1、溶血性贫血的实验室检测n溶血性贫血的分类溶血性贫血的分类n1、RBC内在缺陷所致的溶贫n（1）RBC膜缺陷：PNHn（2）HB结构异常：地中海贫血n（3）RBC内酶缺陷：G-6PD缺陷症2、RBC外来因素所致的溶贫nAIHA、药物、化学因素、感染因素2溶血性贫血的实验室检测n n 3溶血性贫血的实验室检测n1、血管内溶血：RBC在循环血n 液中直接破坏如PNHn2、血管外溶血：RBC在脾脏破n 坏如球形RBC增多症、脾亢n3、原位溶血：幼RBC在骨髓中n 溶血如AL、巨幼贫4溶血性贫血的实验室检测n如何诊断溶血性贫血？如何诊断溶血性贫血？n第一步第一步 确定是否有溶血确定是否有溶血n第二步第二
2、步 哪一类溶贫哪一类溶贫n一、首先确定有溶血一、首先确定有溶血5溶血性贫血的实验室检测n1、找出RBC破坏增多的依据n（1）RBC寿命测定15天（正常半衰期n 2532天）n（2）血片见RBC碎片n（3）血浆游离HB增高（血管内溶血）n（4）HB尿检测（），酱油色n（5）尿含铁血黄素试验（）n（6）血清非结合胆红素（间接胆红素）n 增高n（7）尿胆原增高6溶血性贫血的实验室检测n（8）血清结合珠蛋白检测 均减低n（9）血浆高铁血红素清蛋白检测n 电泳法：区带n2、找出RBC代偿增生的依据n（1）网织RBC增多n（2）外周血见有核RBCn（3）骨髓红系统增生明显活跃7溶血性贫血的实验室检测n二、
3、哪一类溶血性贫血？二、哪一类溶血性贫血？8溶血性贫血的实验室检测红细胞膜缺陷的检验红细胞膜缺陷的检验 红细胞渗透脆性试验 酸溶血试验(Ham)蔗糖水试验 9溶血性贫血的实验室检测红细胞膜缺陷的检验红细胞膜缺陷的检验 红细胞渗透脆性试验 酸溶血试验(Ham)蔗糖水试验 10溶血性贫血的实验室检测n1、红细胞渗透脆性试验红细胞渗透脆性试验n原理原理:是测定红细胞对不同浓度是测定红细胞对不同浓度 低滲氯化钠溶血的抵抗能低滲氯化钠溶血的抵抗能 力力 n 渗透脆性减低渗透脆性减低 渗透脆性增高渗透脆性增高11溶血性贫血的实验室检测方法：方法：0.60.40.2NaCl12溶血性贫血的实验室检测n 参考值
4、参考值 n开始溶血：开始溶血：0.42%0.46%（4.24.6g/L）NaCL 完全溶血：完全溶血：0.28%0.34%（2.83.4g/L）NaCLn临床意义临床意义 （1）脆性增高 遗传性球形红细胞增多症 （2）脆性减低 小细胞低色素性贫血：海洋性贫 血、缺铁性贫血 13溶血性贫血的实验室检测红细胞膜缺陷的检验红细胞膜缺陷的检验 红细胞渗透脆性试验 酸溶血试验(Ham)蔗糖水试验 14溶血性贫血的实验室检测红细胞孵育渗透脆性试验原理 37孵育24小时，细胞内葡萄糖消耗增加，ATP减少，钠离子泵出减少，细胞膨胀脆性增高。参考值参考值 未孵育未孵育 50%溶血溶血44.45%孵育孵育 50%
5、溶血溶血4.655.9%意义意义 脆性增高 遗传性球形红细胞增多症 脆性减低 缺铁性贫血 珠蛋白生成障碍性贫血15溶血性贫血的实验室检测 2、酸溶血试验、酸溶血试验(Ham)原理：原理：红细胞+弱酸血清（pH6.66.8）37 1小时 红细胞膜对补体敏感，备解素作用下溶血。临床意义：临床意义：正常人阴性，阵发性睡眠性 血红蛋白尿阳 性（PNH）16溶血性贫血的实验室检测PNH不同时间尿样不同时间尿样17溶血性贫血的实验室检测Ham试验试验19溶血性贫血的实验室检测红细胞膜缺陷的检验红细胞膜缺陷的检验 红细胞渗透脆性试验 酸溶血试验(Ham)蔗糖水试验 20溶血性贫血的实验室检测3、蔗糖水溶血试
6、验、蔗糖水溶血试验 离子浓度低，增强补体离子浓度低，增强补体与红细胞结合，膜与红细胞结合，膜 孔，孔，水进入水进入-细胞破坏细胞破坏21溶血性贫血的实验室检测（二）红细胞内酶缺陷的检验（二）红细胞内酶缺陷的检验 1、自身溶血试验及纠正试验 原理：原理：细胞内酶缺陷（葡萄糖-6-磷酸脱氢酶 G-6PD）(丙酮酸激酶)，葡萄糖效解障碍，不能提供足量ATP，红细胞在自身血浆中温育48小时，不能继续从血浆摄取葡萄糖作能量来源，ATP减少，不能维持红细胞内钠泵作用，导致溶血增加。在温育过程中分别加入葡萄糖和ATP作纠正物，看溶血能否纠正。22溶血性贫血的实验室检测参考值：参考值：正常人轻微溶血，溶血度3
7、.5%；加葡萄糖、ATP溶血明显纠正，溶血度1%。临床意义：临床意义：（葡萄糖-6-磷酸脱氢酶 G-6PD缺乏症 蚕豆病）溶血增加，加葡萄糖、ATP溶血部分纠正，（丙酮酸激酶缺乏症）加葡萄糖不能纠正。加入ATP能纠正。23溶血性贫血的实验室检测高铁血红蛋白还原试验高铁血红蛋白还原试验 G-6PD缺乏症筛选试验 高铁血红蛋白还原试验高铁血红蛋白还原试验 G-6PD缺乏症筛选试验 24溶血性贫血的实验室检测（三）珠蛋白合成异常的试验（三）珠蛋白合成异常的试验 血红蛋白电泳检测：醋酸纤维膜电泳法，检查有无 异常血红蛋白区带 诊断海洋性贫血 地中海贫血25溶血性贫血的实验室检测异常异常HB带带+26溶
8、血性贫血的实验室检测醋酸纤维蛋白膜电泳醋酸纤维蛋白膜电泳27溶血性贫血的实验室检测 免疫性溶血的检验免疫性溶血的检验 抗人球蛋白试验抗人球蛋白试验(Coombs)原理原理 直接抗人球蛋白试验：自身免疫性溶血性贫血（AIHA）血清中有抗自身红细胞的不完全抗体，他与表面附有相应抗原的红细胞结合，成为致敏红细胞，加入抗人球蛋白与红细胞表面不完全抗体结合，使红细胞相互连接起来出现凝集现象。来证实红细胞表面有不完全抗体。抗人球蛋白直接试验阳性；间接抗人球蛋白试验：检查血清中有无游离的不完全抗体，敏感性差。28溶血性贫血的实验室检测抗人球蛋白抗人球蛋白IgG不完不完全抗体全抗体RBC29溶血性贫血的实验室检测直接抗球蛋白试验（直接抗球蛋白试验（DAT）阳性（右）阳性（右）30溶血性贫血的实验室检测临床意义临床意义 1、正常人抗人球蛋白试验直接、间接均阴性，2、自身免疫性溶血性贫血（温抗体型 37条件下作用最强 IgG）,(冷抗体型 4条件下进行试验 IgM)3、新生儿同种免疫溶血病、SLE、RA、HD、NHL 可阳性。31溶血性贫血的实验室检测32溶血性贫血的实验室检测
