1、 化学生物学专业实验讲义课程内容与学时:一、 药用植物学实验 24学时二、 化生专业综合实验(1) 34学时三、 化生专业综合实验(2) 84学时四、 化生专业综合实验(3) 30学时目 录实验室守则 3实验一 显微镜的构造使用与植物细胞的基本结构4实验二 植物组织的观察6实验三 植物根外形、初生及次生结构的观察10实验四 植物根茎的外形、初生及次生结构的观察14实验五 叶的外形、内部构造及繁殖器官观察17 实验六 植物标本的采集制作及植物检索表的编制与使用25实验室守则 1实验课是培养学生独立思考和理论联系实际、灵活应用能力的重要手段,也是进行科研工作的基础,必须严肃认真。2准时上实验课,不
2、得无故缺席,不得迟到早退,按指定座位就坐,使用相应的显微镜。3.实验前必须通过预习,明确实验的目的要求、内容、方法和步骤。实验时要认真观察,独立思考,做好记录,实验完毕后要按时交实验报告。 4.老师讲解实验时,要专心听讲,并作必要的记录。实验中如有疑问请举手,不准大声喧哗。 5爱护实验室一切仪器设备,按操作规程使用显微镜,尽量节约水、电及擦镜纸、试剂等一切消耗物质损坏仪器须登记,按规定赔偿。 6每次实验必须带教科书,绘图用具(HB、2H铅笔各一支,橡皮、尺子等)和实验记录本。 7保持实验室清洁整齐,一切实验用具用完后要擦洗干净,放回原处。每次实验完毕,要搞好室内清洁卫生离开实验室时要关好水、电
3、、门、窗。实验一 显微镜的构造与使用植物细胞的基本结构及后含物的观察实验学时:4学时实验类型:验证性实验教学方式:集中授课,分小组实验一、目的要求 1. 熟悉光学显微镜的构造、使用 2. 掌握植物细胞的基本结构 3.识别植物细胞的各种后含物 4.掌握水合氯醛制片法、表面片制法 5.掌握草酸钙晶体的类型和形态 6.学习绘制植物显微图二、仪器用品及实验材料 1. 仪器用品 显微镜、载玻片、盖玻片、镊子、刀片、吸水纸、擦镜纸、稀碘液、酒精灯、培养皿、解剖针、水合氯醛液,蒸馏水等 2. 实验材料新鲜洋葱鳞茎、马铃薯、浙贝、半夏、黄柏、大黄、甘草、地骨皮、射干粉末;红萝卜,辣椒,叶片等。三、实验内容与步
4、骤 1. 植物细胞的基本构造 (1) 洋葱表皮细胞制片(观察细胞结构) 用镊子撕取2小片( 3mm 3mm )洋葱内表皮,置载玻片上,蒸馏水装片。其中一片在盖玻片一侧加1滴1的I-KI溶液,用吸水纸在另一侧吸去多余溶液。然后在显微镜下观察洋葱表皮的细胞壁、细胞核、液泡。 (2) 有色体的观察用刀片从红辣椒果肉上刮取少许,均匀涂在载玻片中央,加蒸馏水1滴,再加盖玻片观察。细胞内橙色颗粒即为有色体。 2.植物细胞构造的观察 将洋葱表皮临时装片放在低倍镜下观察,可看到许多无色透明的稍长形的细胞,彼此紧密相连,没有细胞间隙。在细胞中,可见到浸埋在细胞质中的圆形的细胞核,如不清晰,可由盖玻片一侧加稀碘液
5、一滴,用吸水纸在另一侧稍吸,使碘液布满整个标本而染色,几分钟后观察,可见细胞质被染成浅黄色,细胞核被染成较深的黄色,细胞各部分显得较为清晰。移动装片,选择几个较清楚的细胞置于视野中央,换用高倍镜再仔细观察。注意识别下列各部分:(1) 细胞壁:植物细胞所特有,为细胞的最外层。(2) 细胞质:为无色透明的胶状物,紧贴在细胞壁以内,被中央大液泡挤成一薄层,仅细胞两端较明显。 (3) 细胞核:贴近细胞侧壁,呈类球形。(4) 液泡:位于细胞中央,占细胞体积的大部分,由于液泡内充满细胞液,所以比细胞质更透明。 3.植物细胞的后含物 淀粉粒 (1)切取一小块马铃薯块茎,用刀片刮取少许细胞,置载玻片上,加水一
6、滴,搅匀,盖上盖玻片。先在低倍镜下观察淀粉粒,注意其形状。转换高倍镜继续观察,仔细、准确地分辨单粒,注意识别淀粉粒中的脐点和层纹,绘图记录。然后取下制片,加一滴稀碘液,观察有何变化,记录观察结果。(2)取少量半夏粉末置于滴加12滴蒸馏水的载玻片上,置酒精灯上加热透化后,置于镜下观察其复粒淀粉,半复粒淀粉。(3)按上述方法制成浙贝母粉末装片置镜下观察,与马铃薯淀粉粒进行比较,注意彼此间淀粉粒的大小、形状、层纹、脐点有何不同,找出各自淀粉粒的特征。 结晶体(1) 簇晶:取大黄根状茎粉末少许,置于滴加12滴水合氯醛试液的载玻片上,在酒精灯上慢慢加热透化,加稀甘油1滴,盖上盖玻片,用吸水纸拭净其周围的
7、试剂,置镜下观察,可见到许多大型、形如星状的草酸钙簇晶。(2) 针晶:取半夏粉末少许,按上述方法透化后制片观察,可见散在或成束的针状草酸钙晶体。偶尔可见到类圆形粘液细胞中含有排列整齐的针束。(3) 方晶:取黄柏或甘草粉末少许,按上述方法制片,置镜下观察,在粉末中可见到一些方形、不规则形等形状的晶体。这些方晶常成行排列维旁边的薄壁细胞中,这种由一束纤维外侧包围着许多含有草酸钙方晶的薄壁细胞所组成的复合体,成为晶鞘纤维。(4) 砂晶:取地骨皮或牛膝根粉末少许,按上述方法制片,在粉末中可见类圆形薄壁细胞中充满了细小三角形或箭头状的草酸钙砂晶。因砂晶存在于某些薄壁细胞中,将药材研成粉末后砂晶多分散在药
8、材粉末中,而且数量很少,故难以与药材粉末区别。在观察时注意以下几点:砂晶虽然很少,但大小非常均匀。其形状为小的三角形颗粒,立体感较强。在调节微调节器时砂晶常有忽明忽暗的现象,或略比周围粉末亮。若用地骨皮制成徒手切片,观察效果好于粉末制片。(5) 柱晶: 取射干粉末少许,按上述方法制片,置镜下观察,可见到棱角分明的长柱形晶体,晶体呈半透明状。 四、实验报告与思考题 1. 绘洋葱鳞叶的内表皮细胞,注明细胞各部分。 2绘马铃薯、浙贝母、半夏淀粉粒的构造和类型图。3. 绘制辣椒果肉细胞中的有色体。4. 绘制各种材料、各种类型的草酸钙结晶。 5植物细胞的显微构造主要有哪几部分? 6质体有哪几种类型?它们
9、的结构和功能之间有何关系? 实验二 植物组织的观察(分生、基本/薄壁、保护、机械组织、输导组织)实验学时:4学时实验类型:验证性实验教学方式:集中授课,分小组实验一、 实验目的 1.掌握分生组织、基本/薄壁的基本特征。 2.掌握机械组织(厚角 组织)的形态特征。 3.掌握机械组织(厚壁组织:石细胞、纤维)的形态特征。 4.掌握周皮(木栓组织)和表皮细胞及毛茸的形态特征,气孔的轴式 (类型) 5.掌握导管(管胞)的特征及类型,了解筛管和伴胞。 二、仪器用品及实验材料 1. 仪器用品 显微镜,酒精灯,载玻片,盖玻片,刀片,镊子,水合氯醛试液,浓盐酸, 间苯三酚试液, 蒸馏水等。2. 实验材料 小麦
10、或洋葱根尖永久纵切片;椴树茎永久横切片;薄荷茎横切面永久制片;大黄、甘草粉末;豆芽嫩茎;黄柏、厚朴、薄荷叶、金银花、石韦粉末;白英叶。三、实验内容和步骤1. 顶端分生组织的观察取小麦根尖纵切片观察:先在低倍镜观察,首先确定根冠的位置,位于根冠之上是一团非常小,排列紧密的细胞,这些细胞就是顶端分生组织。转换高倍镜下观察可以清晰地看到较大的细胞核或正在进行细胞分裂的染色体形态。随着位置不断上下移动,细胞将逐渐增大,开始出现了细胞的分化,通过仔细观察,并比较细胞形态的变化,初步鉴定出原表皮层、基本分生组织和原形成层的大致位置。2. 侧生分生组织的观察在显微镜下观察椴树茎横切片:首先在低倍镜可以明显地
11、观察到微管组织呈环状排列,其中木质部被试剂染成红色,韧皮部被染成绿色,在木质部和韧皮部之间,可以看到几层扁平细胞呈环状排列,细胞略呈切向延长,这就是形成层。转换高倍镜下进一步观察可以清楚地看到,这几层切向延长的扁平细胞排列紧密,细胞壁薄。在大多数情况下,通常将这几层扁平细胞称为形成层,在这个区域不仅有形成层细胞,也包括了由形成层细胞刚刚分生出来的还未分化为木质部和韧皮部的组织,而这些细胞离形成层越近,两者就越难以区别。在茎的最外层有几层略呈扁平的被染成棕红色或红褐色的死亡细胞,细胞壁较厚,排列整齐,无胞间隙,这几层细胞为木栓层细胞。在木栓层内方有13层颜色淡而扁平的细胞就是木栓形成层,木栓形成
12、层以及两侧刚刚分生出未成熟的组织有与维管形成层相似的特征。侧生分生组织细胞多为切线延长,并进行切向分生活动,沿器官的径向增加细胞的层数。可以说明,侧生分生组织活动的结果可以使植物体的轴状器官不断增粗,这种生长方式称为增粗生长。3.薄壁组织的观察观察薄荷茎的横切永久制片:在显微镜下可以看到许多大小不等的维管束呈环状排列于薄壁组织中,这些薄壁组织又可分为外部的皮层和中间的髓部,以及维管束之间的髓射线等。这类薄壁组织除了具有贮藏、输导作用外,还具有填充和使组织间彼此联系等功能,并具有转化为分生组织的可能。4.保护组织的观察(1)腺毛:是指可以分泌粘液、树脂、挥发油等物质的毛茸。取金银花花冠的一小片,
13、经水合氯醛透化后制片观察;也可直接取金银花粉末制片观察。看到许多具有多细胞腺头的腺毛,有的腺头呈橄榄球状,有的腺头呈三角形状等,腺柄也由多细胞组成。腺鳞是一种特殊的腺毛,可选用薄荷叶(或唇形科的某一植物的叶)的表皮细胞制片观察,所看到的腺鳞的腺头是由8个分泌细胞呈辐射状排列组成,侧面观察为扁球形,具明显的角质层,极短的腺柄由单细胞组成,腺鳞周围的表皮多呈放射状排列。(2)非腺毛:是指没有腺头和腺柄区分,不能分泌物质的毛茸。非腺毛广泛存在于植物体的表面,种类极多,形态变化较大。金银花的非腺毛是由单细胞组成,较长,从基部向上逐渐变细,呈牛角弯曲状;薄荷叶表面的非腺毛是由多细胞组成,也呈牛角状歪曲。
14、这些单细胞和多细胞组成的单列非腺毛是较为常见的类型,多种植物体表面都可以看到。此外也有多种形态和结构更为复杂的类型。取石韦叶片,用刀片刮取叶背面毛茸,加1滴蒸馏水制片观察,可以看到许多放射状星状毛。(3)气孔 : 植物体的表皮( 除根表皮外)均有气孔,气孔由两个半月形的保卫细胞对合而成。在保卫细胞周围常有2至多个与表皮细胞形状不同的细胞,为副卫细胞;由于保卫细胞和副卫细胞之间不同的排列关系,双子叶植物的气孔有下列几种类型 (撕取叶下表皮制成临时水装片观察): a. 平轴式气孔;b. 直轴式气孔;c. 环式; d. 不等式气孔; e. 不定式气孔 5. 机械组织的观察(1)厚角组织厚角组织可存在
15、于植物的草质茎和叶柄内,特别是棱角处更为多见。厚角组织细胞多为生活细胞,它们的特点是细胞壁呈不均匀地增厚,这些细胞壁主要由纤维素组成,细胞壁具弹性而硬度不强。根据其增厚的位置不同,可分为真厚角组织、片状厚角组织和腔隙厚角组织。取新鲜的薄荷茎(或芹菜叶柄)为实验材料,作徒手横切片,因厚角组织分布在茎的四个角处,所以不用考虑切下的材料是否完整,只包括一个棱角即可,但要求所切下的材料一定要薄。将切下的材料放在载玻片上加稀碘液和66%硫酸,然后封片观察,可见茎的棱角处被染成淡蓝色的细胞壁,细胞的角处增厚明显,细胞腔略呈棱形。如高倍镜认真观察,细胞内可以看到原生质体存在,证明其为生活细胞。(2)厚璧组织
16、厚壁组织细胞的特征是细胞壁全面显著地木质化增厚,常见层纹和纹孔,成熟的细胞腔小,是死细胞。根据其形态又可分为纤维和石细胞,纤维通常比石细胞要长很多,但也有许多中间类型。A. 纤维纤维最显著的特征是细胞细长,细胞壁为纤维素或木质素增厚,通常成束存在。取黄柏粉末少许于载玻片上,加水合氯醛试液透化后再加间苯三酚和浓硫酸各一滴,然后封片在镜下观察。因粉末中许多纤维细胞均为木质化增厚,遇间苯三酚和浓硫酸后都可染成淡红色或樱红色。镜下观察到的纤维束周围的薄壁细胞中含有草酸钙方晶,成为晶纤维。B. 石细胞石细胞广泛存地分布于植物体,并有各种各样的形状,这些细胞有较厚的次生璧并强烈地木质化,有许多的单纹孔或分
17、枝的纹孔沟。因石细胞形态变化较大,分布较普遍,常作为中药鉴定的重要依据。取厚朴药材粉末少许,经水合氯醛试液透化后制片观察,可见石细胞成群或分散存在。石细胞多呈分枝状,细胞腔和纹孔沟清晰。因石细胞的细胞壁为木质素增厚,也可用间苯三酚和浓硫酸染色后观察。6. 输导组织的观察(导管的观察)(1) 取大黄粉末少许制片观察:其导管增厚部分为网状,网孔为未增厚部分,导管的直径较大,为典型的网纹导管,也可发现其他类型的导管如梯网纹导管。观察时要注意:先确认出导管类型,再进一步区分中间类型,找出彼此间的区别。(2) 用甘草粉末少许制片观察:可看到很多导管碎片,细胞壁绝大多数增厚,仅留下一些未增厚的小孔,并可见
18、两个同心圆,圆形或椭圆形,称具缘纹孔,有的分散排列,有的排列较为整齐。(3) 取新鲜豆芽纵切面制片,观察其导管类型为环纹、螺纹、具缘纹孔等导管类型。四、实验报告与思考题 1绘各种类型气孔的简图。 2绘黄柏的纤维和石细胞图。 3腺毛和非腺毛有何区别? 腺鳞有何形态特征? 4何谓周皮?它包括哪几部分?5厚角组织和厚壁组织在形态和结构上有何不同?实验三植物的分泌组织,植物根的外形、初生及次生结构的观察实验学时:4学时实验类型:验证性实验教学方式:集中授课,分小组实验一、目的和要求(一)掌握油细胞、油室、油管、树脂道、乳汁管等分泌组织(细胞)的形态特征。(二)掌握植物根的外部形态特征和根系的类型。(三
19、)掌握根的初生构造及次生构造的特点。二、仪器用品及实验材料(一)仪器用品显微镜,酒精灯,载玻片,盖玻片,刀片,水合氯醛试液,浓盐酸, 间苯三酚试液, 苏丹试液, 蒸馏水等。(二)实验材料 鲜姜(切片,观察油细胞):小茴香横切面永久制片(观察油管):丁香粗粉(观察裂生式油室);桔梗(纵切片粉末)(观察乳汁管)。毛茛根横切面永久制片(观察根的初生构造);直立百部根横切面永久制片;青木香根横切面永久制片(观察根的次生构造)。 三、实验内容和步骤1. 分泌组织(细胞) (1)分泌细胞 油细胞 取鲜姜作徒手切片,制成临时水装片,镜检,可见在薄壁细胞之间,杂有许多类圆形的油细胞,胞腔内含淡绿黄色挥发油滴。
20、(2)油室 丁香粉末装片观察,有大形腔穴即油室,内有挥发油。 (3)油管 观察小茴香横切面永久制片,可见有许多分泌细胞围绕成的大圆腔,即分泌道,因其内贮藏挥发油而称油管。(4)乳汁管 观察桔梗纵切片,可见多细胞的有节乳汁管。2. 根的外部形态特征和根系的类型主根:由胚根细胞的分裂和伸长所形成的向下垂直生长的根。侧根:主根生长达到一定的长度,在一定部位侧向生出的支根。不定根:在主根和侧根以外的部分,如茎、叶、老根或胚轴上生出的根。直根系:主根发达,主根和侧根界限非常明显的根系(裸子植物、双子叶植物的根系)。须根系:主根不发达,或早期死亡,由茎基部长出许多大小、粗细相仿的不定根,呈胡须状簇生的根系
21、(单子叶植物、少数双子叶植物的根系)。3. 根的初生构造 (1)双子叶植物根的初生构造 毛茛根横切片的观察 取毛茛根横切片,在低倍镜下观察区分出表皮、皮层和维管柱三大部分,再转换高倍镜由外向里仔细观察表皮、皮层和维管柱的细胞构造特点。 表皮:为最外一层薄壁细胞,排列整齐紧密,没有细胞间隙。 皮层:位于表皮内,占根的相当大部分,由多层排列疏松的薄壁细胞组成。可以区分为三层。紧靠表皮下方的12层细胞,略呈切向延长,排列较紧密,称外皮层。位于外皮层以内为多层排列疏松的薄壁细胞,具明显的细胞间隙,称为皮层薄壁组织。皮层最内一层排列紧密的细胞称为内皮层。内皮层有些细胞的径向壁上,可见增厚的凯氏点。 维管
22、柱:为内皮层以内的所有组织,占据根中央部分,细胞较小而密集,由中柱鞘、初生木质部和初生韧皮部组成。 中柱鞘:为紧贴内皮层的1-2层薄壁细胞组成,细胞壁薄,排列紧密。侧根、木栓形成层和维管形成层的一部分均发生于中柱鞘。 初生木质部:在中柱鞘内方部分,为四束(四原型)呈放射状。靠近中柱鞘一端的导管口径较小,是原生木质部;近根中心的导管分化较晚,口径大,为后生木质部,这是根的初生构造特征之一。由于初生木质部一直分化到根的中央,故无髓,这是典型的双子叶植物根的初生构造特征。 初生韧皮部:位于两初生木质束部之间,与初生木质部束相间排列呈辐射状,构成辐射维管束,这也是根的初生构造的重要特征。初生韧皮部,束
23、的数目与初生木质部束数相同。细胞大小不一,呈多角形。 薄壁细胞:在初生木质部束和初生韧皮部束之间分布的很薄的细胞层,当根进行次生生长时,它将分化成维管形成层的一部分。 (2)单子叶植物根的初生构造 观察直立百部根的横切制片 根被:由最外层3-4层细胞组成,细胞壁具条纹状木栓化纹理。 皮层:紧靠根被内方,占根的大部分,由薄壁细胞组成。可区分为外皮层、皮层薄壁组织和内皮层。内皮层可见凯氏带。 维管柱:内皮层以内的全部组织。包括中柱鞘、初生木质部、初生韧皮部和髓。 中柱鞘:紧贴内皮层,由1-2层小型薄壁细胞组成,细胞切向延长,略似内皮层细胞,但其侧壁没有增厚。 初生木质部束和初生韧皮部束:各19-2
24、7个,相间排列成辐射维管束。韧皮部束内侧有单个或2-3成束的非木化纤维;木质部导管类似多角形,偶有单个或2-3个并列的导管分布于髓部外缘,作二轮列状。 髓:位于维管柱的中心,散有单个或2-3个成束的细小纤维。4. 根的次生构造 观察青木香根横切制片 先在低倍镜下从外向里逐层观察各部分组织所在的部位,然后转高倍镜仔细观察各部组织的细胞特点。 (1)周皮 为最外方的数层细胞,由木栓层、木栓形成层和栓内层组成。 木栓层:为最外几层排列紧密、整齐的扁平状细胞,细胞壁栓质化,是死细胞,常呈浅棕色。 木栓形成层:是由中柱鞘细胞恢复分生能力而产生的在木栓层内方一层扁长形的薄壁细胞,在切片中不易分辨。 栓内层
25、:在木栓形成层的内方。狭窄,为23列呈切向延长的大型薄壁细胞。 (2)次生维管组织 在栓内层以内的全部组织,是由形成层活动所产生的。 次生韧皮部:为周皮以内,包括筛管、伴胞和韧皮薄壁细胞、韧皮纤维、韧皮射线。在横切面上韧皮薄壁细胞与筛管形态相似,常不易区分。韧皮射线多弯曲,由l2列径向排列的薄壁细胞组成。 形成层:在次生韧皮部和次生木质部之间,由排列紧密、整齐的扁长方形薄壁细胞组成。形成层只有一列细胞,但由于它向内、向外分裂迅速,刚产生不久的衍生细胞,尚未分化成熟,故在横切面上看到是多列细胞组成的“形成层区”。 次生木质部:占整个根的大部分。位于形成层以内,包括导管、管胞和木薄壁细胞等。横切面
26、上,导管最容易辨认,口径大小不一的类圆形或多边形的死细胞,作放射状排列。在次生木质部的内方,根的中心部位,为初生木质部。其导管口径细小。 维管射线:贯穿整个次生木质部和次生韧皮部中,沿径向延长,由12列薄壁细胞组成,在韧皮部内的叫韧皮射线,在木质部的叫木射线。维管射线也呈放射状排列。 注意根次生构造的维管束已由辐射型转变成无限外韧型维管束,大多数双子叶植物的根中央没有髓部。四、实验报告与思考题 1绘制油细胞、油管、油室详图。 2绘制毛茛根横切、直立百部根横切面面、青木香根横切面详图、 3溶生式油室与裂生式油室的区别在哪里? 4根的初生构造包括哪几部分,内皮层有何特点?实验四、植物茎(根茎)的外
27、形、初生及次生结构的观察实验学时:4学时实验类型:验证性实验教学方式:集中授课,分小组实验一、目的和要求(一)掌握茎的形态和变态类型。(二)掌握茎的初生构造及次生构造特点。二、仪器用品及实验材料(一)仪器用品显微镜,酒精灯,载玻片,盖玻片,刀片,水合氯醛试液,蒸馏水等。(二)实验材料 1. 向日葵幼茎横切面永久制片。 2. -年生椴树茎横切面制片。 3. 薄荷茎横切面永久制片。 4. 玉蜀黍茎横切面永久制片。 5. 新鲜材料:白杨树幼嫩枝条,樟树幼嫩枝条三、实验内容和步骤1. 茎的形态茎的形态特征:节和节间、顶芽、腋芽、叶痕和皮孔。2. 茎的变态 (1)地上茎变态 叶状枝 茎扁化变态成绿色的叶
28、状体。 枝刺 由腋芽发育而成,不易剥落,可观察皂荚或枸橘的刺。 茎卷须 由茎变态而来,呈卷须状。 小块茎和小鳞茎 均由地上茎的腋芽变态而成,如薯蓣茎上叶腋的珠芽(小块茎)和半夏叶柄上的珠芽(小块茎)以及卷丹(小鳞茎)。 (2)地下茎变态 根状茎 多匍匐生长在土壤中,是很象根的一种地下茎。如姜、玉竹或黄精、白茅或莲藕的根状茎, 块茎 如马铃薯或天麻,其上有顶芽,叶退化,脱落后留有叶痕,其腋部是凹陷的芽眼,每个芽眼内,可有l至多个腋芽萌发,注意其缩短的节间。球茎 如荸荠,球茎是由地下侧枝末端膨大而形成。有环状短的节间和膜质叶。鳞茎 如洋葱头,有鳞茎盘、鳞片叶、腋芽。有的植物鳞叶较肥厚。3. 双子叶
29、植物草质茎的初生结构观察向日葵幼茎横切制片 在低倍镜下区分出表皮、皮层和维管柱三部分(维管束环状排列为一圈,束间有髓射线,中央为宽大的髓),然后转换高倍镜逐层观察: (1)表皮:为一层排列整齐、紧密的扁长方形的薄壁细胞组成,其外壁角质加厚,有时可见非腺毛。 (2)皮层:为多层薄壁细胞,具细胞间隙。与根的初生构造相比,所占比例很小。靠近表皮的几层细胞较小,是厚角组织,细胞在角隅处加厚,其内为数层薄壁细胞,其中有小型分泌腔。皮层的最内一层细胞无凯氏带的分化。 (3)维管柱:所占面积宽广,包括维管束、髓射线和髓。 维管束:为数个大小不等的无限外韧维管束,排成一轮,每个维管束由初生韧皮部、束中形成层、
30、初生木质部组成。 初生韧皮部位于维管束外方,其外侧有韧皮纤维,横切面呈多角形,壁明显加厚。在初生韧皮纤维内方是筛管、伴胞和韧皮薄壁细胞。 束中形成层为23列扁平长方形细胞,排列紧密、壁薄。 初生木质部,导管横切面类圆形或多角形,根据导管分子口径的大小可以判断靠近茎中心的是原生木质部,导管口径小,发生早;而接近束中形成层的为后生木质部,导管口径大,发生较晚。 髓射线:是两个维管束之间的薄壁细胞,它外连皮层,内接髓部。具横向运输,兼有贮藏的功能。 髓:位于茎的中央,也是维管柱中心的薄壁细胞,排列疏松,常具贮藏功能。 4. 双子叶植物草质茎次生构造观察薄荷茎横切制片 可见茎呈四方形,在显微镜下由外到
31、里仔细观察以下部分: (1)表皮:为一层长方形表皮细胞组成,外被角质层,有时具毛(腺毛、非腺毛或腺鳞)。 (2)皮层:较窄,为数层排列疏松的薄壁细胞组成。在四个棱角内方,各有10余层厚角细胞组成的厚角组织,其细胞角隅处加厚明显。内皮层明显,径向壁上可见。 (3)维管柱: 维管束:由四个大的维管束(正对棱角)和其间较小维管束环状排列。韧皮部在外方,狭窄,形成层成环,束间形成层明显。木质部在棱角处较发达,导管单列,数行,纵向排列,在导管列之间为薄壁细胞组成的维管射线。 髓:发达,由大型薄壁细胞组成。髓射线:为维管束间的薄壁细胞组成,宽窄不一。5. 双子叶植物木质茎的次生结构观察34年生椴树茎的横切
32、制片先在低倍镜下观察切面的整个轮廓,可见到分为两大部分:周皮和次生维管组织。转换高倍镜,自横切面的最外层向内依次观察。(1)周皮 包括三部分:木栓层位于最外层,由数层排列整齐的扁平状细胞组成。木栓形成层位于木栓层之内为一层扁平状薄壁细胞组成,切片中不明显。栓内层位于木栓形成层内方。由多层排列疏松的薄壁细胞组成。 (2)次生韧皮部 细胞排列成梯形(底部靠近形成层),与排列成喇叭形的髓射线薄壁细胞相间分布。在切片中,占茎部横切比例较小,明显可见韧皮纤维与韧皮薄壁细胞、筛管和伴胞呈横条状相间排列。初生韧皮部已破坏。 (3)形成层 为形成层区,呈环状,由45层排列整齐的扁长细胞组成。 (4)次生木质部
33、 在形成层内方,在横切面上占有最大面积。主要是次生木质部。由于其细胞直径的大小和壁的厚薄不同,可以看到数轮同心轮层,即年轮。注意观察早材和晚材在组织构造上的区别,紧靠髓部周围的一群小型导管即初生木质部。 (5)髓 位于茎的中央,多由薄壁细胞组成,有的含草酸钙簇晶,有的含粘液和单宁。 (6)髓射线 由髓部薄壁细胞向外辐射状发出,直达皮层经木质部时,为l2列细胞,至韧皮部时则扩大成喇叭状。 (7)维管射线 在每个维管束之内,由木质部和韧皮部中的横向运输的薄壁细胞组成,一般短于髓射线。位于木质部的称木射线,位于韧皮部的称韧皮射线。6. 单子叶植物茎的结构观察观察玉蜀黍茎横切面永久制片表皮:为一层长方
34、形表皮细胞组成,具有角质层,其下常有厚壁细胞。基本组织:表皮内为大量基本组织。维管束:有限外韧型维管束或周木型维管束散在分布于基本组织中,无皮层与髓之分。四、实验报告与思考题 1绘制向日葵幼茎横切面、椴树茎横切面简图。 2绘制薄荷茎横切面、玉蜀黍茎横切面详图。 3茎的变态有哪些类型,各有什么特征? 4比较双子叶植物茎初生构造和单子叶植物茎显微构造的区别?实验五:叶的外形、内部构造及繁殖器官观察实验学时:4学时实验类型:验证性实验教学方式:集中授课,分小组实验一、 实验目的 (1)了解叶的外部形态,掌握签别叶的各部分包括叶脉、单叶及复叶的基本原则; (2)学习叶的徒手切片技术。掌握叶的显微结构的
35、基本特征。 (3)掌握花的外部形态与结构和花序的分类。 (4)掌握花和果的结构的对应关系。 (5)掌握果的分类。二、仪器用品及实验材料 (一)仪器用品 显微镜、载玻片、盖玻片、刀片、镊子、毛笔、蒸馏水等。(二)实验材料新鲜的叶片(包括单叶和复叶)、小麦和水稻的叶的永久制片。百合子房的永久制片、常见的果实。三、实验内容和步骤(一)植物叶的外形观察(1)叶的基本形态叶片:叶片的形状,即叶形,类型极多,就一个叶片而言,上端称为叶端,基部称为叶基,周边称为叶缘;贯穿于叶片内部的维管束则为叶脉,这些部分亦有很多变化。叶柄:为着生于茎上,以支持叶片的柄状物。托叶:为叶柄基部或叶柄两侧或腋部所着生的细小绿色
36、或膜质片状物。托叶通常先于叶片长出,并于早期起着保护幼叶和芽的作用。托叶的有无,托叶的位置与形状,常随植物种属而有不同,因此亦为中草药鉴定时需要给予适当注意的形态特征之一。(二)单叶与复叶单叶(simple leaf) 一个叶柄上只生1张叶片的,如棉、油菜、桃等的叶。 复叶(compound leaf) 一个叶柄上着生2多数分离的叶片,如大豆、蚕豆、紫云英、七叶树等的叶。复叶的叶柄叫总叶柄(common petiole),其延伸的部分称叶轴(rachis);其上着生的叶片称小叶(leaflet),小叶的柄称为小叶柄(petiolule),小叶的托叶称小托叶(stipel)。复叶依小叶排列的形态
37、不同,有以下几种类型:羽状复叶(pinnately compound leaf) 3枚以上的小叶排列在叶轴的左右两侧,呈羽毛状,如蚕豆、月季等的叶。羽状复叶以小叶数目可为单数或双数,因此又分为:单(奇)数羽状复叶(odd-pinnately compound leaf),小叶的数目为单数,有一顶生小叶,如紫云英、月季的叶;双(偶)数羽状复叶(even-pinnately compound leaf),小叶的数目为双数,无顶生小叶,如花生、皂荚的叶。羽状复叶又因叶轴分枝的情况,可分为一回、二回、三回或多回羽状复叶:紫云英、蚕豆的复叶叶轴不分支,小叶直接生在叶轴上,属一回羽状复叶(simple c
38、ompound leaf);如叶轴分支一次,各分支也做羽状排列的,小叶生在叶轴的分支上,称二回羽状复叶(bipinnate leaf),如合欢、云实的叶。此时叶轴的分枝叫做羽片(pinna, 复数pinnae);如叶轴羽状分枝二次,则为三回羽状复叶(bipinnate leaf),如南天竹、楝的叶;以此类推。掌状复叶(palmately compound leaf) 3枚以上的小叶都着生在总叶柄的顶端,排列呈掌状, 如大麻,木通的叶。三出复叶(terately compound leaf) 仅有3片小叶着生在总叶柄的顶端。三出复叶又有:羽状三出复叶(ternate pinnate leaf),
39、顶端的小叶柄较长,如大豆、菜豆、苜蓿等的叶;掌状三出复叶(ternate palmate leaf),3小叶柄等长,如酢浆草、车轴草的叶。有些二回掌状复叶和三回掌状复叶实际上是二回三出复叶和三回三出复叶。前者如淫羊藿;后者如唐松草的叶。 单身复叶(unifoliate compound leaf) 形似单叶,可能是三出复叶的一退化类型,其两侧的小叶退化不存在,顶生小叶的基部和叶轴交界处有一关节,叶轴向两侧延展,常成翅,如柑桔、金桔等的叶(三)制备叶的临时切片(1)选切叶片:选一片新鲜的菠菜叶片,平放在玻璃板上,用刀片切去叶片基部、叶片尖端以及叶片两侧的边缘。留下部分为宽约0.5cm左右、中央带
40、有主脉的长方形小块叶片。(2)切取材料:用左手食指指尖压住材料一端,右手并排捏紧两个刀片,从另一端沿和主叶脉垂直方向多次切割材料,每切一次刀片要沾水一次,以便将切下的叶片薄片放入盛有清水的玻璃皿中。(3)选材制片:用镊子从水中选取较薄的叶片切片,放在洁净的载玻片上,制成临时切片。(四)观察双子叶植物叶的内部构造(1)表皮 位于叶的上下表面,分别称为上表皮和下表皮。上下表皮均为一层细胞组成,横切面呈长方形,外壁有透明角质层。表皮上有棒状或椭圆形表皮毛或腺毛。在表皮细胞中有成对、较小的细胞即保卫细胞,两个保卫细胞之间的缝隙是气孔。在表皮上还可以见到表皮毛。注意观察细胞中是否有叶绿体,以及上下表皮气
41、孔的数目的差异。气孔在上下表皮中均有分布,但下表皮为多,并能见到保卫细胞的横切面,在其内侧可看到有明显的气室。(2)叶肉 位于上下表皮之间,细胞中含有大量叶绿体。靠近上表皮,与其垂直的一层(或2层)排列整齐的长圆柱形薄壁细胞称为栅栏组织,细胞内含叶绿体较多。在栅栏组织和下表皮之间,有许多形状不规则,排列疏松的薄壁细胞称为海绵组织,细胞内含叶绿体较少。主脉附近的叶肉中可见到分泌腔。注意观察栅栏组织和海绵组织的细胞特点,以及孔下室的分布位置。试想这些特点与植物的生存环境及叶的功能有什么关系?(3)叶脉 叶肉中的维管组织,主脉较大,由主脉进行分支形成侧脉。主脉包埋在基本组织中,上方表皮下有厚角组织,
42、下方基本组织中有厚壁细胞分布。叶脉维管束的木质部在近轴面,而韧皮部在远轴面。在较大叶脉的木质部与韧皮部之间有一层形成层细胞。侧脉维管束的组成趋于简单,木质部和韧皮部只有少数几个细胞,但一般具有薄壁细胞形成的维管束鞘。在切片中可以见到各种走向的叶脉,试想其原由。(五)观察单子叶植物叶的内部构造(1)表皮 小麦叶表皮分上、下表皮,各为一层细胞组成。表皮由表皮细胞、表皮毛、气孔器、上表皮泡状细胞(或称运动细胞)构成。表皮细胞外壁角质层增厚,并高度硅化,形成一些硅质和栓质乳突及附属毛。泡状细胞位于两个维管束之间,呈扇形,外壁无角质层增厚。上、下表皮均有气孔分布,可见保卫细胞和副卫细胞的横切面。(2)叶
43、肉 叶肉无栅栏组织和海绵组织之分,属等面叶。叶肉细胞不规则,其细胞壁向内皱褶,形成具有“峰、谷、腰、环”结构的叶肉细胞。水稻叶中有发达的气腔。注意比较小麦与水稻叶的不同。(3)叶脉 叶脉为平行脉,见到的只有横切面。维管束有大有小,维管束鞘为两层细胞,外层细胞较大、壁薄、含少量叶绿体,内层细胞小、壁厚,为C3植物。叶脉上下方都有机械组织将叶肉隔开而与表皮相连,属有限维管束。(六)花的外形观察(1)花的基本组成取备好的花一朵,用镊子由外向内剥离,观察其组成。 花柄 花下面所生的短柄,是花与茎相连的中间部分。 花托 花柄顶端凹陷成杯状的部分(实际是花筒),花的其它部分都着生在花筒的边缘上。 花萼 着
44、生在杯状花托边缘的最外层,由五个绿色叶片状萼片组成,离生。 花冠 花萼里面一层,由五片粉红色花瓣组成的离生花冠。 雄蕊 雄蕊在花托边缘作轮状排列,数目多,不定数,每一雄蕊由花丝和花药两部分组成。花丝细长,花药呈囊状。雌蕊 雌蕊着生于杯状花筒底部的花托上,顶端稍膨大的部分为柱头;基部膨大部分为子房;柱头和子房之间的细长部分为花柱。注意子房位置的变化:花朵中的各部位都是直接长在花托上的,如果花托的中部略微突起,将子房向上推,那萼片、花冠和雄蕊都长在子房之下,此种花就称“下位花” 或称“ 子房上位”,如杜鹃花。反之,如果子房下陷,全住都被花托包住,花的其他 不为著生在其上,就称为“上位花”或称“子房
45、下位”,如:苹果。倘若子房并没有完全下陷,只有基部被花托包围,而萼片、花瓣和雄蕊, 围绕著子房著生,此类的花就称“周位花”,如:梅、李。观察子房与胚珠的结构 取百合子房横切(示胚珠结构)永久制片,置低倍镜下观察,可见百合子房由三个心皮联合构成,子房 3 室,每两个心皮边缘联合向中央延伸形成中轴,胚珠着生在中轴上,在整个子房中,共有胚珠六行,在横切面上可见每个室内有 2个倒生的胚珠着生在中央上,称中央胎座。转换高倍镜观察子房壁的结构,可见子房壁的内外均有表皮,两层表皮之间为圆球形薄壁细胞组成的薄壁组织。再转换低倍镜,辨认背缝线、腹缝线、隔膜、中轴和子房室,然后选择一个通过胚珠正中的切面,用高倍镜
46、仔细观察胚珠的结构。珠柄 在心皮边缘所组成的中轴上,是胚珠与胎座相连接的部分。珠被 胚珠最外面的两层薄壁细胞,外层为外珠被,内层为内珠被。两层珠被延伸生长到胚珠的顶端并不联合,留有一孔,即为珠孔。珠心 胚珠中央部分为珠心,包在珠被里面。合点 珠心、珠被和珠柄相联合的部分。胚囊 珠心中间有一囊状结构,即为胚囊。(2)花序的形态观察无限花序(indefinite inflorescence)无限花序也称总状花序,它的特点是花序的主轴在开花期间,可以继续生长,向上伸长,不断产生苞片和花芽,犹如单轴分枝,所以也称单轴花序。各花的开放顺序是花轴基部的花先开,然后向上方顺序推进,依次开放。如果花序轴缩短,各花密集呈一平面或球面时,开花顺序是先从边缘开始,然后向中央依次开放。无