1、微生物学肠道杆菌大微生物学肠道杆菌大肠肠肠杆菌科细菌在临床上重要的有哪几种?肠杆菌科细菌在临床上重要的有哪几种?微生物学肠道杆菌大肠2第一节概述n形态染色:n大小、染色、菌毛、鞭毛、荚膜、质粒(F、R、COL)。n培养:营养要求不高,兼性厌氧。n1.菌落特点 营养琼脂:多数湿润、光滑、灰白色、中等大小;个别:产色素,红色、黄色菌落。微生物学肠道杆菌大肠3第一节概述、生化反应:生化反应活跃,但致病性越强反应越弱。致病菌不发酵乳糖,非致病菌发酵乳糖(变形菌除外)1.基本生化反应:KIA、MIU。2.定科试验;革兰阴性杆菌、触酶阳性、氧化酶阴性、硝酸盐还原试验阳性、OFF。微生物学肠道杆菌大肠4O-
2、F试验微生物学肠道杆菌大肠5氧化酶试验阳性:紫红色 阴性:无色微生物学肠道杆菌大肠6硝酸盐还原试验阳性:红色 阴性:淡黄色 微生物学肠道杆菌大肠7肠杆菌科与其它革兰阴性杆菌区别 微生物学肠道杆菌大肠8苯丙氨酸脱氨酶试验阳性:绿色 阴性:黄色 微生物学肠道杆菌大肠9葡萄糖酸盐试验阳性:黄绿色 阴性:蓝色 返回返回微生物学肠道杆菌大肠10第一节概述抗原构造:菌体O鞭毛H表面抗原。微生物学肠道杆菌大肠11肠杆菌科细菌抗原模式图返回返回微生物学肠道杆菌大肠12第一节概述遗传变异现象:S-R:光滑(含有特异性多糖)粗糙型菌落(特异性多糖丢失)H-O:有鞭毛细菌失去鞭毛。其他变异:变种、耐药菌株(质粒介导
3、)ESBL、Ampc酶、金属酶等。微生物学肠道杆菌大肠13第一节概述n、传染途径:n肠道致病性杆菌:传染源:病人、带菌者。传播途径:粪口,鼠疫:多途径。n条件致病菌:移位感染。n、致病物质:n菌毛、表面抗原、内毒素、肠毒素。微生物学肠道杆菌大肠14第一节概述n、致病物质:n菌毛:黏附定植n表面抗原:抗吞噬n内毒素:内毒素血症,发热n肠毒素:腹痛腹泻微生物学肠道杆菌大肠15第一节概述、检验方法;1、标本采集肠外标本:不同感染部位取不同标本肠道标本:脓血便、黏液便;肛拭子2、分离培养:根据不同标本接种不同培养基。3、鉴定;观察菌落特点,涂片染色,按科、属、种、血清型鉴定。微生物学肠道杆菌大肠16肠
4、杆菌科与其它革兰阴性杆菌区别 微生物学肠道杆菌大肠17苯丙氨酸脱氨酶试验阳性:绿色 阴性:黄色 微生物学肠道杆菌大肠18葡萄糖酸盐试验阳性:黄绿色 阴性:蓝色 返回返回微生物学肠道杆菌大肠19第二节埃希菌属n埃希菌属(Escherichia):5个种一、生物学形状形态染色培养特性生化反应:IMViC+-抗原构造:O、H、K微生物学肠道杆菌大肠20大肠埃希菌革兰染色微生物学肠道杆菌大肠21大肠埃希菌电镜图微生物学肠道杆菌大肠22大肠埃希菌菌落特征(血平板)微生物学肠道杆菌大肠23大肠埃希菌菌落特征(MAC)微生物学肠道杆菌大肠24O157:H7菌落特征(MAC)微生物学肠道杆菌大肠25O157:
5、H7菌落特征(山梨醇麦康凯琼脂平板)返回返回微生物学肠道杆菌大肠26大肠埃希菌KIA(AA)MIU()微生物学肠道杆菌大肠27大肠埃希菌IMViC试验()右侧为对照()微生物学肠道杆菌大肠28大肠埃希菌抗原结构微生物学肠道杆菌大肠29第二节埃希菌属n、抵抗力n自然界水中存活数周至数月n低温粪便存活更久n胆盐、煌绿对大肠选择性抑制n对氯霉素、链霉素、庆大霉素敏感,易产生耐药性。微生物学肠道杆菌大肠30第二节埃希菌属n二、致病性与免疫性:n致病物质:n1、侵袭力-K抗原、菌毛。n2、毒素内毒素、外毒素(肠毒素LT、ST)微生物学肠道杆菌大肠31第二节埃希菌属n所致疾病1、机会感染2、肠内感染微生物
6、学肠道杆菌大肠32所致疾病n肠道外感染 泌尿道感染(最常见)胆道感染、腹膜炎、肺炎 菌血症、新生儿脑膜炎n肠道感染 ETEC、EPEC、EIEC、EHEC、EaggEC 微生物学肠道杆菌大肠33微生物学肠道杆菌大肠35ETEC致病物质及致病机制1.肠毒素(LT、ST)LT:1个A亚单位(活性)、5个B亚单位(结合)B亚单位与肠粘膜上皮细胞表面的GMI神经节苷酯结合,A亚单位穿越细胞膜活化腺苷酸环化酶,使细胞内cAMP增加,肠粘膜细胞内水、钾、钠、氯分泌亢进致腹泻。ST:激活鸟苷环化酶,使胞内cGMP增加而腹泻。2.定植因子:菌毛。3.其它:LPS、K抗原。微生物学肠道杆菌大肠36EPEC致病物
7、质及致病机制n黏附:局限性黏附(块状)、弥漫性黏附(单个分散)荧光肌动蛋白染色发现:EPEC能引起真核细胞的肌动蛋白集聚,这与EPEC引起的黏附-脱落损伤相关。微生物学肠道杆菌大肠37EIEC致病物质及致病机制n侵袭性因子:大质粒编码的ipac、ipah。n内毒素:直接侵袭结肠粘膜上皮细胞并在其中繁殖,释放内毒素破坏细胞,形成炎症和溃疡,致腹泻和脓血便。微生物学肠道杆菌大肠38EHEC致病物质及致病机制1、菌毛:黏附2、外毒素:Vero毒素VT、VT均由溶源性噬菌体介导。VT1A、5B单位组成、B宿主细胞特异糖脂结合,A内化裂解为两个片段,A1片段与28SrRNA4328位腺嘌呤作用,灭活核糖
8、体,终止细胞蛋白质合成。、VT选择性地破坏肾内皮细胞。3、内毒素和溶血素。微生物学肠道杆菌大肠39EAggEC的致病物质和机制n黏附素:4种菌毛,集聚性黏附菌毛n肠集聚耐热毒素EASTn溶血素微生物学肠道杆菌大肠40第二节埃希菌属n三、微生物检验n标本采集1、肠道外感染标本2、肠道内标本n检验程序微生物学肠道杆菌大肠41第二节埃希菌属n、检验方法及鉴定1、显微镜检查2、分离培养肠道外标本:增菌肉汤、血平板、MAC肠道内标本:SS、MAC、GN3、鉴定初步鉴定:定科试验,涂片、KIAMIU(肠道内)最后鉴定:肠杆菌科生化编码试剂盒血清学试验:EPEC、ETEC、EIEC、EHEC微生物学肠道杆菌
9、大肠42ST检测(乳鼠灌胃试验)微生物学肠道杆菌大肠43LT 检测(CHO细胞培养)微生物学肠道杆菌大肠44 肠 杆 菌科弧菌科非发酵菌巴斯德菌科形 态 染色G-杆菌G-弧菌G-杆菌G-球杆菌氧化酶-+/-+葡 萄 糖OFFFO/-F鞭毛周 毛/无毛单毛单/周/从/无毛无毛微生物学肠道杆菌大肠45苯丙氨酸脱氨酶苯丙氨酸脱氨酶-+葡萄糖酸盐葡萄糖酸盐-+-试验试验埃希菌埃希菌属属志贺菌志贺菌属属沙门菌沙门菌属属枸橼酸杆枸橼酸杆菌属菌属爱 德 华爱 德 华菌属菌属硫化氢硫化氢/动力动力枸橼酸枸橼酸盐盐/靛基质靛基质/赖氨酸赖氨酸/定群试验定群试验定属试验定属试验微生物学肠道杆菌大肠46微生物学肠道杆菌大肠47微生物学肠道杆菌大肠48