1、2023-1-4芳酸类非甾体抗炎药物的分析芳酸类非甾体抗炎药物芳酸类非甾体抗炎药物的分析的分析2023-1-4芳酸类非甾体抗炎药物的分析第六章第六章 芳酸类非甾体抗炎药物的分析芳酸类非甾体抗炎药物的分析v 非甾体抗炎药（非甾体抗炎药（Nosteroidal Antiinflammatory Drugs，NSAIDs）是）是一类不含有甾体骨架的抗炎药，多数具有芳酸基一类不含有甾体骨架的抗炎药，多数具有芳酸基本结构。本结构。v 本章主要讲芳酸类本章主要讲芳酸类NSAIDs，同时讲一下尼美利，同时讲一下尼美利舒和对乙酰氨基酚。舒和对乙酰氨基酚。甾体结构：甾体结构：2023-1-4芳酸类非甾体抗炎药物
2、的分析第一节第一节 典型芳酸类非甾体抗炎药物的结构与性质典型芳酸类非甾体抗炎药物的结构与性质v 一、典型药物与结构特点一、典型药物与结构特点2023-1-4芳酸类非甾体抗炎药物的分析第一节第一节:结构与性质结构与性质酸性酸性酸性酸性光谱特性光谱特性2023-1-4芳酸类非甾体抗炎药物的分析第一节第一节:结构与性质结构与性质酸性酸性酸性酸性光谱特性光谱特性基团特性基团特性2023-1-4芳酸类非甾体抗炎药物的分析第一节第一节:结构与性质结构与性质酸性酸性2023-1-4芳酸类非甾体抗炎药物的分析第一节第一节:结构与性质结构与性质酸性酸性光谱特性光谱特性2023-1-4芳酸类非甾体抗炎药物的分析第
3、一节第一节:结构与性质结构与性质水解水解光谱特性光谱特性2023-1-4芳酸类非甾体抗炎药物的分析第一节第一节:结构与性质结构与性质其它非甾体类抗炎药其它非甾体类抗炎药水解水解光谱特性光谱特性2023-1-4芳酸类非甾体抗炎药物的分析第二节第二节 鉴别试验鉴别试验v 依据药物理化性质，可展开一系列鉴别方法依据药物理化性质，可展开一系列鉴别方法一、与三氯化铁反应显色一、与三氯化铁反应显色阿司匹林：紫堇色阿司匹林：紫堇色双水杨酯：紫色双水杨酯：紫色二氟尼柳：深紫色二氟尼柳：深紫色均通过产生水杨酸与三氯化铁反应显色均通过产生水杨酸与三氯化铁反应显色水杨醛反水杨醛反应应2023-1-4芳酸类非甾体抗炎
4、药物的分析第二节第二节:鉴别试验鉴别试验v 对乙酰胺基酚与三氯化铁对乙酰胺基酚与三氯化铁显蓝紫色显蓝紫色显玫瑰红色显玫瑰红色显淡紫色显淡紫色酚羟基反酚羟基反应应2023-1-4芳酸类非甾体抗炎药物的分析第二节第二节:鉴别试验鉴别试验二、缩合反应显色二、缩合反应显色二苯甲酮结构二苯甲酮结构2023-1-4芳酸类非甾体抗炎药物的分析第二节第二节:鉴别试验鉴别试验v三、重氮化三、重氮化-偶合反应偶合反应 对乙酰氨基酚具有潜在芳伯氨基，在酸性条件下反应可对乙酰氨基酚具有潜在芳伯氨基，在酸性条件下反应可生成对氨基酚，再与亚硝酸钠进行重氮化反应，之后再与碱生成对氨基酚，再与亚硝酸钠进行重氮化反应，之后再与
5、碱性性-萘酚偶合生成红色偶氮化合物。萘酚偶合生成红色偶氮化合物。水解反应水解反应产生芳伯产生芳伯胺胺芳伯胺重氮芳伯胺重氮化化偶合反应偶合反应2023-1-4芳酸类非甾体抗炎药物的分析重氮化重氮化-偶合反应偶合反应贝诺酯橙红色第二节第二节:鉴别试验鉴别试验2023-1-4芳酸类非甾体抗炎药物的分析四、四、氧化反应氧化反应甲芬那酸H2SO4深蓝色并产生绿色荧光随即变为棕绿色第二节第二节:鉴别试验鉴别试验2023-1-4芳酸类非甾体抗炎药物的分析五、五、水解反应水解反应第二节第二节:鉴别试验鉴别试验阿司匹林阿司匹林白色水杨酸白色水杨酸醋酸气味醋酸气味2023-1-4芳酸类非甾体抗炎药物的分析第二节第
6、二节:鉴别试验鉴别试验六、特征元素反应六、特征元素反应 分子中含有氯、硫等元素可以转化为氯化物或硫分子中含有氯、硫等元素可以转化为氯化物或硫化物进而进行鉴别。化物进而进行鉴别。七、光谱法七、光谱法 1、UV 2、IR2023-1-4芳酸类非甾体抗炎药物的分析IR：阿司匹林-COOH-OH-COOHPh-C邻位取代Ph第二节第二节:鉴别试验鉴别试验2023-1-4芳酸类非甾体抗炎药物的分析N-HO-HN-HPh:C=C芳胺酚第二节第二节:鉴别试验鉴别试验2023-1-4芳酸类非甾体抗炎药物的分析第二节第二节:鉴别试验鉴别试验八、色谱法八、色谱法供试品保留时供试品保留时间间对照品保留时间对照品保留
7、时间2023-1-4芳酸类非甾体抗炎药物的分析第三节第三节 特殊杂质及其检查特殊杂质及其检查法法一、阿司匹林和双水杨酯生产工艺ASA副产物水杨酸双水杨酯2023-1-4芳酸类非甾体抗炎药物的分析HPLC法法淡黄、淡黄、红棕、红棕、深棕色深棕色第三节第三节:特殊杂质及其检查特殊杂质及其检查法法2023-1-4芳酸类非甾体抗炎药物的分析第三节第三节:特殊杂质及其检查特殊杂质及其检查法法其它有关物质其它有关物质醋酸苯酯水杨酸苯酯乙酰水杨酸苯酯HPLC法法2023-1-4芳酸类非甾体抗炎药物的分析二、甲芬那酸中二、甲芬那酸中2,32,3二甲基苯胺的检查二甲基苯胺的检查第三节第三节:特殊杂质及其检查法特
8、殊杂质及其检查法甲芬那酸GC法法2023-1-4芳酸类非甾体抗炎药物的分析三、二氟尼柳中有关物质的检查TLCHPLC所谓物质所谓物质A和物质和物质B的检查的检查是采用是采用自身对照法自身对照法进行检查进行检查的的相同药物相同药物,不同浓度不同浓度,相互比较相互比较,主点主点限限量量第三节第三节:特殊杂质及其检查特殊杂质及其检查法法2023-1-4芳酸类非甾体抗炎药物的分析四、萘普生的有关物质检查四、萘普生的有关物质检查色谱条色谱条件件杂质限杂质限量量第三节第三节:特殊杂质及其检查法特殊杂质及其检查法2023-1-4芳酸类非甾体抗炎药物的分析五、对乙酰氨基酚中氨基酚和对氯苯乙酰胺五、对乙酰氨基酚
9、中氨基酚和对氯苯乙酰胺第三节第三节:特殊杂质及其检查法特殊杂质及其检查法HPLC2023-1-4芳酸类非甾体抗炎药物的分析一、酸碱滴定法一、酸碱滴定法(Acid-base titration method)苯甲酸苯甲酸pKa 4.20水杨酸水杨酸pKa 2.98酸性较强酸性较强羧酸邻位羧酸邻位-OH-OH，吸电子基团，使酸性增加；，吸电子基团，使酸性增加；分子内氢键，更增加了其极性分子内氢键，更增加了其极性直接滴定：Aspirin、丙磺舒丙磺舒(Ch.P.BP.JP等等)苯甲酸苯甲酸(Ch.P等等)均均采用本法。采用本法。第四节第四节 含量测定含量测定2023-1-4芳酸类非甾体抗炎药物的分析
10、1.1.直接滴定法直接滴定法乙醇乙醇作用：溶解作用：溶解ASAASA；防止；防止ASAASA在水溶在水溶 液中滴定过程易水解液中滴定过程易水解中性乙醇：中性乙醇：对指示剂对指示剂(酚酞酚酞)而言为中性，而言为中性，可消除滴定误差可消除滴定误差 pKa 36 的药物溶于中性醇的药物溶于中性醇,可可直接用直接用NaOH滴定滴定 pKa 69 的药物要用的药物要用非水溶液滴定法非水溶液滴定法第四节第四节:含量测定含量测定2023-1-4芳酸类非甾体抗炎药物的分析本品在甲醇、乙醇及水中极微溶或者本品在甲醇、乙醇及水中极微溶或者几乎不溶，在丙酮中微溶。所以几乎不溶，在丙酮中微溶。所以Chp使使用用定量过
11、量的氢氧化钠滴定液定量过量的氢氧化钠滴定液溶解后，溶解后，再用盐酸滴定液回滴剩余的氢氧化钠。再用盐酸滴定液回滴剩余的氢氧化钠。烯醇式烯醇式结构结构:酸酸性性为什么氢为什么氢氧化钠能溶氧化钠能溶解之？解之？第四节第四节:含量测定含量测定2023-1-4芳酸类非甾体抗炎药物的分析2.2.水解后剩余滴定法水解后剩余滴定法(Residual titration after hydrolysis)取本品约取本品约1.5g，精密称定，准确加，精密称定，准确加NaOH液液(0.5mol/L)50.0ml，缓缓煮沸缓缓煮沸10min，放冷，以酚酞为指示剂，用，放冷，以酚酞为指示剂，用H2SO4液液(0.25m
12、ol/L)滴定滴定剩余剩余的的NaOH，并将滴定结果用，并将滴定结果用空白试验空白试验校正。每校正。每1ml的的NaOH液液(0.5ml/L)相当于相当于45.04mg的的C9H8O4。USP32-NF27第四节第四节:含量测定含量测定2023-1-4芳酸类非甾体抗炎药物的分析滴定度滴定度滴定度滴定度浓度浓度待测物反待测物反应系数应系数滴定液物滴定液物反应系数反应系数滴定液物滴定液物摩而质量摩而质量空白反应空白反应体积体积样品测定样品测定消耗体积消耗体积样品称重样品称重量量第四节第四节:含量测定含量测定2023-1-4芳酸类非甾体抗炎药物的分析3.两步滴定法两步滴定法(Two-step tit
13、ration)Aspirin片枸橼酸枸橼酸Citric acid酒石酸酒石酸Trataric acid水解产物水解产物水杨酸水杨酸SAHAc第四节第四节:含量测定含量测定第一步：NaOH滴定所有的酸：滴定所有的酸：ASA，CA，TA，SA，HAc第二步：水解后剩余滴定水解后剩余滴定2023-1-4芳酸类非甾体抗炎药物的分析 取本品取本品1010片，精密称定，研细，精密称取适量片，精密称定，研细，精密称取适量(约相当于阿约相当于阿司匹林司匹林0.3g)0.3g)，置锥形瓶中，加中性乙醇，置锥形瓶中，加中性乙醇(对酚酞指示剂显中对酚酞指示剂显中性性)20ml)20ml，振摇使，振摇使ASAASA溶
14、解，加酚酞指示液溶解，加酚酞指示液3 3滴，滴，滴加滴加NaOHNaOH液液(0.1mol/L)(0.1mol/L)至显粉红色，至显粉红色，再精密加再精密加NaOHNaOH液液(0.1mol/L)40ml(0.1mol/L)40ml，置水，置水浴上加热浴上加热15min15min，并时时振摇，迅速放冷至室温，并时时振摇，迅速放冷至室温，用用H H2 2SOSO4 4液液(0.05mol/L)(0.05mol/L)滴定滴定，并将滴定的结果用空白试验校正。，并将滴定的结果用空白试验校正。每每1ml1ml的的NaOHNaOH液液(0.1mol/L)(0.1mol/L)相当于相当于18.02mg18.
15、02mg的的C C9 9H H8 8OO4 4。第四节第四节:含量测定含量测定2023-1-4芳酸类非甾体抗炎药物的分析空白空白消耗消耗样测样测消耗消耗校正校正因数因数滴定滴定度度片剂片剂规格规格第四节第四节:含量测定含量测定2023-1-4芳酸类非甾体抗炎药物的分析二、非水溶液滴定法二、非水溶液滴定法吡罗昔康第四节第四节:含量测定含量测定2023-1-4芳酸类非甾体抗炎药物的分析三、三、UVUV法法1.直接直接UV法法2.离子交换离子交换-UV法法氯贝丁酯在氯贝丁酯在226nm226nm的波长处有最大吸收，但的波长处有最大吸收，但对氯酚对氯酚等等有关物质亦有吸收，干扰有关物质亦有吸收，干扰U
16、VUV法的测定。根据氯贝丁酯法的测定。根据氯贝丁酯为酯结构，不能发生电离，而有关物质可为酯结构，不能发生电离，而有关物质可发生酸性解发生酸性解离离的性质差异，采用阴离子交换色谱分离后，采用的性质差异，采用阴离子交换色谱分离后，采用UVUV法测定。法测定。第四节第四节:含量测定含量测定2023-1-4芳酸类非甾体抗炎药物的分析3.CPC-UV法法(Column Partition Chromatography)利用固定相酸碱性的不同酸碱性的不同进行分离利用药物和固定相起化学反应而进行分离利用生成离子对离子对进行层析分离单纯靠选择流动相进行分离200300mm60mm4mm22mm层析柱玻棉压榨棒
17、350mm21mm担体：硅藻土：硅藻土(Celite 545)(Celite 545)固定相：一定：一定pHpH的缓冲水溶的缓冲水溶液液流动相：与水不相混溶的有：与水不相混溶的有机溶剂机溶剂(洗脱前必须先用水饱洗脱前必须先用水饱和和)第四节第四节:含量测定含量测定2023-1-4芳酸类非甾体抗炎药物的分析例：例：ASA测定供试液制备洗脱洗脱 ：5,25mlCHCl3 相继洗脱，弃去相继洗脱，弃去CHCl3；用用10ml冰冰HAc-CHCl3(150)洗脱洗脱，再用，再用85ml冰冰HAc-CHCl3(1100)洗脱，收集洗脱液并冰洗脱，收集洗脱液并冰HAc-CHCl3(1100)稀释至稀释至1
18、00ml。测定：280nm 空白：CHCl3NaHCONaHCO3 3使使ASA和和SA成盐成盐保留于柱上保留于柱上 用用CHClCHCl3 3洗脱的目的洗脱的目的：去除中性或碱性杂质去除中性或碱性杂质冰冰HAcHAc酸化的目的酸化的目的：使使ASAASA游离游离，易被，易被 CHCl3洗脱洗脱第四节第四节:含量测定含量测定2023-1-4芳酸类非甾体抗炎药物的分析供试品吸光供试品吸光度度对照品吸光对照品吸光度度对照品浓对照品浓度度例子例子第四节第四节:含量测定含量测定2023-1-4芳酸类非甾体抗炎药物的分析四、四、HPLCHPLC对照对照品浓品浓度度供试供试品峰品峰面积面积对照对照品峰品峰面积面积第四节第四节:含量测定含量测定2023-1-4芳酸类非甾体抗炎药物的分析
