (The Collection of Copillary Blood)视频录像观看 6皮肤采血法特点皮肤采血法特点 部位部位 ：左手无名指指尖内侧左手无名指指尖内侧 、耳垂、足根等、耳垂、足根等 用血量：用血量：少（少（0.5ml）适用范围适用范围：窄（细胞计数窄（细胞计数、Hb）结果：结果：不够稳定，不能重复不够稳定，不能重复 一般较静脉血高一般较静脉血高 影响
5、因素：影响因素：多（部位、气候、采血技术多（部位、气候、采血技术)注意事项：一人一针一次使用，去第一滴血，注意事项：一人一针一次使用，去第一滴血，采血动作要快，首采血小板计数采血动作要快，首采血小板计数 7 自动皮肤采血法自动皮肤采血法TZD-100的工作原理：的工作原理：仪器中的激光发射器在不超过仪器中的激光发射器在不超过500S时间时间内发出一束波长为内发出一束波长为2.94m的激光的激光,在耗材（一在耗材（一次性）次性）镜头保护片的配合下，细微的光束镜头保护片的配合下，细微的光束打在采血者手指的滑囊处，在打在采血者手指的滑囊处，在1/1000秒时间内秒时间内使皮肤瞬间温度达到使皮肤瞬间温
6、度达到1K左右左右,组织溶解、挥组织溶解、挥发发,出现一个出现一个0.5毫米的小孔，而打孔后的残留毫米的小孔，而打孔后的残留物呈现出等离子状态，吸附在镜头保护片的物呈现出等离子状态，吸附在镜头保护片的表面表面,从而实现采集血液样本的目的。标本广从而实现采集血液样本的目的。标本广泛运用于血常规、血型、各类干化学测试等泛运用于血常规、血型、各类干化学测试等一切使用适量末梢血的分析项目一切使用适量末梢血的分析项目,适合于各种适合于各种类型的医疗机构使用。类型的医疗机构使用。8（二）静脉采血法venipuncture for blood collectionn严格生物安全防护技术：戴帽、口罩、手套、一
7、人一针一带。严格遵守窗口人员采血规范n确认病人信息：询问、医疗就诊卡n确认采血项目使用的采血管类型n选取静脉采血部位：肘部静脉,手背静脉,股静脉、颈外静脉。n不能采血部位：水肿、血肿、疤痕、点滴侧静脉。n确认采血量，采血下班后应记录工作日记9静静 脉脉 采采 血血 法法 特特 点点部位部位：肘部静脉肘部静脉,手背静脉手背静脉,股静脉、颈外静脉等股静脉、颈外静脉等用血量：用血量：较多（较多（2ml）适用范围：适用范围：广（生化、血液、微生物）广（生化、血液、微生物）结果：结果：稳定，可重复稳定，可重复影响因素：影响因素：少，少，但要防止溶血但要防止溶血10静静 脉脉 采采 血血 法法 常常 见见
8、 问问 题题n血肿淤青：穿刺太深、太浅、针头晃动、止血按压方式错误（揉搓）n凝固：采血的技术问题；抗凝剂没加或失效；抗凝剂没有充分混匀止血带压迫时间过长。n溶血：器材不干燥、不清洁；血液注入试管时产生大量气泡；针头没有拔下；混匀或搅拌时过猛。n晕血解救：让病人平躺或指掐人中合谷。11采血时采血时注意：注意：n血量的多少血量的多少 n抗凝剂是否需要抗凝剂是否需要n试管的编号、是否加塞、保存的方式试管的编号、是否加塞、保存的方式n晕血的处理晕血的处理n止血带压迫时间不宜过长，最好不超过半分钟止血带压迫时间不宜过长，最好不超过半分钟n注射器和容器必须干燥注射器和容器必须干燥n抽血不宜过快抽血不宜过快
9、n采血后采血后禁止直接用手拔针头。禁止直接用手拔针头。12（三）真空采血法（三）真空采血法（vacuum tube for bloodcollection）真空采血法，又称为真空采血法，又称为负压采血法负压采血法。国内外已生产专供医学检验使用的真空采血国内外已生产专供医学检验使用的真空采血装置，有装置，有套筒式（硬接式）套筒式（硬接式）和和头皮静脉式（软接式）头皮静脉式（软接式）两种，后者两种，后者还设计备有软橡皮套管式止血装置，穿刺回血后，即可将另一端还设计备有软橡皮套管式止血装置，穿刺回血后，即可将另一端的硬插管插入真空定量硅化的采血试管中，血液足量后，拔出硬的硬插管插入真空定量硅化的采血
10、试管中，血液足量后，拔出硬插管即止血，当插另一真空定量试管时又可采血，整个采血过程插管即止血，当插另一真空定量试管时又可采血，整个采血过程无血液外溢和污染。血标本转运方便，特别适用于病房和野外流无血液外溢和污染。血标本转运方便，特别适用于病房和野外流动采血；能避免对医护人员的感染和患者血标本间的交叉污染。动采血；能避免对医护人员的感染和患者血标本间的交叉污染。13干净安全干净安全：钴钴6060照射，保证内壁照射，保证内壁100%100%无菌；去离子水和去污剂冲洗，内无菌；去离子水和去污剂冲洗，内壁无致热源；并经硅酮处理；超净室内组装：标本溶血或被外源性物质污壁无致热源；并经硅酮处理；超净室内组
11、装：标本溶血或被外源性物质污染的可能性极小染的可能性极小 简便快捷简便快捷：不需配制添加剂，平均减少采血时间不需配制添加剂，平均减少采血时间20%20%，检验操作时间，检验操作时间12%12%；减少患者不适：可实现一针多管操作减少患者不适：可实现一针多管操作 准确可靠准确可靠：预置真空度准确预置真空度准确定量定量采样，血样与添加剂的比例准确，减少采样，血样与添加剂的比例准确，减少溶血和微凝血，结果准确可靠。国际统一头盖颜色标记，易于选择、辨认溶血和微凝血，结果准确可靠。国际统一头盖颜色标记，易于选择、辨认及分类及分类 经济有效经济有效：省略采样及试验前繁杂准备工作，节省了人力和物力；定量省略采
12、样及试验前繁杂准备工作，节省了人力和物力；定量采集，避免患者血样浪费；采集，避免患者血样浪费；直接上机直接上机检测，减少不必要操作且样品中无微检测，减少不必要操作且样品中无微血块，避免机器堵塞；减少因溶血或异常凝血造成的误检和再检；减少因血块，避免机器堵塞；减少因溶血或异常凝血造成的误检和再检；减少因误检而导致患者诊断及治疗的延误误检而导致患者诊断及治疗的延误 真空采血法特点：真空采血法特点：14真空采血采集步骤真空采血采集步骤 15真空采血常用器材及用途16 真空采血容器色泽及应用范围颜颜 色色 抗抗 凝凝 剂剂 应应 用用 范范 围围 灰灰 草酸盐、氟化钠草酸盐、氟化钠 全血、血浆，抑制糖
13、原分解的酶全血、血浆，抑制糖原分解的酶 黄黄 生化、免疫检验生化、免疫检验 绿绿 肝素肝素 全血、血浆全血、血浆 红红 血清血清 蓝蓝 枸橼酸盐枸橼酸盐 全血、血浆，凝血一般检查全血、血浆，凝血一般检查 紫紫 乙二胺四乙酸盐乙二胺四乙酸盐 全血、血浆全血、血浆 钾盐用于血细胞、血小板和血液学检查钾盐用于血细胞、血小板和血液学检查黑色黑色 枸橼酸盐枸橼酸盐 血沉血沉17BD公司建议公司建议：无菌培养管无菌培养管-无添加剂红色管无添加剂红色管-出凝血出凝血-生化管生化管-血常规血常规-血糖血糖18（四）动脉采血法（四）动脉采血法n部位部位:桡动脉桡动脉,股动脉股动脉,肱动脉肱动脉n适用适用:血气分
14、析测定血气分析测定n抗凝剂抗凝剂:肝素肝素n注意事项注意事项:(1):(1)必须隔绝空气必须隔绝空气 (2)(2)及时送检，止血及时送检，止血10-15min10-15min19采血的方法学评价采血的方法学评价皮肤采血主要缺点是易于溶血、凝血和可能混入组织液。皮肤采血主要缺点是易于溶血、凝血和可能混入组织液。检查结果重复性差，现在多已改用检查结果重复性差，现在多已改用静脉采血静脉采血。开放式采血由于操作环节多、难于规范统一，在移液及丢开放式采血由于操作环节多、难于规范统一，在移液及丢弃注射器时可能造成环境污染。弃注射器时可能造成环境污染。封闭式采血封闭式采血法操作规范，从静脉穿刺到血标本转运，
15、整个法操作规范，从静脉穿刺到血标本转运，整个过程血标本皆不与外界接触。既有利于标本的收集运送和过程血标本皆不与外界接触。既有利于标本的收集运送和保存，也有利于防止医院内血源性传染病的交叉感染和环保存，也有利于防止医院内血源性传染病的交叉感染和环境保护境保护。20第二节第二节 血液标本处理血液标本处理抗凝（抗凝（Anticoagulation）：）：应用物理或化学的方法，除去或抑制血液中某些应用物理或化学的方法，除去或抑制血液中某些 凝血因子的活性，以阻止血液凝固。凝血因子的活性，以阻止血液凝固。抗凝剂（抗凝剂（Anticoagulant）：）：能够阻止血液凝固的化学试剂或物质。能够阻止血液凝固
16、的化学试剂或物质。促凝促凝(Coagulation)：就是用化学物质激活血液中的纤维：就是用化学物质激活血液中的纤维蛋白酶，使可溶性纤维蛋白原变为不可溶的纤维蛋白蛋白酶，使可溶性纤维蛋白原变为不可溶的纤维蛋白多聚体，进而形成稳定的纤维蛋白凝块，可在短时间多聚体，进而形成稳定的纤维蛋白凝块，可在短时间内（内（5分钟左右）加速所采集的血液凝固加速血液凝固分钟左右）加速所采集的血液凝固加速血液凝固的过程。的过程。21常用抗凝剂常用抗凝剂1、EDTA盐盐 （乙二胺四乙酸盐）（乙二胺四乙酸盐）2、枸橼酸钠枸橼酸钠 （柠檬酸钠）（柠檬酸钠）3、肝素肝素4、其它（草酸盐等）其它（草酸盐等）22常用抗凝剂常用
17、抗凝剂 1 1、乙二胺四乙酸（乙二胺四乙酸（EDTAEDTA）盐盐：原理：原理：EDTA EDTA有二钠、二钾和三钾盐，均可与有二钠、二钾和三钾盐，均可与钙钙 离子离子结合成螯合物，从而阻止血液凝固。结合成螯合物，从而阻止血液凝固。Na Na2 2C C1010H H1414O O8 8N N2 2+Ca+Ca2+2+CaCCaC1010H H1212O O8 8N N2 2+2Na+2Na+2H+2H+23常用抗凝剂常用抗凝剂n乙二胺四乙酸（乙二胺四乙酸（EDTAEDTA）盐适用：盐适用：血细胞计数。血细胞计数。用量为用量为EDTA-KEDTA-K2 2-2H-2H2 2O 1.5O 1.5
18、2.2mg/ml2.2mg/ml血液血液 不适合不适合:出凝血检查。出凝血检查。用法用法:15:15g/Lg/L，0.4ml/5mlBlood0.4ml/5mlBlood 特点特点:对细胞形态影响小，但影响血小板聚集对细胞形态影响小，但影响血小板聚集24常用抗凝剂常用抗凝剂2.2.枸椽酸钠枸椽酸钠（trisodium citratetrisodium citrate）原理：原理：可与血中可与血中钙离子钙离子形成可溶性螯合物，从形成可溶性螯合物，从 而阻止血液凝固。而阻止血液凝固。2 2NaNa3 3C C6 6H H5 5O O7 7+2Ca+2Ca2+2+2CaC2CaC6 6H H5 5O
19、 O7 7-+6Na+6Na+25常用抗凝剂常用抗凝剂n枸椽酸钠（枸椽酸钠（trisodium citratetrisodium citrate适用：适用：出凝血出凝血(1:9)(1:9)、血沉、血沉(1:4)(1:4)、血液保养液血液保养液 用法：用法：109109mmol/Lmmol/L当红细胞压积当红细胞压积0.550.55或或0.200.20时：时：抗凝剂用量（抗凝剂用量（mlml）=0.00185=0.00185血量（血量（100100病人红细胞比积病人红细胞比积%）对贫血或红细胞增多症患者的血液仍按对贫血或红细胞增多症患者的血液仍按1 1：9 9的比例加入抗凝剂的比例加入抗凝剂就会
20、发生抗凝剂相对过多就会发生抗凝剂相对过多/少，这将明显地影响凝血象检查结果。少，这将明显地影响凝血象检查结果。26常用抗凝剂常用抗凝剂3.肝素肝素（heparin）：）：钠盐或锂盐钠盐或锂盐 原理：原理：由由肥大细胞和嗜碱性粒细胞产生肥大细胞和嗜碱性粒细胞产生，加强，加强抗凝血酶抗凝血酶（AT-）灭活丝氨酸蛋白酶的作用，灭活丝氨酸蛋白酶的作用，从而阻止凝血酶形成从而阻止凝血酶形成 适用：适用：血液流变学血液流变学、RBC脆性、脆性、血气血气分析、分析、生生化化分析分析 27常用抗凝剂常用抗凝剂n肝素（肝素（heparin）用量：用量：1515IU/1mlBloodIU/1mlBlood特点：抗
21、凝效果特点：抗凝效果强强；不影响血细胞体积、不影响血细胞体积、不易溶血不易溶血 过量会使过量会使WBCWBC凝集、凝集、PLTPLT减少减少 不适于血液学一般检查不适于血液学一般检查 28常用抗凝剂常用抗凝剂 4.4.草酸钠（草酸钠（sodium oxalate）原理：原理：草酸草酸钠钠可与血中钙离子生成草酸钙沉淀，可与血中钙离子生成草酸钙沉淀，从而阻止血液凝固。从而阻止血液凝固。适用：可用于凝血象检查。适用：可用于凝血象检查。用法：常用用法：常用0.1mol/L浓度，与血液按浓度，与血液按1：9比例使用。比例使用。特点：特点：对凝血对凝血V V因子保护功能差，影响凝血酶原时间测定效果；因子保
22、护功能差，影响凝血酶原时间测定效果；由于草酸盐与钙结合形成的是沉淀物，影响自动凝血仪由于草酸盐与钙结合形成的是沉淀物，影响自动凝血仪的使用，因此，多数学者认为凝血象检查选用枸椽酸钠为抗的使用，因此，多数学者认为凝血象检查选用枸椽酸钠为抗凝剂更为适宜。凝剂更为适宜。29常用抗凝剂常用抗凝剂5.5.双草酸盐抗凝剂：双草酸盐抗凝剂：原理：原理：草酸钾可使红细胞缩小，而草酸铵可使草酸钾可使红细胞缩小，而草酸铵可使 红细胞胀大，二者适量混合后，恰好不红细胞胀大，二者适量混合后，恰好不 影响红细胞的形态和体积。影响红细胞的形态和体积。适用：适用：红细胞比积红细胞比积30物理法抗凝n原理：用物理搅拌的方法去
23、除纤维蛋白n使用：玻璃珠转动器皿采集血培养的绵羊血；用竹签搅拌法抗凝，进行红斑狼疮细胞检查。31真空采血常用促凝剂n种类：凝血酶、蛇毒、硅石粉、硅碳素、纤维蛋白酶等n原理：激活凝血蛋白酶，加速血液凝固 n适用项目：血清生化、免疫检验 特别适用于急诊血清生化检验 32真空采血分离胶n分离胶:是一种聚合高分子材料，不溶于水，具有抗氧化，耐高温，抗低温，高稳定性等特性分离胶具有触变性的性质。触变性现象就是凝胶和溶胶在机械力作用下的互变现象.n分离原理：分离胶的比重约在1.041.05之间。（血清的比重约在1.0261.031之间，血细胞的比重约在1.0921.095之间，在离心力的作用下，分离胶就在
24、血清和血块间形成隔离层）。33血液标本采集和保存的质量控制n采血场所要求：空间宽敞，光线明亮，通风良好，台面高低和宽度适宜，设置叫号设备系统等。防止交叉感染，履行环境消毒。n患者状态要求：生理状态饮食药物 采血时间采血部位体位输液压脉带使用溶血、凝血和脂血 34血液标本采集和保存的质量控制n标本运送及保存：唯一标识原则 生物安全原则 尽快运送原则 一般4 冰箱；20 冰箱（1月）70保存（3月）。n标本拒收常见原因：溶血、脂血、抗凝标本出现凝固、血液采集容器不当、采血量不足或错误、转运条件不当、申请和标本标签不一致、标本污染、容器破漏等n废弃标本处理：实验室生物安全通用要求（GB19489-2
25、004）35第三节第三节 血涂片的制备和细胞染色血涂片的制备和细胞染色Making Blood Films and Making Blood Films and StainingStaining36一、制备血涂片的玻片要求一、制备血涂片的玻片要求玻片要求：清洁、干燥、中性、无油腻玻片要求：清洁、干燥、中性、无油腻 新玻片：新玻片：重铬酸钾洗液或稀盐酸重铬酸钾洗液或稀盐酸10%浸泡浸泡 24小时，然后清洗。小时，然后清洗。旧玻片：旧玻片：肥皂水泡，煮沸肥皂水泡，煮沸20分，清洗，烘干。分，清洗，烘干。推片：推片：光滑光滑 37二、血涂片制备方法二、血涂片制备方法 38两种推片方式39三、一张良好
26、的血涂片要求三、一张良好的血涂片要求 良好的血片：良好的血片：厚薄适宜，头体尾分明，厚薄适宜，头体尾分明，分布均匀，边缘整齐、分布均匀，边缘整齐、两边留有一定的空隙。两边留有一定的空隙。影响因素：血量（多影响因素：血量（多厚厚）速度（快速度（快厚厚）角度（大角度（大厚厚），一般），一般3045度。度。4041四、血片的染色四、血片的染色n1 1瑞氏（瑞氏（WrightWright）染色法染色法 伊红伊红瑞氏染料：瑞氏染料：1g 美蓝美蓝 甲醇（甲醇（AR）:600mln瑞氏染料是由酸性染料伊红和碱性染料亚甲瑞氏染料是由酸性染料伊红和碱性染料亚甲蓝组成的复合染料。蓝组成的复合染料。n亚甲蓝为四甲
27、基硫堇染料，有对醌型和邻醌型两种结亚甲蓝为四甲基硫堇染料，有对醌型和邻醌型两种结构，通常为氯盐，即氯化美蓝。构，通常为氯盐，即氯化美蓝。n伊红通常为钠盐伊红通常为钠盐n将一定的伊红和美蓝溶解在甲醇中，即为瑞氏染液。将一定的伊红和美蓝溶解在甲醇中，即为瑞氏染液。ME ME 甲醇甲醇 M M+E+E-42甲醇的作用甲醇的作用、溶解美蓝和伊红、溶解美蓝和伊红MEME，使其解离为使其解离为M+M+和和E-E-，后后两者可以选择性地被吸附于血细胞内的不同成两者可以选择性地被吸附于血细胞内的不同成分而着色。分而着色。、具有很强的脱水作用，可固定细胞的形态，、具有很强的脱水作用，可固定细胞的形态，当细胞发生
28、凝固时，蛋白质被沉淀为颗粒状或当细胞发生凝固时，蛋白质被沉淀为颗粒状或者网状结构，增加细胞结构的表面积，提高对者网状结构，增加细胞结构的表面积，提高对染料的吸附作用，增强染色效果。染料的吸附作用，增强染色效果。43Wright染色法原理染色法原理 染色作用：染色作用：细胞的染色既有物理的吸附作用，细胞的染色既有物理的吸附作用，又有化学的亲和作用。又有化学的亲和作用。各种细胞成分化学性质不同，对各种细胞成分化学性质不同，对 各种染料的亲和力也不一样。各种染料的亲和力也不一样。44Wright染色法原理染色法原理酸性染料伊红酸性染料伊红+碱性物质（碱性物质（HBHB、嗜酸颗粒）嗜酸颗粒）红色红色碱
29、性染料美蓝碱性染料美蓝+酸性物质（核染色质、嗜酸性物质（核染色质、嗜 碱颗粒、碱颗粒、PLTPLT等）等）兰色兰色ME+ME+中性物质中性物质紫红色紫红色45Wright染色法原理染色法原理nPHPH对细胞染色影响对细胞染色影响1 1、细胞各种成分均属蛋白质，由于蛋白质系两性电解质、细胞各种成分均属蛋白质，由于蛋白质系两性电解质，所带电荷随溶液，所带电荷随溶液PHPH而定。而定。2 2、酸性环境：偏、酸性环境：偏红红 H+H+增多，与蛋白增多，与蛋白COO-COO-结合增多，游离结合增多，游离NH4+NH4+增多，增多，与伊红结合增多。与伊红结合增多。3 3、碱性环境：染色偏、碱性环境：染色偏
30、兰兰 H+H+减少，减少，COO-COO-游离增多，与美蓝结合增多。游离增多，与美蓝结合增多。4 4、要求、要求 PH6.4PH6.46.86.8为宜。（磷酸盐缓冲液）为宜。（磷酸盐缓冲液）46试剂使用注意点：试剂使用注意点：n新鲜配制的染料偏碱，须在室温或是新鲜配制的染料偏碱，须在室温或是3737下贮存下贮存一定时间，才能使用。贮存时间越久，染色效果一定时间，才能使用。贮存时间越久，染色效果越好。如越好。如20102010年配制年配制20112011年使用，一般至少年。年使用，一般至少年。n采用吸光度比值来评价瑞氏染液的质量。采用吸光度比值来评价瑞氏染液的质量。rA=A650/A525 rA
31、=A650/A525。美蓝吸收峰波长为美蓝吸收峰波长为650650nmnm，伊红吸收峰波伊红吸收峰波长为长为525525nmnm，天青天青B B吸收峰也为吸收峰也为650650nmnm。RARA下降到下降到1.31.30.10.1时即可使用时即可使用。n实际血片染色观察实际血片染色观察47染色步骤染色步骤n血涂片的制备干燥血涂片的制备干燥n染色（加瑞氏染液后加缓冲液，染色（加瑞氏染液后加缓冲液，1:1，一定时间），一定时间）n流水冲洗干燥流水冲洗干燥n观察染色效果（观察染色效果（RBC、WBC核及颗粒）并分类核及颗粒）并分类48注意事项：注意事项：涂片染色视频涂片染色视频n血膜必须充分干燥血膜
32、必须充分干燥n染色时间与染液浓度、室温高低、细胞多少染色时间与染液浓度、室温高低、细胞多少有关有关n染液不可过少染液不可过少n冲洗时应以流水将染液冲去冲洗时应以流水将染液冲去n染色过深可用甲醇或酒精适当褪色染色过深可用甲醇或酒精适当褪色n染色时应注意保护血膜尾部细胞，不能划掉染色时应注意保护血膜尾部细胞，不能划掉49吉姆萨（吉姆萨（Giemsa）染色法染色法 n原理：吉姆萨染液由天青、伊红组成。原理：吉姆萨染液由天青、伊红组成。染色原理和结果与瑞氏染色法基本相同。染色原理和结果与瑞氏染色法基本相同。n与瑞氏染色不同点：与瑞氏染色不同点：本法对细胞核和寄生虫着色较好，结构显示本法对细胞核和寄生虫
33、着色较好，结构显示 更清晰，而胞浆和中性颗粒则着色较差。更清晰，而胞浆和中性颗粒则着色较差。50瑞氏染色对胞浆和中性颗粒着色较好瑞氏染色对胞浆和中性颗粒着色较好;吉姆萨染色对吉姆萨染色对细胞核着色较好细胞核着色较好,故可用故可用瑞氏瑞氏-吉姆萨复合染色法吉姆萨复合染色法。即。即在瑞氏染色过程中，以稀释的吉姆萨染液代替瑞氏染在瑞氏染色过程中，以稀释的吉姆萨染液代替瑞氏染色缓冲液色缓冲液;或先用瑞特染色法染色后，再用稀释吉姆或先用瑞特染色法染色后，再用稀释吉姆萨染液复染。萨染液复染。目前临床上已有血液自动分析仪自动制片和自动染色。目前临床上已有血液自动分析仪自动制片和自动染色。染色评价染色评价:5
34、1其它染色法其它染色法n荧光染色法荧光染色法:阴道分泌物阴道分泌物n细胞活体染色法：网织红计数、细胞活体染色法：网织红计数、精子精子 （先染色，后固定）（先染色，后固定）n细胞化学染色法：骨髓细胞染色细胞化学染色法：骨髓细胞染色n苏木素染色：病理组织切片苏木素染色：病理组织切片52思考题n血液检验有哪些标本类型及其应用范围？血液检验有哪些标本类型及其应用范围？n临床有哪些主要采血方式及其应用范围？临床有哪些主要采血方式及其应用范围？n使用真空采血管有哪些优点和用途？使用真空采血管有哪些优点和用途？n常用抗凝剂各自有什么特点和用途？常用抗凝剂各自有什么特点和用途？nWright染色依据何原理？如何保证染色质量？染色依据何原理？如何保证染色质量？
