1、第八章第八章 常用免疫学检查常用免疫学检查免疫学迅猛发展,免疫学迅猛发展,方兴未艾,几乎渗方兴未艾,几乎渗透各领域。临床用透各领域。临床用于诊断、鉴别诊断、于诊断、鉴别诊断、疗效观察和预后判疗效观察和预后判断等方面。断等方面。内容内容(content)(content):1 1、体液免疫检测、体液免疫检测(免疫球蛋白、补体)免疫球蛋白、补体)2 2、相关临床疾病的免疫检测、相关临床疾病的免疫检测 肿瘤标志物(肿瘤标志物(AFPAFP、CEACEA)自身免疫性疾病自身免疫性疾病 感染性疾病(感染性疾病(ASOASO、RFRF)一、免疫球蛋白免疫球蛋白Ig测定测定 Ig Ig 属一组具有抗体活性的
2、球蛋白,属一组具有抗体活性的球蛋白,分五类分五类:功能:功能:分子量较小,唯一能分子量较小,唯一能通过通过 胎盘屏障;胎盘屏障;出现较晚,提示既往出现较晚,提示既往 感染感染;再次感染;再次感染含量最多,含量最多,约占约占7080参考值:参考值:7-16g/L减低意义:减低意义:AIDS、肾病、肾病综合征、免疫综合征、免疫药物药物1、IgG检测检测增多意义:增多意义:慢性肝病、慢性慢性肝病、慢性感染、感染、SLE、MM2、IgAIgA检测检测约占约占10201020;有血清型和有血清型和分泌型分泌型,后者在分泌液(如唾液、,后者在分泌液(如唾液、泪液、呼吸道液、阴道液)中多见泪液、呼吸道液、阴
3、道液)中多见 增多意义:增多意义:MMMM、SLESLE、类风湿、湿疹、肝硬化、类风湿、湿疹、肝硬化减低同减低同IgGIgG3、Ig M Ig M 检测检测约占约占510510;分子量大;分子量大;天然抗体;最早出现,又称急性时相或感天然抗体;最早出现,又称急性时相或感染相免球染相免球参考值:参考值:0.5-2.6g/L0.5-2.6g/L增多意义:病毒性肝炎、肝硬化、增多意义:病毒性肝炎、肝硬化、SLESLEIgE IgE 主要参与变态反应;主要参与变态反应;IgDIgD少,不检查。少,不检查。4、血清、血清M蛋白蛋白属于单克隆免球,属于单克隆免球,多无免疫活性多无免疫活性尿液出现(本尿液出
4、现(本-周氏蛋白、凝溶蛋白)周氏蛋白、凝溶蛋白)主要主要见于免疫增殖性见于免疫增殖性,恶性程度高,恶性程度高:MM、巨球蛋白血症、恶性淋巴瘤、巨球蛋白血症、恶性淋巴瘤、重链病、轻链病重链病、轻链病二、补体测定补体测定 属于糖蛋白,有酶活性属于糖蛋白,有酶活性以非活化形式存于血清中、以非活化形式存于血清中、不耐热不耐热功效:杀菌、抗病毒、免疫调节功效:杀菌、抗病毒、免疫调节 激活途径激活途径?1 1、总补体活性测定、总补体活性测定 C50测定使致敏绵羊红细胞溶解测定使致敏绵羊红细胞溶解50时的补体含量时的补体含量正常值为正常值为50100 KU/LC50检测意义:检测意义:增高增高急性炎症、组织
5、损伤、恶性肿瘤急性炎症、组织损伤、恶性肿瘤减低减低肾小球炎、肾小球炎、SLE 病毒性肝炎、病毒性肝炎、慢性肝病慢性肝病2 2、补体单个成分检测(、补体单个成分检测(C3C3、C4C4、C1qC1q)方法方法:免疫比浊法、单向免疫扩散法免疫比浊法、单向免疫扩散法补体单个成分检测的意义补体单个成分检测的意义:C3含量含量:C3是急性时相反应蛋白,见于急是急性时相反应蛋白,见于急 性炎症、传染病早期、急性组织损性炎症、传染病早期、急性组织损 伤、恶性肿瘤、移植物排斥反应伤、恶性肿瘤、移植物排斥反应C3含量含量:合成能力低下,如慢性肝病;:合成能力低下,如慢性肝病;合成原料不足,如营养不良;合成原料不
6、足,如营养不良;补体消耗或丢失增多,补体消耗或丢失增多,SLE、化疗、化疗C4含量含量:自身免疫病、:自身免疫病、MM、类风湿等、类风湿等体液免疫检测体液免疫检测一、一、T细胞花环试验细胞花环试验降低见于免疫缺陷病:降低见于免疫缺陷病:升高见于甲亢、慢活肝、升高见于甲亢、慢活肝、SLE活动期活动期体液免疫检测体液免疫检测二、白细胞分化抗原二、白细胞分化抗原CD测定测定原理:荧光标记、流式细胞计数原理:荧光标记、流式细胞计数CD3见于自身免疫疾病见于自身免疫疾病CD4/CD8 见于见于AIDS、恶性肿瘤、恶性肿瘤 提示排斥反应提示排斥反应体液免疫检测体液免疫检测三、三、NK细胞活性测定细胞活性测
7、定活性减低见于病毒感染、恶性肿瘤活性减低见于病毒感染、恶性肿瘤活性增强提示排斥反应活性增强提示排斥反应体液免疫检测体液免疫检测四、细胞因子检测四、细胞因子检测1、IL2升高见于升高见于自身免疫疾病、自身免疫疾病、AA、MM、排斥反应、排斥反应减低见于减低见于AIDS、恶性肿瘤、恶性肿瘤、2、肿瘤坏死因子、肿瘤坏死因子TNF有抗感染、抗肿瘤作用有抗感染、抗肿瘤作用3、干扰素、干扰素IFN三、肿瘤标志物检查三、肿瘤标志物检查 肿瘤标志物系肿瘤细肿瘤标志物系肿瘤细胞产生蛋白质、酶、胞产生蛋白质、酶、糖、激素类糖、激素类非完全特异非完全特异应用:肿瘤普查、辅应用:肿瘤普查、辅助诊断和疗效观察助诊断和疗
8、效观察蛋白质类:蛋白质类:AFP CEA PSA糖脂类:糖脂类:CA 50 CA19-9 CA125酶类:酶类:NSE AFU1)1)、甲胎蛋白、甲胎蛋白AFP 测定测定为胎儿早期肝脏合成,出生后消失,为胎儿早期肝脏合成,出生后消失,肝癌或发生生殖腺胚胎癌变时重新肝癌或发生生殖腺胚胎癌变时重新出现出现 参考值:阴性,参考值:阴性,20 ug/L AFP增高意义增高意义:原发肝癌原发肝癌AFP300(少数病例可阴性),(少数病例可阴性),继发肝癌不升高。继发肝癌不升高。生殖腺胚胎癌(如睾生殖腺胚胎癌(如睾丸癌、畸胎瘤)、肝丸癌、畸胎瘤)、肝硬化等硬化等AFP2 2)、癌胚抗原)、癌胚抗原CEA
9、也是胎儿早期合成,出生后消失;部也是胎儿早期合成,出生后消失;部分癌症可见升高分癌症可见升高 参考值:阴性参考值:阴性 5 ug/L CEA增高意义增高意义:广泛癌症:广泛癌症结肠、乳腺、胰腺、肺癌结肠、乳腺、胰腺、肺癌 肝病、肺病、结肠炎等肝病、肺病、结肠炎等其他标志物PSA:前列腺癌:前列腺癌 CA50CA50:非特异性广谱肿瘤标志:非特异性广谱肿瘤标志CA19-9:消化道恶性肿瘤(特别胰腺癌)消化道恶性肿瘤(特别胰腺癌)CA 242:胰腺癌、结肠癌:胰腺癌、结肠癌CA 125:糖类抗原,卵巢癌、:糖类抗原,卵巢癌、子宫内膜癌子宫内膜癌CA15-3:乳腺癌乳腺癌NSE:神经母细胞瘤、小细胞
10、肺癌:神经母细胞瘤、小细胞肺癌AFU:肝癌:肝癌 首选指标首选指标 第一补充指标第一补充指标 第二选择补充指标第二选择补充指标 四、自身抗体检查四、自身抗体检查 自身免疫疾病定义:自身免疫疾病定义:最常用检查有抗核抗体和类风湿因子测定。最常用检查有抗核抗体和类风湿因子测定。1、类风湿因子、类风湿因子RF检测检测 以变性以变性IgG为靶抗原为靶抗原。约约90的类风湿病人的类风湿病人RF阳性,阳性,RF高效价阳性,特别是高效价阳性,特别是分泌型分泌型RF,常提示预后,常提示预后不良。不良。其它自身免疫病也阳性其它自身免疫病也阳性2、抗核抗体、抗核抗体ANAANA检测检测 以真核细胞的核成分以真核细
11、胞的核成分为靶抗原。为靶抗原。无器官、种族特异性。无器官、种族特异性。现用免疫荧光或酶标现用免疫荧光或酶标法检测,灵敏性和特法检测,灵敏性和特异性都高。异性都高。胞浆颗粒型胞浆颗粒型 均匀型均匀型边缘型边缘型检测其荧光模型检测其荧光模型ANA阳性见于阳性见于SLE、重、重症肌无力、桥本氏甲状症肌无力、桥本氏甲状腺炎、类风湿病等。腺炎、类风湿病等。广义广义ANA:抗胞质抗:抗胞质抗体体3、抗组织细胞抗体、抗组织细胞抗体种类多种类多前沿、技术高前沿、技术高收费高收费高用于疑难病诊治用于疑难病诊治抗肾小球基底膜抗体抗肾小球基底膜抗体五、感染免疫检查五、感染免疫检查 P434P434 1 1、抗链球菌
12、溶血素抗链球菌溶血素“O”ASO为为A群链球菌分泌群链球菌分泌的溶血素所产生的抗体的溶血素所产生的抗体 ASO升高见于链球菌感染如升高见于链球菌感染如 特别见于风湿病和肾炎活动期特别见于风湿病和肾炎活动期 2、沙门氏菌免疫测定、沙门氏菌免疫测定伤寒杆菌含有菌体抗原和鞭毛抗原,副伤寒杆菌含有菌体抗原和鞭毛抗原,副伤寒杆菌含菌体抗原。伤寒杆菌含菌体抗原。机体感染后血清中产生相应抗体,与灭机体感染后血清中产生相应抗体,与灭活的菌液产生肉眼可见的凝集反应即活的菌液产生肉眼可见的凝集反应即肥肥达氏反应达氏反应正常值:伤寒菌体抗原正常值:伤寒菌体抗原O 180 伤寒鞭毛抗原伤寒鞭毛抗原H 1160 副伤寒
13、甲、乙、丙副伤寒甲、乙、丙 180 意义意义:比例升高为阳性,见于伤寒或副伤寒。比例升高为阳性,见于伤寒或副伤寒。病程第一周阳性率低,第病程第一周阳性率低,第24周阳性率周阳性率高。阳性反应滴度越高越有诊断价值高。阳性反应滴度越高越有诊断价值 3、其它细菌感染:、其它细菌感染:流行性脑脊髓膜炎抗原测流行性脑脊髓膜炎抗原测定定幽门螺杆菌抗体测定幽门螺杆菌抗体测定4、TORCH试验 P435抗体联合检测:抗体联合检测:弓形虫、风疹、弓形虫、风疹、巨细胞、单纯疱疹病毒巨细胞、单纯疱疹病毒妇科产前筛查妇科产前筛查IgM 型近期感染型近期感染 IgG既往感染既往感染5、轮状病毒抗体、轮状病毒抗体、RNA
14、测定测定 抗体阳性:婴幼儿腹泻抗体阳性:婴幼儿腹泻 急性胃肠炎流行急性胃肠炎流行6、STD检查见后检查见后六、六、C-反应蛋白检测反应蛋白检测 P439肝内合成,肝内合成,五元体五元体环形结构,环形结构,属于急属于急性时相反应蛋白性时相反应蛋白功效:功效:结合在死亡结合在死亡细胞或微生物外膜细胞或微生物外膜上的上的磷酸胆碱磷酸胆碱以活以活化补体系统。化补体系统。促进促进吞噬、调节免疫吞噬、调节免疫升高意义:升高意义:急性炎症、类风湿炎、急性炎症、类风湿炎、SLE、恶性肿瘤、恶性肿瘤风湿活动期;风湿活动期;急性组织损伤;急性组织损伤;肾移植排斥反应肾移植排斥反应鉴别细菌性与非细菌性感染鉴别细菌性
15、与非细菌性感染鉴别器质性与功能性病变鉴别器质性与功能性病变1 1、免疫球蛋白、补体检测意义、免疫球蛋白、补体检测意义2 2、肿瘤标志物(、肿瘤标志物(AFPAFP、CEACEA)检测参)检测参 考值与意义考值与意义3 3、ANAANA、RFRF检测意义检测意义4 4、感染性疾病检测意义、感染性疾病检测意义学习要点学习要点 复习思考题复习思考题1、风湿热、风湿性关节炎常作下列那项检测、风湿热、风湿性关节炎常作下列那项检测 抗链球菌溶血素抗链球菌溶血素“O”检测(检测(ASO)类风湿因子(类风湿因子(RF)检测)检测 肥达氏反应肥达氏反应 病毒抗体检测病毒抗体检测2、抗原刺激机体产生抗体,下列那一类型抗、抗原刺激机体产生抗体,下列那一类型抗体最早可检测到?体最早可检测到?IgA IgE IgD IgM3、原发性肝癌下列哪项升高明显、原发性肝癌下列哪项升高明显 A、CEA B、AFP C、ANA D、CRPThe end!The end!