1、需氧芽孢杆菌二、二、微生物特性微生物特性 炭疽芽胞杆菌 亚甲基蓝染色 1000 革兰染色 1000能胨化牛乳，液化明胶，VP（+）、卵磷脂芽胞椭圆形，小于菌体，位于菌体中央Ascoli热沉淀试验：可作追溯性诊断Ascoli热沉淀试验：可作追溯性诊断BAP1215h不溶血，1824h轻微溶血含菌量达105/g以上BAP1215h不溶血，1824h轻微溶血从可疑食物分离到的菌株与从病人粪便和(或)呕吐物中分离到的菌株属同一血清型对氯霉素、红霉素、庆大霉素敏感，对青霉菌体两端平截，多数呈链状排列剂振荡1015min，离心取沉淀物增菌和分离培养芽胞抵抗力很强，煮沸10min或干热140炭疽是人畜共患的
2、急性传染病抗吞噬，有利于细菌在组织内繁殖扩散在活体或完整未解剖尸体内不形成芽胞，尸Ascoli热沉淀试验：可作追溯性诊断有免疫原性和血清学诊断价值炭疽是人畜共患的急性传染病培养特性：需氧或兼性厌氧，生长条件不严格，最适温 度3035普通培养基扁平、粗糙、不透明、灰白色、无光泽，边缘不整齐的菌落，低倍镜下菌落边 缘呈卷发状炭疽杆菌在血琼脂平板中菌落炭疽杆菌在血琼脂平板中菌落 芽胞杆菌、14型肺炎链球菌、人A血型抗原发生交叉反应。荚膜多肽抗原：-与毒力有关，有抗吞噬作用，有利于细 菌生长和扩散 -荚膜肿胀试验，对本菌鉴定有意义芽胞抗原：有免疫原性和血清学诊断价值第一节 炭疽芽胞杆菌（Bacillu
3、s anthracis，B.痰、呕吐物、CSF及炎症分泌物1：2500碘 10min、对氯霉素、红霉素、庆大霉素敏感，对青霉从食物中分离出菌数105CFU/g，提示本菌活跃生长，构成潜在危险G染色、荚膜染色、芽胞染色初步报告分解葡萄糖、麦芽糖、蔗糖、蕈糖，-对磺胺、青霉素、链霉素、四环素、红霉素、抗吞噬，有利于细菌在组织内繁殖扩散megaterium）卵黄平板生长迅速，培养3h后，虽看不到菌落，但该菌可分解卵磷脂而形成白色的混浊环，称乳光反应或卵黄反应-芽胞对化学消毒剂抵抗力不一，对碘和氧化食用肠炭疽多次传代后生化特性常可改变有免疫原性和血清学诊断价值有免疫原性和血清学诊断价值含菌量达105/
4、g以上主要是牛、羊等食草类动物的传染病，人可通过接触或摄食病畜及畜产品而感染单独皆无致病性，与PA结合才显示出致病性接种 普通琼脂平板、BAP、卵黄平板-芽胞对化学消毒剂抵抗力不一，对碘和氧化 剂较敏感，常用以下方法杀菌：1：2500碘 10min、3%H2O2 1h、4%高锰酸钾 15min、0.5%过氧乙酸 10min -对磺胺、青霉素、链霉素、四环素、红霉素、氯酶素均敏感三、微生物学检验三、微生物学检验无杂菌污染标本：直接接种肉汤增菌或固体培养基污染杂菌固体标本：加10倍量生理盐水充分浸泡，振 荡1015min、静置10min，取悬液65水浴30min或 855min杀死杂菌，保留芽胞活
5、性，再增菌和培养污染杂菌液体标本：离心，弃上清液后，加0.5%洗涤 剂振荡1015min，离心取沉淀物增菌和分离培养 生化反应噬菌体裂解青霉素抑制毒力试验检验程序皮毛、腐败脏器等血液Ascoli试验以NG制成悬液经加温或饱和尿素处理肉汤增菌培养BAP或戊烷脒平板2%兔血清肉汤4-8hG染色镜检菌落特征动力观察串珠试验确定报告荚膜肿胀试验痰、呕吐物、CSF及炎症分泌物2%兔血清肉汤快速增菌374h荚膜肿胀试验直接涂片荚膜染色 G染色初步报告0.2ml注射小白鼠腹腔，8h后解剖涂片G染色、荚膜染色初步报告类炭疽无此现象青霉素抑制试验：接种于含青霉素5、10、100U/ml琼脂平板，3724h 生长
6、 受抑制不生长 串珠和青霉素抑制联合试验：兔血琼脂平板抑菌环青霉素纸片 噬菌体裂解试验：AP631炭疽噬菌体 NaHCO3毒力试验：接种于含0.5%NaHCO3和10%马血清的平板，10%CO2、37、2448h 有毒株形成荚膜黏液型菌落 无毒株不形成荚膜粗糙型菌落 动物试验：小鼠、家兔或豚鼠皮下接种植物凝集素试验：Ascoli热沉淀试验：可作追溯性诊断第二节第二节 蜡样芽胞杆菌蜡样芽胞杆菌(Bacillus cereus,B.cereus)28megaterium）在牛乳中生长24天牛乳凝固缓慢胨化在干燥土壤中或皮毛中常温下存活数十年致要求快速检出、分离鉴定病原菌，以利早期确诊、查清疫源、及
7、时治疗和采取预防对策-对磺胺、青霉素、链霉素、四环素、红霉素、灰白色，表面粗糙似毛玻璃状或融蜡状，有主要是牛、羊等食草类动物的传染病，人可通过接触或摄食病畜及畜产品而感染从可疑食物分离到的菌株与从病人粪便和(或)呕吐物中分离到的菌株属同一血清型中，37 6h，大而均匀成串的圆球状菌体Ascoli热沉淀试验：可作追溯性诊断从食物中分离出菌数105CFU/g，提示本菌活跃生长，构成潜在危险NaHCO3毒力试验：855min杀死杂菌，保留芽胞活性，再增菌和培养与青霉素抑制细菌细胞壁合成有关明胶371824h表面液化成漏斗状，由于细菌沿穿刺线向四周扩散形成倒松树状。剂振荡1015min，离心取沉淀物增
8、菌和分离培养第二节 蜡样芽胞杆菌(Bacillus cereus,B.与青霉素抑制细菌细胞壁合成有关生长 受抑制不生长在米饭中极易繁殖，由米饭受污染引起的食物中毒在国内、外均为常见病力不减，牧场一旦污染，传染性可持续数一、临床意义29鞭n毛、无荚膜培养特性：培养特性：需氧或兼性厌氧营养要求不高最适温度3035普通琼脂平板：菌落较大，灰白色，表面粗糙似毛玻璃状或融蜡状，有 蜡样光泽生化反应：能分解葡萄糖、麦芽糖、蔗糖、水杨素、糊 精，产酸不产气能胨化牛乳，液化明胶，VP（+）、卵磷脂 酶（+）多次传代后生化特性常可改变 抵抗力：耐热，肉汤中细菌需10020min才能杀死，食物中毒菌株的游离芽胞耐
9、受10030min、干热12060min才能杀死对氯霉素、红霉素、庆大霉素敏感，对青霉素、磺胺、呋喃类耐药检验程序呕吐物、残留食物等活菌计数 接种 普通琼脂平板、BAP、卵黄平板3718-24h纯培养动物试验（肠毒素测定）生化反应血清凝集（分型）报告结果直接涂片染色镜检中，37 6h，大而均匀成串的圆球状菌体单独皆无致病性，与PA结合才显示出致病性Ascoli热沉淀试验：可作追溯性诊断卵黄平板生长迅速，培养3h后，虽看不到菌落，但该菌可分解卵磷脂而形成白色的混浊环，称乳光反应或卵黄反应多在有氧条件下形成，2530，在培养基中、土壤内、动物尸体解剖后暴露在空气中，都易形成芽胞对氯霉素、红霉素、庆大霉素敏感，对青霉接种 普通琼脂平板、BAP、卵黄平板分解葡萄糖、麦芽糖、蔗糖、蕈糖，中，37 6h，大而均匀成串的圆球状菌体从可疑食物分离到的菌株与从病人粪便和(或)呕吐物中分离到的菌株属同一血清型从食物中分离出菌数105CFU/g，提示本菌活跃生长，构成潜在危险芽胞椭圆形，小于菌体，位于菌体中央有免疫原性和血清学诊断价值含菌量达105/g以上菌体中心或次末端、不突出菌体主要是牛、羊等食草类动物的传染病，人可通过接触或摄食病畜及畜产品而感染3%H2O2 1h、以NG制成悬液经加温或饱和尿素处理
