1、一、免疫球蛋白的结构一、免疫球蛋白的结构二、免疫球蛋白的异质性二、免疫球蛋白的异质性三、免疫球蛋白的功能三、免疫球蛋白的功能四、各类免疫球蛋白的特性与功能四、各类免疫球蛋白的特性与功能五、人工制备抗体五、人工制备抗体免疫球蛋白免疫球蛋白 一、基本概念一、基本概念B细胞接受抗原刺激后增殖分化成浆细胞产生的糖蛋白细胞接受抗原刺激后增殖分化成浆细胞产生的糖蛋白与相应抗原特异性结合与相应抗原特异性结合主要存在于血清中主要存在于血清中又称免疫球蛋白又称免疫球蛋白(Immunoglobulin)分泌型分泌型 sIg、膜型、膜型 mIg。二、免疫球蛋白的结构二、免疫球蛋白的结构1、基本结构、基本结构1）四肽
2、链通过链间二硫键组成）四肽链通过链间二硫键组成H2L2重链：五类重链：五类(isotype:a a、g g、m m、d d、e e)轻链：两型轻链：两型(k k、l)l)单体单体2、三个功能区、三个功能区可变区可变区(Variable region,VH/VL,Fv)：结合抗原：结合抗原 VH和和VL：高变区高变区 HVR抗原结合部位互补决定区抗原结合部位互补决定区CDR 骨架区骨架区 FR14 恒定区恒定区(Constant region,CH/CL)绞链区绞链区(Hinge region)免疫球蛋白功能区结构示意图3、蛋白酶的酶解、蛋白酶的酶解木瓜蛋白酶木瓜蛋白酶(papain)：Fab、
3、Fc 胃蛋白酶胃蛋白酶(pepsin)：F(ab)2、pFc木瓜蛋白酶(papain)胃蛋白酶(pepsin)抗原结合片段（fragment of antigen binding，Fab）可结晶片段（fragment crystallizable，Fc）F(ab)2pFc轻链VH、CH1CH2和CH32个F(ab)及铰链区小片段三、免疫球蛋白的类型及血清型三、免疫球蛋白的类型及血清型1、类型、类型类类(Class):重链重链C区抗原性区抗原性IgG、IgA、IgM、IgD、IgE亚类亚类(Subclass):重链抗原性重链抗原性/二硫键数目位置二硫键数目位置IgG1-4型型(Type):轻链轻
4、链C区抗原性区抗原性k k、l l亚型亚型(Subtype):轻链轻链C区区aa差异排列差异排列 l1l14 42、血清型、血清型 同种型同种型(Isotype)：C区决定，非遗传标志。区决定，非遗传标志。同种异型同种异型(Allotype)：个体等位基因，遗传标志。：个体等位基因，遗传标志。独特型独特型(Idiotype,Id)：IdiotopeAnti-Id3、辅助结构、辅助结构 1）J链链(Joining chain)2）分泌片）分泌片(Secretory piece,SP)4、功能区、功能区(Domain)1）Ig分子中由链内二硫键构成的致密立体球体分子中由链内二硫键构成的致密立体球体
5、(V/C/H)2）b b-sheet、b b-barrel、immunoglobulin fold 3）CDRs(Hypervariable regions)、FRs(Framework regions)免疫球蛋白的结构功能区免疫球蛋白的结构功能区四、抗体的主要特性及生物学功能四、抗体的主要特性及生物学功能1、主要功能、主要功能1）与相应抗原特异性结合：）与相应抗原特异性结合：Fv2）激活补体：）激活补体：3）结合）结合FcR：促吞噬：促吞噬(opsonization)介导过敏介导过敏 介导细胞毒介导细胞毒(ADCC)免疫调理免疫调理 4）穿过胎盘和粘膜）穿过胎盘和粘膜5）调节免疫功能）调节免
6、疫功能2、各类抗体的特性与功能、各类抗体的特性与功能1）IgG 四个亚类，分布广、血清含量最高、唯一能通过胎盘四个亚类，分布广、血清含量最高、唯一能通过胎盘2）IgM 五个单体五个单体J链连接，最早、可诊断宫内及近期感染链连接，最早、可诊断宫内及近期感染3）IgA 单体：血清，双体：外分泌液单体：血清，双体：外分泌液4）IgD 含量低、含量低、B细胞成熟标志细胞成熟标志5）IgE 含量最低、亲细胞、超敏反应含量最低、亲细胞、超敏反应/寄生虫免疫寄生虫免疫未成熟未成熟B细胞细胞 成熟成熟B细胞细胞 活化或记忆活化或记忆B细胞细胞mIgM mIgD 五、抗体的制备五、抗体的制备 1、多克隆抗体（、
7、多克隆抗体（polyclonal antibody，PcAb）2、单克隆抗体（、单克隆抗体（monoclonal antibody，McAb）3、基因工程抗体（、基因工程抗体（engineering antibody）利用利用DNA重组技术和基因重组技术和基因 工程手段生产的抗体工程手段生产的抗体 包括人包括人-鼠嵌合抗体、改型抗体、双特异性抗体、小分子抗体等鼠嵌合抗体、改型抗体、双特异性抗体、小分子抗体等抗血清（多克隆抗体）的制备抗血清（多克隆抗体）的制备多克隆抗体单克隆抗体来源动物免疫血清、恢复期病人血清或免疫接种人群多为鼠源性特点来源广泛、制备容易纯度高、特异性强、效价高、少或无血清交叉
8、反应、制备成本低组成针对不同抗原表位的抗体的混合物针对单一表位，结构和组成高度均一，抗原特异性及同种型一致应用疾病的被动免疫治疗广泛用于疾病诊断、特异性抗原或蛋白的检测和鉴定、疾病的被动免疫治疗和生物导向药物制备缺点特异性不高、易发生交叉反应，不易大量制备人体应用后可导致人鼠抗体反应多克隆抗体与单克隆抗体的比较多克隆抗体与单克隆抗体的比较Humanization（Chimeric/Reshaped Antibody)掌握免疫球蛋白的结构和主要生物学功能掌握免疫球蛋白的结构和主要生物学功能 熟悉免疫球蛋白异质性熟悉免疫球蛋白异质性 熟悉单克隆抗体概念和特点熟悉单克隆抗体概念和特点 了解单克隆抗体制备、概念、特点了解单克隆抗体制备、概念、特点
