1、医学微生物学医学微生物学Medical Microbiology（第三讲：细菌感染与免疫、诊断与防治、消毒与灭菌）（第三讲：细菌感染与免疫、诊断与防治、消毒与灭菌）目目 录录 细菌感染与免疫细菌感染与免疫 第一部分第一部分 细菌的致病机制细菌的致病机制 第二部分第二部分 抗细菌免疫机制抗细菌免疫机制 细菌感染的实验室诊断与防治原则细菌感染的实验室诊断与防治原则 第一部分第一部分 细菌感染的实验室诊断细菌感染的实验室诊断 第二部分第二部分 细菌感染的防治原则细菌感染的防治原则 消毒与灭菌消毒与灭菌一、基本概念一、基本概念（一）细菌的感染（一）细菌的感染（bacterial infectionba
2、cterial infection）或传染）或传染 细菌侵入宿主机体后，进行生长繁殖、释放毒性物质等，引起不同程度细菌侵入宿主机体后，进行生长繁殖、释放毒性物质等，引起不同程度病理损伤的过程病理损伤的过程（二）致病菌或病原菌（二）致病菌或病原菌（pathogenpathogen）：能使宿主致病的细菌）：能使宿主致病的细菌 非致病菌或非病原菌（非致病菌或非病原菌（nonpathogenic bacterium,nonpathogennonpathogenic bacterium,nonpathogen）（三）正常菌群（三）正常菌群（normal flora)normal flora)：正常人的体
3、表和同外界相通的口腔、鼻咽腔、肠道、泌尿生殖道等腔道中正常人的体表和同外界相通的口腔、鼻咽腔、肠道、泌尿生殖道等腔道中都寄居着不同种类和数量的微生物。当人体免疫功能正常时，这些微生物都寄居着不同种类和数量的微生物。当人体免疫功能正常时，这些微生物对宿主无害，有些对人还有利，是为正常微生物群，通称正常菌群对宿主无害，有些对人还有利，是为正常微生物群，通称正常菌群乳杆菌、大肠杆菌、类白喉杆菌、白假丝酵母菌乳杆菌、大肠杆菌、类白喉杆菌、白假丝酵母菌阴道阴道葡萄球菌、类白喉杆菌、非致病性分枝杆菌葡萄球菌、类白喉杆菌、非致病性分枝杆菌尿道尿道大肠杆菌、产气杆菌、变形杆菌、铜绿假单胞菌、葡萄球菌、粪链球菌
4、、类大肠杆菌、产气杆菌、变形杆菌、铜绿假单胞菌、葡萄球菌、粪链球菌、类杆菌、产气荚膜梭菌、破伤风梭菌、双歧杆菌、真细菌、乳杆菌、白假丝酵杆菌、产气荚膜梭菌、破伤风梭菌、双歧杆菌、真细菌、乳杆菌、白假丝酵母菌母菌肠道肠道一般无菌一般无菌胃胃葡萄球菌、干燥棒状杆菌、奈瑟菌葡萄球菌、干燥棒状杆菌、奈瑟菌眼结膜眼结膜葡萄球菌、类白喉杆菌、铜绿假单胞菌、非致病性分枝杆菌葡萄球菌、类白喉杆菌、铜绿假单胞菌、非致病性分枝杆菌外耳道外耳道葡萄球菌、甲型和丙型链球菌、肺炎链球菌、奈瑟菌、类杆菌葡萄球菌、甲型和丙型链球菌、肺炎链球菌、奈瑟菌、类杆菌鼻咽腔鼻咽腔葡萄球菌、甲型和丙型链球菌、肺炎链球菌、奈瑟菌、乳杆菌
5、、类白喉棒状葡萄球菌、甲型和丙型链球菌、肺炎链球菌、奈瑟菌、乳杆菌、类白喉棒状杆菌、梭菌、放线菌、螺旋体杆菌、梭菌、放线菌、螺旋体口腔口腔葡萄球菌、类白喉杆菌、铜绿假单胞菌、非致病性分枝杆菌、丙酸杆菌、白葡萄球菌、类白喉杆菌、铜绿假单胞菌、非致病性分枝杆菌、丙酸杆菌、白假丝酵母菌假丝酵母菌皮肤皮肤主要菌类主要菌类部位部位人体常见的正常菌群人体常见的正常菌群鼻咽腔鼻咽腔葡萄球菌、甲，丙型链球菌葡萄球菌、甲，丙型链球菌肺炎球菌、奈氏菌、类杆菌等肺炎球菌、奈氏菌、类杆菌等外耳道外耳道葡萄球菌、类白喉杆菌葡萄球菌、类白喉杆菌绿脓杆菌、非致病性分枝杆菌绿脓杆菌、非致病性分枝杆菌表皮葡萄球菌表皮葡萄球菌口
6、腔口腔甲，丙型链球菌甲，丙型链球菌类白喉杆菌、肺炎球菌类白喉杆菌、肺炎球菌奈氏菌、乳杆菌、梭杆菌奈氏菌、乳杆菌、梭杆菌螺旋体、放线菌、白念珠菌螺旋体、放线菌、白念珠菌肠道肠道大肠杆菌、产气杆菌、变形杆菌大肠杆菌、产气杆菌、变形杆菌绿脓杆菌、葡萄球菌、厌氧性细绿脓杆菌、葡萄球菌、厌氧性细菌菌真菌、乳杆菌，双歧杆菌等真菌、乳杆菌，双歧杆菌等阴道阴道大肠杆菌、乳杆菌大肠杆菌、乳杆菌白念珠菌、类白喉杆菌白念珠菌、类白喉杆菌非致病性分枝杆菌等非致病性分枝杆菌等皮肤皮肤葡萄球菌、绿脓杆菌、白念珠菌葡萄球菌、绿脓杆菌、白念珠菌丙酸杆菌、类白喉杆菌、丙酸杆菌、类白喉杆菌、非致病性分枝杆菌非致病性分枝杆菌人人体
7、体内内正正常常菌菌群群的的分分布布眼结膜眼结膜白色葡萄球菌、干燥杆菌白色葡萄球菌、干燥杆菌尿道尿道白色葡萄球菌、类白喉杆菌、白色葡萄球菌、类白喉杆菌、非致病性分枝杆菌非致病性分枝杆菌 正常菌群生理学意义正常菌群生理学意义：1 1生物拮抗生物拮抗作屏障作屏障 2 2营养作用营养作用产营养产营养 3 3免疫作用免疫作用 有免疫有免疫 4 4抗衰老作用抗衰老作用除废物除废物 （四）条件致病菌（四）条件致病菌（conditioned pathogen)conditioned pathogen)机会致病菌（机会致病菌（opportunistic pathogen)opportunistic pathog
8、en)有些细菌在正常情况下并不致病，在某些条件改变的特殊情况下可以致病。有些细菌在正常情况下并不致病，在某些条件改变的特殊情况下可以致病。致病条件致病条件 寄居部位的改变寄居部位的改变 免疫功能低下免疫功能低下 菌群失调（菌群失调（dysbacteriosisdysbacteriosis）菌群失调症或菌群交替症（菌群失调症或菌群交替症（microbial selection and substitutionmicrobial selection and substitution）二重感染：金黄色葡萄球菌、白假丝酵母菌等二重感染：金黄色葡萄球菌、白假丝酵母菌等（五）医院获得性感染（五）医院获得性
9、感染（hospital acquired infectionhospital acquired infection）病人在住院期间发生的感染，通称医院内感染（病人在住院期间发生的感染，通称医院内感染（nosocomialnosocomial infectioninfection）。）。1.1.交叉感染交叉感染:由医院内病人或医务人员直接或间接传播引起的感染。由医院内病人或医务人员直接或间接传播引起的感染。2.2.内源性感染内源性感染:或称自身感染，由病人自己体内正常菌群引起的感染。或称自身感染，由病人自己体内正常菌群引起的感染。3.3.医源性感染医源性感染:在治疗、诊断或预防过程中，因所用器械
10、等消毒不严而造成在治疗、诊断或预防过程中，因所用器械等消毒不严而造成的感染。的感染。二、细菌的致病机制二、细菌的致病机制（一）基本概念：（一）基本概念：1.1.细菌能引起感染的能力称为致病性（细菌能引起感染的能力称为致病性（pathogenicitypathogenicity）或病原性。）或病原性。(质质)2.2.致病菌的致病性强弱程度称为毒力（致病菌的致病性强弱程度称为毒力（virulencevirulence），即致病性的强度。），即致病性的强度。(量量)3.3.半数致死量（半数致死量（median lethal dose,LDmedian lethal dose,LD5050）4.4.半
11、数感染量（半数感染量（median infective dose,IDmedian infective dose,ID5050）（二）（二）致病菌致病作用的主要影响因素：致病菌致病作用的主要影响因素：1.1.细菌的毒力强弱细菌的毒力强弱2.2.侵入宿主机体的菌量侵入宿主机体的菌量3.3.侵入部位是否合适侵入部位是否合适 （三）细菌的毒力物质（三）细菌的毒力物质 ：侵袭力、毒素：侵袭力、毒素(物质基础物质基础)1 1、侵袭力侵袭力（invasivenessinvasiveness）致病菌能突破宿主皮肤、黏膜生理屏障，进入机体并在体内定植、繁殖和扩致病菌能突破宿主皮肤、黏膜生理屏障，进入机体并在体
12、内定植、繁殖和扩散的能力散的能力荚膜荚膜黏附素黏附素侵袭性物质侵袭性物质2 2、毒素（、毒素（toxintoxin）（1 1）外毒素外毒素（exotoxinexotoxin）多数革兰阳性菌和少数革兰阴性菌在生长繁殖过程中释放到菌体外的蛋白质。多数革兰阳性菌和少数革兰阴性菌在生长繁殖过程中释放到菌体外的蛋白质。n外毒素特征外毒素特征分子结构：分子结构：A-BA-B模式模式A A：活性亚单位：活性亚单位B B：结合亚单位：结合亚单位 可提纯制疫苗可提纯制疫苗神经毒素神经毒素 破伤风痉挛毒素、肉毒毒素破伤风痉挛毒素、肉毒毒素细胞毒素细胞毒素 白喉毒素、葡萄球菌表皮剥脱毒素、葡萄球菌毒性休克综合征毒白
13、喉毒素、葡萄球菌表皮剥脱毒素、葡萄球菌毒性休克综合征毒素、素、A A群链球菌致热外毒素群链球菌致热外毒素肠毒素肠毒素 霍乱肠毒素、霍乱肠毒素、ETECETEC肠毒素、产气荚膜梭菌肠毒素、葡萄球菌肠毒肠毒素、产气荚膜梭菌肠毒素、葡萄球菌肠毒素素（2 2）内毒素内毒素（endotoxinendotoxin）革兰阴性菌细胞壁的脂多糖革兰阴性菌细胞壁的脂多糖,菌体死亡崩解时游离出来菌体死亡崩解时游离出来发热反应发热反应 白细胞反应白细胞反应 内毒素血症与内毒素休克内毒素血症与内毒素休克 ShwartzmanShwartzman现象与现象与DICDIC 内毒素与外毒素的比较内毒素与外毒素的比较弱，能刺激
14、机体形成抗体，弱，能刺激机体形成抗体，但无中和作用，但无中和作用，甲醛处理后不能形成类毒素甲醛处理后不能形成类毒素强，能刺激机体形成抗毒素，强，能刺激机体形成抗毒素，经甲醛脱毒后能形成类毒素经甲醛脱毒后能形成类毒素抗原性抗原性较弱、各种内毒素作用大致相同，较弱、各种内毒素作用大致相同，引起休克，发热，引起休克，发热，DICDIC等等强、对机体组织器官有选择性，强、对机体组织器官有选择性，引起特殊临床表现引起特殊临床表现毒性作用毒性作用好、好、160 2160 24 4小时破坏小时破坏差、差、606080 3080 30分钟破坏分钟破坏稳定性稳定性脂多糖脂多糖蛋白质蛋白质化学成分化学成分细胞壁成
15、分、细菌裂解后释出细胞壁成分、细菌裂解后释出活菌分泌或细菌溶解后散出活菌分泌或细菌溶解后散出存在部位存在部位革兰阴性菌革兰阴性菌革兰阳性菌及部分革兰阴性菌革兰阳性菌及部分革兰阴性菌来源来源内毒素内毒素外毒素外毒素种类种类目目 录录 细菌感染与免疫细菌感染与免疫 第一部分第一部分 细菌的致病机制细菌的致病机制 第二部分第二部分 抗细菌免疫机制抗细菌免疫机制 细菌感染的实验室诊断与防治原则细菌感染的实验室诊断与防治原则 第一部分第一部分 细菌感染的实验室诊断细菌感染的实验室诊断 第二部分第二部分 细菌感染的防治原则细菌感染的防治原则 消毒与灭菌消毒与灭菌一、宿主的免疫防御机制一、宿主的免疫防御机制
16、 人体免疫系统组成：免疫器官和组织人体免疫系统组成：免疫器官和组织 免疫细胞免疫细胞 免疫分子免疫分子免疫应答类型：天然免疫免疫应答类型：天然免疫 获得性免疫获得性免疫（一）天然免疫（一）天然免疫（innate immunityinnate immunity）（非特异性免疫）（非特异性免疫nonspecific immunity nonspecific immunity）屏障结构、免疫细胞、免疫分子屏障结构、免疫细胞、免疫分子 1.1.屏障结构屏障结构 （1 1）皮肤与黏膜）皮肤与黏膜 机械性阻挡与排除作用机械性阻挡与排除作用 分泌杀菌物质分泌杀菌物质 正常菌群的拮抗作用正常菌群的拮抗作用 （
17、2 2）血脑屏障）血脑屏障 （3 3）胎盘屏障）胎盘屏障 2.2.吞噬细胞吞噬细胞 小吞噬细胞小吞噬细胞 外周血中的中性粒细胞外周血中的中性粒细胞大吞噬细胞大吞噬细胞 血中的单核细胞和各种组织中的巨噬细胞（单核吞噬细胞系统）血中的单核细胞和各种组织中的巨噬细胞（单核吞噬细胞系统）吞噬过程吞噬过程 接触接触 吞入吞入 杀灭杀灭吞噬后果吞噬后果 完全吞噬完全吞噬 不完全吞噬不完全吞噬3.3.体液因素体液因素补体补体 是正常血清中的一组蛋白质是正常血清中的一组蛋白质溶菌酶（溶菌酶（lysozymelysozyme）主要来源于吞噬细胞）主要来源于吞噬细胞 防御素防御素1.1.体液免疫：体液免疫：由特异
18、抗体起主要作用的免疫应答由特异抗体起主要作用的免疫应答 IgGIgG、IgMIgM、IgAIgA、IgDIgD、IgEIgE 抗菌抗体（调理素）抗菌抗体（调理素）抗外毒素抗体抗外毒素抗体2.2.细胞免疫细胞免疫：以：以T T细胞为主的免疫应答细胞为主的免疫应答 CD4Th1CD4Th1细胞细胞 CTL CTL(二二)获得性免疫（获得性免疫（acquired immunityacquired immunity）（特异性免疫（特异性免疫,specific immunity,specific immunity）3.3.胞外菌感染的免疫机制胞外菌感染的免疫机制 （1 1）胞外菌）胞外菌（extrace
19、llular bacteriaextracellular bacteria）：寄居在宿主细胞外的组织间隙和血液、）：寄居在宿主细胞外的组织间隙和血液、淋巴液、组织液等体液中淋巴液、组织液等体液中 葡萄球菌、链球菌、志贺菌、霍乱弧菌、破伤风梭菌等葡萄球菌、链球菌、志贺菌、霍乱弧菌、破伤风梭菌等（2 2）致病机制）致病机制：产生毒性物质、引起炎症反应：产生毒性物质、引起炎症反应（3 3）免疫机制）免疫机制中性粒细胞吞噬、杀灭中性粒细胞吞噬、杀灭产生抗体产生抗体IgGIgG抗体调理细菌促进吞噬（调理素）抗体调理细菌促进吞噬（调理素）抗体中和细菌外毒素（抗毒素）抗体中和细菌外毒素（抗毒素）激活补体经典
20、途径激活补体经典途径SIgASIgA阻挡致病菌定植阻挡致病菌定植 4.4.胞内菌感染的免疫胞内菌感染的免疫 （1 1）胞内菌）胞内菌（intracellular bacteriaintracellular bacteria）：兼性（）：兼性（facultativefacultative）和专性（）和专性（obligateobligate）专性胞内菌专性胞内菌 立克次体、衣原体立克次体、衣原体 兼性胞内菌兼性胞内菌 结核分枝杆菌、麻风分枝杆菌、伤寒沙门菌、布鲁菌、嗜肺军团菌、产单核细胞结核分枝杆菌、麻风分枝杆菌、伤寒沙门菌、布鲁菌、嗜肺军团菌、产单核细胞李氏菌李氏菌（2 2）致病机制：慢性病理性
21、免疫损伤）致病机制：慢性病理性免疫损伤（3 3）胞内菌感染的免疫：）胞内菌感染的免疫：T T细胞为主的细胞免疫细胞为主的细胞免疫 CD4Th1CD4Th1细胞细胞 产生细胞因子，活化巨噬细胞、产生细胞因子，活化巨噬细胞、CTLCTL、引起迟发型超敏反应、引起迟发型超敏反应 CD8CTLCD8CTL 穿孔素、粒酶破坏感染细胞穿孔素、粒酶破坏感染细胞5.5.感染的发生和发展感染的发生和发展（1 1）感染的来源）感染的来源 外源性感染（外源性感染（exogenous infectionexogenous infection）来源于宿主体外）来源于宿主体外病人病人 带菌者带菌者 携带有某些致病菌的健康
22、人，传染病恢复期仍排菌者（重要传染源）携带有某些致病菌的健康人，传染病恢复期仍排菌者（重要传染源）病畜和带菌动物病畜和带菌动物 人畜共患病人畜共患病 内源性感染（内源性感染（endogenous infectionendogenous infection）来源于宿主体内或体表）来源于宿主体内或体表 大多为正常菌群，少数为致病菌大多为正常菌群，少数为致病菌（2 2）传播方式与途径）传播方式与途径 呼吸道感染呼吸道感染 消化道感染消化道感染创伤感染创伤感染 接触感染接触感染节肢动物叮咬感染节肢动物叮咬感染多途径感染多途径感染（3 3）感染的类型）感染的类型(结局结局)不感染不感染隐性感染隐性感染(
23、inapparent(inapparent infection)infection)当宿主体的抗感染免疫力较强，或侵当宿主体的抗感染免疫力较强，或侵入的病菌数量不多、毒力较弱，入的病菌数量不多、毒力较弱，感染后对机体损害较轻，不出现或出现感染后对机体损害较轻，不出现或出现不明显的临床症状，不明显的临床症状，或称亚临床感染。或称亚临床感染。特点：机体获得足够的特异免疫力特点：机体获得足够的特异免疫力 传染源传染源潜伏感染潜伏感染(latent infection)(latent infection)当宿主与致病菌在相互作用过程中暂时处当宿主与致病菌在相互作用过程中暂时处于平衡状态时，病菌潜伏在病
24、灶内或某些特殊组织中，一般不出现在血于平衡状态时，病菌潜伏在病灶内或某些特殊组织中，一般不出现在血液、分泌物或排泄物中。一旦机体免疫力下降，则潜伏的致病菌大量繁液、分泌物或排泄物中。一旦机体免疫力下降，则潜伏的致病菌大量繁殖，使疾病复发。结核分枝杆菌殖，使疾病复发。结核分枝杆菌显性感染显性感染(apparent infectionapparent infection)(传染病传染病)宿主细胞受到不同程度的损害，生理功能发生改变，并出现一系列宿主细胞受到不同程度的损害，生理功能发生改变，并出现一系列的临床症状和体征的临床症状和体征 I.I.按疾病发生急缓分按疾病发生急缓分 急性感染（急性感染（a
25、cute infectionacute infection）慢性感染（慢性感染（chronic infectionchronic infection）II.II.按感染累及部位的范围分按感染累及部位的范围分 局部感染（局部感染（local infectionlocal infection）全身感染（全身感染（generalized infectiongeneralized infection；systemic infectionsystemic infection）III.III.全身感染可引起多种不同的全身症状：全身感染可引起多种不同的全身症状：毒血症（毒血症（toxemiatoxemia）
26、：）：致病菌侵入宿主体后，只在机体局部生长繁殖，致病菌侵入宿主体后，只在机体局部生长繁殖，病菌不进入血循环，病菌不进入血循环，但其产生的外毒素入血但其产生的外毒素入血。外毒素经血到达易感的组织和细胞，引起特殊。外毒素经血到达易感的组织和细胞，引起特殊的毒性症状。例如白喉、破伤风等的毒性症状。例如白喉、破伤风等。内毒素血症（内毒素血症（endotoxemiaendotoxemia）:革兰阴性菌革兰阴性菌侵入侵入血流血流，并在其中大量繁殖、崩解后释放出大量，并在其中大量繁殖、崩解后释放出大量内毒素内毒素；也可由病灶内大量革兰阴性菌死亡、释放的也可由病灶内大量革兰阴性菌死亡、释放的内毒素入血内毒素入
27、血所致。所致。菌血症（菌血症（bacteremiabacteremia）：）：致病菌由局部侵入血流，但未在血流中生长繁致病菌由局部侵入血流，但未在血流中生长繁殖，只是殖，只是短暂的一过性通过血循环短暂的一过性通过血循环到达体内适宜部位后再进行繁殖而致到达体内适宜部位后再进行繁殖而致病。例如伤寒早期。病。例如伤寒早期。败血症（败血症（septicemiasepticemia）：致病菌）：致病菌侵入侵入血流血流后，在其中后，在其中大量繁殖大量繁殖并产生毒并产生毒性产物，引起全身性中毒症状。鼠疫耶氏菌、炭疽芽胞杆菌等。性产物，引起全身性中毒症状。鼠疫耶氏菌、炭疽芽胞杆菌等。脓毒血症（脓毒血症（pye
28、miapyemia）：化脓性病菌）：化脓性病菌侵入侵入血流血流后，在其中后，在其中大量繁殖大量繁殖，并通，并通过过血流扩散血流扩散至宿主的其他组织或器官，产生至宿主的其他组织或器官，产生新的化脓性病灶新的化脓性病灶。例如金黄。例如金黄色葡萄球菌的脓毒血症，常导致多发性肝脓肿、皮下脓肿和肾脓肿等。色葡萄球菌的脓毒血症，常导致多发性肝脓肿、皮下脓肿和肾脓肿等。带菌状态带菌状态 有时致病菌在显性或隐性感染后并未立即消失，在体内继有时致病菌在显性或隐性感染后并未立即消失，在体内继续留存一定时间，与机体免疫力处于相对平衡状态。续留存一定时间，与机体免疫力处于相对平衡状态。带菌者（带菌者（carrierc
29、arrier）是）是重要的传染源重要的传染源目目 录录 细菌感染与免疫细菌感染与免疫 第一部分第一部分 细菌的致病机制细菌的致病机制 第二部分第二部分 抗细菌免疫机制抗细菌免疫机制 细菌感染的实验室诊断与防治原则细菌感染的实验室诊断与防治原则 第一部分第一部分 细菌感染的实验室诊断细菌感染的实验室诊断 第二部分第二部分 细菌感染的防治原则细菌感染的防治原则 消毒与灭菌消毒与灭菌一、细菌感染实验室诊断的基本流程一、细菌感染实验室诊断的基本流程标本标本生化试验生化试验血清学试验血清学试验动物试验动物试验 药敏试验药敏试验直接涂片检查直接涂片检查分离培养分离培养 分子生物学技术分子生物学技术（核酸杂
30、交、（核酸杂交、PCRPCR）其它其它(HPLC)(HPLC)n注意无菌操作，尽量避免杂菌污染。注意无菌操作，尽量避免杂菌污染。n根据病程、细菌在体内分布及从人体排出途径的不同，采集相应的标本。根据病程、细菌在体内分布及从人体排出途径的不同，采集相应的标本。n应在使用抗菌药物前采集标本，否则在培养时应加入拮抗剂。应在使用抗菌药物前采集标本，否则在培养时应加入拮抗剂。n尽可能采集病变明显部位的材料。尽可能采集病变明显部位的材料。n标本必须新鲜，采集后尽快送检。标本必须新鲜，采集后尽快送检。n送检过程中要采取适当的保存方式。送检过程中要采取适当的保存方式。（一）标本采集与送检的原则（一）标本采集与
31、送检的原则1 1、显微镜观察法、显微镜观察法细菌形体微小，肉眼不能直接看到，必须借助细菌形体微小，肉眼不能直接看到，必须借助显微镜（普通光学显微镜、电子显微镜）放大后才能观察。显微镜（普通光学显微镜、电子显微镜）放大后才能观察。（二）细菌的形态学检查（二）细菌的形态学检查 普通光学显微镜的分辨率为普通光学显微镜的分辨率为0.250.25m m。一般细菌都大于。一般细菌都大于0.250.25m m，故可，故可用普通光学显微镜观察。用普通光学显微镜观察。普通光学显微镜普通光学显微镜(light microscope)电子显微镜的分辨率为电子显微镜的分辨率为1nm1nm。不仅能看清细菌的外形，内部超
32、微结构可。不仅能看清细菌的外形，内部超微结构可一览无余。一览无余。电子显微镜电子显微镜(electron microscope)肺炎链球菌荚膜肺炎链球菌荚膜荚膜荚膜透射电镜透射电镜扫描电镜扫描电镜革兰染色法：革兰染色法：结晶紫结晶紫 碘液碘液 95%95%乙醇乙醇 复红复红抗酸染色：抗酸染色：石炭酸复红石炭酸复红 3%3%盐酸酒精盐酸酒精 美兰美兰其它特殊染色其它特殊染色（2 2）染色法）染色法细菌体小半透明，经染色后才能观察较清楚。细菌体小半透明，经染色后才能观察较清楚。1min1min1min脱色5min脱色 抗酸染色抗酸染色革兰阳性菌革兰阳性菌革兰阴性菌革兰阴性菌（三）细菌的分离培养（三
33、）细菌的分离培养 1 1、培养基（、培养基（culture mediumculture medium）由人工方法配制而成的，专供微生物生长繁殖使用的混合营养物制品由人工方法配制而成的，专供微生物生长繁殖使用的混合营养物制品 （1 1）培养基按营养组成和用途可分为：）培养基按营养组成和用途可分为：基础培养基（基础培养基（basic mediumbasic medium）增菌培养基（增菌培养基（enrichment mediumenrichment medium）选择培养基（选择培养基（selective mediumselective medium）鉴别培养基（鉴别培养基（differentia
34、l mediumdifferential medium）厌氧培养基（厌氧培养基（anaerobic mediumanaerobic medium）（2 2）按物理状态可分为：液体培养基、固体培养基、半固体培养基）按物理状态可分为：液体培养基、固体培养基、半固体培养基 2 2、细菌在培养基中的生长情况、细菌在培养基中的生长情况液体培养基：表面生长液体培养基：表面生长 均匀混浊生长均匀混浊生长 沉淀生长沉淀生长 A.A.均匀浑浊生长均匀浑浊生长 B.B.菌膜生长菌膜生长 C.C.沉淀生长沉淀生长固体培养基：菌落，菌苔固体培养基：菌落，菌苔半固体培养基：半固体培养基：无动力无动力 有动力有动力3 3
35、、培养基的用途、培养基的用途液体培养基：增菌液体培养基：增菌固体培养基：纯化，增菌固体培养基：纯化，增菌半固体培养基：动力检测，保种半固体培养基：动力检测，保种用已知的细菌或其特异性抗原检测患者体液中有无相应特异抗体和用已知的细菌或其特异性抗原检测患者体液中有无相应特异抗体和其效价的动态变化。一般采取病人的血清进行试验，故称为其效价的动态变化。一般采取病人的血清进行试验，故称为血清学血清学诊断诊断(serological diagnosis)(serological diagnosis)。血清学诊断试验最好取患者急性期和恢复期双份血清标本，当后者血清学诊断试验最好取患者急性期和恢复期双份血清标
36、本，当后者的抗体效价比前者的抗体效价比前者升高升高44倍倍时方有意义。时方有意义。常用方法：直接凝集试验、乳胶凝集试验、沉淀试验、补体结合试常用方法：直接凝集试验、乳胶凝集试验、沉淀试验、补体结合试验、中和试验、验、中和试验、ELISAELISA。（四）血清学诊断（四）血清学诊断（五）细菌的核酸检测（五）细菌的核酸检测通过检测细菌遗传物质，包括细菌的染色体通过检测细菌遗传物质，包括细菌的染色体DNADNA和染色体外的遗传物质，和染色体外的遗传物质，来确认细菌感染的方法。也称细菌的基因诊断。来确认细菌感染的方法。也称细菌的基因诊断。常用方法：核酸杂交技术、多聚酶链反应技术常用方法：核酸杂交技术、
37、多聚酶链反应技术目目 录录 细菌感染与免疫细菌感染与免疫 第一部分第一部分 细菌的致病机制细菌的致病机制 第二部分第二部分 抗细菌免疫机制抗细菌免疫机制 细菌感染的实验室诊断与防治原则细菌感染的实验室诊断与防治原则 第一部分第一部分 细菌感染的实验室诊断细菌感染的实验室诊断 第二部分第二部分 细菌感染的防治原则细菌感染的防治原则 消毒与灭菌消毒与灭菌一、细菌感染的防治一、细菌感染的防治（一）预防（一）预防n人工主动免疫：人工主动免疫：用于预防用于预防疫苗疫苗（vaccine）：）：死疫苗（死疫苗（killed vaccinekilled vaccine）减毒活疫苗（减毒活疫苗（live att
38、enuated vaccinelive attenuated vaccine）基因工程疫苗（基因工程疫苗（genetically engineering vaccinegenetically engineering vaccine）多肽疫苗（多肽疫苗（polypeptide vaccinepolypeptide vaccine）亚单位疫苗（亚单位疫苗（subunit vaccinessubunit vaccines）DNADNA疫苗（疫苗（DNA vaccineDNA vaccine）等）等 类毒素类毒素（toxoid）n人工被动免疫：人工被动免疫：用于治疗或紧急预防用于治疗或紧急预防抗毒素、
39、抗菌血清、胎盘丙种球蛋白、免疫制剂抗毒素、抗菌血清、胎盘丙种球蛋白、免疫制剂 （二）药物治疗（二）药物治疗细胞壁细胞壁青霉素青霉素细胞膜细胞膜多粘菌素（作用于脂类）多粘菌素（作用于脂类）蛋白质合成蛋白质合成30S30S亚基亚基氨基糖苷类、四环素类氨基糖苷类、四环素类50S50S亚基亚基氯霉素、林可霉素、大内环酯类氯霉素、林可霉素、大内环酯类核酸代谢核酸代谢喹诺酮类、利福平、磺胺类喹诺酮类、利福平、磺胺类 目目 录录 细菌感染与免疫细菌感染与免疫 第一部分第一部分 细菌的致病机制细菌的致病机制 第二部分第二部分 抗细菌免疫机制抗细菌免疫机制 细菌感染的实验室诊断与防治原则细菌感染的实验室诊断与防
40、治原则 第一部分第一部分 细菌感染的实验室诊断细菌感染的实验室诊断 第二部分第二部分 细菌感染的防治原则细菌感染的防治原则 消毒与灭菌消毒与灭菌一、基本概念一、基本概念消毒消毒(disinfection)(disinfection)杀死物体上病原微生物的方法杀死物体上病原微生物的方法,并并不一定能杀死含芽胞的细菌或非病原不一定能杀死含芽胞的细菌或非病原微生物微生物灭菌灭菌(sterilization)(sterilization)杀灭物体上杀灭物体上所有微生物所有微生物的方法的方法防腐防腐(antisepsis)(antisepsis)防止或抑制体外细菌生长繁殖的方法防止或抑制体外细菌生长繁殖
41、的方法无菌无菌(asepsis)(asepsis)不存在活菌不存在活菌二、物理消毒灭菌法二、物理消毒灭菌法（一）热力灭菌法（一）热力灭菌法n焚烧焚烧n烧灼烧灼n干烤（干烤（160160170/2h170/2hn红外线红外线用较低温度杀灭液体用较低温度杀灭液体中的病原菌或特定微生物，而仍保持物品中所需的不耐中的病原菌或特定微生物，而仍保持物品中所需的不耐热成分不被破坏的消毒方法（热成分不被破坏的消毒方法（62306230或或72307230 ）n煮沸法煮沸法n流动蒸气消毒法流动蒸气消毒法n间歇蒸气灭菌法间歇蒸气灭菌法n高压蒸气灭菌法高压蒸气灭菌法 ：121,15121,15个大气压个大气压,20
42、,20分钟分钟同一温度下同一温度下,湿湿热比干热效果好热比干热效果好（二）辐射杀菌法（二）辐射杀菌法紫外线紫外线 265265266nm266nm 杀菌原理杀菌原理 用途与缺陷用途与缺陷电离辐射电离辐射 、射线射线微波微波（三）滤过除菌法（三）滤过除菌法 0.220.22m,m,不耐热血清空气不耐热血清空气超声波杀菌法超声波杀菌法干燥与低温抑菌法干燥与低温抑菌法 冷冻真空干燥保存菌种冷冻真空干燥保存菌种三、化学消毒灭菌法（外用）三、化学消毒灭菌法（外用）（一）常用消毒剂的杀菌机制（一）常用消毒剂的杀菌机制使菌体蛋白变性或凝固使菌体蛋白变性或凝固干扰微生物酶系统和影响其代谢干扰微生物酶系统和影响其代谢损伤细胞膜损伤细胞膜（二）选择原则（二）选择原则效果好效果好毒力低毒力低便宜便宜（三）消毒剂的主要种类（三）消毒剂的主要种类醋酸、生石灰破坏膜、壁，蛋白凝固酸碱类龙胆紫干扰氧化、抑制繁殖染料环氧乙烷蛋白质、核酸烷基化烷化剂新洁而灭蛋白变性，细胞膜损伤表面活性剂红汞、硫柳汞氧化、蛋白酶变性重金属盐高锰酸钾、过氧乙酸、碘酒氧化、蛋白沉淀氧化剂乙醇蛋白变性醇类石炭酸蛋白变性，细胞膜损伤酚类常用种类常用种类作用机制作用机制类别类别消毒剂的性质、浓度与作用时间消毒剂的性质、浓度与作用时间微生物的种类与数量微生物的种类与数量温度温度酸碱度酸碱度有机物有机物
