1、第十二章第十二章 革兰氏阳性产芽孢杆菌革兰氏阳性产芽孢杆菌内容提要内容提要第一节第一节 芽孢杆菌属芽孢杆菌属 炭疽芽孢杆菌炭疽芽孢杆菌第二节第二节 梭菌属梭菌属 产气荚膜梭菌产气荚膜梭菌 肉毒梭菌肉毒梭菌 破伤风梭菌破伤风梭菌1第一节第一节 芽孢杆菌属芽孢杆菌属（Bacillus)炭疽芽孢杆菌炭疽芽孢杆菌 炭疽芽孢杆菌炭疽芽孢杆菌炭疽的病原体炭疽的病原体人兽共患病人兽共患病一、形态及染色特性一、形态及染色特性 革兰氏阳性革兰氏阳性大杆菌大杆菌，无鞭毛，不运动。，无鞭毛，不运动。形成芽孢形成芽孢、荚膜荚膜。l 动物组织和血液动物组织和血液:单在或呈短链单在或呈短链，竹节状、竹节状、有丰厚的有丰厚
2、的荚膜荚膜l人工培养物人工培养物:形成长链形成长链，形成芽胞，一般不形成荚膜形成芽胞，一般不形成荚膜2二、培养特性二、培养特性 需氧菌，适温需氧菌，适温3737，营养要求不高，营养要求不高普通肉汤：普通肉汤：3737，2424h h培养，上层液培养，上层液透明透明，形成，形成白色絮状沉淀白色絮状沉淀普通琼脂：普通琼脂：大而扁平、灰白色，不透明、表面干燥、大而扁平、灰白色，不透明、表面干燥、边缘不整齐边缘不整齐 火焰状菌落火焰状菌落。低倍镜观察菌落边缘呈。低倍镜观察菌落边缘呈卷发状卷发状，不溶血不溶血。明胶高层：明胶高层：呈呈倒置松树状倒置松树状串珠反应：串珠反应：0.50.5单位单位/mlml
3、青霉素青霉素的培养基中，细胞壁的培养基中，细胞壁合成受抑制合成受抑制，菌体膨胀相互粘连形成菌体膨胀相互粘连形成“串珠状串珠状”普通琼脂上的菌落普通琼脂上的菌落低倍镜观察菌落低倍镜观察菌落串珠反应试验串珠反应试验3三、抵抗力三、抵抗力l繁殖体的抵抗力不强繁殖体的抵抗力不强6030-606030-60minmin即可杀死即可杀死常用消毒剂均能将其杀死常用消毒剂均能将其杀死青霉素等多种抗生素高度敏感青霉素等多种抗生素高度敏感l芽胞的抵抗力特别强芽胞的抵抗力特别强在干燥状态下可长期存活在干燥状态下可长期存活121 121 灭菌灭菌5-105-10minmin芽胞对碘特别敏感芽胞对碘特别敏感 0.04-
4、10 min4四、抗原结构四、抗原结构是芽胞外膜层含有的抗原决定簇，是芽胞外膜层含有的抗原决定簇，特异性抗原特异性抗原具有具有免疫原性和血清学诊断价值免疫原性和血清学诊断价值。荚膜荚膜半半抗原，与毒力有关，无保护作用抗原，与毒力有关，无保护作用不稳定，反应性特异不稳定，反应性特异可用于血清学鉴定可用于血清学鉴定细胞壁及菌体内的半抗原（细胞壁及菌体内的半抗原（多糖）多糖），与毒力无关，与毒力无关性质稳定性质稳定（耐腐败、热）（耐腐败、热）AscoliAscoli反应反应胞外蛋白质抗原（胞外蛋白质抗原（炭疽毒素炭疽毒素），具有免疫原性），具有免疫原性免疫保护免疫保护荚膜抗原：荚膜抗原：菌体抗原：菌
5、体抗原：保护性抗原：保护性抗原：芽孢抗原：芽孢抗原：5五、致病性五、致病性本菌可引致各种家畜、野兽和人类的本菌可引致各种家畜、野兽和人类的炭疽炭疽易感性最强易感性最强牛、绵羊、鹿等牛、绵羊、鹿等其次其次马、驼、猪、山羊等次之马、驼、猪、山羊等次之犬、猫、食肉兽等则有相当大的抵抗力犬、猫、食肉兽等则有相当大的抵抗力禽类一般不感染禽类一般不感染感染途径：感染途径：消化道、呼吸道、皮肤创伤或通过吸血昆虫传播消化道、呼吸道、皮肤创伤或通过吸血昆虫传播食草动物炭疽常表现为食草动物炭疽常表现为急性败血症急性败血症猪炭疽多表现为慢性的咽部猪炭疽多表现为慢性的咽部局限感染局限感染犬、猫和食肉兽则多表现为犬、猫
6、和食肉兽则多表现为肠炭疽肠炭疽感染表现感染表现 人类人类肠炭疽肠炭疽、肺炭疽肺炭疽或或皮肤炭疽皮肤炭疽实验动物：小鼠、豚鼠、家兔易感实验动物：小鼠、豚鼠、家兔易感6荚膜多肽：荚膜多肽：荚膜荚膜抗吞噬抗吞噬，抑制抗体抑制抗体的作用，使易于扩散，引起的作用，使易于扩散，引起 感染乃至败血症。动物无保护作用，可用于细菌鉴定感染乃至败血症。动物无保护作用，可用于细菌鉴定 毒力因素：毒力因素：炭疽毒素：炭疽毒素：水肿毒素水肿毒素(edema factor,EF)致死毒素致死毒素(lethal factor,LF)保护性抗原保护性抗原（PA）三种成分单独无生物学三种成分单独无生物学活性（毒性），活性（毒性
7、），三种相结三种相结合时，表现毒性作用合时，表现毒性作用增强微血管的通透性，增强微血管的通透性，改变血液循环，改变血液循环，损害肾功能，损害肾功能，干扰糖代谢干扰糖代谢导致动物死亡导致动物死亡具有免疫原性，具有免疫原性，有保护作用有保护作用7六、免疫性六、免疫性患过炭疽的动物，能获得坚强的免疫力。患过炭疽的动物，能获得坚强的免疫力。菌苗有第二号炭疽芽胞苗菌苗有第二号炭疽芽胞苗无毒炭疽芽胞苗无毒炭疽芽胞苗抗炭疽血清抗炭疽血清保护性抗原保护性抗原炭疽毒素炭疽毒素刺激机体产生的抗体刺激机体产生的抗体抗感染作用抗感染作用8七、微生物学诊断七、微生物学诊断1.1.细菌学检查细菌学检查采病料：采病料：严禁
8、剖检，严禁剖检，局部采料（耳根部、肋间采取局部采料（耳根部、肋间采取脾脏脾脏、水肿液水肿液或或渗出物渗出物、肠炭疽可采取、肠炭疽可采取粪便粪便等等（1 1）涂片镜检：）涂片镜检：碱性美蓝碱性美蓝瑞氏染色瑞氏染色姬姆萨染色姬姆萨染色有荚膜竹节状大杆菌有荚膜竹节状大杆菌组织病料组织病料碱性美蓝碱性美蓝革兰氏染色革兰氏染色 具有芽胞的链杆菌具有芽胞的链杆菌 培养物培养物9（2 2）分离培养：）分离培养：普通琼脂普通琼脂血液琼脂血液琼脂碳酸氢钠琼脂碳酸氢钠琼脂观察生长特性观察生长特性生物学特性检测生物学特性检测被检材料被检材料强度株形成荚膜强度株形成荚膜动物机体内动物机体内含含碳酸氢钠碳酸氢钠或或血清
9、血清培养基培养基（在（在CO2条件下培养）条件下培养）炭疽杆菌与炭疽杆菌与 噬菌体噬菌体具有高度的特异性具有高度的特异性裂解炭疽杆菌裂解炭疽杆菌形成噬菌斑形成噬菌斑被检菌被检菌含青霉素含青霉素培养基培养基形成串珠形成串珠生长抑制生长抑制穿刺接种于穿刺接种于明胶培养基明胶培养基18-20 培养培养4-7d呈倒置松树状呈倒置松树状*荚膜检查：荚膜检查：*噬菌体裂解试验噬菌体裂解试验：*串珠试验串珠试验：*明胶穿刺明胶穿刺试验：试验：细菌细菌噬菌斑噬菌斑细菌噬菌体裂解试验细菌噬菌体裂解试验串珠试验串珠试验串珠串珠细菌细菌102.2.动物实验：动物实验：在内脏、血液中有大量在内脏、血液中有大量带荚膜的
10、竹节状菌体带荚膜的竹节状菌体剖检变化：剖检变化：注射部位呈注射部位呈胶样水肿胶样水肿脾脏肿大脾脏肿大3.3.血清学检查：血清学检查：热沉淀反应热沉淀反应（Ascoli氏沉淀反应）氏沉淀反应）间接血凝试验间接血凝试验串珠荧光抗体检查串珠荧光抗体检查被检抗原被检抗原炭疽芽孢炭疽芽孢串珠试验与串珠试验与荧光抗体法结合荧光抗体法结合病料病料(1:5(1:5乳悬液乳悬液)或培养物或培养物皮下接种：小鼠皮下接种：小鼠0.1 ml 兔兔0.2-0.3 ml败血症败血症而死亡而死亡11第二节第二节 梭菌属梭菌属 (Clostridium)一、属的特征一、属的特征*菌体杆状菌体杆状，两端钝圆或尖锐，常单在，两端
11、钝圆或尖锐，常单在，革兰氏染色阳性革兰氏染色阳性*形成形成卵圆形或圆形的卵圆形或圆形的芽孢芽孢，常使菌体膨大，呈，常使菌体膨大，呈梭状梭状二、梭菌分布二、梭菌分布*梭菌梭菌在自然界分布广泛在自然界分布广泛土壤、污水、腐烂植物、动物肠道土壤、污水、腐烂植物、动物肠道*人人与动物的伤口及软组织感染灶与动物的伤口及软组织感染灶三、病原梭菌及梭菌病的诊断原则三、病原梭菌及梭菌病的诊断原则*本属本属有有80多种，多为非病原菌，常见的致病菌约多种，多为非病原菌，常见的致病菌约11种种*多多为人为人兽共患病病原兽共患病病原*病原病原梭菌通常均能产生梭菌通常均能产生外毒素外毒素，其毒力强，其毒力强12产气荚膜
12、梭菌产气荚膜梭菌 (Cl.Perfringens)*本菌本菌又称又称魏氏梭菌魏氏梭菌或或产气荚膜杆菌产气荚膜杆菌*在自然界在自然界分布极广分布极广土壤、饲料、污水、乳汁、消化道粪便等土壤、饲料、污水、乳汁、消化道粪便等*在一定在一定条件下，可引起多种严重疾病条件下，可引起多种严重疾病一、形态及染色特性一、形态及染色特性菌体菌体直杆状直杆状，两端钝圆，两端钝圆，革兰氏阳性，形成芽胞（革兰氏阳性，形成芽胞（中央或近端）中央或近端）多数菌株在动物体内多数菌株在动物体内可形成荚膜可形成荚膜13二、培养及生化特性二、培养及生化特性 本菌对本菌对厌氧厌氧条件要求不太严格加入葡萄糖、条件要求不太严格加入葡萄
13、糖、血液则生长更好，适温血液则生长更好，适温37 37 肝片肉汤肝片肉汤；生长迅速，；生长迅速，5-65-6h h 出现混浊，产生出现混浊，产生大量气体大量气体葡萄糖琼脂葡萄糖琼脂；37 37，2424h h形成形成 ，勋章样菌落勋章样菌落血液琼脂血液琼脂；灰白色，圆形，边缘呈锯齿状的大菌落，灰白色，圆形，边缘呈锯齿状的大菌落，周围有棕绿色溶血区，出现周围有棕绿色溶血区，出现双层溶血环双层溶血环 为为溶血（内环透明，外环淡绿色）。溶血（内环透明，外环淡绿色）。牛乳培养基牛乳培养基：汹涌发酵汹涌发酵或或暴烈发酵暴烈发酵分解乳糖产酸产气，分解乳糖产酸产气，酪蛋白凝固，变成海绵状酪蛋白凝固，变成海绵
14、状1415三、致病性三、致病性 菌型：菌型：根据产生毒素种类，细菌分为根据产生毒素种类，细菌分为A A、B B、C C、D D、E E 等等5 5个型个型*致病致病作用主要在于所作用主要在于所产生的毒素产生的毒素蛋白质蛋白质*毒素有毒素有12种，小写希腊字母表示种，小写希腊字母表示、.；其中其中、和和是主要坏死、致死性、溶血性毒素是主要坏死、致死性、溶血性毒素 有些菌株还产生有些菌株还产生肠毒素肠毒素细菌菌型细菌菌型所致疾病所致疾病产气荚膜梭菌产气荚膜梭菌A A型型人气性坏疽和食物中毒人气性坏疽和食物中毒,坏死性肠炎坏死性肠炎(牛牛,仔猪仔猪),兔腹泻等兔腹泻等产气荚膜梭菌产气荚膜梭菌B B型
15、型羔羊痢疾羔羊痢疾,犊牛、羔羊、绵羊和山羊的肠毒血症或坏死性肠炎犊牛、羔羊、绵羊和山羊的肠毒血症或坏死性肠炎产气荚膜梭菌产气荚膜梭菌C C型型绵羊猝狙绵羊猝狙,羔羊、犊牛、仔猪、绵羊的肠毒血症和坏死性肠炎以及羔羊、犊牛、仔猪、绵羊的肠毒血症和坏死性肠炎以及人的坏死性肠炎人的坏死性肠炎,仔猪红痢仔猪红痢,产气荚膜梭菌产气荚膜梭菌D D型型羔羊、绵羊、山羊、牛的肠毒血症羔羊、绵羊、山羊、牛的肠毒血症,人肠毒血症人肠毒血症产气荚膜梭菌产气荚膜梭菌E E型型犊牛、羔羊肠毒血症犊牛、羔羊肠毒血症,兔腹泻兔腹泻.表表:产气荚膜梭菌菌型及所致疾病产气荚膜梭菌菌型及所致疾病16四、微生物学诊断四、微生物学诊断
16、*A A型所型所致气性坏疽及人食物中毒致气性坏疽及人食物中毒依靠细菌分离鉴定依靠细菌分离鉴定*其余其余各型所致的各种疾病各型所致的各种疾病肠道内产生肠道内产生毒素毒素所致，靠所致，靠毒素检测毒素检测1.1.细菌学检查细菌学检查肠内容物肠内容物肝片肉汤肝片肉汤 热处理热处理80 80，1515minmin37 37 培养培养观察观察观察要点：观察要点：形态及染色特点：形态及染色特点：革兰氏阳性粗大杆菌革兰氏阳性粗大杆菌培养特性：培养特性：厌氧，生长快，不运动，菌落形状，双层溶血环厌氧，生长快，不运动，菌落形状，双层溶血环生化特性：生化特性：暴烈发酵暴烈发酵l细菌分离培养细菌分离培养172.肠内容
17、物毒素检查肠内容物毒素检查方法及程序：方法及程序：肠内容物肠内容物（回肠）（回肠）离心离心(3000(3000rmp,30min)rmp,30min)取上清夜取上清夜 一份加热（破坏）一份加热（破坏）（60 60，3030minmin）一份不加热一份不加热动物静注动物静注小鼠；小鼠；0.1-0.30.1-0.3mlml兔；兔；1-31-3mlml 观察结果观察结果不加热组常于数分不加热组常于数分钟至十小时内死亡钟至十小时内死亡加热组不死亡加热组不死亡3.细菌菌型测定：细菌菌型测定：被检毒素被检毒素+各型抗毒素血清各型抗毒素血清中和毒素中和毒素37.37.4040minmin小鼠静注小鼠静注观察
18、观察24h定型定型18肉毒梭菌肉毒梭菌 (Cl.botulinum)*广泛分布于土壤，动物肠道，饲料以及食品中广泛分布于土壤，动物肠道，饲料以及食品中*当有适宜当有适宜营养和营养和厌氧环境厌氧环境时，生长繁殖产生时，生长繁殖产生肉毒毒素肉毒毒素1.1.形态及染色特性形态及染色特性 菌体多呈菌体多呈直杆状直杆状，单在或成双，革，单在或成双，革兰氏阳性兰氏阳性。着生周鞭毛。着生周鞭毛形成形成芽胞位于菌体近端芽胞位于菌体近端，大于菌体直径，使细胞膨大，大于菌体直径，使细胞膨大192.2.培养特性培养特性 专性厌氧，专性厌氧，适温适温3737（产毒素最适温产毒素最适温25-3025-30），），6.5
19、%6.5%NaCl,20%NaCl,20%胆汁，胆汁，pH8.5pH8.5抑制生长，抑制生长，营养要求不高营养要求不高血液琼脂平板：成圆形到扇状（血液琼脂平板：成圆形到扇状（1-6mm），不规则菌落，），不规则菌落，溶血溶血203.3.抵抗力抵抗力本菌繁殖体抵抗力弱：本菌繁殖体抵抗力弱：加热加热80 80 30min30min或或100 100 10min10min杀死杀死芽孢抵抗力极强：芽孢抵抗力极强：湿热湿热1005-7h高压高压105100min120 5-20min干热干热18015min肉毒毒素抵抗力较强肉毒毒素抵抗力较强耐酸（耐受耐酸（耐受 pH 3-6），），对碱敏感对碱敏感（p
20、H8.5以上即破坏）以上即破坏）0.1高锰酸钾高锰酸钾加热加热80 30min或或100 10min，破坏，破坏214.4.抗原性及分型抗原性及分型*根据根据毒素毒素抗原性抗原性分为分为A、B、C、D、E、F、G等等7个型个型*具有良好免疫具有良好免疫原性原性抗毒素，抗毒素，有型特异性，无交叉反应有型特异性，无交叉反应5.5.肉毒毒素肉毒毒素*蛋白质蛋白质外毒素，性质稳定，毒性最强的外毒素，性质稳定，毒性最强的神经麻痹毒素之一神经麻痹毒素之一如如A型毒素型毒素毒素毒素 lmg杀死杀死2亿只小鼠，亿只小鼠，人致死量约人致死量约0.1ug*A-G A-G型毒素合成时为型毒素合成时为无毒性的毒素前体
21、无毒性的毒素前体，被水解后表现毒性，被水解后表现毒性*G G型毒素型毒素须胰酶激活后才有毒性须胰酶激活后才有毒性22神经毒亚单位神经毒亚单位非毒性亚单位非毒性亚单位肉毒毒素前体肉毒毒素前体小肠吸收小肠吸收亚单位分解亚单位分解抗胃蛋白酶水解抗胃蛋白酶水解淋巴、血流作用于靶器官细胞淋巴、血流作用于靶器官细胞阻断乙酰胆碱的释放阻断乙酰胆碱的释放导致肌肉弛缓型麻痹导致肌肉弛缓型麻痹6.6.致病性致病性*所有温血动物所有温血动物和冷血动物对肉毒毒素均有感受性和冷血动物对肉毒毒素均有感受性*A A、B B、E E及及F型毒素引起人的食物中毒型毒素引起人的食物中毒237.7.微生物学诊断微生物学诊断主要方法
22、主要方法被检材料中被检材料中检查肉毒毒素检查肉毒毒素（1 1）肉毒毒素检测）肉毒毒素检测A.材料处理材料处理：被检材料被检材料离心离心取上清液取上清液胰酶液胰酶液37，60min不处理不处理B.检出试验检出试验：分别小鼠腹腔注射（分别小鼠腹腔注射（0.5mL/只）只）观察观察4d24h内发病、死亡内发病、死亡最终死于呼吸麻痹最终死于呼吸麻痹主要表现主要表现竖毛、四肢瘫软、呼吸困难竖毛、四肢瘫软、呼吸困难可能有肉毒毒素存在可能有肉毒毒素存在24C.证实试验：证实试验：第一组（毒素中和组）第一组（毒素中和组）+肉毒抗毒素肉毒抗毒素第二组（毒素灭活组）第二组（毒素灭活组）+煮沸煮沸1010minmi
23、n第三组（毒素对照组）第三组（毒素对照组）+缓冲液缓冲液小鼠腹腔注射小鼠腹腔注射保护存活保护存活发病死亡发病死亡肉肉毒毒毒毒素素阳阳性性被被检检材材料料小鼠腹腔注射小鼠腹腔注射保护存活保护存活小鼠腹腔注射小鼠腹腔注射原理：原理：*肉毒毒素肉毒毒素 +抗毒素抗毒素能中和毒素能中和毒素*肉毒毒素肉毒毒素煮沸煮沸10min 破坏毒素破坏毒素D.定型试验：定型试验：原理：原理：*肉毒毒素肉毒毒素 +抗毒素抗毒素能中和毒素能中和毒素*抗毒素抗毒素能中和相应的毒素能中和相应的毒素 有型特异性有型特异性25（2 2）细菌分离与鉴定）细菌分离与鉴定A.被检材料热处理：被检材料热处理：检验材料检验材料庖肉培养基
24、庖肉培养基80 加热加热30min处理处理（利用芽胞耐热特点）（利用芽胞耐热特点）增菌液增菌液B.细菌分离及鉴定：细菌分离及鉴定：检验材料检验材料增菌液增菌液血液琼脂血液琼脂乳糖牛奶卵黄琼脂平板乳糖牛奶卵黄琼脂平板37 厌氧培养厌氧培养48h挑取可疑菌落挑取可疑菌落形态学观察形态学观察生化特性检查生化特性检查C.产毒素检查：产毒素检查：分离菌株分离菌株庖肉培养基，置庖肉培养基，置30培养培养5d毒素检测毒素检测毒素定型毒素定型定菌型定菌型26破伤风梭菌破伤风梭菌（Cl.tetani)本菌又名本菌又名破伤风杆菌破伤风杆菌，引起人畜破伤风的病原引起人畜破伤风的病原一一.生物学特性生物学特性n形态特
25、征：形态特征：菌体两端钝圆、细长、正直杆菌，单在菌体两端钝圆、细长、正直杆菌，单在革兰氏阳性菌革兰氏阳性菌体内外均体内外均能形成圆形芽胞，位于顶端能形成圆形芽胞，位于顶端鼓槌状鼓槌状无荚膜，多具周鞭毛而能运动无荚膜，多具周鞭毛而能运动27n 培养特征：培养特征：严格厌氧严格厌氧，含有血液、肝汤、庖肉培养基中易生长，含有血液、肝汤、庖肉培养基中易生长肉肝汤和庖肉培养基肉肝汤和庖肉培养基：轻微浑浊，有颗粒状或粘稠状沉淀，产生：轻微浑浊，有颗粒状或粘稠状沉淀，产生 特殊臭味特殊臭味血液琼脂培养基：血液琼脂培养基：形成直径形成直径46mm菌落，伴有狭窄菌落，伴有狭窄溶血环溶血环。28二、致病性二、致病
26、性病原体病原体皮肤黏膜皮肤黏膜创伤感染创伤感染产生产生强烈毒素强烈毒素局部生长局部生长骨骼肌痉挛骨骼肌痉挛1.易感动物：易感动物：马属动物的易感性最高马属动物的易感性最高其次是牛、羊、猪，犬、猫等其次是牛、羊、猪，犬、猫等禽类和冷血动物不敏感禽类和冷血动物不敏感实验动物家兔、小鼠、大鼠、豚鼠对毒素易感实验动物家兔、小鼠、大鼠、豚鼠对毒素易感人易感人易感2.毒素：毒素：破伤风破伤风痉挛毒素痉挛毒素破伤风破伤风溶血素溶血素毒力非常强，外毒素，良好毒力非常强，外毒素，良好抗原性抗原性不耐热，对氧敏感，与致病性无关不耐热，对氧敏感，与致病性无关29 破伤风的临床症状特征比较典型，故根据流行病学和临破伤
27、风的临床症状特征比较典型，故根据流行病学和临床症状，可以基本确诊。一般不需微生物学诊断。床症状，可以基本确诊。一般不需微生物学诊断。必要时，可采集创伤部的必要时，可采集创伤部的分泌物或坏死组织分泌物或坏死组织进行细菌学进行细菌学检查。另外，还可以检测毒素。检查。另外，还可以检测毒素。三、微生物学诊断三、微生物学诊断四、免疫防治四、免疫防治主动免疫预防主动免疫预防破伤风类毒素破伤风类毒素紧急预防和治疗紧急预防和治疗破伤风抗毒素血清破伤风抗毒素血清30第十二章第十二章 复习思考题复习思考题1.1.试述炭疽芽孢杆菌的抵抗力及其实际意义。试述炭疽芽孢杆菌的抵抗力及其实际意义。2.2.试述炭疽的微生物学诊断，采取检验材料应注意哪些事项？试述炭疽的微生物学诊断，采取检验材料应注意哪些事项？3.3.试述产气荚膜梭菌的类型、微生物学诊断程序。试述产气荚膜梭菌的类型、微生物学诊断程序。4.4.试述肉毒梭菌的类型、微生物学诊断程序。试述肉毒梭菌的类型、微生物学诊断程序。31个人观点供参考，欢迎讨论！
