1、,自身免疫病,自身免疫病与自身抗体,北京积水潭医院检验科 孔卓,1,自身抗体概况及其在诊断中的价值 常见风湿病相关自身抗体介绍 自身抗体检测实验室检测方法,内 容,2,自身抗体概况及其在诊断中的价值 常见风湿病相关自身抗体介绍 自身抗体检测实验室检测方法,内 容,3,自身免疫病的概念,自身免疫性疾病：机体对自身抗原成分发生过度而持久的自身免疫应答而导致组织器官损伤的疾病状态,4,自身免疫性疾病的分类,器官特异性:糖尿病、多发性硬化症,甲状腺炎 器官非特异性:系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎 中间性:胆汁性肝硬化 (自身抗原是小胆管,自身抗体是抗线粒体),5,自身免疫病的诊断要点,1. 血中有高效
2、价的由B细胞产生的自身抗体和（或）自身应答性T细胞 2. 性别及年龄：老年及女性多发 3. 多器官发病 4. 有遗传倾向 5. 用免疫抑制剂有一定疗效,6,自身抗体的概念,自身抗体: 是指抗自身细胞内、细胞表面和细胞外抗原的免疫球蛋白。 自身免疫和自身免疫病重要特征之一 自身免疫病多伴有特征性的自身抗体(谱),7,自身抗体分类,1. 根据靶抗原在体内的分布不同分 类 抗器官/组织特异性自身抗体 抗细胞抗体 抗细胞外抗原抗体,8,自身抗体分类,2.根据自身抗体临床意义分类 疾病标记（志）性自身抗体 疾病特异性自身抗体 疾病相关性自身抗体 疾病非特异性自身抗体 生理性自身抗体 低滴度非特异性自身抗
3、体,9,自身抗体测定的临床意义,1. 在典型风湿病 确诊指标之一 如 SLE：关节炎、口腔溃疡、光过敏、意识 不清、血小板减少（抗dsDNA抗体阳性） 2.在不典型风湿病 提示、鉴别 早期 RA：关节炎（抗体阳性） 3.评估预后及指导用药 抗体谱广+高滴度 病情重 用药规范,10,11,自身抗体概况及其在诊断中的价值 常见风湿病相关自身抗体介绍 自身抗体检测实验室检测方法,内 容,12,胞核物质(如DNA、RNA、核内可溶性蛋白)刺激机体产生抗核抗体(ANA)，形成IC，沉积于周身毛细血管、关节滑膜、心脏瓣膜等处，引起全身性损伤。,系统性红斑狼疮,侵犯全身结缔组织, 胞核物质(如DNA、RNA
4、、核内可溶性蛋白)为自身抗原。 抗核抗体：最重要，检出率95-100%。 包括抗核酸抗体（dsDNA)和抗核蛋白抗体（抗组蛋白抗体和抗非组蛋白抗体） 抗dsDNA抗体检出率75%，是判断SLE活动性的标志，诊断标准中一条。 发病机制：III型超敏反应,SLE,14,系统性红斑狼疮的自身抗体,敏感性 (%) 特异性 (%),抗核抗体 (ANA) dsDNA抗体 抗Sm抗体 膜DNA抗体 核小体抗体 PCNA抗体 nRNP抗体(核糖体P蛋白) 组蛋白抗体 U1RNP抗体 SS-A 抗体 SS-B 抗体 抗心磷脂抗体 ,80 95 99 94 92 95 97 50 87-94 70 40 75,9
5、9 30-70 25 78 85 5 30-40 30-80 50 25-35 15 20-40,15,类风湿性关节炎,体内变性IgG刺激机体产生抗体(称为类风湿因子，RF,IgM类)，形成IC，沉积于全身小关节滑膜处，引起小关节红肿、变形僵直、失去运动功能。,病毒或其他微生物感染导致关节滑膜腔变性，从而刺激机体产生自身抗体。 发病机制：III型超敏反应，变性的IgG与IgM结合形成抗原抗体复合物，沉积于关节的滑膜腔。形成炎症。,RA,17,类风湿关节炎的自身抗体,敏感性(%),特异性(%),特点,18,58 articles,79,60,5797,1865,4,55.5,8206,RF,45
6、 articles,95,68,4646,1561,5,55,6125,Anti-CCP2,14 articles,96,53,1465,324,1.5,55,2234,Anti-CCP1,Refs,Specificity (%),Sensitivity (%),No,No,DD(years),Age(years),No,Other rheumatic diseases,Healthy subjects,RA,抗CCP抗体对RA的诊断价值,Ann Rheum Dis 2006;65:845-851,19,干燥综合征是最常见的结缔组织病 慢性自身免疫性外分泌腺炎症疾病，主要累及唾液腺与泪腺，表现
7、为眼干、口干 受累器官可见大量淋巴细胞浸润 血清中可检测到多种自身抗体。,干燥综合征,20,干燥综合症的自身抗体,21,联合检测在干燥综合征诊断中的合理应用,110例pSS患者4种特异性自身抗体联合检测结果,22,抗磷脂抗体综合征,APS是以动脉或静脉血栓及/或妊娠并发症为主要临床表现，且患者血浆中存在aPL的非炎症性自身免疫疾病. 血栓是最突出的临床表现 是目前公认获得性血栓的主 要原因。,23,APS的分类标准（Sapporo修正标准） （2006年Sydney-11th international APS）,24,抗心磷脂抗体(ACA),心磷脂：从牛的心肌中分离得来 通常采用ELISA方
8、法测定 分为IgG 、IgM、IgA类ACA。 IgG类ACA与血栓形成和习惯性流产强相关,25,APS-其他抗体,aCL、B2GP1抗体均未较合理的解释Ab-血栓的机制 针对凝血过程中一些因子的抗体的体内外研究已经证实-Ab可以诱发血栓,26,其他风湿病的自身抗体,硬皮病(PSS) 皮肌炎/多肌炎 (DM/PM) 血管炎 抗磷脂抗体综合征 混合性结缔组织病 (MCTD),Scl-70抗体 抗着丝点抗体(ACA) PM-1抗体 Jo-1抗体 抗中性粒细胞胞浆抗体(ANCA) 抗GBM抗体 抗内皮细胞抗体(AECA) 抗心磷脂抗体(Acl) 狼疮抗凝物 2糖蛋白I U1RNP抗体(70kd) 抗
9、核抗体(ANA),27,自身抗体概况及其在诊断中的价值 常见风湿病相关自身抗体介绍 自身抗体检测实验室检测方法,内 容,28,自身抗体检测方法 直接免疫荧光法（direct immunofluorescence , DIF) 间接免疫荧光法（indirect immunofluorescence , IIF) 酶联免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay ,ELISA) 放射免疫法(radioimmunoassay , RIA) 被动血凝法(passive hemagglulination , PHA) 颗粒凝集法(particle agglutinati
10、on , PA) 对流免疫电泳法(countercurrent immunoelectrophoresis , CIE) 免疫双扩散法(agar gel double immunodiffusion , ID or DID) 免疫印迹法(immunoblotting , IB) 免疫沉淀法(radioimmuno precipitation assy , RIP) 斑点酶免疫渗透试验(dot immunoenzyme filtration assy , DIEFA) 斑点金免疫结合试验(dot immnuogold filtration , DIGFA),29,针对细胞或组织原位成分的抗体 “金标准”的检测方法IIF（ANA、dsDNA） 纯化靶抗原的特异性检测方法-ELISA(CCP、MPO、PR3) 易感基因的检测-分子生物学方法（HLADR4、HLAB27）,抗体检测方法的选择,30,原理,31,IIF,32,ANA：均质型,ANA：斑点型,ANA：核膜型,33,ELISA,34,免疫印迹法检测ANA HEp-2 cell extract,35,免疫斑点法,36,临床与实验室间的联系 建立临床与实验室交流平台 高危值回报 检验项目在临床应用中存在的问题 临床根据需求指导开展新的检验项目,37,谢谢,38,
