1、益生菌混合制剂（双歧杆菌和乳酸杆菌） 对改善婴儿湿疹的 随机双盲安慰剂对照研究 目录 Contents 研究目的 研究背景 研究过程 质量控制 参考文献 研究目的 u探讨婴儿期有无口服益生菌混合剂 （双歧杆菌和乳酸杆菌）与婴儿湿疹 发病的关系 研究背景 婴儿湿疹是婴儿期一种常见的过敏性疾 病。近年来 ，婴幼儿湿疹发病率呈明显上升 趋势（hygiene hypothesis）。 发展中国家约为 11% - 28%。我国尚无婴儿湿疹发病率 的确切资料，2007年于天津市局部调查显示，婴儿湿疹 的发病率已高达75.6%。 婴儿湿疹发病时瘙痒难耐，严重影响患儿的睡 眠休息，在高发病率的背景下，探究婴儿
2、湿疹 的防治方法已迫在眉睫。 即随着医疗卫 生条件的改善 ，早期缺乏感 染和微生物的 暴露，可能导 致随后感染性 疾病的高发。 已有证据显示，食物过敏是婴儿湿疹的主要病 因之一,IgE介导的食物变态反应参与了婴儿湿疹的 发病，提示对食物产生的过敏反应是婴儿湿疹发病 的重要因素，通过对婴儿食物及消化进行干预，可 能是防治婴儿湿疹的可行手段。但近年来有研究显 示，母乳喂养与婴儿湿疹的发病并无相关，虽然添 加辅食过早是婴儿湿疹的危险因素，但出生4个月后 推迟辅食添加时间并不能预防湿疹。这些结果提示 我们，婴儿湿疹与进食、消化的关系可能存在更深 层次的原因。 研究背景 目前研究发现肠道菌群在建立正常的
3、肠道屏障和诱导 免疫耐受方面发挥重要作用。 动物实验发现无菌条件下饲养的小鼠不能建立口服耐 受性，而在新生儿期重建肠道菌群可以逆转这一免疫功能 的失调。 流行病学调查发现过敏性疾病的婴儿肠道内双歧杆菌 和乳酸杆菌群比未患过敏性疾病的婴儿少。国外许多人群 干预研究发现双歧杆菌和乳酸杆菌在湿疹防治中有一定作 用，但尚需要更多的临床证据支持。 鉴于患者家属对益生菌等生物制品的接受度一般好于 传统药物，益生菌可能成为防治婴儿湿疹的有效手段。 研究背景 研究背景 目前已有的研究地域大多为芬兰、瑞典、挪威等欧 洲白人国家，涉及其他地区人种的研究很少，益生菌使 用的疗程和剂量也各有不同，菌种主要为乳酸菌种和
4、双 歧杆菌，其他益生菌种很少涉及，且诊断标准和随访时 间也不尽相同，这些特征的不同在一定程度上可能影响 结果的外推性。 本研究旨在使用随机双盲安慰剂对照实验法，在国 内尝试婴儿期服用益生菌在婴儿湿疹改善作用的有效性 进行探究，为改善婴儿湿疹提供新思路。 研究过程 确定研究人群确定样本量设立对照 随机分组与盲法伦理学问题对关键问题的定义 干预方案随访、资料收集、整理统计分析方法 有家族过敏史的婴儿 9 招募方法： 在广州市医院妇产科，妇幼保健院，通过宣传栏、广告、传单 等多种方式进行志愿者招募宣传，对2014年5月2015年5月前来 孕检的距离预产期较近的孕妇进行招募。 选取原因： u预期婴儿湿
5、疹在改人群中发病率较高而且稳定； u人口稠密，有足够数量的符合条件的研究对象； u医疗卫生条件较好，卫生防疫保健机构比较健全，文化教育水平 较高，交通便利。 一、确定研究人群 10 纳入标准（有家族过敏史）： 父亲或母亲至少一方，或是之前生育的子女患有临床确诊的过 敏性疾病，如过敏性湿疹，食物过敏，哮喘，过敏性鼻炎等（ 由招募时的专科医生诊断确认） 一、确定研究人群 排除标准： 1、分娩时孕周0. 35 0. 7 3. 5 17. 5 50 100 KUA / L 为 6 级。 免疫学指标检测： 试验组婴儿，出生后3天开始服用益生菌混合制剂，由医生发给婴儿 家庭，由其喂养者混入婴儿配方奶或母乳
6、中（母乳喂养着可供应吸奶 器），每日一次，每次一袋，直至出生后6个月。 对照组给予安慰剂，服用方法相同。 依从性的监督：母亲或其他喂养者需记录每日服用情况 （如记录剩余 实验制剂的袋数），每两周电话询问服用情况。不依从定义为连续三 天内，使用了的实验制剂小于一袋。 七、干预方案 质量控制：保 证依从性，避 免失访偏倚。 基线资料：试验组与对照组人群基本特征及影响婴儿湿疹发病的重要因素 基本特征试验组n(%)对照组n(%)P值 纳入人数 孕妇年龄 吸烟史 父母过敏性疾病史 家族过敏性疾病史 双亲特异性IgE 滴度 孕期 八、随访、资料收集、整理、分析 随访（婴儿生后3、6、12个月各一次） 内容
7、： u 医生对婴儿湿疹及严重程度进行诊断； u 两组实际按要求治疗（使用实验制剂）时间 u 按要求使用实验制剂的依从率 u 失访率、不依从对象及原因的记录，分析失访者与未失访者的基本特 征并比较，为结果的可靠性提供依据； 随访方式： 由父母或喂养者带婴儿来医疗机构常规体检并观察湿疹发生情况。 3个月，6个月，12个月时婴儿湿疹患病率与累计发病率 试验 组 对照组P值校正后 OR(95%CI) 患病率 3个月 6个月 12个月 累计发病率 3个月 6个月 12个月 完成12个月研究婴儿的临床资料（主要的混杂因素） 试验组n(%)对照组n(%)P值 最终纳入人数 胎龄 出生体重 性别（男/女） 剖
8、腹产 母乳喂养时间 感染 随访期使用抗生素 随访期住院治疗 总IgE及抗原特异性IgE的检测 随访样本的采集 最后一次随访常规静脉取血2 ml, 室温下( 20 25 ) 凝血( 610 min）, 在室温下1000 1350 g离心10 min, 将血清移至另一玻璃试管 中, 重复上述离心, 最后将血清移至另一个 Eppendo rf 试管中,2 8 冰箱保存待测( 不 超过5天) ，行免疫学检测。 采血应征得父母同意，统计两组实际采集的样 本数及占总研究对象的比例，将不愿采血与原 采血者的特征进行比较，以判断结果的可靠 性。 总IgE及抗原特异性IgE的检测 试验组n(%)对照组n(%)P
9、值 完成实验人数 总IgE(KU/L) 食物特异性 IgE(=0.35 kU/L) 所有食物 鸡蛋白 牛奶 大豆 小麦 花生 IgE相关性湿疹 食物过敏 鸡蛋 牛奶 随访流程图 招募到的受试 对象n=? 筛选并随机分组 n=? 试验组 n=? 对照组 n=? 3个月随访 n=? 3个月随访 n=? 6个月随访 n=? 6个月随访 n=? 12个月随访 研究完成n=? 12个月随访 研究完成n=? 未被采纳的病 例n=? 原因：符合剔 除标准，失访 未被采纳的病 例n=? 原因：符合剔 除标准，失访 ，不愿配合研 究 失访人数n=? 失访原因 失访人数n=? 失访原因 失访人数n=? 失访原因
10、失访人数n=? 失访原因 采用SPSS软件对基线、随访资料及试验结果进行统计学分析，均数与率 的显著性分别采用t检验和卡方检验，P0.05考虑有统计学意义，分析 比较两组间各指标的差异情况，从而判断干预效果。由于研究的是保护 作用，婴儿湿疹患病情况的相关指标应使用意向性分析。 同时可用多因素logistic回归分析校正可能的混杂因素：将剖腹产，母乳 喂养，抗生素使用，性别因素纳入logistic回归模型，得出校正后的OR 值。结果用OR值及95%置信区间表示 相对危险度降低=（对照组湿疹发病率-试验组湿疹发病率）/对照组湿疹发病率 绝对危险度降低=对照组湿疹发病率-试验组湿疹发病率 需治疗人数
11、=1/(对照组湿疹发病率-试验组湿疹发病率) 九、统计分析方法 质量控制 研究设计、资料收集、整理和分析各个阶段均应贯彻质量控制 选择偏倚、混杂偏倚 严格的入选标准，使用随机隐匿分组，无碳复写纸信封的使用。 测量偏倚 实验制剂的统一生产和定期检测 干扰：告知不要服用其他益生菌制剂。 沾染：研究对象最好互不认识，不相互交流。 失访偏倚：知情同意的获得，避免了撤出。 换组、进入：保证研究对象不知分组情况而避免。 参考文献 1.Kristin Wickens, P., P.N. Black and FRACP, A differential effect of 2 probiotics in the
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