1、临床基因扩增检验实临床基因扩增检验实验室的设置及质量管验室的设置及质量管理体系的建立理体系的建立临床基因扩增检验实验室的设置临床基因扩增检验实验室的设置n依据：卫生部颁发的临床基因扩增检验实验室管理暂行办法（卫医发200210号）2临床基因扩增检验实验室的设置及质量管理体系的建立临床标本的接收临床标本的接收 n通常的工作流程：标本采集 血清分离 编号 保存或检测n应在四个测定区域之外的地方或区域内接收 n接收的标本应收集在原始容器中n在核酸提取时带入至标本制备区3临床基因扩增检验实验室的设置及质量管理体系的建立理想的理想的PCR实验室设置实验室设置A产物分析区产物分析区空气流向空气流向空气流向
2、空气流向空气流向空气流向空气流向空气流向缓冲间缓冲间缓冲间缓冲间缓冲间缓冲间专用走廊专用走廊工作流向工作流向扩增区扩增区标本制备区标本制备区试剂准备区试剂准备区4临床基因扩增检验实验室的设置及质量管理体系的建立产物分析区产物分析区空气流向空气流向空气流向空气流向空气流向空气流向空气流向空气流向缓冲间缓冲间缓冲间缓冲间缓冲间缓冲间专用走廊专用走廊工作流向工作流向扩增区扩增区标本制备区标本制备区试剂准备区试剂准备区理想的理想的PCR实验室设置实验室设置B5临床基因扩增检验实验室的设置及质量管理体系的建立门门试剂准备区试剂准备区标本制备区标本制备区扩增区扩增区产物分析区产物分析区外走廊外走廊门门门门
3、门门门门试剂准备区试剂准备区标本制备区标本制备区扩 增 及 产 物扩 增 及 产 物分析区分析区外走廊外走廊门门门门门门门门AB6临床基因扩增检验实验室的设置及质量管理体系的建立试剂准备区试剂准备区标本制备区标本制备区扩 增 及 产扩 增 及 产物分析区物分析区门门门门门门门门空气流向空气流向空气流向空气流向空气流向空气流向7临床基因扩增检验实验室的设置及质量管理体系的建立走廊走廊走廊走廊试剂准备区试剂准备区标本制备区标本制备区扩增和产扩增和产物分析区物分析区空气流向空气流向空气流向空气流向空气流向空气流向其他实验室其他实验室其他实验室其他实验室其他实验室其他实验室其他实验室其他实验室其他实验
4、室其他实验室其他实验室其他实验室其他实验室其他实验室8临床基因扩增检验实验室的设置及质量管理体系的建立门试剂准备区试剂准备区标本制备区标本制备区扩 增 及 产扩 增 及 产物分析区物分析区门门门空气流向空气流向空气流向空气流向+空气流向空气流向+走廊走廊试 剂 准 备试 剂 准 备区区标 本 制 备标 本 制 备区区扩增和产扩增和产物分析区物分析区空气流向空气流向+空气流向+其他实验室其他实验室其他实验室其他实验室其他实验室其他实验室其他实验室空气流向9临床基因扩增检验实验室的设置及质量管理体系的建立临床基因扩增实验室设置的一般原则临床基因扩增实验室设置的一般原则n各区独立n注意风向n因地制宜
5、n方便工作“十六字口诀十六字口诀”10临床基因扩增检验实验室的设置及质量管理体系的建立产物分析区产物分析区空气流向空气流向空气流向空气流向空气流向空气流向空气流向空气流向缓冲间缓冲间缓冲间缓冲间缓冲间缓冲间专用走廊专用走廊工作流向工作流向扩增区扩增区标本制备区标本制备区试剂准备区试剂准备区传递窗传递窗传递窗11临床基因扩增检验实验室的设置及质量管理体系的建立实验室质量管理体系的建立实验室质量管理体系的建立n质量手册n质量体系程序文件n标准操作程序 (相关记录表格)12临床基因扩增检验实验室的设置及质量管理体系的建立质量管理的内涵质量管理的内涵n写你所做的n做你所写的n记录你已做的n分析你已做的
6、13临床基因扩增检验实验室的设置及质量管理体系的建立怎样编写怎样编写SOP？14临床基因扩增检验实验室的设置及质量管理体系的建立实验室清洁实验室清洁SOP要点要点 n目的:为了使实验室台面、地面和仪器设备在实用后，处于洁净和无感染性状态，以防止出现因仪器设备不洁影响检测或仪器使用寿命；防止因实验室台面、地面和仪器设备的生物传染危险性造成实验室人员感染，以及防止实验室交叉污染而出现假阳性结果等。n适用范围应包括实验室地面、台面和仪器设备等的清洁。n按实验室台面、地面和仪器设备分开来写各自的具体清洁方法，要具体而又有可操作性 n应规定工作人员在清洁时，必须按试剂准备区标本制备区扩增(及产物分析)区
7、方向进行，不得逆行 n规定每一工作区域的清洁必须使用专用的清洁用具，不得混用 n规定有潜在生物传染危险性材料溅出时的消毒清洁方法 15临床基因扩增检验实验室的设置及质量管理体系的建立生物安全防护生物安全防护SOP要点要点n明确规定实验室工作人员在进行哪一类接触到有潜在生物传染危险性的物品和材料时，应使用哪类个体生物安全防护设备和用具 n制定实验室内锐器物品的使用规则 n制定发生意外如手指划破、血清溅入眼内等情况下的处理程序 n明确有潜在生物传染危险性的废弃物（包括废弃临床标本）拿出实验室前的消毒方法如高压或化学消毒 16临床基因扩增检验实验室的设置及质量管理体系的建立仪器设备的维护和校准仪器设
8、备的维护和校准SOP n责任人n维护和校准的基本方面：光路、滤光片、波长、加热模块的清洁、具体的校准点选择（如加样器的校准体积点选择、温度计的校准温度点选择等）、维护和校准的具体方法包括用具 n校准合格的判断标准 n维护和校准的间隔时间 17临床基因扩增检验实验室的设置及质量管理体系的建立仪器设备仪器设备的操作 SOPn按照每台仪器设备的使用说明书，将其详细操作步骤包括开机关机次序、编程、调试、运行、计算等按实际使用中的先后顺序逐项列出，最后还应有使用的注意事项。18临床基因扩增检验实验室的设置及质量管理体系的建立临床标本的采集、运送、接收和保存临床标本的采集、运送、接收和保存 SOPn特定标
9、本采集的具体方法步骤 n明确规定标本的采集容器要求 n明确标本的采集量 n明确标本采集后送到实验室检测所能容许的最大时间间隔，亦即标本采集后，应在多长时间内送至实验室 n明确标本采集后，在送至实验室检测前的保存方式和条件 n明确标本从采集处运送至实验室过程中所要求的运送条件 n明确标本接收时，签收的程序、拒收的标准和标本唯一编号的规则 n规定标本在实验室内的短期（应有具体时间）和长期（应有具体时间）保存条件和要求 n制定保证标本安全，即如何防止标本丢失、掉换、变质的措施 19临床基因扩增检验实验室的设置及质量管理体系的建立试剂和消耗品的质检 SOPn试剂质检的基本方面，如试剂的抗干扰能力（主要
10、是针对提取试剂），即对溶血、脂血标本扩增抑制作用的了解。可通过自行制备含已知量病毒核酸的不同程度溶血或脂血的标本进行质检。如为定量检测试剂，还应包括检测的重复性、线性范围等的质检，通常使用2-3份样本进行检测即可。如为定性检测试剂，则应重点考察测定下限，可用系列稀释的含已知量靶核酸的血清标本进行 n核酸提取用离心管质检的基本方面 n带滤心吸头的质检主要是滤心的密封性 20临床基因扩增检验实验室的设置及质量管理体系的建立项目检测、结果判断、解释和报告项目检测、结果判断、解释和报告 SOPn标本进入实验程序后的操作编号方式 n根据所用试剂盒确定的详细操作流程 n仪器编程及文件名的编写规则 n结果判
11、读的流程和规则 n结果分析解释的流程 n结果报告流程 21临床基因扩增检验实验室的设置及质量管理体系的建立室内质量控制室内质量控制 SOPn明确室内质控物的来源及浓度 n明确所选用的质控方法 n明确失控的判断标准或所采用的失控规则 n明确失控后的分析及处理措施 23临床基因扩增检验实验室的设置及质量管理体系的建立参加室间质量评价参加室间质量评价 SOPn明确规定室间质评样本的接收记录方式、保存条件及实验编号规则 n明确室间质评样本的检测流程，要强调的是，室间质评样本应以与临床标本相同的方式处理和检测 n明确室间质评样本的报告流程，即填写、复核和签发如何进行，由谁负责 n明确对返回结果的分析流程
12、和责任人 n明确室间质评检测失败的原因分析流程 n明确如果测定准确性出现问题后，如何针对性采取措施的流程 24临床基因扩增检验实验室的设置及质量管理体系的建立投诉处理投诉处理 SOPn明确投拆第一接触人对投拆的处理流程，即如何记录、如何针对相关投诉的进一步处理程序、是否需要报告和如何报告、以及如何向投拆人返回处理意见等。可将投拆分为不同类如对检验结果正确性、服务态度、报告单填写错误等分别编写处理流程 n投拆有效时的如何改进和采取何种措施的具体流程。应非常具体并具有可操作性 25临床基因扩增检验实验室的设置及质量管理体系的建立 临床临床PCRPCR检验流程记录表检验流程记录表 检验日期检验日期
13、检验项目：检验项目：扩增仪中保存文件名：扩增仪中保存文件名：使用说明：使用说明：1本记录表须严格遵循试剂准备区标本制备区扩增区（产物分析区）单一流向移动，严禁逆向移动。2各项工作执行后，在相应叙述前的“”内打“”。3本记录表最后与相应的标本接收记录等归档保存于扩增区的专用文件柜内，以备查找。实验前准备实验前准备 试剂在有效期内 扩增仪、加样器和温度计在校准的有效期内 生物安全柜的滤膜在使用有效期内 消毒溶液在有效期内 冲眼器内无菌生理盐水在有效期内 离心管、带滤心吸头已经过质检合 操作者操作者：26临床基因扩增检验实验室的设置及质量管理体系的建立 试剂准备区（试剂准备区（1 1区）区）实验前实
14、验前 ：打开通风设备 实验台面清洁（水或70%酒精擦拭）冰箱温度：冷藏室（28）；冷冻室（182）实验室温度：（允许范围：1030）；相对湿度：（允许范围：30%70%）PCR试剂来源：（可直接列出有关厂家名称）批号：检验项目：本次实验用量：人份，剩余量：人份。其他有关试剂配制：按XXX（将有关SOP编号列出）SOP配制1%含氯消毒液 毫升；按XXX（将有关SOP编号列出）SOP配制4NaOH溶液 毫升；按XXX（将有关SOP编号列出）SOP配制0.1%焦磷酸二乙酯 毫升；按XXX（将有关SOP编号列出）SOP配制 毫升；其他：仪器设备使用：仪器设备使用：离心机：正常 不正常 振荡器：正常 不
15、正常实验后：实验后：按XXX（将有关SOP编号列出）SOP清洁实验室台面、地面、加样器和离心机，并进行紫外照射30分钟以上。按XXX（将有关SOP编号列出）SOP处理实验废弃物。操作者：操作者：27临床基因扩增检验实验室的设置及质量管理体系的建立 标本制备区（标本制备区（2 2区）区）实验前：实验前：打开通风设备 实验台面清洁（水或70%酒精擦拭）冰箱（柜）温度：冷藏室（28）；冷冻室（182）实验室温度：（允许范围：1030）；相对湿度：（允许范围：30%70%）阳性室内质控物来源：浓度及批号：扩增位置：阴性室内质控物来源：批号：扩增位置：所取理的标本（对应标本接收的唯一编号）及拟扩增位置：
16、所取理的标本（对应标本接收的唯一编号）及拟扩增位置：1 19 9171725252 21010181826263 31111191927274 41212202028285 51313212129296 61414222230307 71515232331318 8161624243232核酸提取及加样过程核酸提取及加样过程：按XXX（列出编号）SOP进行。仪器设备使用：仪器设备使用：生物安全柜：正常 不正常 恒温仪温度校准：离心机：正常 不正常 振荡器：正常 不正常实验后：实验后：按XXX（将有关SOP编号列出）SOP清洁实验室台面、地面及仪器设备。按XXX（将有关SOP编号列出）SOP处理
17、实验废弃物。操作者：操作者：28临床基因扩增检验实验室的设置及质量管理体系的建立 扩增及产物分析区（扩增及产物分析区（3 3区）区）实验前实验前 打开通风设备 实验台面清洁（水或70%酒精擦拭）实验室温度：（允许范围：1030）；相对湿度：（允许范围：30%70%）扩增仪操作：开机自检及运行正常 按XXX（列出编号）SOP进行编程、参数设定标准曲线计算值：标准曲线计算值：Slope值值：（）Intercept值值：（）r值值：（）室内质控结果：室内质控结果：结果：填写室内质控记录、描质控图 是否失控：是否失控：否 是 实验结果：实验结果：见所附扩增仪打印结果实验后：实验后：按XXX（将有关SO
18、P编号列出）SOP清洁实验室台面、地面及仪器设备。按XXX（将有关SOP编号列出）SOP处理实验废弃物。操作者：操作者：失控原因及分析：（失控判断标准及原因分析按XXXSOP进行）29临床基因扩增检验实验室的设置及质量管理体系的建立 临床PCR实验室标本接收记录唯一编号 姓 名 性 别 病历号 采集时间 接收时间 标本特性 标本状态 以上标本编号从 至 ，送检人（签字）：接收人（签字）以上标本编号从 至 ，送检人（签字）：接收人（签字）以上标本编号从 至 ，送检人（签字）：接收人（签字）男 女 月 日 时 月 日 时 全血 正常 男 女 月 日 时 月 日 时 全血 正常 男 女 月 日 时
19、月 日 时 全血 正常 男 女 月 日 时 月 日 时 全血 正常 男 女 月 日 时 月 日 时 全血 正常 男 女 月 日 时 月 日 时 全血 正常 男 女 月 日 时 月 日 时 全血 正常 30临床基因扩增检验实验室的设置及质量管理体系的建立姓 名 性 别 病历号 采集时间 接收时间 标本特性 拒收原因 男 女 月 日 时 月 日 时 全血 （列出原因号）男 女 月 日 时 月 日 时 全血 （列出原因号）男 女 月 日 时 月 日 时 全血 （列出原因号）标本拒收原因：标本拒收原因：1患者姓名不符。2标本容器为非不含任何添加剂的真空采血管。3采血量低于2 ml。4 标本采用肝素抗凝
20、。5.容器破损。6标本采集后送检时间超过6小时。7标本重度溶血。8标本脂血。9标本不正确。10其他：临床临床PCRPCR实验室标本拒收记录实验室标本拒收记录31临床基因扩增检验实验室的设置及质量管理体系的建立实验室的日常工作管理实验室的日常工作管理 工工 作作 项项 目目 核核 查查 点点水浴箱、微量恒温器（加热模块）校准及记录温度 次氯酸钠溶液 新鲜配制生物安全柜 先起动运行30分钟后再开始工作 室内质控 弱阳性质控（定性）有 低、中、高浓度质控（定量）有 阴性质控：原样本 有 经历提取过程的空管 有 仅含扩增反应混合液管 有实验台面 使用后用次氯酸钠溶液消毒，再用70%乙醇清洁 紫外照射加
21、样器、离心机 使用后用次氯酸钠溶液消毒，再用70%乙醇清洁实验室各区 遵循单一工作流向 紫外照射32临床基因扩增检验实验室的设置及质量管理体系的建立分析你已做的分析你已做的n每次实验结果的分析 表象与真象n多次实验结果的综合分析 趋势的内在含义n仪器设备的使用情况分析 维护与校准周期的有效性33临床基因扩增检验实验室的设置及质量管理体系的建立技术验收的其它内容技术验收的其它内容n就有关实验室质量管理方面与具体工作有关的内容进行口试和/或笔试；n已知HBV DNA和/或HCV RNA血清盘的实际检测和结果报告。34临床基因扩增检验实验室的设置及质量管理体系的建立 谢谢！35临床基因扩增检验实验室的设置及质量管理体系的建立
