常见血红蛋白电泳图谱和临床应用培训课件.ppt

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1、本文档所提供的信息仅供参考之用,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。血红蛋白是由4条多肽链(2对)和4个可以结合铁和氧气的血红素组成本文档所提供的信息仅供参考之用,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。本文档所提供的信息仅供参考之用,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。一、原理:Hb中的珠蛋白和其他蛋白质一样为两性电解质,在不同的缓冲液中可带正或负电荷,在电场中向阴极或阳极移动,由于不同的蛋白质之间其等电点、分子大小、形态及所带电荷不同,其移动速率不同(电泳迁移率不同),在一定的支持介质中可借以分离。二、仪器:H

2、elena BioSciences SAS-3样本分析系统(英国海伦娜生物科学)三、操作:(一)血红蛋白液的制取1、取一份红细胞(或全血)加十份生理盐水洗涤,3000转/分钟离心5分钟,弃盐水 2、洗涤三次后,弃盐水3、按压积红细胞体积加等体积蒸馏水,摇匀,再加1/2体积的四氯化碳震荡1-3分钟,3000转/分钟离心5分钟,吸取上层血红蛋白溶液(此浓度约为10%)待用(二)仪器操作1、开机2、吸取30ul血红蛋白溶液加入样本盘3、取两片点样刀锋放在自动加样器2,14号位,点样的时候把梳子从14号的位置跳至12号位置4、电泳槽内加界面液(3100)5、揭掉电泳片表面的保护膜,放入电泳片,避免气泡

3、,擦掉四周多余液6、用BLOTC吸去电泳片上多作的缓冲液7、放好碳棒,盖好盖子,按下箭头选择“”为测试项目再按“START”进入程序再按“Enter”开始电泳,约18分钟,仪器示警,按“STOP”结束操作,打开盖子,铲掉盐桥8、将电泳片放在染色架上,放入染色槽中,按下箭头选择“START”为测试项目约15分钟,仪器示警,表示已完成操作,按下“STOP”结束操作9、拿出电泳片即可扫描本文档所提供的信息仅供参考之用,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。正常成人:HbA(2 22 2):94.5%-98.5%HbF(2 22 2):1%HbA2(2 22 2):2.5%-

4、3.5%Hb A:a2b2Hb F:a2g2Hb A2:a2d2 本文档所提供的信息仅供参考之用,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。正常新生儿:HbA(2 22 2):12%-40%HbF(2 22 2):6%-93%HbA2(2 22 2):0.1%-1.0%Hb A:a2b2Hb F:a2g2Hb A2:a2d2 本文档所提供的信息仅供参考之用,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。本文档所提供的信息仅供参考之用,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。本文档所提供的信息仅供参考之用,不能作为科学依据,请勿模仿

5、;如有不当之处,请联系网站或本人删除。本文档所提供的信息仅供参考之用,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。本文档所提供的信息仅供参考之用,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。本文档所提供的信息仅供参考之用,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。本文档所提供的信息仅供参考之用,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。本文档所提供的信息仅供参考之用,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。本文档所提供的信息仅供参考之用,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。本文档所提供的信息仅供参考之用,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。本文档所提供的信息仅供参考之用,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。常见有HbJ,HbD本文档所提供的信息仅供参考之用,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。本文档所提供的信息仅供参考之用,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。谢谢大家!

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