1、L/O/G/O体外诊断试剂分析性体外诊断试剂分析性能评估指导原则能评估指导原则1.检测限2.线性范围3.可报告范围4.准确度（回收实验）5.准确度（方法学比对）6.精密度7.干扰实验8.稳定性9.参考值（参考区间）2体外诊断试剂分析性能评估指导原则检测限检测限检测限评估的基本原则检测限评估的基本原则 实验人员应熟悉检测方法与仪器操作；采用合适的校准品、质控品并保持仪器处于正常状态；用于实验的试剂应为同一批号，且在有效期内。3体外诊断试剂分析性能评估指导原则检测限检测限检测限的评估和数据处理方法检测限的评估和数据处理方法实验材料和基本要求实验材料和基本要求空白样本的制备：空白样本应不含被测物，但
2、其基质应与待测定常规样本相同。如空白样本难以得到，可采用5%牛血清或人血清白蛋白溶液。或根据测定项目选用相应基质的样本，但应注意将基质效应减至最小。实验方法实验方法在一次运行中将空白样本重复测定20次。数据处理数据处理数据记录：将测定结果记录于表格中。如果检测系统对于低于零的结果报告为零，应记录初始响应值，如吸光度值等。数据统计：计算20次结果的均值与标准差SD。结果报告：结果报告：以空白均值加两倍标准差报告方法的检测限。4体外诊断试剂分析性能评估指导原则线性范围线性范围线性范围评估的基本原则线性范围评估的基本原则实验操作人员应熟悉方法原理与操作，能对样本进行正确处理，确保仪器工作状态正常，采
3、用适当的校准品对仪器进行校准。仪器的各项性能指标（如精密度）应与标称值相符，不存在明显的携带污染等。应使用同批号试剂及校准品。5体外诊断试剂分析性能评估指导原则线性范围线性范围基本要求基本要求样本基质应与临床实验样本相似，但不可采用含有对测定方法具有明确干扰作用物质的样本，如溶血、脂血、黄疸或含有某些特定药物的样本。进行血清学标志物检测时，理想的样本为分析物浓度接近预期测定上限的混合人血清。建立一种定量测定方法的线性范围时，需在预期测定范围内选择7-11个浓度水平。如将预期测定范围加宽至130%，在此范围内选择更多的浓度水平，然后依据实验结果逐渐减少数据点直至表现出线性关系，可发现最宽的线性范
4、围。当对标称线性参数进行验证时，需在已知线性范围内选择5-7个浓度水平。无论是建立或验证线性范围，所选用的浓度水平应可覆盖整个预期测定范围并包括与临床有关的重要评价浓度，如最小测定浓度或线性范围的最低限、不同的医学决定水平、最大测定浓度或线性范围的高限等。6体外诊断试剂分析性能评估指导原则线性范围线性范围制备方法制备方法不同浓度水平的样本可通过将高浓度样本与低浓度样本进行倍比稀释得到，注意在进行液体吸取时应选择精密度与准确性好的移液装置。制备时应将样本完全混合并避免蒸发或其他使样本变质的情况。每份样本的浓度与体积单位应统一。如果高/低浓度血清的值未知，可将每种血清编码，用编码代表每个血清的相对
5、浓度。对于等浓度间隔样本，可用连续整数（如1、2、3、4、5）代表连续样本。进行数据处理时可用样本号代替X值。样本的特殊处理：在无法得到适用的人血清时，需对样本进行一些特殊处理以满足实验要求。这些处理过程包括稀释、加入添加物或透析、热处理等，无论进行何种处理均应以保持基质恒定为基本原则。在评价报告中应对所使用的稀释液、添加物、溶剂等的材料来源加以注明。7体外诊断试剂分析性能评估指导原则线性范围线性范围实验过程实验过程建立线性范围：需测定9-11个浓度水平，每个浓度水平重复测定3-4次验证标称线性参数：需测定4-6个浓度水平，每个浓度水平重复测定3-4次。所有样本应在一次运行中或几次间隔很短的运
6、行中随机测定，最好在一天之内完成。8体外诊断试剂分析性能评估指导原则线性范围线性范围结果报告结果报告线性范围报告的具体格式不要求，但至少应包括以下几方面：进行线性评价的实验室或生产厂家名称。被评价的方法或试剂名称，批号。测定项目。线性范围（如为二阶线性应包括临床允许误差）。如可能应标出测定项目的医学决定水平及在此水平处的临床允许误差。9体外诊断试剂分析性能评估指导原则可报告范围可报告范围可报告范围评估的基本原则可报告范围评估的基本原则1.实验人员应熟悉测定方法与仪器操作。2.采用合适的校准品、质控品并保持仪器处于正常状态。3.用于评价实验的试剂应为同一批号，并在有效期内。10体外诊断试剂分析性
7、能评估指导原则可报告范围可报告范围样本要求样本要求最好选择与测定样本具有相同基质的样本。制备方法制备方法低值样本：将待测样本（含被分析物）用混合人血清（含被分析物浓度水平较低）或5%牛血清白蛋白生理盐水溶液进行稀释，产生接近于方法线性范围低限浓度水平的样本，一般为5个浓度水平，浓度水平间隔应小于线性范围低限的10%。高值样本：选取含被测物的高值样本，必要时可添加被分析物的纯品，并计算出理论值。使用混合血清或5%牛血清白蛋白生理盐水溶液或测定方法要求的稀释液对高值待测样本进行稀释，使其接近于线性范围的上1/3区域内，并记录稀释倍数。至少选用三个高浓度样本，稀释倍数应为方法性能标明的最大稀释倍数、
8、并适当增加或减小稀释比例。11体外诊断试剂分析性能评估指导原则可报告范围可报告范围实验过程实验过程在一次运行中将低值样本重复测定10次，高值稀释样本重复测定3次。数据处理数据处理数据记录：可根据附表进行数据记录。数据统计：分别计算AVE、SD、CV值。对于可报告范围高限还应计算乘以稀释倍数后的还原浓度和相对偏差。结果报告结果报告可报告范围低限：以方法性能标示的CV值为可接受界值，由数据中选取CV值等于或小于可接受界值的最低浓度水平做为可报告范围低限。可报告范围高限：选取还原浓度与理论浓度的偏差（%）等于或小于方法标示CV值时的最大稀释倍数为方法推荐的最大稀释倍数，方法线性范围的上限与最大稀释倍
9、数的乘积为该方法可报告范围的高限。12体外诊断试剂分析性能评估指导原则准确度准确度回收实验回收实验回收实验评估的基本原则回收实验评估的基本原则1.实验人员应熟悉测定方法与仪器操作。2.采用合适的校准品、质控品并保持仪器处于正常状态。13体外诊断试剂分析性能评估指导原则准确度准确度回收实验回收实验 实验样本的基本要求和制备方法实验样本的基本要求和制备方法1 选择合适浓度的常规检测样本，分为体积相同的3-4份。2 在其中2-3份样本中加入不同量的待测物标准，制成2-3个不同加入浓度的回收样本，计算加入的待测物的浓度。3 在另一份样本中加入同样量的无被测物的溶剂，制成基础样本。实验过程实验过程用待评
10、价方法对回收样本和基础样本进行测定，通常对样本进行2-3次重复分析，取其均值进行计算。数据处理及结果报告数据处理及结果报告1 计算回收率：回收率1=2可接受判断：比例系统误差不大于CLIA 88允许总误差的1/2 14体外诊断试剂分析性能评估指导原则准确度准确度回收实验回收实验注意事项：注意事项：1 加入体积：加入的标准液体积一般在样本体积的10%以内；并且保证在加样过程中的取样准确度。2 加入待测物的浓度：在保证总浓度在方法分析测量范围内，尽量使加入标准液后样本中的被测物浓度达到医学决定水平。3 标准物浓度：因为标准物溶液加入体积不到10%，为保证得到不同浓度的回收样本，标准物的浓度应该足够
11、高。15体外诊断试剂分析性能评估指导原则准确度准确度方法学比对方法学比对方法学比对的基本原则方法学比对的基本原则1.熟悉待评价系统。2.编写仪器标准操作规程，其中包括校准程序和室内质控程序。3.比对方法的选择：对于比较、对方法，采用符合生产厂家要求的实验室现行方法，或采用公认的参考方法。比对方法应具有以下条件：（1）具有比实验样品方法更好的精密度。（2）没有已知的干扰物。（3）同实验样品方法具有相同单位。比较方法应该选择正确性经过验证的方法,根据实际条件,选择的顺序如下：参考方法、原装系统、配套系统、经过验证的非配套系统。4.待评价方法的处理：进行方法学对比实验前，应该对系统进行初步评价（可参
12、考NCCLS EP-10），并且对待评价方法进行精密度评价（参考相关标准）,只有在以上评价完成并且达到相关标准后，才可进行对比实验。16体外诊断试剂分析性能评估指导原则准确度准确度方法学比对方法学比对实验样本的基本要求实验样本的基本要求1 按照实验对样品的要求收集处理病人样品，样本贮存时间及条件由被测组分的稳定性而定，尽可能避免使用贮存的样品。2 样品应来自于许多病人，并且此病人的疾病对于被测组成的影响应该是知道的，不要使用含有干扰此方法的组分或条件(如溶血)样品。3 在具有临床意义范围内即医学决定水平范围内，评价实验样品方法，通常基本从低于参考范围的低限到高于参考范围的高限。分析浓度尽可能在
13、报告的浓度范围内均匀分布。商品质控物或者校准物可能存在基质效应，应避免使用。17体外诊断试剂分析性能评估指导原则准确度准确度方法学比对方法学比对实验过程实验过程1 每天选择8个临床病人样本，按1到8的顺序编号。用两种方法同时进行实验，按照1，2，3，4，5，6，7，8，8，7，6，5，4，3，2，1的样本顺序进行测定。2 以上实验至少重复5天，即至少分析40个不同的临床病人样本。每天实验必须进行校准和室内质控。只有在室内质控合格的情况下，当天的实验室数据才有效。18体外诊断试剂分析性能评估指导原则精密度精密度1.批内精密度批内精密度是众多种类精密度中最基本的一个，它是在严格的相似条件下，所得到
14、的最佳的精密度。2.批间精密度批间精密度指在同一实验室，由同一（组）操作员在同一仪器上，使用同一方法和同种、同一批号试剂，在一段时间内(一般为一个月或20个工作日)对同一测试样品（常用质控品）测量结果的精密度。19体外诊断试剂分析性能评估指导原则Text in here精密度精密度精密度评估的基本原则精密度评估的基本原则1.操作者必须熟悉方法和/或仪器工作原理，了解并掌握仪器的操作步骤和各项注意事项，能在评估阶段维持仪器的可靠和稳定。2.用于评估试验的样品一般常采用临床实验室收集的稳定和冷冻贮存的血清(浆)库；当实验室收集的样品不稳定或不易得到时，也可考虑使用稳定的、以蛋白质为基质的商品物质，
15、如校准品或质控品。3.评估精密度时，应至少评估二个浓度水平样本的精密度。当二个浓度的精密度有显著差异时，建议增加为三个浓度。所选样本浓度应在测量范围内有医学意义，即至少有一个浓度在医学决定水平(medical decision levels)左右。不要为了得到较小的精密度，都选用较高值的样品，甚至超出测量范围。也不应选用靠近最低检出限的样品，此时所得的精密度往往偏大。相当多的检验项目低值常无实际临床意义，但有少数检验项目，其低值也有临床价值，此时就需要评估有判断价值的低值精密度，适用时，可进行功能灵敏度的评估。如没有医学决定水平，可在参考区间上限左右选一个浓度。此外，再根据检验项目的性质在线性
16、区间内选择另一个值。如与厂商或文献报导的精密度进行比较，所选浓度应与被比较精密度的浓度相接近。否则，有可能得出不恰当的结论。20体外诊断试剂分析性能评估指导原则精密度精密度只评估批内不精密度只评估批内不精密度1 试剂和校准品：应使用同一种类、同一批号的试剂和校准物,如可能,只进行一次校准。使用不同批号试剂和多次校准都会增加检验结果的变异程度。2 评估方法：在以上条件满足的情况下，在一批内对样本进行重复测定，至少进行20次重复测定。3 质量控制：检验时应同时至少测一个质控品。当质控品结果超出规定的失控限，不论实验结果是否满意都应弃去不用，重新进行试验以取得20个实验数据。要保存所有的质控数据和失
17、控处理记录。4 数据收集：在进行数据分析前，检查数据中有无由于偶然差错引起的离群值(outliers)，可用下述离群值的标准；从已收集的20数据计算出总均值和标准差，任何结果和总均值的差值超过4个标准差时，可认为是离群值。为了能收集到至少20个有效数据。除补充由于质控失控而增加的测试外，还应再增加由于离群值不用于精密度的计算所需增加的检验次数。在进行这种批内精密度评估实验时，一次只能有一个离群值，当离群值超过1个时，应怀疑是否为方法不稳定或操作者不熟悉所致。此时，应不用此次试验数据。检查问题和解决问题后重新开始新的评估实验。21体外诊断试剂分析性能评估指导原则Text in here精密度精密
18、度同时评价批内和批间不精密度同时评价批内和批间不精密度评估方法：评估方法：每天做2个批次的测试，每批测试时，对同一样品作双份测量，共做20天。评估结束时共有40对，即80个测试结果。从40批次测量中双份结果的差值求出批内精密度。从所有80个数据计算出批间精密度。在实施此项评估工作时，必须由同一个或一组操作者在同一台仪器上进行，应该使用相同的校准品、相同种类和批号的试剂。所用时间不得少于20个工作日，这样所测到的精密度能更好地反映出该临床实验室定量测量方法在一段时间内的理想或最适的稳定性。在每一批次测量中，必须同时测量质控品，以保证结果是可靠的，数据能够采用。注：也可以一日进行一个批次测量，一个
19、批次中对同一样品重复测量4次，共测20个工作日，由80个数据求出批内和批间精密度；如果取得稳定样品有困难，也可改为测5日，每日2个批次，每个批次测一个样本8次。仍有80个数据。从10个批次中每一样品8次差异算出批内精密度。从所有80个结果计算出批间精密度。22体外诊断试剂分析性能评估指导原则同时评价批内和批间不精密度同时评价批内和批间不精密度数据的收集数据的收集要收集到足够有效数据(至少为80个数据)。除补充由于质控失控而增加的测试外，应在进行数据分析前，检查数据中有无由于偶然差错引起的离群值(outlier)，可用下述剔除值的标准；从实施段已收集的40对均值的数据计算出总均值和标准差，出现下
20、列任何一种情况都可认为是离群值：（1）任何一对均值和总均值的差超过4倍标准差（2）任何一对中二个结果的绝对差值超过4倍标准差离群值不用于精密度的计算。在剔除后应再增加检验次数，以保证至少有40批次，80个数据进行计算。注：任何一次实验的剔除值不能超过总测量数的2.5%。当超过时，应怀疑是否为方法不稳定或操作者不熟悉所致。此时应不用此次试验数据，重新开始新的试验。精密度精密度23体外诊断试剂分析性能评估指导原则精密度精密度精密度的报告形式精密度的报告形式精密度的结果受众多因素影响，在报告测量精密度时，应同时说明下列各点：批内标准差及其95%置信区间；批内变异系数;批间标准差及其95%置信区间;批
21、间变异系数;实验进行的工作日数;检验批次数;每个批次重复检验数和总检验数;试剂的种类和批号;校准品种类、批号和校准次数;如适用，使用仪器的种类和型号。24体外诊断试剂分析性能评估指导原则干扰实验干扰实验干扰实验评估的基本原则干扰实验评估的基本原则（一）干扰物质来源：干扰物质可能来自内源或外源物质。可疑干扰物质的来源通常有：1.常见的异常标本，例如溶血、黄疸及脂血；2.普通的处方药及非处方药；3.患者群体中异常的生化代谢物；4.患者群体中常见的治疗药物；5.干扰测量程序的药物（包括代谢物）；6.已报道干扰相似测量程序的物质；7.标本处理过程中的添加物，例如抗凝剂、防腐剂；8.采集及处理过程中接触
22、标本的物质，例如血清分离设备、导管、标本收集容器及塞子；9.影响某些实验的膳食物质，例如咖啡因，-胡萝卜素，罂粟籽。（二）在实施评价实验前，必须决定临床可接受的标准。（三）在实施评价实验前，操作者必须熟悉仪器设备及测量程序并对精密度及准确度进行评价，在进行实验设计时要避免遗留效应影响分析结果，确保分析系统保持稳定。25体外诊断试剂分析性能评估指导原则干扰实验干扰实验干扰实验的评估及数据处理方法干扰实验的评估及数据处理方法干扰物质对实验结果的影响，一般是通过测定对照或基础样本池中待测物的浓度计算得出的。在某些情况下，对照样本池中可能含有一定量的内源性干扰物质，如胆红素、血红蛋白、蛋白质和脂类。在
23、一些测量程序中，采用标本前处理、样本空白、血清基质校正物和因子校正等手段以减少这些干扰物质在平均浓度下的影响，只有当患者样本中干扰物质浓度高于或低于平均水平时，由于干扰物质引起的误差才会显现出来。基于此，有两种评估干扰物质的基本方法，每一种方法都有它的优点及内在局限性，当两种方法同时使用时，可提供相互补充的信息。一种方法是将可疑干扰物质加入样本以评价干扰效果，另一种方法是测量个别有代表性病人标本，相对于高特异性可比较的测量程序评价被分析测量程序产生的偏倚。26体外诊断试剂分析性能评估指导原则干扰实验干扰实验实验材料和基本要求实验材料和基本要求（1）基础样本池：从一些未服用药物的健康个体获得新鲜
24、标本，以此反应标本基质。若不能获得新鲜标本，可使用冷冻或冻干的标本代替，但应保证实验材料充分接近新鲜临床标本。使用适当纯度的分析物将样本池中分析物的浓度调整到医学决定水平，但要避免引入其它的干扰物质。（2）储存溶液：准备一种适当纯度或者最接近循环形式的可疑干扰物质。选择一种实验物质能充分被溶解的溶剂，例如试剂纯水、稀释的HCl或NaOH、甲醇或乙醇、丙酮、二甲亚砜（DMSO）及其他有机溶剂。制备至少20倍干扰物实验浓度的储存溶液。（3）每个标本所需要的重复测量次数：双侧检验的实验重复次数为：，单侧检验用Z1-代替Z1-/2。其中，Z1-/2是双侧检验的可信度为100(1-)%时标准正态分布相对
25、应的百分位数；Z1-是单侧检验的可信度为100(1-)%时标准正态分布相对应的百分位数；Z1-是把握度为100(1-)%时标准正态分布相对应的的百分位数；dmax是检测分析物浓度时最大允许的干扰（interference）；s是测量程序的重复性标准差。由于实验次数必须为整数，所以将计算结果四舍五入为整数。（4）干扰物实验浓度：干扰物质浓度应达到病理标本的最高浓度值。（5）分析物实验浓度：分析物实验浓度应选择两个浓度水平。在大多数情况下，可选择医学决定水平、参考范围的上、下限或病理浓度。27体外诊断试剂分析性能评估指导原则干扰实验干扰实验实验过程实验过程（1）选择适当的分析物浓度；（2）建立一个
26、临床上显著性差别（dmax）的标准；（3）决定每个样本的重复次数；（4）制备一个基础样本池；（5）制备一个储存溶液；（6）制备实验样本，将储存溶液加至容量瓶体积的1/20，再用基础样本加至刻度，混匀；（7）制备对照样本，将溶剂加至另一容量瓶体积的1/20，再用基础样本加至刻度，混匀；（8）在同一批测定中，交替分析实验（T）及对照样品（C），例如C1T1C2T2C3T3.CnTn；（9）记录分析结果。28体外诊断试剂分析性能评估指导原则稳定性稳定性稳定性评估的基本原则稳定性评估的基本原则1.实验操作人员能熟练应用操作系统。能定期（包括：每日、每周、每月、每季度）对所用仪器进行维护保养，按仪器说明
27、书所要求定期更换易损零配件，每年请国家计量院对仪器滤光片进行校验，使仪器处在正常的工作状态，确保仪器有较好的测定精密度及减少样本、试剂携带污染等。2.要采用与评价试剂配套的校准品，校准品的使用（储存、复溶）应严格按照产品说明，校准步骤与间隔应按照本室的标准操作程序进行。3.要做好室内质控，质控物应有可靠的来源，稳定性应在一年以上，应尽可能采用人血清基质，可选用定值或非定值质控品，质控物的使用（储存、复溶）应严格按照产品说明，质控物的定值与靶值的确定应按照本室的标准操作程序进行。4.进行稳定性评价时应注意试剂有效期及批号，不可采用过期试剂或不同批号的试剂，最好用同批混合试剂，这样可避免瓶间差。试
28、剂应存放在说明书规定的条件下。工作液配制应严格按照产品说明进行，试剂瓶上要标注打开的日期及开瓶后的失效日期并签上名或缩写，要注意配制好的工作液是否需要避光保存。5.实验室应对用来保存试剂的冰箱有温度监控记录，如果发现冰箱温度可能存在问题，应该及时调整冰箱温度，以符合试剂保存的要求，如果不能调整，应该及时转移冰箱内的试剂。还应做好实验室内温度记录，对实验用水进行电阻率的测定（不能低于1兆欧姆.厘米）。29体外诊断试剂分析性能评估指导原则Description of the contentsDescription of the contentsDescription of the contents
29、参考值（参考区间）参考值（参考区间）定义定义 1.参考个体：根据设计标准筛选出进行实验的个体（确定一个人的健康状况通常是非常重要的）。2.参考人群：由参考个体组成的群体。（参考人群的数量通常是未知的，因此它是一个假定的实体。参考人群也可以由一个人组成，例如为自身或其他人做参考。主题特异性参考个体在本指导文件中不包含在内。）3.参考样品组：选出适当数量的个体以代表参考人群。4.参考值：经过对一定数量参考个体的测量和观查，所获得的检测结果。（对参考个体的实验结果，参考值源于参考样品组）5.参考值分布：一组参考值的分布。6.参考样本组的参考值分布：通过测定，并用适当的统计方法进行处理。7.参考人群的
30、参考值分布：评估参考样本组的参考值分布，并用统计方法进行处理。8.参考限：源自参考值的分布，用于描述部分参考值的位置（小于或等于、大于或等于、下限/上限。9.参考区间：参考值低限和高限之间。如：GLU：3.66.1 mmol/L。有时只有参考值高限（X）有意义，其参考区间为：0X)。10.观测值：病人样本的实验室检验结果，与参考值、参考值分布、参考限、参考区间作比较。31体外诊断试剂分析性能评估指导原则参考值（参考区间）参考值（参考区间）选择参考个体选择参考个体1.1 概要概要健康是一个缺乏统一定义的概念，因此，确定排除非健康的标准是选择参考个体的第一步。每一项研究均有不同的健康标准。一个准参
31、考个体的健康状态需经过一系列检查才能确定，这些检查包括病历检查或现状态生理指标的临床实验检查。用于参考值研究的标准应具有详细的描述和证明，实验操作者根据此标准来判定参考样品组的健康状态，调查问卷可用于评价每个参考个体的健康状态。1.2 排除和分组排除和分组排除标准详细规定了准参考个体的非健康状态，用于排除非健康参考样本。表-1列出了基本的排除标准，此表并没有囊括所有的排除标准，每个项目应根据实际情况细化排除标准。分组标准详细规定了组别特征。最常用的分组标准是年龄和性别。表-2还列出了其它的分组标准。各个项目可根据实际情况进行调整。排除和分组的最佳方法是调查问卷的方式。调查问卷常只需要回答“是”
32、或“否”即可确定，也可与体检同时进行。1.3 选择参考个体：选择参考个体：健康参考值的参考个体不要求是健康年青人，他们应与疾病人群相似。许多情况下，年龄相关的参考区间更适用于临床诊断。但有些情况下，与年龄相关的实验室指标改变可能不代表健康状况的变化，如老年人的总胆固醇或生长激素水平改变。除非特别需要（婴儿、老年人），参考个体通常不应是临床病人。1.4 抽样调查问卷：抽样调查问卷：为了保护参考个体的权益，应确保问卷信息和检测结果的保密性。32体外诊断试剂分析性能评估指导原则参考值（参考区间）参考值（参考区间）项目准备：项目准备：对所有的分析前条件，包括项目准备、样品收集和处理、分析方法、仪器，应
33、进行严格限定，限定条件应可同时应用于参考个体和患者人群。一般情况下，分析前应考虑两个因素，即生物学因素和方法学因素。生物学因素包括代谢和血液动力学，方法学因素包括样品收集和处置等。样本的种类、收集、处置和贮存样本的种类、收集、处置和贮存实验室应有样品收集、处置和贮存的标准操作手册。选择适宜的采血管，采血管不能引入外源性干扰。确定样本是否可在厌氧条件下贮存。不应使用溶血、脂血、黄疸的血清或血浆样本。血样血样如果选择的样本为血样，应确定需要的是动脉血、静脉血还是毛细血管血。样本需要抗凝时，应选择抗凝剂，应明确样本的采集方法。其它体液样本其它体液样本其它的体液样本包括尿液、脑脊液、胸膜积液、腹腔积液
34、、心包积液、关节内滑液、羊水和唾液等。应注意体液收集的时间段。温度温度应明确样本收集和贮存的温度。通常情况下，样本在采集后，应尽快进行处置和检测，尽量减少放置时间。33体外诊断试剂分析性能评估指导原则参考值（参考区间）参考值（参考区间）分析方法特征分析方法特征实验室应对所用检测方法进行细致的描述和规定，应建立不精密度、不准确性、最小检测限、线性、回收率、干扰特征的评价准则。34体外诊断试剂分析性能评估指导原则参考值（参考区间）参考值（参考区间）考值（参考区间）评估的方法和结果报告考值（参考区间）评估的方法和结果报告1.新的分析物质或分析方法新的分析物质或分析方法1.1 方法描述方法描述此方法适
35、用于新分析物、新分析方法及以前的分析物参考值的建立。健康人群某分析物质参考值的产生和参考区间的估计，应根据一个详细限定条件的方法进行，这些条件限定包括以下几点。（1）根据医学科技文献，建立适宜的生物变异和分析干扰的项目列表。（2）建立选择、排除及分组标准，设计适宜的调查问卷，以揭示潜在参考个体的标准。（3）参加参考区间实验的参考个体应签署书面同意协议，并完成调查问卷。（4）按照问卷结果及其它适宜的健康分析结果，对潜在的参考个体进行分类。（5）根据排除标准或体检结果，从参考样品组排除不符合要求的参考个体。（6）根据所需要的参考限，决定适宜的参考个体的数目。（7）用被分析物检测的常规方法，对被选择
36、的参考个体进行采样。（8）按照常规方法对样本进行收集和处理。（9）按照被评价方法分析样品，收集数据。整个过程与常规的操作保持一致。（10）检测数据，设计图表，以评价数据分布。（11）识别可能的数据错误。（12）选择估计方法、估计参考限和参考区间，对参考区间进行分析。（13）对以上的步骤进行证明。35体外诊断试剂分析性能评估指导原则参考值（参考区间）参考值（参考区间）1.2 结果分析结果分析 参考区间包括两个值，即参考上限和参考下限。对于大多数分析物，以2.5%为低限，以97.5%为高限，通常确定范围在2.5%97.5%的测定值为参考值。有时，只有参考上限具临床意义。对于单侧指标，可以确定第5百
37、分位数或第95百分位数为参考值。1.2.1 所需最少的参考个体数：所需最少的参考个体数：120个观测值可以满足90%的置信限，153个观测值可以满足95%的置信限，198个观测值可以满足99%的置信限。作为通行标准，推荐一个分析项目至少需要120个参考个体数。如果实验分组，每一组至少需要120个参考个体数。如果这120个参考值中，有不符合健康条件的值，将其排除后，应补测符合标准的值，最终总体参考值不少于120个。1.2.2 离群值的处理：离群值的处理：设定比值D/R，其中D=最大值-次大值，或D=最小值-次小值，R为所有观测值的极差。如果D1/3R，则极值应被删除。当两三个离群值处在数据分布的
38、一侧时，D1/3R规律常常不能识别出极值是否是具有显著水平的异常值。这种情况下，1/3规律应将最小的极值认定为离群值。1.2.3 参考值分组：参考值分组：对不同性别、不同年龄之间参考区间的差异应进行验证，每一组至少应选择120个参考个体。一般情况下，如果两组数据具有显著性差异，则参考区间应分别报告。两组之间平均值差异应用z检验进行验证。第一步，每组先检测60个个体。每一组平均值的显著性差别应用标准正态检验。36体外诊断试剂分析性能评估指导原则参考值（参考区间）参考值（参考区间）已有的分析物质或分析方法已有的分析物质或分析方法1 方法描述方法描述此方法适用于将已知的有效参考值（参考区间）从供给实
39、验室转移到接收实验室。在适宜的情况下，如果检测主体、方法学、取样方法均具有兼容性，参考值（参考区间）的转移是可行的。测量系统之间的可比性可以通过相应的方法进行验证。37体外诊断试剂分析性能评估指导原则参考值（参考区间）参考值（参考区间）已有的分析物质或分析方法已有的分析物质或分析方法2 参考值（参考区间）的转移参考值（参考区间）的转移参考值（参考区间）的转移是一个复杂的过程，为了使参考值具有可接收性，需要满足一定的条件。可接收的转移条件应视具体情况而定：2.1 使用相同的分析系统（方法和仪器）：使用相同的分析系统（方法和仪器）：（1）在相同的实验室里；（2）从一个实验室到另一个实验室；检测主体
40、来自相同的地区或相同的人口统计学总体；检测主体来自不同的地区或不同的人口统计学总体；2.2 使用不同的分析系统（不同的方法和不同的仪器）：使用不同的分析系统（不同的方法和不同的仪器）：（1）在相同的实验室里；（2）从一个实验室到另一个实验室；检测主体来自相同的地区或相同的人口统计学总体；检测主体来自不同的地区或不同的人口统计学总体；如果首次参考值（参考区间）的测定已经完成，则不同参考值（参考区间）的转移应着重注意两个事项：即分析系统的结果可比性和样本总体的可比性。整个的分析前过程及分析过程，均应与首次参考值（参考区间）确立过程保持一致。38体外诊断试剂分析性能评估指导原则参考值（参考区间）参考
41、值（参考区间）已有的分析物质或分析方法已有的分析物质或分析方法3 参考值（参考区间）确认：参考值（参考区间）确认：有三种方法可用于参考值（参考区间）转移可接收性的评价。3.1 参考值（参考区间）转移可接收性可以通过对首次适宜参考值研究的相关要素的检查来进行评估，包括参考总体的地区和人口统计学同质性，分析前和分析程序，分析操作，参考值（参考区间）的描述和调整，估计参考值（参考区间）的方法等。如果初始参考值（参考区间）的研究资料详细，接收实验室的上述条件均与初始参考值（参考区间）研究相同，参考值（参考区间）可以直接进行转移，不需要进行确认实验。39体外诊断试剂分析性能评估指导原则参考值（参考区间）
42、参考值（参考区间）已有的分析物质或分析方法已有的分析物质或分析方法3.2 如果用户或接收实验室希望对厂家或其它实验室所报告的参考值（参考区间）进行确认实验，应对较少数量的参考个体（n=20）进行参考值（参考区间）实验，并将结果与首次研究结果进行比较。在此研究中，整个过程应与首次研究保持一致。这20个参考个体应具有接收实验室健康人群的代表性，并满足排除和分组标准。如果接收实验室检验主体的人口统计学与首次研究的检验主体不具有同质性，即存在明显差别时，参考值（参考区间）不可进行转移。如果20个检验主体中有2个以下的值落在首次研究的95%参考限之外，则首次参考值（参考区间）可被转移。如果3个以上检验主
43、体的值落在95%参考限之外，则用户应重新检查分析程序，检查两个参考总体人群是否具有同质性，是否需要按照规模性实验指南建立适合自己实验室的参考值（参考区间）。此方法介绍接收实验室按照厂家或权威实验室提供的方法，检测20个参考个体，如果只有两个以下参考个体的值落在首次参考限以外，则应接收厂家或权威实验室提供的参考值（参考区间）。40体外诊断试剂分析性能评估指导原则参考值（参考区间）参考值（参考区间）已有的分析物质或分析方法已有的分析物质或分析方法3.3 用户或接收实验室希望对厂家或其它实验室所报告的参考值（参考区间）的转移进行确认实验，也可以对60个参考个体进行参考值（参考区间）实验，将测定结果与
44、所提供的首次参考值（参考区间）进行比较。在此研究中，整个过程应与首次研究保持一致。如果接收实验室检验主体的人口统计学与首次研究的检验主体不具有同质性，即存在明显差别时，参考值（参考区间）不可进行转移。参考个体的选择，参考值（参考区间）的获得应与首次参考值（参考区间）研究相一致，数据经检查和离群值的排除之后，将小样本的参考值（参考区间）数据与首次大样本的参考值（参考区间）数据进行显著性检验，如果检验结果不存在显著性差异，则接收所提供的首次参考值（参考区间）。如果存在显著性差异，应进一步取样，进一步比较，或者进行全规模的参考值（参考区间）研究。41体外诊断试剂分析性能评估指导原则参考值（参考区间）
45、参考值（参考区间）已有的分析物质或分析方法已有的分析物质或分析方法4 参考值（参考区间）的报告参考值（参考区间）的报告：试剂生产企业如果提供参考值（参考区间）研究，则应提供实验室设备、数据处理系统、参考值（参考区间）覆盖范围，参考人群的选择等具体的参考值（参考区间）来源的条件。体外诊断试剂生产企业在产品标识上应提供参考值（参考区间），并说明参考值（参考区间）所引用的文献。在此文件中，应详细列出参考样本的数量，选择标准，分析前和分析变量控制，统计学处理方法等。生产企业应识别分组因素，为每一个具有显著性差别的组别提供参考值（参考区间），并且说明是否对组之间的差别进行了检验，如性别、年龄、饥饿/非饥饿、一天中的取样时间、妊娠、体位等。生产企业使用的参考人群应具有与其市场类似的分布。为了易于参考值的转移，生产企业应提供详细的研究过程及结果。42体外诊断试剂分析性能评估指导原则L/O/G/OThank You!43体外诊断试剂分析性能评估指导原则
