1、血细胞及骨髓细胞学检查,郑州大学第三附属医院检验科 冯 建 飞,临床检验诊断学研究生课程,基础知识,临床检验诊断学研究生课程,基础知识,骨组织 淋巴组织 3 脾脏,临床检验诊断学研究生课程,基础知识,临床检验诊断学研究生课程,血液: 血细胞和血浆 血浆占55%,血细胞占45%。 造血系统疾病,除直接累及血液外,常可影响全身组织器官。 反之,各组织器官的病变也可直接或间接引起血液发生相应的变化,提示:,复习题 1 外周血细胞形态及性质检查的内容? 2 网织红细胞的意义? 3 危急值定义? 4 骨髓穿刺的适应症?,一 血细胞检查内容,1 如何看血细胞检查报告单 2 外周血细胞形态及性质 3 网织红
2、细胞的意义 4 寄生虫检查,临床检验诊断学研究生课程,一 血细胞检查内容,临床检验诊断学研究生课程,一 血细胞检查内容,临床检验诊断学研究生课程,一 血细胞检查内容,1 如何看血细胞检查报告单,临床检验诊断学研究生课程,一 血细胞检查内容,临床检验诊断学研究生课程,临床检验诊断学研究生课程,一 血细胞检查内容,一 血细胞检查内容,临床检验诊断学研究生课程,临床检验诊断学研究生课程,一 血细胞检查内容,2 外周血细胞形态及性质 a 红细胞形态 b 白细胞估计值及形态 c 血小板估计值及形态 d 异常细胞 意义:为临床提供参考及诊断依据,是血液病诊断的 “金标准”。,一 血细胞检查内容,临床检验诊
3、断学研究生课程,一 血细胞检查内容,临床检验诊断学研究生课程,a 红细胞形态,一 血细胞检查内容,临床检验诊断学研究生课程,a 红细胞形态,一 血细胞检查内容,临床检验诊断学研究生课程,a 红细胞形态,b 白细胞估计值及形态,一 血细胞检查内容,临床检验诊断学研究生课程,一 血细胞检查内容,临床检验诊断学研究生课程,b 白细胞估计值及形态,c 血小板估计值及形态,一 血细胞检查内容,临床检验诊断学研究生课程,d 异常细胞,一 血细胞检查内容,临床检验诊断学研究生课程,一 血细胞检查内容,临床检验诊断学研究生课程,d 异常细胞,一 血细胞检查内容,临床检验诊断学研究生课程,d 异常细胞,3 网织
4、红细胞的意义 定义: 晚幼红细胞和成熟红细胞之间 (残留RNA) 临床意义: 1 红细胞系统造血情况 2 疗效观察指标,一 血细胞检查内容,临床检验诊断学研究生课程,一 血细胞检查内容,临床检验诊断学研究生课程,一 血细胞检查内容,临床检验诊断学研究生课程,4 寄生虫检查 血液检查是诊断疟疾、丝虫病、黑热病和锥虫病的基 本方法 指尖或耳垂取血,婴儿可于足部取血 间日疟宜在发作后数小时采血;恶性疟在发作初期采血 可见大量环状体,l周后可见配子体 丝虫成虫寄生于淋巴系统,但产出的微丝蚴主要在血循 环中,且具有夜现周期性,一 血细胞检查内容,临床检验诊断学研究生课程,杜氏利士曼原虫,一 血细胞检查内
5、容,临床检验诊断学研究生课程,一 血细胞检查内容,临床检验诊断学研究生课程,一 血细胞检查内容,临床检验诊断学研究生课程,一 血细胞检查内容,一 血细胞检查内容,危急值 在检验过程中,某项或某类检验结果异常,表明患者可能正处于有生命危险的状态,临床医生需要及时获得检验信息,迅速对患者进行干预治疗,否则将危机生命。,一 血细胞检查内容,Hemoglobin Hg血红蛋白 50g/L - WBC(血液病、放化疗患者)WBC 0.5109/L 40.0109/L WBC(其他患者) WBC 1109/L 40.0109/L Platelets(血液病、放化疗患者)PLT 10109/L Platel
6、ets(其他患者)PLT 30109/L 1000109/L,一 血细胞检查内容,总结:,一 血细胞检查内容,临床检验诊断学研究生课程,二 骨髓细胞学检查内容,骨髓穿刺的适应症 不明原因的一种或多种血液成分的减少,如各种白血病,再生障碍性贫血,溶血性贫血,血小板减少性紫癜等。 不明原因长期发热,如某些传染病或寄生虫病(疟疾、黑热病及伤寒等),有助于确定病原体。 不明原因的肝、脾、淋巴结肿大。 疑有骨髓原发性或转移性肿瘤。 借助骨髓内发现特殊细胞,诊断戈谢氏病、尼曼匹克氏病。,临床检验诊断学研究生课程,骨髓穿刺的禁忌症 凝血功能障碍: 血友病 弥漫性血管内凝血,临床检验诊断学研究生课程,二 骨髓
7、细胞学检查内容,临床检验诊断学研究生课程,二 骨髓细胞学检查内容,肯定性诊断:骨髓中具有特异性病理性细胞,如白血病细胞、巨幼红细胞、骨髓瘤细胞、异形组织细胞、癌细胞等。 符合性诊断:骨髓象表现异常变化,结合临床病史可符合诊断。如缺铁性贫血、溶血性贫血、再生障碍性贫血、粒细胞缺乏、免疫性血小板减少性紫癜、脾功能亢进、类白血病反应等。 提示性诊断:骨髓象可提供进一步诊断线索。如溶血性贫血需结合病史作溶血检查才能明确诊断。 除外性诊断:骨髓象的检查能排除临床上被怀疑的疾病。如全白细胞减少,疑患急性白血病而骨髓检查无相应改变时,可作出排除性诊断。,临床检验诊断学研究生课程,骨髓细胞形态学检查在临床诊断
8、中的价值,二 骨髓细胞学检查内容,骨髓细胞学检查步骤、方法、内容 正常骨髓细胞学形态 组织化学染色 常见血液病骨髓细胞学特点,临床检验诊断学研究生课程,二 骨髓细胞学检查内容,骨髓采集 部位:胸骨,髂后上棘, 髂前上棘 骨髓涂片和染色 瑞特姬姆萨染色(Wright-Giemsa),临床检验诊断学研究生课程,二 骨髓细胞学检查内容,临床检验诊断学研究生课程,二 骨髓细胞学检查内容,二 骨髓细胞学检查内容,二 骨髓细胞学检查内容,二 骨髓细胞学检查内容,低倍镜观察 X10 1 染色,有无骨髓特有细胞(幼稚细胞、巨核细胞、造血岛和特殊细胞等) 2 骨髓增生程度判断 3 计数巨核细胞,临床检验诊断学研
9、究生课程,二 骨髓细胞学检查内容,临床检验诊断学研究生课程,二 骨髓细胞学检查内容,临床检验诊断学研究生课程,二 骨髓细胞学检查内容,增生程度 成熟红细胞/有核细胞 意 义 增生极度活跃 1:1 白血病 增生明显活跃 10:1 白血病、增生性贫血 增生活跃 20:1 正常骨髓、多种血液病 增生减低 50:1 再生障障性贫血(非重型) 增生重度减低 200:1 再生障障性贫血(重型),临床检验诊断学研究生课程,二 骨髓细胞学检查内容,油镜观察 X100 1.有核细胞计数及分类(骨髓200个-500有核细胞,血片100个有核细胞) 2.观察各系统细胞的形态特点:成熟情况, 有无异常细胞 3.观察有
10、无特殊细胞、异常细胞及寄生虫,临床检验诊断学研究生课程,二 骨髓细胞学检查内容,骨髓细胞学诊断注意事项 必须结合病史:注意年龄、性别、症状、体征、治疗经过、用药史。 必须结合末梢血象:对骨髓中不易辨认的细胞做出较正确判断。 结合现代新的技术. 认识:主观性 (FAB 约80%) 客观性 (MICM约95%),临床检验诊断学研究生课程,二 骨髓细胞学检查内容,临床检验诊断学研究生课程,二 骨髓细胞学检查内容,临床检验诊断学研究生课程,二 骨髓细胞学检查内容,组织化学染色意义 辅助判断急性白血病的细胞类型 辅助血液系统疾病的诊断和鉴别诊断,临床检验诊断学研究生课程,二 骨髓细胞学检查内容,常见细胞
11、化学染色 铁染色 过氧化物酶染色(POX) 过碘酸雪夫染色(PAS) 氯醋酸脂酶染色(NAS-DCE) 醋酸AS-D萘酚酯酶(NASDAE) 中性粒细胞碱性磷酸酶(NAP),临床检验诊断学研究生课程,二 骨髓细胞学检查内容,POX染色,NAP染色,临床检验诊断学研究生课程,二 骨髓细胞学检查内容,醋酸AS-D萘酚酯酶(NASDAE),PAS染色,临床检验诊断学研究生课程,二 骨髓细胞学检查内容,氯醋酸脂酶染色(NAS-DCE),PAS染色,临床检验诊断学研究生课程,二 骨髓细胞学检查内容,Fe染色 (外铁),Fe染色 (内铁),临床检验诊断学研究生课程,二 骨髓细胞学检查内容,三种急性白血病细
12、胞化学染色鉴别 急淋 急粒 急单 POX () (+) (- +/-) PAS 粗颗粒 ()() 小颗粒 NAS-DAE () (/+)不被NaF抑制 ()被NaF抑制 AS-DCE () () (+/-) NAP 积分升高 积分减低,临床检验诊断学研究生课程,二 骨髓细胞学检查内容,临床检验诊断学研究生课程,二 骨髓细胞学检查内容,细胞形态学,免疫学分型,遗传学,分子生物学,MICM分型,骨髓活检,临床检验诊断学研究生课程,二 骨髓细胞学检查内容,缺铁性贫血髓像,临床检验诊断学研究生课程,二 骨髓细胞学检查内容,再障性贫血髓像,临床检验诊断学研究生课程,二 骨髓细胞学检查内容,再障性贫血髓像
13、,临床检验诊断学研究生课程,二 骨髓细胞学检查内容,巨幼红细胞性贫血髓像,临床检验诊断学研究生课程,二 骨髓细胞学检查内容,血小板减少性紫癜髓像,临床检验诊断学研究生课程,二 骨髓细胞学检查内容,急性淋巴细胞性白血病髓像,临床检验诊断学研究生课程,二 骨髓细胞学检查内容,急性髓细胞性白血病髓像,临床检验诊断学研究生课程,二 骨髓细胞学检查内容,急性髓细胞性白血病髓像,临床检验诊断学研究生课程,二 骨髓细胞学检查内容,急性髓细胞性白血病髓像,临床检验诊断学研究生课程,二 骨髓细胞学检查内容,戈-谢氏(Gaucher disease)病髓像,临床检验诊断学研究生课程,二 骨髓细胞学检查内容,戈-谢
14、氏(Gaucher disease)病髓像,临床检验诊断学研究生课程,二 骨髓细胞学检查内容,尼曼-匹克氏(Niemann-Pick disease)病髓像,临床检验诊断学研究生课程,二 骨髓细胞学检查内容,尼曼-匹克氏(Niemann-Pick disease)病髓像,临床检验诊断学研究生课程,二 骨髓细胞学检查内容,嗜血细胞综合征髓像,临床检验诊断学研究生课程,二 骨髓细胞学检查内容,嗜血细胞综合征髓像,流式细胞术(FCM),细胞免疫分型也称细胞免疫标记(表型)检测 它是用单克隆抗体及免疫学技术对细胞膜表面和/或细胞质存在的特异性抗原进行检测,借以分析细胞所属系列,分化程度和功能状态的一种
15、方法。,临床检验诊断学研究生课程,流式细胞术(FCM),髓系细胞的抗体有CD13、CD14、CD15、CD32、CD33、CD65、CD91、CD156、CD166等。 淋巴细胞系列的抗体有:CD1、CD2、CD3、CD4、CD5、CD7、CD8、CD9、CD10、CD19、CD20、CD52、CD77等。 巨核细胞和血小板的抗体有CD41、CD42、CD61等。红细胞系列的抗体常用血型糖蛋白A或B。,临床检验诊断学研究生课程,流式细胞术(FCM),临床检验诊断学研究生课程,染色体和分子生物学,自从20世纪70年代以来由于染色体分带技术的出现,尤其是高分辨显带技术的应用,细胞遗传学研究在血液学
16、领域内才得以迅速发展,特别是在恶性血液病的研究中不但确定了某些染色体异常与疾病发生、发展、诊断、治疗及预后有密切关系,而且染色断裂点也往往成为寻找癌基因或抑癌基因的标志。因此血细胞染色体的检查与分析对遗传性血液病和恶性血液的诊断、分型及病因和发病机制的研究有重要价值,也为遗传咨询、优生优育提供依据。,临床检验诊断学研究生课程,染色体和分子生物学,48,XY,+4,t(9;22),+Ph,临床检验诊断学研究生课程,染色体和分子生物学,一个完整核型书写方法如下:47,XY,+8,t(9;22)(q34;q11)。表示47条染色体,增加了一条8号染色体,第9号与第22号染色体之间易位,断裂点分别在第
17、9号染色体长臂3区4带和第22号染色体长臂1区1带。,临床检验诊断学研究生课程,染色体和分子生物学,临床检验诊断学研究生课程,染色体和分子生物学,临床检验诊断学研究生课程,染色体和分子生物学,临床检验诊断学研究生课程,急性淋巴细胞白血病的MIC分型,临床检验诊断学研究生课程,染色体和分子生物学,白血病的分子生物学检查对白血病诊断分型及预后判断有以下几方面意义: 补充MIC检查的不足 发现新的亚型 监测白血病的微小残留病灶(MRD) 为研究白血病的发病机制打下基础,临床检验诊断学研究生课程,PCR方法检测MRD常用的分子标志,染色体和分子生物学,临床检验诊断学研究生课程,复习题,1 骨髓穿刺的适应症? 2 骨髓细胞学诊断注意事项? 3 危急值定义?,谢谢各位光临,