1、免疫功能检测,体液免疫功能检查 细胞免疫功能检查,体液免疫功能检查,是由产生免疫球蛋白的B淋巴细胞受到抗原刺激后所形成的免疫应答。通过检测体液免疫功能有助于了解人体免疫力及抗体水平。,体液免疫功能,是一组具有抗体(antibody)活性的蛋白质。由浆细胞合成和分泌。存在于机体的血液、体液、外分泌液及部分细胞的表面。应用免疫电泳和超速离心,可以将免疫球蛋白分为:IgG、IgA、IgM、IgD、IgE五类。其中以IgG、IgA、IgM含量较多。,免疫球蛋白(immunoglobulin, Ig),IgG、IgA、IgM含量的测定,1 脾脏和淋巴结中浆细胞合成和分泌; 2 约占血清中总Ig 75%,
2、血清中主要抗体成分; 3 机体免疫防疫中起重要作用,大多数抗细菌、抗病毒、抗毒素抗体为IgG类; 4 唯一通过胎盘的抗体;,IgG特性,1 肠系膜淋巴组织中的浆细胞产生; 2 约占血清中总的10%,分为血清型和分泌型; 3 具有抗细菌、抗病毒和抗毒素作用; 4 分泌型IgA(SIgA)在机体的局部免疫中起重要作用;,IgA特性,1 为五聚体,是Ig中分子量最大者; 2 在个体发育过程中,I gM是出现最早的Ig; 3 当机体受到抗原刺激时, IgM亦是最早出现的抗体; 4 其杀菌、溶菌、溶血、促吞噬以及凝集作用比IgG高5001000倍;,IgM特性,单向免疫扩散法 免疫比浊法 速率散射比浊法
3、,IgG、IgA、IgM含量的测定常用方法,IgG: 6.94-16.18g/L IgA: 0.68-3.78g/L IgM: 0.6-2.63g/L,IgG、IgA、IgM测定参考范围,人体免疫球蛋白含量随着年龄的增长逐 渐升高,到12岁以后基本稳定不变。,Ig水平与年龄、性别有一定关系 婴幼儿、儿童 成年人 女性 男性,IgG、IgA、IgM含量的测定临床意义,Ig含量降低,一种或多种Ig水平减少,分为 原发性:见于各种先天性免疫缺陷病等; 继发性:常与免疫抑制剂应用、射线、蛋白质 丢失、营养不良等有关。也可以见于 细胞毒药物治疗后;,见于各种慢性感染、慢性肝病、肝硬化、淋巴瘤和某些自身免
4、疫病,如 SLE,SS,RA,也见于寄生虫疾病、结节病。,Ig含量多克隆性增加,又称Monoclonal Protein(MP,M蛋白),主要见于免疫增殖性疾病,如多发性骨髓瘤、重链病、轻链病、原发性巨球蛋白血症; 采用免疫固定电泳鉴别;,IgG、IgA、IgM含量单克隆性的增高,血清总IgE测定,为血清中含量极少的一种免疫球蛋白,与过敏性疾病和寄生虫感染有关。,IgE,ELISA 免疫比浊法 ECLIA(电化学发光) FIA(荧光免疫测定法),总IgE测定方法,150ku/ml,总IgE测定参考范围,IgE增高:见于IgE多发性骨髓瘤、特应性哮喘、过 敏性鼻炎、寄生虫感染等; IgE减低:一
5、般无意义。可见于原发性无丙种球蛋 白血症、恶性肿瘤及细胞毒性药物治疗,总IgE测定临床意义,1 年龄、性别:男性女性 新生儿水平低,青春期水平最高、30岁以后 逐渐下降。 2 种族差异:混血人种白人 3-4倍,黑人水 平更高,黄种人水平也较高。,血清总IgE测定影响因素,血清特异性IgE的测定,1 过敏患者的血清中存在着具有抗变应原特异性的IgE称之为特异性IgE(sIgE); 2 sIgE的测定在变态反应性疾病的体外诊断中占有重要地位; 3 在呼吸系统疾病中,过敏性哮喘、过敏性鼻炎、职业性哮喘等患者血清中均能检出sIgE; 4 sIgE检出方法有多种,目前临床上常用有ELISA等;,血清特异
6、性IgE特性,参考范围:100 非常严重的过敏,血清特异性IgE的测定,COMMENTS,对某些小分子的变应原,sIgE测定的灵敏度不高,如青霉素降解物.故对这些变应员,如测不出sIgE并不能除外过敏的可能性。 要结合临床症状、体格检查、常规化验、当地的实际条件、体内实验和体外实验的结果综合考虑才能确诊。,血清补体测定,补体是血清中一组具有酶活性的蛋白质。它由二十多种蛋白组成。,血清补体的定义,1 当机体受到病原微生物侵袭时,在抗体的存在下,补体 参与灭活病毒或杀死细菌的免疫反应; 2 在自身免疫病中,补体也能参与破坏自身组织或细胞而 造成免疫病理损伤; 3 测定血清中补体活性或其单一补体成分
7、含量,对于许多 疾病的诊断和鉴别诊断、疗效观察以及发病机制的研究 都有一定的临床意义;,血清补体的功能,1 总补体测定 方法:脂质体法 参考范围:75-160U/ml 临床意义: 增高:急性炎症、组织损伤、心肌梗死 、某些恶性 肿瘤 降低:见于各种免疫复合性疾病 标本要求:待测血清须新鲜、无溶血 不同方法具有不同的参考范围,血清补体测定,2 补体C3测定 C3为补体各组分中含量最高的组分,也是激活补体传统途径与旁路途径的关键成分。检测方法:速率散射浊法; 参考范围:0.8-1.55g/L; 临床意义: 增高:见于某些急性炎症或传染病早期以 及某些恶性肿瘤; 降低:见于SLE、RA、急性肾小球肾
8、炎等;,血清补体测定,3 补体C4的测定: C4是一种多功能的球蛋白,也是补体系统中的主要成分。在补体传统活化途径中起重要作用。裂解后的产物在补体的活化、促进吞噬、防止免疫复合物沉着和中和毒素等方面发挥很大作用; 参考范围:0.16-0.47g/L 临床意义: 升高:见于风湿热的急性期 降低:见于自身免疫病等;,血清补体测定,1 细胞免疫主要是T淋巴细胞介导的免疫应答 2 T淋巴细胞亚群测定: 分类: 功能: T辅助/诱导细胞 T抑制/细胞毒性细胞 T细胞表面分化抗原不同:CD4、CD8 3 参考范围:(流式细胞仪) 总T细胞(CD3+):955-2860/l CD4+细胞:27-51%, 5
9、50-1440/l CD8+细胞:15-44%,320-1250/ l CD4+/CD8+比值:0.64-2.85,细胞免疫功能测定,淋巴细胞亚群检测原理,淋巴细胞亚群检测/分析又叫免疫功能分析。 通过荧光标记的特异性单克隆抗体,以流式多色分析的方法,同时分析淋巴细胞上多种抗原的表达,从而检测总T细胞、辅助/诱导T细胞、抑制/细胞毒T细胞、B细胞、NK细胞(自然杀伤细胞)在淋巴细胞中的百分含量。,临床意义: 1)自身免疫病中,CD8+细胞数量及功能的下降 2) 免疫缺陷病患者,CD4+/CD8+比值减低 3) 感染性疾病患者免疫抑制功能增强,表现为CD8+细胞数量及功能都异常增高 4) 肿瘤病人总T细胞,CD4+细胞明显减少,CD8+明显增加,CD4+/CD8+明显下降 5) 支气管哮喘病人,在过敏原激发后,外周血CD4+T细胞迅速降低 6) 血液系统疾病,如再障,粒细胞减少症时CD4细胞减少,CD8细胞增多,CD4+/CD8+比值下降,细胞免疫功能测定,