1、医学微生物学-细菌学 第六章 消毒灭菌与生物安全 Sterilization and Biosafety,大连医科大学微生物学教研室 主讲人：张伟,第一节 消毒灭菌的常用术语,消毒（disinfection）：杀死大部分微生物，并不一定能杀死细菌芽胞或所有微生物的方法。用以消毒的药品称为消毒剂； 灭菌（sterilization）：杀灭物体上所有微生物的方法。灭菌比消毒要求高，包括杀灭细菌芽胞在内的全部病原微生物和非病原微生物； 防腐：体外防止或抑制细菌生长繁殖的方法； 无菌(asepsis)：不存在活菌，多是灭菌的结果； 无菌操作：防止微生物进入人体或其它物品的操作技术，临床实际工作时，要时
2、刻牢记无菌概念,第二节 消毒灭菌的方法,一、物理消毒灭菌法 热力灭菌法：干热灭菌法和湿热灭菌法 辐射杀菌法 滤过除菌法 干燥与低温抑菌法,（一）热力灭菌法 （1）干热灭菌法 焚烧：废弃物、尸体 灼烧：接种环、试管口 干烤（160170，2h才可杀死芽胞）：玻璃器皿等 红外线: 医疗器械,（一）热力灭菌法 （2）湿热灭菌法 巴氏消毒法：用较低温度杀灭液体中病原菌而保持物品中所需不耐热成分不被破坏的消毒方法，由巴斯德创建，主要用于牛乳、酒类消毒。方法：61.162.8，30min或71.7，1530s； 煮沸法：100，5min杀死繁殖体。食具、注射器等； 高压蒸汽灭菌法 压力103.4 kPa（
3、1.05kg/cm2） 温度121.3 时间1520 min 效果杀灭包括芽胞在内所有微生物 应用所有耐高温、高压、耐湿的物品,（一）热力灭菌法 （3）湿热灭菌法与干热灭菌法效果比较 结论同样温度下，湿热比干热灭菌效果好 原因： 蛋白含水量多时易凝固变性 湿热穿透力比干热大 湿热的蒸汽具有潜热,（二）辐射杀菌法 紫外线(Ultraviolet radiation，UV) 其主要作用于DNA，使一条DNA链上相邻的两个胸腺嘧啶共价结合形成二聚体，干扰DNA复制与转录，导致细菌变异和死亡，并可杀灭病毒。 缺点：穿透力较弱 应用：物体表面及空气消毒 电离辐射：高速电子、X射线、射线 微波,（三）滤过
4、除菌法 原理：用物理阻留的方法除去液体或空气中的细菌、真菌； 常用滤器：薄膜滤器、玻璃滤器、石棉滤器； 特点：只能除去细菌、真菌，不能除去病毒、支原体、L型细菌； 应用：用于一些不耐高温灭菌的血清、毒素、抗生素，以及空气的除菌。,（四）干燥与低温抑菌法 干燥法：有些细菌的繁殖体在干燥时很快死亡，如脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌、苍白密螺旋体等； 低温法：低温可使细菌的新陈代谢减慢，常用作保菌种。冷冻真空干燥法是目前保存菌种最好的方法,二、化学消毒灭菌法 消毒机制： 引起菌体蛋白变性、凝固 ：醇类(皮肤、体温计) 干扰细菌的酶系统：重金属盐类 损伤细菌的细胞膜：表面活性剂 消毒剂的种类：酚类、醇类、重
5、金属盐类、氧化剂、表面活性剂、烷化剂(甲醛)。 消毒剂的特点：作用无选择性，对人体细胞有损伤 故只能外用，不能内服。 消毒剂的应用：病人排泄物与分泌物、皮肤、粘膜、手、空气、饮水、器械、环境等。,第三节 影响消毒灭菌的因素,微生物的种类：敏感性由高到低依次为真菌、细菌繁殖体、病毒、分枝杆菌、细菌芽胞。 微生物的数量 消毒剂的性质、浓度与作用时间：浓度大，时间长，效果好。但70%75%酒精杀菌力最强，原因是：更高的浓度会使菌体表面蛋白迅速脱水而凝固，影响酒精向内部渗入 温度和酸碱度,第四节 生物安全,一、病原微生物的分类 根据传染性、感染后对个体或者群体的危害程度，病原微生物分为四类： 第一类是
6、指能够引起人类或者动物非常严重疾病的微生物，以及我国尚未发现或者已经宣布消灭的微生物。天花病毒,新疆出血热病毒,埃博拉病毒等. 第二类是指能够引起人类或者动物严重疾病，比较容易直接或者间接在人与人、动物与人、动物与动物间传播的微生物。 艾滋病毒,霍乱弧菌,结核杆菌等.,第三类是指能够引起人或动物疾病，但一般情况下对人、动物或环境不构成严重危害，传播风险有限，实验室感染后很少引起严重疾病，并且具备有效治疗和预防措施的微生物。肝炎病毒,流感病毒,金黄色葡萄球菌, 伤寒沙门菌等. 第四类是指在通常情况下不会引起人或动物疾病的微生物。E.coli、小鼠白血病病毒等。 第一类、第二类统称为高致病性病原微
7、生物,二、病原微生物实验室的分级,一、二级实验室不得从事高致病性病原微生物实验活动。三级、四级实验室从事高致病性病原微生物实验活动。,从事高致病性病原微生物相关实验活动应当有名以上的工作人员共同进行。在同一个实验室的同一个独立安全区域内，只能同时从事一种高致病性病原微生物的相关实验活动。应有健全安全保卫制度,Biosafety level 4, personnel must work in special suits with air supplied via hoses. Such work is generally done in separate buildings with extre
8、me security.,第三节 灾害医学,灾害医学：是研究各种灾害对人类健康及其周围生存环境的影响，以及怎样开展灾后医疗救护和疾病防治的一门学科； 分类：自然灾害（汶川地震）、事故灾害（切尔贝利核电站泄漏事故）、公共卫生事件（SARS）； 灾害后感染的控制： 急救措施：清创、预防破伤风、注意感染； 卫生防疫：自然疫源性疾病、常见的（霍乱、痢疾、肝炎、乙脑、伤寒等）、气性坏疽。 措施：环境卫生、食品安全、医疗措施、应急预案。,问 题,定义：微生物 选择题：非细胞型、原核细胞型和真核细胞型微生物的代表者分别是什么？ 第一个被发现的致病性细菌是什么？何人发现的？ 青霉素是谁发现的？谁首先发现病毒？
9、 何人第一个成功的分离了沙眼衣原体？,问 题,定义：细菌L型、芽胞、质粒、中介体 溶菌酶和青霉素的作用机制是什么？并通过其机制说明为什么他们对G+菌杀菌效果更好？ G+菌和G-菌的细胞壁有何不同？ 芽胞具有强大抵抗力的原因是什么？ 细菌的细胞膜成分与真核细胞类似，但是不含什么？,问 题,定义：专性需氧菌、微需氧菌、兼性厌氧菌、专性厌氧菌、热原质 举例说明，你所了解的哪种细菌在高浓度的NaCl环境中生长良好？其引起的主要疾病是什么？ 什么叫代时？结核分枝杆菌的代时为多少？ 细菌在液体培养基中生长历经那4个时期？那个时期最有利于研究细菌的特性？那个时期产生抗生素？,问 题,定义：消毒、灭菌和无菌操
10、作。 牛奶常采用何种方法进行消毒？其具体方法是什么？由何人创立？他还首先研制了何种病毒疫苗？ 临床上的手术器械、敷料、手术衣等常用何种方法消毒，具体方法是什么？ 临床上手术室的空气消毒常用何种方法？其原理是什么？这种方法有什么缺点？ 乙醇的消毒浓度为多少？为何90%的酒精消毒效果差？,问 题,定义：噬菌体、毒性噬菌体、温和噬菌体。 白喉棒状杆菌是获得了来自何种生物的基因片段而获得了对人的致病性？其致病物质是什么？ 噬菌体感染的宿主是什么？温和噬菌体有几个周期？,问 题,定义：卡介苗、质粒。 白喉棒状杆菌是获得了来自何种生物的基因片段而获得了对人的致病性？其致病物质是什么？ 何为超级细菌，了解有关它的知识对于临床工作有何帮助？ F质粒编码何种结构？R质粒与细菌什么性状有关？,问 题,定义：疫苗、类毒素。 以你目前所学的知识，铁钉刺伤脚后如何进行处理？ 人工主动免疫与人工被动免疫的区别？ 在我国的常规儿童免疫程序中，出生即接种是哪两种疫苗，它们分别属于那种类型的疫苗？,chance favors the prepared mind！,
