1、药物半数有效量（药物半数有效量（ED50）的测定）的测定及镇痛药物实验及镇痛药物实验药物半数有效量（药物半数有效量（ED50）的测定）的测定#认识生物个体差异，了解测定药物认识生物个体差异，了解测定药物 ED50 的方法、原理及意义，同时了解质反应的方法、原理及意义，同时了解质反应的量效关系。的量效关系。实验目的实验目的#戊巴比妥钠戊巴比妥钠（pentobarbital sodium）为中）为中效巴比妥类中枢抑制药，随着剂量加大，效巴比妥类中枢抑制药，随着剂量加大，相继出现镇静、催眠、抗惊厥、麻醉、死相继出现镇静、催眠、抗惊厥、麻醉、死亡的效应。亡的效应。药物效应和药物剂量的关系称药物效应和药
2、物剂量的关系称量效关系量效关系（dose-effect relationship），药理效应按），药理效应按性质可分为性质可分为量量反应和反应和质质反应两种。反应两种。#量反应量反应(graded response)：药物效应的强弱有：药物效应的强弱有的是连续增减的量变关系，称为量反应。如的是连续增减的量变关系，称为量反应。如BP、平滑肌舒张与收缩。平滑肌舒张与收缩。质反应质反应(quantal response)：有的药物效应只能：有的药物效应只能用全或无，阳性或阴性来表示。如死亡与生存、用全或无，阳性或阴性来表示。如死亡与生存、惊厥与否、是否睡眠等惊厥与否、是否睡眠等质反应实验中，以对数剂
3、量为横坐标、反应百质反应实验中，以对数剂量为横坐标、反应百分率为纵坐标绘图，形成一条对称的分率为纵坐标绘图，形成一条对称的“S”形曲线形曲线。#质反应的量效曲线质反应的量效曲线睡眠睡眠死亡死亡反应百分率反应百分率020408060100剂量剂量LD50ED50#半数有效量半数有效量（median effective dose,ED50）：在一）：在一群动物中，使半数动物产生阳性药效反应的剂量。群动物中，使半数动物产生阳性药效反应的剂量。是标志药物是标志药物效价效价的参数，的参数，ED50 越小，药物效价越高。越小，药物效价越高。半数致死量半数致死量（median lethal dose,LD5
4、0）：）：在一群在一群动物中，引起半数动物死亡的剂量。动物中，引起半数动物死亡的剂量。LD50实际是以实际是以死亡为阳性药效反应的死亡为阳性药效反应的ED50，是，是ED50的一个特例。的一个特例。求求ED50和和LD50的实验方法原则上相同。的实验方法原则上相同。#半数有效量（半数有效量（50 effective dose，ED50）半数致死量（半数致死量（50 lethal dose，LD50 ）治疗指数（治疗指数（therapeutic index，TI）=LD50/ED50安全系数（安全系数（safety factor，SF）LD5/ED95可靠安全系数（可靠安全系数（certain
5、safety factor，CSF）LD1/ED99#实验设计三大原则：实验设计三大原则：重复、随机、对照重复、随机、对照#重复的原则 重现性重现性 实验结果在同样的条件下可以重复出来实验结果在同样的条件下可以重复出来 重复数重复数 足够的实验例数和实验次数足够的实验例数和实验次数#随机的原则 即所研究总体中的每一个个体都有同等的机会即所研究总体中的每一个个体都有同等的机会被分配到任何一个组中去，分组的结果不受人被分配到任何一个组中去，分组的结果不受人为因素的干扰和影响。为因素的干扰和影响。通过随机化的处理，可使抽取的样本能够代表通过随机化的处理，可使抽取的样本能够代表总体，减少抽样误差总体，
6、减少抽样误差 使各组样本的条件尽量一致，消除或减小组间使各组样本的条件尽量一致，消除或减小组间人为的误差，从而使处理因素产生的效应更加人为的误差，从而使处理因素产生的效应更加客观客观#对照原则对照就是要设立参照物对照就是要设立参照物 比较的意思。目的是排除非处理因素对实验结果的影比较的意思。目的是排除非处理因素对实验结果的影响，如种系、性别、年龄、体重等。响，如种系、性别、年龄、体重等。空白对照空白对照 标准对照（跟正常值）标准对照（跟正常值）实验对照（不同实验处理因素）实验对照（不同实验处理因素）自身对照（实验前后）自身对照（实验前后）相互对照（实验组间的比较，如几种不相互对照（实验组间的比
7、较，如几种不同药物）同药物）#均衡随机法分组均衡随机法分组：先按易控制的因素：先按易控制的因素（性别、年龄、体重等）均衡分档，然（性别、年龄、体重等）均衡分档，然后在每一档随机取出等量的动物分配到后在每一档随机取出等量的动物分配到各组，使难控制的因素（活泼程度、饥各组，使难控制的因素（活泼程度、饥饱、疲劳程度等）得到随机安排。饱、疲劳程度等）得到随机安排。#先把小鼠按照先把小鼠按照体重体重范围大体分类范围大体分类雄性为例雄性为例 粗略称重粗略称重 16 16-18 18-20 20-22 22 4只只 6只只 13只只 12只只 5只只 A B C D E 1 2 3 4 5 5 1 2 3
8、4 4 5 1 2 3 3 4 5 1 2 2 3 4 5 1#小鼠随机分成小鼠随机分成 5 组，每组组，每组10只、雌雄各半只、雌雄各半 戊巴比妥钠戊巴比妥钠(腹腔注射腹腔注射,0.2ml/10g)20、25、31、39、49 (mg/kg)以以翻正反射消失翻正反射消失(15S)为入睡指标，记录给为入睡指标，记录给药药15分钟后各组睡眠鼠数。分钟后各组睡眠鼠数。Bliss法计算：法计算：ED50、ED5、ED95#1、各组睡眠鼠数各组睡眠鼠数2、计算计算ED50、ED95、ED5等。等。#1、分组时采用均衡随机法。、分组时采用均衡随机法。2、注意观察小鼠翻正反射是否消失，保持室内安、注意观察
9、小鼠翻正反射是否消失，保持室内安静，已睡眠鼠与未睡眠鼠分笼放置。静，已睡眠鼠与未睡眠鼠分笼放置。#剂量剂量 实验鼠数实验鼠数 睡眠鼠数睡眠鼠数 反应百分率反应百分率 ED50（mg/kg）（）（）（mg/kg）49 10 39 10 31 10 25 10 20 10 不同剂量戊巴比妥钠对小鼠睡眠的影响不同剂量戊巴比妥钠对小鼠睡眠的影响#1、如何实现动物随机分组？如何实现动物随机分组？2、何为、何为ED50?为什么要以为什么要以ED50作为衡量作为衡量药物效价的参数？如何评价药物的安全药物效价的参数？如何评价药物的安全性？性？#镇痛药物实验镇痛药物实验#实验目的实验目的 观察镇痛药（阿司匹林）
10、的镇痛作用，观察镇痛药（阿司匹林）的镇痛作用，了解几种常用的镇痛实验方法。了解几种常用的镇痛实验方法。#实验原理实验原理 小鼠腹腔注射刺激剂小鼠腹腔注射刺激剂(如酒石酸锑钠、醋酸溶液等如酒石酸锑钠、醋酸溶液等)可诱导疼痛，动物表现出特征性的躯体伸缩行为可诱导疼痛，动物表现出特征性的躯体伸缩行为称之为称之为扭体反应扭体反应(表现为腹部内凹、躯干与后腿伸表现为腹部内凹、躯干与后腿伸张、臀部抬高等张、臀部抬高等)。将给药组与对照组相比，若使。将给药组与对照组相比，若使扭体反应发生率减少扭体反应发生率减少50%以上的，可认为有镇痛以上的，可认为有镇痛作用。作用。#实验动物和药品实验动物和药品 动物：小
11、鼠，体重动物：小鼠，体重2025 g。阿斯匹林：是一类解热镇痛抗炎药物，亦称为阿斯匹林：是一类解热镇痛抗炎药物，亦称为非甾体类抗炎药。镇痛作用部位主要在外周，非甾体类抗炎药。镇痛作用部位主要在外周，也可通过脊髓和其他皮质下中枢起作用。也可通过脊髓和其他皮质下中枢起作用。给药途径：灌胃（给药途径：灌胃（ig）0.6%醋酸溶液醋酸溶液 给药途径：腹腔注射（给药途径：腹腔注射（ip）#实验方法实验方法取取4只小鼠，只小鼠，标记，称重，标记，称重，均分为均分为2组组2只只 生理盐水（生理盐水（0.1ml/10g，ig）2只只 阿司匹林（阿司匹林（0.1ml/10g，ig）15min后后0.6%醋酸溶液
12、醋酸溶液（0.1ml/10g，ip）观察观察15min内各组小鼠内各组小鼠出现的扭体次数出现的扭体次数灌胃灌胃腹腔注射腹腔注射#组别组别 动物数（动物数（n n）发生反应动物数发生反应动物数(%)(%)小鼠出现的扭体次数小鼠出现的扭体次数 （15min15min内）内）1 22 2汇总各组实验结果，记于上表内，并依照下列公式计算药物汇总各组实验结果，记于上表内，并依照下列公式计算药物镇痛百分率镇痛百分率和和抑制百分率抑制百分率。#注意事项注意事项1、扭体反应：腹部收缩（内凹），躯体扭曲，、扭体反应：腹部收缩（内凹），躯体扭曲，后肢伸展及蠕行。后肢伸展及蠕行。2、灌胃方法和及时计时。、灌胃方法和及时计时。3、实验后可以汇集数据，评价药物的镇痛作用。、实验后可以汇集数据，评价药物的镇痛作用。4、分组，设立对照。、分组，设立对照。#思考与讨论思考与讨论 简述阿司匹林镇痛作用的特点及其应用。简述阿司匹林镇痛作用的特点及其应用。#
