幽门螺杆菌与尿素呼气试验诊断课件.ppt

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资源描述

1、v幽门螺杆菌的发现幽门螺杆菌的发现v 1982 1982年年MarshallMarshall(马歇尔)等从人胃(马歇尔)等从人胃黏膜组织中培养出了幽门螺杆菌(黏膜组织中培养出了幽门螺杆菌(Helicobacter PyloriHelicobacter Pylori,HpHp),认为该细),认为该细菌可能是引起慢性胃炎和消化性溃疡的致菌可能是引起慢性胃炎和消化性溃疡的致病菌。随后,各国学者纷纷进行研究,证病菌。随后,各国学者纷纷进行研究,证实了这种关系的存在,在临床治疗实践中实了这种关系的存在,在临床治疗实践中也取得了瞩目的成就,被认为是近年来胃也取得了瞩目的成就,被认为是近年来胃肠病学的重大进

2、展。肠病学的重大进展。23v幽门螺杆菌的生物学性状幽门螺杆菌的生物学性状v v Hp Hp在光镜下是一种革兰氏阴性杆菌,在光镜下是一种革兰氏阴性杆菌,常作常作S S形或弧形弯曲。电镜下呈单极多鞭形或弧形弯曲。电镜下呈单极多鞭毛,末端钝圆,菌体作螺旋弯曲。细菌长毛,末端钝圆,菌体作螺旋弯曲。细菌长2.52.54.0m4.0m,宽,宽0.50.51.0m1.0m。HpHp的运动的运动源于鞭毛的螺旋推进运动,而鞭毛在源于鞭毛的螺旋推进运动,而鞭毛在HpHp的的定居过程又起定居过程又起“抛锚抛锚”的作用。当延长培的作用。当延长培养时间或体内抗生素作用时,养时间或体内抗生素作用时,HpHp可发生球可发生

3、球形体样变化。形体样变化。4vHP的传播方式和途径v目前多数学者认为“人人”是主要的传播方式和途径。亦可通过内镜传播,而且Hp感染在家庭内有明显的聚集现象,父母感染了Hp其子女的感染机会比其它家庭高得多。对感染Hp的家庭调查提示。有Hp感染者家庭中的“健康人”,Hp抗体阳性率为64%,明显高于同年龄组无Hp感染患者家庭的“健康人”5v幽门螺杆菌的主要危害幽门螺杆菌的主要危害v幽门螺旋杆菌具有很强的活性及繁殖能力幽门螺旋杆菌具有很强的活性及繁殖能力,是一种严重影响公众健康的细菌。其危,是一种严重影响公众健康的细菌。其危害有:害有:感染其它健康人口感染其它健康人口 破坏胃的正常结构及功能(破坏胃的

4、正常结构及功能(100%100%)导致胃酸减少或缺乏(导致胃酸减少或缺乏(25%25%)(A A)增加肠道感染的机会增加肠道感染的机会 (B B)减少人体对铁质及维生素减少人体对铁质及维生素B12B12的吸收的吸收 急慢性胃炎(急慢性胃炎(7090%7090%)发展成为消化性溃疡及溃疡综合症(发展成为消化性溃疡及溃疡综合症(17%17%)发展成为胃腺癌(发展成为胃腺癌(1%-3%1%-3%)发展成为胃淋巴癌发展成为胃淋巴癌 发展成为原因不明的消化不良发展成为原因不明的消化不良 6v幽门螺杆菌的感染和溃疡的形成:幽门螺杆菌的感染和溃疡的形成:v 幽门螺杆菌进入人胃后,首先通过菌膜表幽门螺杆菌进入

5、人胃后,首先通过菌膜表面的尿素酶分解尿素产生氨,在菌体周围形成面的尿素酶分解尿素产生氨,在菌体周围形成氨云,并分泌酸性抑制蛋白降低胃部的氨云,并分泌酸性抑制蛋白降低胃部的PHPH值,值,以利于自身的存活。然后借助菌体一端的鞭毛以利于自身的存活。然后借助菌体一端的鞭毛运动穿过粘液层。研究表明,运动穿过粘液层。研究表明,HpHp在粘稠的环境在粘稠的环境下具有极强的运动能力,强动力性是下具有极强的运动能力,强动力性是HpHp致病力致病力的重要因素。的重要因素。HpHp到达上皮表面后,通过粘附素到达上皮表面后,通过粘附素,牢牢地及上皮细胞连接在一起。并分泌过氧,牢牢地及上皮细胞连接在一起。并分泌过氧化

6、物歧化酶(化物歧化酶(SODSOD)和过氧化氢酶,以保护其)和过氧化氢酶,以保护其不受中性粒细胞的杀伤作用。不受中性粒细胞的杀伤作用。HpHp感染使胃上皮感染使胃上皮表面表面PHPH值升高,干扰了正常的胃酸对胃泌素的值升高,干扰了正常的胃酸对胃泌素的反馈作用,使胃泌素水平升高,胃泌素升高又反馈作用,使胃泌素水平升高,胃泌素升高又使胃酸分泌增加,胃部的高酸度极易使感染使胃酸分泌增加,胃部的高酸度极易使感染HpHp后损伤的胃粘膜形成溃疡。胃部的高酸度引起后损伤的胃粘膜形成溃疡。胃部的高酸度引起的十二指肠上端胃上皮化生,菌体分泌的细胞的十二指肠上端胃上皮化生,菌体分泌的细胞毒素及炎症介质,机体的持续

7、免疫反应等共同毒素及炎症介质,机体的持续免疫反应等共同造成十二指肠溃疡。关于造成十二指肠溃疡。关于HpHp引起十二指肠溃疡引起十二指肠溃疡的机制还有待进一步研究。的机制还有待进一步研究。7v幽门螺杆菌的致病机制:幽门螺杆菌的致病机制:va a 菌体动力和粘附作用:是菌体动力和粘附作用:是HpHp能穿越粘液层并定植于胃窦上皮能穿越粘液层并定植于胃窦上皮部的重要因素。部的重要因素。vb b 抗酸能力和免疫保护:抵抗胃内低酸度,使菌体能在酸性环抗酸能力和免疫保护:抵抗胃内低酸度,使菌体能在酸性环境中生存,并抗中性粒细胞的清除作用,起作用的有:尿素酶,境中生存,并抗中性粒细胞的清除作用,起作用的有:尿

8、素酶,热休克蛋白,胃酸分泌抑制蛋白,过氧化物歧化酶,过氧化氢酶热休克蛋白,胃酸分泌抑制蛋白,过氧化物歧化酶,过氧化氢酶等。等。vc c 损害胃粘膜屏障:通过细胞毒素,尿素酶,粘液酶等起作用损害胃粘膜屏障:通过细胞毒素,尿素酶,粘液酶等起作用。vd d 炎症反应和免疫反应:炎症反应和免疫反应:HpHp感染后各种炎症细胞相继被激活和感染后各种炎症细胞相继被激活和趋化,从固有层移行至上皮内,造成炎症反应。炎症细胞释放的趋化,从固有层移行至上皮内,造成炎症反应。炎症细胞释放的细胞因子、氧化自由基、水解酶、溶菌酶造成胃粘膜的损伤。慢细胞因子、氧化自由基、水解酶、溶菌酶造成胃粘膜的损伤。慢性性HpHp感染

9、造成感染造成T T细胞和浆细胞浸润,刺激这两种细胞产生特异性细胞和浆细胞浸润,刺激这两种细胞产生特异性抗体,参及体液免疫反应。抗体,参及体液免疫反应。HpHp感染还能诱发机体的自身免疫反应感染还能诱发机体的自身免疫反应。814C-尿素呼气试验的临床适应症1、消化不良初诊患者:根据病史和体检提示为上消化道疾病所致,虽然以往未作胃镜检查,若病史不长,年龄小于45岁,无报警征兆(明显恶心、呕吐、腹痛、厌食、出血、贫血、黄疸、腹块、体重下降),可先作14C-尿素呼气试验诊断是否感染幽门螺杆菌,阳性者予以根除HP治疗,无效时再考虑胃镜或其他检查。这就是目前国际上流行的“检查治疗”方案。对消化不良初诊者一

10、律先行胃镜检查再治疗,或一概先作抗酸、动力药经验性试验性治疗,亦或全部先作抗HP治疗的主张或行为都是不合适的。9v2、消化不良复诊者:v 若已经作过胃镜检查,并已确诊,除非考虑胃癌,作14C-尿素呼气试验即可,不应重复胃镜检查.v3、胃镜检查者:va)内窥镜的消毒效果目前尚无可靠保障,在病人经济条件许可的情况下,为降低致病病毒传播的风险,用14C-尿素呼气试验代替活检组织快速尿素酶试验,活检只用在疑诊胃癌时。vb)由于快速尿素酶假阴性高,所以对于胃镜活检组织快速尿素酶试验阴性者,仍怀疑有HP感染,可加作一次14C-尿素呼气试验,以明确诊断,降低快速尿素酶试验的误诊率。10v4 4、拒绝胃镜检查

11、者。、拒绝胃镜检查者。v5 5、不能耐受胃镜检查者:、不能耐受胃镜检查者:v 如心脏病、高血压、病毒性肝炎、急性如心脏病、高血压、病毒性肝炎、急性咽喉炎等患者。咽喉炎等患者。v6 6、疗效跟踪:、疗效跟踪:v 由于目前尚无抗由于目前尚无抗HPHP的特效药物,病人的的特效药物,病人的个体差异大,首选的治疗方案约有个体差异大,首选的治疗方案约有101030%30%不能达到根除不能达到根除HPHP的目的。因此可将的目的。因此可将14C-14C-尿尿素呼气试验用作病人服药后的效果评价手素呼气试验用作病人服药后的效果评价手段,给临床治疗方案的调整提供必要的参段,给临床治疗方案的调整提供必要的参考。考。1

12、112131415161718192021222324252627282930313233343536根据全国幽门螺杆菌学组成虹、胡伏莲等最近的文章:中国幽门螺杆菌耐药状况以及耐药对治疗的影响 -全国多中心临床研究(胃肠病学 2007年12卷9期)幽门螺杆菌根除率:兰索拉唑30mg bid 克拉霉素500mg bid 82.7%阿莫西林1000mg bid 兰索拉唑30mg bid克拉霉素500mg bid 68.6%甲硝唑400mg bid中国Hp菌株对甲硝唑和克拉霉素的耐药率均较高,对阿莫西林的耐药率较低,Hp对抗生素耐药是治疗失败的主要原因。37、YH01液体闪烁计数仪液体闪烁计数仪、Y

13、H04卡式幽门螺杆菌检测仪卡式幽门螺杆菌检测仪 3、YH630型光动力肿瘤治疗系统型光动力肿瘤治疗系统 4、13C红外光谱仪红外光谱仪38pH9.25NH3呼气试验原理呼气试验原理39尿素呼气试验尿素呼气试验(UBT)试剂:尿素:试剂:尿素:14C尿素(尿素(0.75mci).受试条件:空腹受试条件:空腹3小时以上,试剂弥散时间:小时以上,试剂弥散时间:15分钟。分钟。检测仪器:检测仪器:14C幽门螺杆菌检测仪幽门螺杆菌检测仪40v二、尿素呼气试验及检测仪器原理1、尿素呼气试验原理胶囊NH3 CONH314阴性患者NH3 CONH314尿素原型尿中排除72h呼气中无 CO2阳性患者无尿素酶Hp

14、产生尿素酶尿素被水解为 CO214呼气中含 CO21414仪器检测口服低计数仪器检测高计数412、卡式检测仪原理、结构、改进原理GM管GM管C衰变 射线14电脉冲计数分析显示打印结果42三、仪器操作、校正和校准、故障1、仪器操作简单 直观 无需特殊培训432、质控方法(校正和校准)YH04幽门螺杆菌检测仪应用幽门螺杆菌检测仪应用质控方法指南质控方法指南 尿素呼气试验诊断幽门螺杆菌感染的原理尿素呼气试验诊断幽门螺杆菌感染的原理幽门螺杆菌(幽门螺杆菌(Hp)产生高活性的尿素酶。当受检者服用)产生高活性的尿素酶。当受检者服用14C标标记尿素后,如存在记尿素后,如存在Hp感染,胃中的尿素酶可将感染,胃

15、中的尿素酶可将14C标记尿素分标记尿素分解为氨和解为氨和14CO2,14CO2通过血液经呼气排出,如胃中不存在通过血液经呼气排出,如胃中不存在Hp感染,则受检者服用的感染,则受检者服用的14C标记尿素将以原型从尿中排出,标记尿素将以原型从尿中排出,14C为一种天然放射性同位素,采集受检者呼气样本并测量其中为一种天然放射性同位素,采集受检者呼气样本并测量其中14C的放射性活度,的放射性活度,Hp感染者呼气样本中的放射性活度远高于感染者呼气样本中的放射性活度远高于本底计数,而本底计数,而Hp阴性者的呼气样本的放射性活度在本底的正常阴性者的呼气样本的放射性活度在本底的正常涨落范围内,从而可准确判断是

16、否感染幽门螺杆菌,该方法高涨落范围内,从而可准确判断是否感染幽门螺杆菌,该方法高度的特异度和灵敏度已通过大量临床研究证实并得到广泛认可。度的特异度和灵敏度已通过大量临床研究证实并得到广泛认可。44 YH04幽门螺杆菌检测仪的应用及技术原理、采样本仪器采用一个一次性的呼气采样卡采集受检者的呼气样本,在卡片内涂有固体吸收剂,可有效吸收呼气中的CO2成份,在卡上还有一个变色指示窗口,可直观的判断呼气卡是否失效,并保证采集到足够的呼气量。采样卡密封在一个铝箔包装袋内,在未拆封的情况下可长期保存,拆封后必须立即使用。、测量仪器采用两个具有铅屏蔽的云母薄窗管探测14C衰变时产生的弱射线,并由一个脉冲计数器

17、进行计数。45、判断仪器对呼气样本进行测量计数后,将样本测量计数值及实时本底测量计数值进行比较,若样本的计数在本底计数的正常涨落范围内,给出阴性(受检者未感染幽门螺杆菌)的诊断结果,若样本测量计数值超出本底计数的正常涨落范围,给出阳性(受检者感染幽门螺杆菌)的诊断结果。根据临床统计的数据,在本底涨落的上限临界点,设置了一个不确定的区间,可能有极少的样本将会落在这个区间,这部分样本应予以重复测量,出现少量不确定的样本并不能否定本方法和本仪器的准确性,而是一种负责任的科学的态度。46 系统质量控制措施系统的质量控制措施应结合14C尿素胶囊生产厂家的操作指南和本仪器的使用说明书,在这些文件上有详细的

18、记载,严格按照其中的事项进项操作,方可确保质量。、标记药物的控制措施本仪器必须配合专业生产厂家生产的14C尿素胶囊来诊断幽门螺杆菌感染,请阅读产品所附的说明文件,按照规定进行保管和使用。特别是其中规定了产品的适应范围和适应症,请严格按规定使用。47、呼气卡的质量控制措施及原理呼气卡上的变色指视窗不仅能指示采样量,而且,可直观的判断呼气卡是否失效,如果呼气卡超过有效期,或包装破损,指示窗内颜色会从蓝色变为白色,提示呼气卡已经失效。因此,当拆开呼气卡的包装袋后,观察指示窗的颜色,发现颜色变白则不能使用,可有效保证质量。483、仪器的控制措施及原理在仪器的测量原理中已经阐明,本仪器是基于样本计数及本

19、底计数的相对偏离程度来判断结果,根据仪器的结构和设计原理,使用者并不需要用一个标准样本来对仪器进行校准,这一点,可通过医疗器械检测中心的检测报告和临床验证报告反映出来。简单的说,仪器并不是像一杆秤一样精确称出某个物体的重量,它类似于一只试电笔,只需要确定物体不带电时的基准,本仪器的基准就是通过实时探测得到的环境本底,因此本仪器采用了对本底计数进行实时校准的方式来保证环境本底基准的可信度。49在仪器内部的单片机中运行着一个专门的实时本底校准程序,在仪器初次使用时即进行本底适应,该程序在仪器每次启动时,或在操作的空闲时间,均自动对本底进行探测和校准,当仪器探测到本底异常,即超出正常的涨落范围时立即

20、报警,专门的实时本底校准程序还对电子计数器和传感器的任何异常进行实时监测并报警。因此,环境因素、仪器的电子线路、传感器等出现的任何异常,都是显而易见的,一旦出现异常显示,应立即通知本公司售后服务人员,对仪器进行修理和更换,严格按照操作说明使用本仪器,可保证质量。作为用户,总有疑问,公司计划提供校准标签,要求业务员每年亲自到每个用户那里去帮助校正一次,贴上标签,无论是否必要都应完成这项工作,让用户心安。50项目名称项目名称检验方法检验方法设备价格设备价格创伤性创伤性准确性准确性交叉交叉感染感染实时性实时性 环境环境污染污染临床收费临床收费快速尿素酶快速尿素酶试验试验 胃镜取材胃镜取材 有有 70

21、7085%85%存在存在 实时实时 无无 15153030元元 14C尿素呼气尿素呼气试验(液闪)试验(液闪)服药呼气服药呼气 6500065000元元 无无 95%95%以上以上 无无 实时实时 闪烁闪烁废液废液 8080120120元元 14C尿素呼气尿素呼气试验(卡式)试验(卡式)服药呼气服药呼气 8900089000元元 无无 95%95%以上以上 无无 实时实时 无无 8080120120元元 13C尿素呼气尿素呼气试验试验 服药呼气服药呼气 无无 95%95%以上以上 无无 实时实时 无无 180180260260元元 组织学检查组织学检查 胃镜取材胃镜取材 有有 707090%9

22、0%存在存在 实时实时 100100120120元元 单克隆单克隆粪便抗原粪便抗原粪便粪便 无无 95%95%以上以上 无无 实时实时 元元 未普遍接受未普遍接受血清学检验血清学检验 采血样采血样 有有 90%90%以上以上 无无 不实时不实时 40406060元元 700000700000元元 5113C-尿素呼气试验尚在14C-尿素呼气试验之前投入的临床应用,这是因为最初的探索仅限于消化病学科的专家学者,人们对14C的放射性确实心存疑虑。而对科学问题的讨论,由非专业领域的专家进行,往往会得出带有偏见的结论。那么,13C-尿素呼气试验及14C-尿素呼气试验究竟有什么差别呢?下面是两者异同点的

23、比较:六、13C-尿素呼气试验及14C-尿素呼气试验的比较521、二者的相同点、二者的相同点(1)二者的原理相同)二者的原理相同 二者都是将尿素(含一个二者都是将尿素(含一个C原子,分子式原子,分子式NH2CONH2)中的)中的C原子用它的原子用它的同位素取代后作为标记药物,口服标记药物,以检验人的胃中是否存在大同位素取代后作为标记药物,口服标记药物,以检验人的胃中是否存在大剂量强活性的尿素酶,从而判断是否感染剂量强活性的尿素酶,从而判断是否感染Hp。(2)二者的准确性相同)二者的准确性相同 二者基于同样的基本原理进行诊断,虽然采样方式不同,分析样本采用二者基于同样的基本原理进行诊断,虽然采样

24、方式不同,分析样本采用的仪器的原理也不同,但其实质都是分析呼气样本中标记同位素的含量。的仪器的原理也不同,但其实质都是分析呼气样本中标记同位素的含量。以不同的技术手段,实现对同位素的含量进行准确测定,都是早已成熟的以不同的技术手段,实现对同位素的含量进行准确测定,都是早已成熟的技术,其准确性是完全相同的。技术,其准确性是完全相同的。(3)二者同样安全)二者同样安全 前已述及,经过包括美国国家核管理委员会在内的许多国家的专业前已述及,经过包括美国国家核管理委员会在内的许多国家的专业机构的专业评估,都证实了机构的专业评估,都证实了14C-尿素呼气试验对环境、受检者、操作者是尿素呼气试验对环境、受检

25、者、操作者是安全的,任何人都不应该再谈核色变。因为没有任何理由认为,人一生中安全的,任何人都不应该再谈核色变。因为没有任何理由认为,人一生中喝了几杯橙汁、坐了一次飞机就受到了核辐射的危害,所以,喝了几杯橙汁、坐了一次飞机就受到了核辐射的危害,所以,13C-尿素呼尿素呼气试验及气试验及14C-尿素呼气试验同样是安全的。尿素呼气试验同样是安全的。532、二者的不同点、二者的不同点(1)二者的标记同位素不同)二者的标记同位素不同 13C-尿素呼气试验及尿素呼气试验及14C-尿素呼气试验分别采用尿素呼气试验分别采用13C和和14C作为标记物。作为标记物。14C的半衰期为的半衰期为5730年,当它生成后

26、在年,当它生成后在5730年年的时间内,有一半会衰变为的时间内,有一半会衰变为14N,并伴随发射能量不等(,并伴随发射能量不等(0157 KeV分布)的分布)的射线。而射线。而13C及及12C,由于其半衰期几乎,由于其半衰期几乎是无穷的长,人们根本探测不到它的衰变,所以称为稳定同是无穷的长,人们根本探测不到它的衰变,所以称为稳定同位素,但它实际上也是在衰变,现代科学已经从理论上阐明,位素,但它实际上也是在衰变,现代科学已经从理论上阐明,宇宙中没有永恒不变的物质。宇宙中没有永恒不变的物质。(2)二者的采样方法不同)二者的采样方法不同 13C-尿素呼气试验一般是往一个空的采样集袋内呼气,而尿素呼气

27、试验一般是往一个空的采样集袋内呼气,而14C-尿素呼气试验过去一般是往一个存有液体吸收剂的采样尿素呼气试验过去一般是往一个存有液体吸收剂的采样瓶内呼气,新型卡式检测法,则是用一个片状的呼气卡采集瓶内呼气,新型卡式检测法,则是用一个片状的呼气卡采集样本。样本。54(3)二者所用的检测仪器不同 13C-尿素呼气试验由于其标记同位素是稳定同位素,不能探测到它的衰变,所以只能使用成本较高的光谱仪进行样本分析,这种仪器是基于13C及12C的吃药前的千分变化量。而14C-尿素呼气试验的标记同位素是不稳定同位素,人们可以利用它的放射性特征,采用不同的技术手段进行探测,过去最常用的是液体闪烁计数法,新型卡式检

28、测仪则采用了直接探测法。(4)二者标记药物的用量不同 由于13C的天然丰度较高,本底样本的13C/12C正常变化的标准差0.72,受检者服用标记药物的量,应使呼出13C/12C比值的升高达到最小值的220倍,所以,13C-尿素呼气试验标记药物的量最少也应是几十毫克。而14C-尿素呼气试验,由于其天然丰度较低,探测方法的灵敏度高,服用标记药物的量只需很小的一点,每次试验所服用的1Ci14C-尿素,几乎称量不到其质量,只能用专门仪器才能探测到它的存在。55(5)二者的设备投资差异悬殊 13C-尿素呼气试验所用的检测设备光谱仪的价格远高于14C-尿素呼气试验所用的检测仪器。质谱仪的价格最少70万元以上,设备投资难以收回,而14C-尿素呼气试验所用的检测仪器价格都只有几万元。(6)二者的耗品成本差异也很大 13C-尿素呼气试验所用标记药物的价格每人份约为100120元,而14C-尿素呼气试验所用标记药物的价格每人份约为5570元。公司目前13C-尿素呼气试验的设备及胶囊都有,也是至今为止世界上唯一一家同时拥有14C、13C-尿素呼气试验设备及胶囊的公司。56谢谢 谢谢!57谢谢观赏!582020/11/5

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