1、第13章 革兰阳性无芽孢杆菌第13章 革兰氏阳性无芽孢杆菌革兰氏阳性无芽孢杆菌 p178p178第一节第一节 李氏杆菌属李氏杆菌属第二节第二节 丹毒丝菌属丹毒丝菌属第三节第三节 肾杆菌属肾杆菌属第一节第一节 李氏杆菌李氏杆菌 （ListeriaListeria）一、需氧、兼性厌氧，无芽孢、无荚膜一、需氧、兼性厌氧，无芽孢、无荚膜二分类：第一群：产单核细胞李氏杆菌（代表）二分类：第一群：产单核细胞李氏杆菌（代表）第二群：格氏李氏杆菌第二群：格氏李氏杆菌（代表）（代表）第一节第一节 李氏杆菌属李氏杆菌属 Listeria 最初，李氏杆菌属仅有单核细胞增多性李氏杆菌一个种，之后相继确认了 伊氏李氏杆
2、菌(L.ivanovii)、无害李氏杆菌(L.innocua)、威斯梅尔氏李氏杆菌(L.Welshimeri)和 西里杰氏李氏杆菌(L.seeligeri)。期间曾将默氏李氏杆菌(L.murrayi)和格氏李氏杆菌(L.grayi)也划到本属中，但后来的研究结果表明它们是一个独立的特殊的属默里亚属(Murraya)，包括格氏默亚里菌格氏亚种(M.grayi subsp.grayi)、格氏默里亚菌默氏亚种(M.grayi subsp.murrayi)。一、产单核细胞李氏杆菌的形态与染色一、产单核细胞李氏杆菌的形态与染色（一）形态染色：G+，两端钝圆的短小杆菌，单在、呈字排列、或成从排列；无芽胞、
3、无荚膜；2025：4根周身鞭毛，具有运动性；37 很少产生鞭毛；R型菌多为长丝状。1、G+，两端钝圆的短小杆菌，单在、呈字排列、2、无芽胞、无荚膜；或成从排列；3、2025：4根周身鞭毛；37 少有，最多1根鞭毛；4、R型菌多为长丝状（二）（二）培养培养：在普通琼脂培养基和普通肉汤中在普通琼脂培养基和普通肉汤中生长不良，如加入生长不良，如加入0.2-0.5(W/V)葡萄糖或葡萄糖或5-10血液、血清则生长良好；在血琼脂平血液、血清则生长良好；在血琼脂平皿上经皿上经37C24h培养可形成湿润、光滑、透明、培养可形成湿润、光滑、透明、灰白色、露珠样的圆形小菌落，并形成灰白色、露珠样的圆形小菌落，并
4、形成 溶血溶血环。环。在麦康凯培养基不生长。在麦康凯培养基不生长。（三）抵抗力（三）抵抗力 本菌对腐败和干燥环境有较强本菌对腐败和干燥环境有较强的抵抗力。在饮水中可存活的抵抗力。在饮水中可存活5d，在污物中可存，在污物中可存活活15d，在深埋的尸体中可存活，在深埋的尸体中可存活9个月。对热和个月。对热和直射光、常用消毒剂抵抗力不强，对青霉素很直射光、常用消毒剂抵抗力不强，对青霉素很敏感。敏感。（四）致病机理与致病性（四）致病机理与致病性 本菌通过消化道感本菌通过消化道感染，进入血流，而后定殖在局部或引致全身感染，进入血流，而后定殖在局部或引致全身感染。染。（五）抵抗力与致病性：（五）抵抗力与致
5、病性：致病机理：肝脾巨噬致病机理：肝脾巨噬细胞的胞内寄生菌细胞的胞内寄生菌 本菌通过消化道感染，进入血流，而后本菌通过消化道感染，进入血流，而后定殖在局部或引致全身感染。定殖在局部或引致全身感染。1、本菌可细胞内寄生；2、可自然感染多种家畜：猪、马、牛、绵羊；3、病畜表现神经症状、妊畜流产、血液中单核细胞增多；4、鸡可全身感染，心肌坏死；5、成人脑膜炎，新生儿脑膜炎(10%)。微生物学诊断：微生物学诊断：1.染色镜检：染色镜检：-病料：死后可采取心血、肝、脾、肾、淋巴结等制成涂片，革病料：死后可采取心血、肝、脾、肾、淋巴结等制成涂片，革兰氏染色镜检。兰氏染色镜检。-如发现少量典型杆菌，可初步确
6、诊，如为慢性心内膜炎病例，如发现少量典型杆菌，可初步确诊，如为慢性心内膜炎病例，可用心脏瓣膜增生物涂片，镜检。羔羊患关节炎病时，可检查关可用心脏瓣膜增生物涂片，镜检。羔羊患关节炎病时，可检查关节滑膜液。节滑膜液。2分离培养：分离培养时可用含有加入分离培养：分离培养时可用含有加入0.2-0.5(W/V)葡萄糖或葡萄糖或5-10血液、血清的琼脂平皿或半固体琼脂培养基。血液、血清的琼脂平皿或半固体琼脂培养基。3血清学检查：血清学检查：p:血清型鉴定时，将待鉴定菌株的纯培养物甲醛血清型鉴定时，将待鉴定菌株的纯培养物甲醛灭活，制成沉淀原，与标准菌株高免血清作琼脂扩散试验。灭活，制成沉淀原，与标准菌株高免
7、血清作琼脂扩散试验。4.动物实验：动物实验：第二节第二节 丹毒丝菌属丹毒丝菌属 猪丹毒是由猪丹毒杆菌引起的猪的猪丹毒是由猪丹毒杆菌引起的猪的一种急性或慢性传染病。一种急性或慢性传染病。其特征为急性型呈败血症症状，亚急其特征为急性型呈败血症症状，亚急性型在皮肤上出现紫红色疹块，慢性型性型在皮肤上出现紫红色疹块，慢性型常发生心内膜炎和关节炎。常发生心内膜炎和关节炎。一、病原一、病原 猪丹毒杆菌猪丹毒杆菌 形态与染色形态与染色：革兰氏阳性革兰氏阳性、纤细、纤细小杆菌，有荚膜、无芽胞和鞭小杆菌，有荚膜、无芽胞和鞭毛。毛。在病料内，细菌常单在、成在病料内，细菌常单在、成对或呈丛排列；对或呈丛排列；在陈旧
8、的肉汤培养物，慢性在陈旧的肉汤培养物，慢性病猪的心内膜疣状物上多呈长病猪的心内膜疣状物上多呈长丝状。丝状。培养：培养：在血液或血清琼脂培养基上，因菌株来在血液或血清琼脂培养基上，因菌株来源不同，可有光滑（源不同，可有光滑（S），粗糙（），粗糙（R）和中间）和中间型（型（I）三个型。）三个型。从急性病猪分离的菌落为从急性病猪分离的菌落为S，细小，表面，细小，表面光滑，边缘整齐，呈光滑，边缘整齐，呈溶血，为强毒（微蓝溶血，为强毒（微蓝色）。色）。从慢性病猪或带菌猪分离的为粗糙型，较从慢性病猪或带菌猪分离的为粗糙型，较大，表面粗糙，边缘不整齐，长丝状，低毒，大，表面粗糙，边缘不整齐，长丝状，低毒，（
9、土黄色），中间型毒力菌落性状介于两者之（土黄色），中间型毒力菌落性状介于两者之间（金黄色）。间（金黄色）。抵抗力 对外界抵抗力很强，例如猪肉内细菌经盐淹或熏制后，能存活 34个月，暴露于日光下存活10天，掩埋尸体内可活7个月，干燥状态下可活3周。可以抵抗胃酸的作用，但对消毒药和温度抵抗力不强。抗原性：用琼扩可分为24个血清型和N型（无特异抗原）。其中、型相当于 迭氏 A、B型。A型抗原构造：A+（B）+G A型多分离自急性败血型病例，A 抗原与病原性有关，用于攻毒；B 型抗原构造：（A）+B+G B型多分离自疹块型，心内膜炎、关节炎型病例，B抗原与防御感染有关，用于制苗；N型抗原构造：无抗原性
10、、亦无毒力；灭活苗交互免疫力低，而弱毒苗交互免疫力较好。抗原构造说明：（）表示含量较少；G为种特异性抗原，A、B分别为型特异性抗原。在我国，因标准血清型不全，尚不能对全国各地分离的所有菌株进行鉴定，故对国内血清型情况知道不多，但知道来源于猪的A、B、N型（马闻天，1957）二、流行病学二、流行病学 易感动物易感动物 猪最易感，各种年龄猪最易感，各种年龄均可感染，但以架子猪（均可感染，但以架子猪（312）发病率最高。发病率最高。其他如牛、羊、马、犬、鼠、家禽其他如牛、羊、马、犬、鼠、家禽及鸟类也能感染发病。及鸟类也能感染发病。人可感染，称为类丹毒。人可感染，称为类丹毒。实验动物中鸽、小白鼠最敏感
11、，肌实验动物中鸽、小白鼠最敏感，肌肉或皮下接种后肉或皮下接种后35天死亡，死后天死亡，死后剖检脾肿大，肝有坏死灶。剖检脾肿大，肝有坏死灶。致病机理及致病性：消化道感染血流定址在局部或引致全身感染。细菌黏附力是致病的主要因素！无外毒素！分布广泛，寄生于家畜家禽和鱼类。微生物学诊断：1.显微镜检查：病猪耳静脉血染色镜检。肝、脾、肾、淋巴结涂片染色镜检：典型杆菌初步诊断。2.分离培养：0.2%葡萄糖+5%马血清，在肉汤中加入新霉素或万古霉素，抑制杂菌生长。3.细菌鉴定：与李氏杆菌鉴别诊断。4.免疫治疗：我国用猪丹毒GC42弱毒菌株制成的冻干苗。我国生产使用的疫苗有：灭活苗、弱毒苗、三联苗。治疗：早期
12、治疗效果好，青霉素（PG）首选，配合高免血清效果更好。二、流行病学二、流行病学 传染源传染源 病猪、带菌猪、病猪内脏（肾、病猪、带菌猪、病猪内脏（肾、脾、肝）分泌物、排泄物都含菌。脾、肝）分泌物、排泄物都含菌。另外，在健猪的扁桃体和回盲口处也可另外，在健猪的扁桃体和回盲口处也可发现本菌，其他禽畜、两栖类、爬行类、发现本菌，其他禽畜、两栖类、爬行类、野生动物也可成为带菌者，野生动物也可成为带菌者，如徐克勤报道：江苏鸡带菌如徐克勤报道：江苏鸡带菌10.96%,鸭鸭81%,鹅鹅97.96%。另外，也常从鱼、吸。另外，也常从鱼、吸血昆虫体内分离到本菌。血昆虫体内分离到本菌。传播途径传播途径 传播途径以
13、消化道感染为主，也传播途径以消化道感染为主，也可通过皮肤创伤（特别是人，屠宰工人等），可通过皮肤创伤（特别是人，屠宰工人等），带菌猪在不良条件下抵抗力降低，也可引起带菌猪在不良条件下抵抗力降低，也可引起内源性感染、发病。内源性感染、发病。本菌在鱼类体表黏液、腐败的动植物、本菌在鱼类体表黏液、腐败的动植物、土壤、污水中进行某种程度的增殖，这在流土壤、污水中进行某种程度的增殖，这在流行病学上值得注意。行病学上值得注意。流行特点流行特点 多发生于夏季，多发生于夏季，58月是流行的高月是流行的高峰期，多发生于架子猪（峰期，多发生于架子猪（46月龄猪占月龄猪占 55.89%）。）。三、症状三、症状 潜伏
14、期潜伏期1 17 7天（平均天（平均3 35 5天），临天），临床上可分为三型：床上可分为三型：1 1急性型：急性型：较多见。初期个别猪无症较多见。初期个别猪无症状突然死亡，大多以发热（状突然死亡，大多以发热（42424343）稽留，寒战，食欲下降，结膜充血，两稽留，寒战，食欲下降，结膜充血，两眼清亮有神，很少有分泌物，粪便干硬，眼清亮有神，很少有分泌物，粪便干硬，粟状（后期可能下痢）呼吸迫促，粘膜粟状（后期可能下痢）呼吸迫促，粘膜发绀。耳尖、鼻端、腹、腿内侧皮肤出发绀。耳尖、鼻端、腹、腿内侧皮肤出现大小、形状不一的红斑，指压退色，现大小、形状不一的红斑，指压退色，病程病程2 24 4日，病死
15、率达日，病死率达 80%80%90%90%。2亚急性型（荨麻疹型）：除轻微表现急性败血症症状外，其特征是在皮肤上出现疹块，俗称“打火印”，疹块大小、形状不一，数量不等，菱形多见，可出现于胸、腹、肩、背、四肢等处，色紫红，稍突起，可于数日内消退，自行恢复。3慢性型：常见的有慢性关节炎，慢性心内膜炎和皮肤坏死。关节的损害最常见于肘、髋、跗、膝、腕关节，受害关节肿胀，跛行；病猪生长缓慢，消瘦；慢性心内膜炎型通常不表现临床症状，常无先兆，突然倒地死亡或在宰后检查时发现；也有呈进行性消瘦，喜卧厌走，强行运动时见心率加快，呼吸迫促，听诊有心杂音。皮肤坏死常发生于背、肩、耳、蹄、尾部，局部皮肤变黑，干硬如革
16、，最后脱落遗留斑痕亚急性猪丹毒：体表皮肤出现相当多的疹块慢性猪丹毒：呈多发性关节炎，不能站立呈犬坐状慢性猪丹毒：病猪表现皮肤坏死 2亚急性型：皮肤上出现疹块为特征，内脏变化与急性型略同。3慢性型：关节炎病例可见肿大，关节囊内充满多量浆液、纤维素性渗出物，滑膜充血，水肿，病程较长者，肉芽组织增生，关节囊肥厚。心内膜炎，在房室瓣形成各种灰白色的菜花形疣状物，使瓣口狭窄，变形，闭锁不全。急性急性猪丹猪丹毒：毒：肺水肺水肿，肿，小叶小叶间质间质性肺性肺炎炎急性猪丹毒：右脾肿大、急性猪丹毒：右脾肿大、充血，左正常对照充血，左正常对照慢性型猪丹毒：关慢性型猪丹毒：关节内增生物节内增生物慢性型猪丹毒：心慢性
17、型猪丹毒：心瓣膜上有灰白色增瓣膜上有灰白色增生物，呈菜花状生物，呈菜花状五、诊断五、诊断作作微生物学检查。微生物学检查。病料采集：肾、脾、肝、淋巴组织，病料采集：肾、脾、肝、淋巴组织，疹块部的渗出液，心内膜组织，关节液。疹块部的渗出液，心内膜组织，关节液。镜检、培养、实验动物接种见实习镜检、培养、实验动物接种见实习指导。指导。血清学诊断：血清学诊断：已报道的有免疫荧光、已报道的有免疫荧光、凝集反应、补反、间接血凝，其中以直接凝集反应、补反、间接血凝，其中以直接荧光抗体实验敏感，主要用于慢性病例的荧光抗体实验敏感，主要用于慢性病例的诊断。诊断。附：血清培养凝集实验附：血清培养凝集实验 将黄牛制备
18、的高免血清经将黄牛制备的高免血清经56305630分分灭能后，用马丁肉汤稀释成灭能后，用马丁肉汤稀释成1 1：10101 1：640640，而后各接种病猪耳静脉各一滴，而后各接种病猪耳静脉各一滴，36123612小时，可见到明显凝集现象，滴度小时，可见到明显凝集现象，滴度可达可达1 1：320320640640，检出率，检出率90.3%90.3%，比血片，比血片镜检法高。在交通不便的农村，可将病料镜检法高。在交通不便的农村，可将病料或血液涂在滤纸片上，置于小瓶中寄往实或血液涂在滤纸片上，置于小瓶中寄往实验室检验验室检验。五、诊断五、诊断 附：血清培养凝集实验附：血清培养凝集实验 将黄牛制备的高
19、免血清经将黄牛制备的高免血清经56305630分分灭能后，用马丁肉汤稀释成灭能后，用马丁肉汤稀释成1 1：10101 1：640640，而后各接种病猪耳静脉各一滴，而后各接种病猪耳静脉各一滴，36123612小时，可见到明显凝集现象，滴度小时，可见到明显凝集现象，滴度可达可达1 1：320320640640，检出率，检出率90.3%90.3%，比血片，比血片镜检法高。在交通不便的农村，可将病料镜检法高。在交通不便的农村，可将病料或血液涂在滤纸片上，置于小瓶中寄往实或血液涂在滤纸片上，置于小瓶中寄往实验室检验验室检验。六、防制六、防制我国生产使用的疫苗有：灭活苗、弱毒苗、三联苗。治疗：早期治疗效果好，青霉素（PG）首选，配合高免血清效果更好。
