1、 抗生素抗生素:在在低微浓度低微浓度下即可对某些生物（病下即可对某些生物（病原微生物）的生命活动有原微生物）的生命活动有特异抑制特异抑制作用的化作用的化学物质的总称学物质的总称 .来源：来源：化学合成化学合成 半合成半合成 生物合成（发酵）生物合成（发酵）一、抗生素类药物的特点一、抗生素类药物的特点1.1.化学纯度低化学纯度低同系物、异构体、降同系物、异构体、降解物；解物；2.2.活性组分易发生变异活性组分易发生变异菌株、发酵菌株、发酵条件；条件；3.3.稳定性差稳定性差活泼基团。活泼基团。二、抗生素药物的质量分析二、抗生素药物的质量分析 抗生素药物的质量控制方法与一般化抗生素药物的质量控制方
2、法与一般化学药品一样，通过学药品一样，通过鉴别、检查、含量鉴别、检查、含量（效价）测定（效价）测定三个主要方面来判断其质三个主要方面来判断其质量的优劣。量的优劣。采用采用生物学法生物学法与与物理化学法物理化学法.l一）鉴别试验：一）鉴别试验：l 1官能团的显色反应官能团的显色反应l 2光谱法光谱法l 3色谱法色谱法l 4生物学法（抑菌能力），已少用。生物学法（抑菌能力），已少用。青霉素钠青霉素钠 鉴别鉴别 取取本品与已知含量的青霉素本品与已知含量的青霉素适量，分别加适量，分别加水水制制成成每每1ml中约中约含含50g的的溶液溶液，各取，各取1ml，加入不少于，加入不少于200 单位的单位的青霉
3、素酶青霉素酶溶液溶液1ml,在在37灭活灭活1小时后，取灭菌滤纸片，分别用上述溶小时后，取灭菌滤纸片，分别用上述溶液浸湿后，用滤纸吸去多余的液体，液浸湿后，用滤纸吸去多余的液体，置置摊布摊布金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌CMCC(B)26003的的培养基培养基上，在上，在37培养培养约约16小时后小时后均无抑均无抑菌作用菌作用，而用，而用同一方法同一方法检查检查未经未经青霉素酶青霉素酶灭活的溶液均有抑菌灭活的溶液均有抑菌作用作用。（二）杂质检查（二）杂质检查 1 1影响产品影响产品稳定性稳定性的指标（酸碱度、的指标（酸碱度、水分）水分）2 2控制有机和无机杂质的指标（澄清度、残留溶剂）控制有机和
4、无机杂质的指标（澄清度、残留溶剂）3 3与与临床安全临床安全性密切相关的指标（性密切相关的指标（异常毒性、热异常毒性、热 原、细菌内毒素、降压物质等）原、细菌内毒素、降压物质等）4 4其他指标（如其他指标（如内酰胺类内酰胺类“聚合物聚合物”的检查）的检查）（三）含量测定或效价测定（三）含量测定或效价测定 1 1微生物检定法微生物检定法 以抗生素以抗生素对微生物的杀对微生物的杀伤或抑制程度伤或抑制程度为指标来衡量抗生素效价为指标来衡量抗生素效价（potencypotency）的一种方法。的一种方法。其测定方法有管碟法、浊度法。其测定方法有管碟法、浊度法。对分子结构复杂、多组分的抗生素，仍为对分子
5、结构复杂、多组分的抗生素，仍为首选方法。首选方法。优点优点1 1、与临床应用一致、与临床应用一致2 2、灵敏度高、灵敏度高3 3、适应范围广、适应范围广缺点缺点1 1、操作繁琐、操作繁琐2 2、培养时间长、培养时间长3 3、测定误差大、测定误差大2 2理化方法理化方法 根据抗生素的分子根据抗生素的分子结构特点结构特点，利用，利用其特有的化学或物理化学性质及反应而进行的。其特有的化学或物理化学性质及反应而进行的。优点优点1 1、准确度高、准确度高2 2、简单、快速、简单、快速1 1、不一定代表生物效价、不一定代表生物效价缺点缺点2 2、易受杂质干扰、易受杂质干扰对所选对所选理化方法理化方法的要求
6、：的要求：正确、专属、省时、用样少、试剂易得、操作正确、专属、省时、用样少、试剂易得、操作简单、结果与简单、结果与生物效价吻合，如生物效价吻合，如HPLC 法。法。3 3、抗生素活性表示方法、抗生素活性表示方法 抗生素的活性以抗生素的活性以效价单位效价单位表示，即指表示，即指每毫升或每毫克中每毫升或每毫克中含含有某种抗生素的有某种抗生素的有效成分有效成分的多少。用单位（的多少。用单位（u u）表示或微克表示或微克（g g）表示。表示。如如1mg1mg青霉素钠为青霉素钠为16701670单位，单位，1mg青霉素钾为：青霉素钾为：1M青霉素钠青霉素钠/M青霉素钾青霉素钾1670=1598单位单位三
7、、抗生素分类l 内酰胺类内酰胺类 l 氨基糖苷类氨基糖苷类 l 四环素类四环素类 l 氯霉素类氯霉素类l 大环内酯类大环内酯类 l 其他类其他类l包括青霉素族和头孢菌素族l化学结构：NSCH3CH3COOHOHN1234567RCO母核（6-氨基青霉烷酸）青霉素类青霉素类7654321NONHSCH2R1COOH母核（7-氨基头孢菌烷酸）RCO头孢菌素类头孢菌素类6-APA7-ACA1432435126CONSOHNCOOHCH3CH3CH2青霉素青霉素（青霉素（青霉素G、苄青霉素）苄青霉素）NH2CONSOHNCOOHCH3CH3CH2氨苄西林氨苄西林（氨苄青霉素）（氨苄青霉素）NH2CON
8、SOHNCOOHCH3CH3HOCHC2H52NCH2CH2OOCNSOHNCOOHCH3CH3OCCH2NH2普鲁卡因青霉素普鲁卡因青霉素NONHSCH3COOHOCNH2CH2HO头孢羟氨苄头孢羟氨苄NONHSCH3COOHOCNH2CH21)青霉素和头孢菌素分子中都有一个游离羧基和酰胺侧链。2)氢化噻唑环或氢化噻嗪环与-内酰胺并合的杂环，分别构成二者的母体：6-APA、7-ACA。3)青霉素分子中含有三个手性碳原子(C3、C5、C6)，头孢菌素分子中含有两个手性碳原子(C6、C7)。l分子中游离羧基具有相当强的酸性，能与无机碱或某些有机碱形成盐。l其碱金属盐易溶于水，而有机碱盐难溶于水，
9、易溶于甲醇等有机溶剂。NSOHNCOOKCH3CH3OCCH2C2H5 2NCH2CH2OOCNSOHNCOOHCH3CH3OCCH2NH2l青霉素族分子中含有三个手性碳原子，头孢菌素族含有两个手性碳原子，故都具有旋光性。l根据此性质，可用于定性和定量分析。NSO123456787654321NOS 性质3：紫外吸收特性NSO2 2、头孢菌素类头孢菌素类 母核母核有共轭体系有共轭体系 1 1、青霉素青霉素类类 母核无明显母核无明显UVUV 多数有多数有苯环取代基苯环取代基 NOS不稳定性不稳定性l 干燥干燥条件下青霉素盐条件下青霉素盐稳定稳定。青霉素。青霉素水溶液在水溶液在lpH6-6.8pH
10、6-6.8时较稳定时较稳定。l -内酰胺环内酰胺环是该类抗生素结构最不稳定的部分。是该类抗生素结构最不稳定的部分。四元环张力大四元环张力大 酰胺键易水解酰胺键易水解不稳定不稳定性因素性因素（某些金属离子）（某些金属离子）（温度）（温度）失失效效降降解解青青霉霉素素类类酸酸、碱碱、青青霉霉素素酶酶某些氧化剂某些氧化剂、羟胺、羟胺例例青霉素的降解反应青霉素的降解反应青青霉霉素素青霉噻唑酸青霉噻唑酸H2O/OH青霉素酶青霉素酶青霉酸青霉酸H2OpH2100青霉噻唑酰基青霉噻唑酰基羟胺酸羟胺酸NH2OH青霉烯酸青霉烯酸pH4青霉胺青霉胺CO2青霉醛青霉醛HgCl2例例l1羟肟酸铁反应 青霉素及头孢菌素
11、在碱性中与羟胺作用，-内酰胺环破裂生成羟肟酸；在稀酸中与高铁离子呈色。+鉴别鉴别 取本品取本品1010mgmg，加水加水2 2mlml与与盐酸羟胺盐酸羟胺溶液溶液 取取34.8%34.8%盐酸羟胺溶液盐酸羟胺溶液1 1份，醋酸钠份，醋酸钠-氢氧化钠氢氧化钠溶液溶液1 1份，乙醇份，乙醇4 4份份33mlml，振摇溶解后，放置振摇溶解后，放置5 5minmin，加加酸酸性硫酸铁铵性硫酸铁铵试液试液1 1mlml，摇匀，显红棕色。摇匀，显红棕色。l（1 1）某些具有）某些具有-氨基氨基的本类药物，如氨的本类药物，如氨苄西林，遇苄西林，遇茚三酮茚三酮即显即显蓝紫色蓝紫色。NH2CONSOHNCOOH
12、CH3CH3CH2蓝蓝紫紫色色氨氨基基茚茚三三酮酮 -氨基、伯胺氨基、伯胺某些羟基胺类某些羟基胺类酮式酮式烯醇式烯醇式茚三酮茚三酮茚三酮茚三酮缩合缩合蓝紫色蓝紫色+H2OCNCH2RC OH2RCHH2NCOOH2OHCCOCOCOHNH2CCOCOCOCOHCNCCOCOCOCOHCHRNCCOCOCO（2 2）双缩脲反应）双缩脲反应-内酰胺类内酰胺类 CONH（开环分解）（开环分解）紫红色紫红色-内酰胺类内酰胺类碱性碱性 铜溶液铜溶液b bl 橙橙黄黄色色重重氮氮苯苯磺磺酸酸 OHHC（偶合）（偶合）SNOHCONHCHCONHH5C2OONNOCOOHCH2SNNNNCH3NClNNaO
13、3S OH（偶合）（偶合）NNNNCH3SNOHCONHCHCONHH5C2OONNOCOOHCH2SNNNaO3S头孢哌酮l 头孢菌素能与头孢菌素能与硫酸硫酸-硝酸硝酸反应后呈色。此显色反应后呈色。此显色反应可反应可区别某些头孢菌素族区别某些头孢菌素族抗生素，因此被一些抗生素，因此被一些国家药典采用供鉴别。国家药典采用供鉴别。l 如中国药典如中国药典(1995(1995年版年版)收载的头孢噻吩钠呈收载的头孢噻吩钠呈红棕色；头孢氨苄呈黄色；头孢噻肟钠呈亮黄色。红棕色；头孢氨苄呈黄色；头孢噻肟钠呈亮黄色。l 中国药典中国药典(1995(1995年版年版)采用本法鉴别。如阿莫西林采用本法鉴别。如阿
14、莫西林林加林加变色酸变色酸-硫酸硫酸试剂混合后，于试剂混合后，于150150加热加热2-32-3minmin，因因分解出分解出甲醛甲醛与变色酸缩合与变色酸缩合而呈深褐色。而呈深褐色。（二）（二）沉淀反应沉淀反应 白白青青霉霉素素青青霉霉素素钠钠青青霉霉素素钾钾 H溶于过量溶于过量HCl或或有机溶剂有机溶剂例例 青霉素钠青霉素钠 青霉素钾青霉素钾 Ch.P（2000）【鉴别鉴别】（2）取本品约）取本品约0.1g，加水加水5ml溶解溶解后后，加稀盐酸，加稀盐酸2滴，即生成白色沉淀；此沉淀能在乙滴，即生成白色沉淀；此沉淀能在乙醇、醋酸戊酯、氯仿、乙醚或过量的盐酸中溶解醇、醋酸戊酯、氯仿、乙醚或过量的
15、盐酸中溶解.2.重氮化重氮化-偶合反应偶合反应芳香第一胺类反应芳香第一胺类反应普鲁卡因普鲁卡因青霉素青霉素重氮化重氮化红色红色 HClNaNO2普普鲁鲁卡卡因因青青霉霉素素碱性碱性-萘酚萘酚（偶合）（偶合）例例 普鲁卡因青霉素普鲁卡因青霉素 Ch.P（2000）【鉴别鉴别】（3）本品显芳香第一胺类的鉴别反）本品显芳香第一胺类的鉴别反应（附录应（附录）。）。K+火焰火焰 紫色紫色+0.1%四苯硼钠四苯硼钠+HAc白白（三）钾、钠离子的焰色反应（三）钾、钠离子的焰色反应Na+火焰火焰 鲜黄色鲜黄色+醋酸氧铀锌醋酸氧铀锌例例 青霉素钠青霉素钠 Ch.P（2005）【鉴别鉴别】（4）本品显钠盐的火焰反
16、应（附录）本品显钠盐的火焰反应（附录 ）。）。例例 青霉素钾青霉素钾 Ch.P（2005）【鉴别鉴别】（3）本品显钾盐的火焰反应（附录）本品显钾盐的火焰反应（附录 ）。）。头孢氨苄头孢氨苄 maxmax=262nm=262nm青霉素青霉素V V钠钠 A A280nm280nm/A/A264nm264nm =1.30=1.301.501.50A A,E Emin,min,max max,%cmcm1 11 1光谱图光谱图2、紫外分光光度法、紫外分光光度法(UV)（四）光谱法（四）光谱法1 1、红外吸收光谱法、红外吸收光谱法（五）色谱法（五）色谱法1 1、TLCTLC法法对照品对照法对照品对照法2
17、 2、HPLCHPLC法法和斑点颜色和斑点颜色比较比较供试品供试品对照品对照品相同条件相同条件fRRt比较比较供试品供试品对照品对照品相同条件相同条件三、特殊杂质的检查三、特殊杂质的检查 本类抗生素的特殊杂质主要有本类抗生素的特殊杂质主要有高分子聚合高分子聚合物、有关物质、异构体物、有关物质、异构体等，一般采用等，一般采用HPLCHPLC法法控制其限量，也有采用测定控制其限量，也有采用测定杂质的吸收度杂质的吸收度来来控制杂质量的。控制杂质量的。四、含量测定四、含量测定（一）电位配位滴定法（一）电位配位滴定法汞量法汞量法*内酰胺类内酰胺类不直接不直接与汞盐反应与汞盐反应*内酰胺类内酰胺类水解产物
18、水解产物可与汞盐可与汞盐 发生定量反应发生定量反应1.原理原理青霉胺青霉胺青霉噻唑酸青霉噻唑酸青霉素类青霉素类 OHOH水解水解水解水解青霉胺络汞青霉胺络汞 2Hg6.4pHCh.P（2000）青霉素钾青霉素钾青霉素钠青霉素钠苯唑西林钠苯唑西林钠普鲁卡因青霉素普鲁卡因青霉素氯唑西林钠氯唑西林钠CH2COHNNOSCOONaCH3CH3NaOHCH2COHNCNSCOONaCH3CH3ONaOpH4.6脱羧脱羧CH2CONHCH2NSCOOHCH3CH3CH3CCHCH3SH NH2COOH6.4pHHg(NO3)2pH4.6HgRS2）（2:1突跃突跃11:1突跃突跃2CH3CCHCH3SNH
19、2COOHgHg(NO3)2pH4.6青霉胺络汞青霉胺络汞 青霉胺与硝酸汞发生络合反应。先按青霉胺与硝酸汞发生络合反应。先按2分子青分子青霉胺与霉胺与1分子汞离子的比例络合，发生第一次滴定分子汞离子的比例络合，发生第一次滴定突跃，但突跃范围很小，变化比较平缓，不宜用突跃，但突跃范围很小，变化比较平缓，不宜用于做终点，于做终点，继续用硝酸汞滴定时，青霉胺分子与继续用硝酸汞滴定时，青霉胺分子与汞离子按汞离子按1:1的比例络合，生成稳定的络合物的比例络合，生成稳定的络合物青霉胺络汞，发生第二次滴定突跃。青霉胺络汞，发生第二次滴定突跃。其突跃范围其突跃范围较大，变化较急剧，宜于确定终点。较大，变化较急
20、剧，宜于确定终点。2.方法方法 总总总总样样V233NOHgHNONaOH醋酸盐缓冲液醋酸盐缓冲液滴定滴定水解水解pH4.6 降降醋醋酸酸盐盐缓缓冲冲液液降降样样V23NOHgpH4.6滴定滴定3.讨论讨论（1）电位法指示终点，以第二次滴定）电位法指示终点，以第二次滴定 突跃为终点突跃为终点 反应摩尔比反应摩尔比1:1 （2）空白试验）空白试验 用未降解样品测定用未降解样品测定（3）优点）优点 不需标准品不需标准品例例 青霉素钠青霉素钠 Ch.P（2000）【含量测定含量测定】取本品约取本品约50mg，精密称定，加精密称定，加水水5ml溶解后，加溶解后，加1mol/L氢氧化钠溶液氢氧化钠溶液5
21、ml，摇匀摇匀,放置放置15分钟，加分钟，加1mol/L硝酸溶液硝酸溶液5ml，醋酸盐缓醋酸盐缓冲液冲液（pH4.6）20ml及水及水20ml，摇匀，照电位滴摇匀，照电位滴定法（附录定法（附录 A）,用铂电极为指示电极，汞用铂电极为指示电极，汞-硫硫酸亚汞电极为参比电极，在酸亚汞电极为参比电极，在3540，用硝酸汞滴，用硝酸汞滴定液（定液（0.02mol/L）缓慢滴定，（控制滴定过程约缓慢滴定，（控制滴定过程约为为15分钟），不计第一个等当点，计算第二个等分钟），不计第一个等当点，计算第二个等当点时消耗滴定液的量。当点时消耗滴定液的量。每每1ml硝酸汞滴定液（硝酸汞滴定液（0.02mol/L）
22、相当于相当于7.128mg的总青霉素（按的总青霉素（按C16H17N2NaO4S计算）。计算）。另取本品约另取本品约0.5g，精密称定，加水与上述醋精密称定，加水与上述醋酸盐缓冲液各酸盐缓冲液各25ml，振摇使完全溶解，在室温下振摇使完全溶解，在室温下,立即用硝酸汞滴定液（立即用硝酸汞滴定液（0.02mol/L）滴定，滴定终滴定，滴定终点判断方法同上。每点判断方法同上。每1ml硝酸汞滴定液（硝酸汞滴定液（0.02mol/L）相当于相当于7.128mg的降解物（按的降解物（按C16H17N2NaO4S计算）。每计算）。每1mg的的C16H17N2NaO4S相当于相当于1670青霉青霉素单位。素单
23、位。（二）（二）RP-HPLC法法特点特点 快速快速 高效高效 灵敏度高灵敏度高 专属性强专属性强 重现性好重现性好 一法多用一法多用(鉴别、检查、含测鉴别、检查、含测)Ch.P第三节第三节 氨基糖苷类抗生素氨基糖苷类抗生素苷苷苷苷元元糖糖缩缩合合 氨氨基基糖糖苷苷苷苷元元氨氨基基糖糖缩缩合合 链霉素链霉素 双氢链霉素双氢链霉素新霉素新霉素 卡那霉素卡那霉素庆大霉素庆大霉素 巴龙霉素巴龙霉素链霉素链霉素链霉胍链霉胍+链霉糖链霉糖+N-甲基甲基-L-葡萄糖胺葡萄糖胺 苷元苷元链霉双糖胺链霉双糖胺NH CNHNH2HOOHOHNHCH2NNHOOCH3OHCHOOOCH2OHOHOHNHCH3链霉
24、糖链霉糖N-甲基甲基-L-葡萄糖胺葡萄糖胺链霉胍链霉胍庆大霉素庆大霉素 糖糖 苷元苷元绛红糖胺绛红糖胺 +脱氧链霉胺脱氧链霉胺 +加洛糖胺加洛糖胺 糖糖 ROC R1R2HNNH2OOHH2NNH2OOOHNHCH3OHCH3绛红糖胺绛红糖胺紫素胺紫素胺2-脱氧链霉胺脱氧链霉胺加洛糖胺加洛糖胺N-甲基甲基-3-去氧去氧-4-甲基戊糖胺甲基戊糖胺庆大霉素庆大霉素C复合物复合物 庆大霉素庆大霉素C1 R=H R1、R2=CH3 庆大霉素庆大霉素C2 R=R2=H R1=CH3 庆大霉素庆大霉素C1a R、R1、R2=H 庆大霉素庆大霉素C2a R=CH3 R1=R2=H 庆大霉素庆大霉素C2b R
25、=R1=H R2=CH3一、一、结构与性质结构与性质多与多与硫酸硫酸成盐成盐链霉素链霉素 3个个庆大霉素庆大霉素 5个个碱性中心碱性中心（一）碱性（一）碱性水溶性水溶性（二）溶解性（二）溶解性（四）（四）UV（三）苷的水解与稳定性（三）苷的水解与稳定性链霉素链霉素 pH57.5庆大霉素庆大霉素 pH212 稳定稳定链霉素在链霉素在230nm处有吸收，处有吸收，庆大霉素、奈替米星无吸收庆大霉素、奈替米星无吸收NH CNHNH2HOOHOHNHCH2NNHOOCH3OHCHOOOCH2OHOHOHNHCH3坂口反应坂口反应N-甲基葡萄甲基葡萄糖胺反应糖胺反应麦芽酚反应麦芽酚反应二、二、鉴别试验鉴别
26、试验 茚三酮反应茚三酮反应（一）（一）蓝蓝紫紫色色庆庆大大霉霉素素链链霉霉素素茚茚三三酮酮羟基胺结构羟基胺结构硫酸庆大霉素鉴别硫酸庆大霉素鉴别 取本品约取本品约5mg，加水，加水1ml 溶解后，加溶解后，加0.1 茚三酮的茚三酮的水饱和正丁醇溶液水饱和正丁醇溶液1ml 与吡啶与吡啶 0.5ml，在水浴中加热，在水浴中加热5 分分钟，即显钟，即显紫蓝色紫蓝色。链霉胍特有反应链霉胍特有反应橙橙红红羟羟基基喹喹啉啉链链霉霉胍胍链链霉霉素素次次溴溴酸酸钠钠 8OH（或或-萘酚萘酚）NOH8-8-羟基喹啉羟基喹啉坂口反应坂口反应（二（二）-萘酚萘酚OHONBrR NH CO NH 麦芽酚反应麦芽酚反应（
27、三）（三）链霉糖特征反应链霉糖特征反应链链霉霉糖糖链链霉霉素素 OH麦麦芽芽酚酚紫紫红红色色 3FeH+分子重排扩环分子重排扩环NH C NH2HOOHOHNHCH2NOOCH3OHCHOOOCH2OHOHOHNHNHNHCH3H2O NaOHOOOHCH3OOCH3Fe3+H+OFe33+/紫红紫红麦芽酚麦芽酚N-甲基葡萄糖胺反应甲基葡萄糖胺反应（四（四）甲甲基基葡葡萄萄糖糖胺胺庆庆大大霉霉素素链链霉霉素素水水解解 N 乙酰丙酮乙酰丙酮 OH-吡咯衍生物吡咯衍生物 对二甲氨基苯甲醛对二甲氨基苯甲醛H+红色红色（Elson-Morgan反应）反应）H+（五）（五）24SO反应反应白白 BaSO
28、SOBaH+光谱法光谱法（七）（七）庆大霉素无庆大霉素无UV吸收吸收nmmax 链霉素链霉素色谱法色谱法（六）（六）三、三、杂质检查杂质检查链霉素杂质链霉素杂质链霉素链霉素B（甘露糖链霉素）甘露糖链霉素）2.方法方法 TLC中的对照品法中的对照品法 （BP）1.来源来源 反应中间体反应中间体四、四、含量测定含量测定链霉素、庆大霉素链霉素、庆大霉素微生物检定法微生物检定法 本法系利用抗生素在本法系利用抗生素在琼脂培养基内的扩散作琼脂培养基内的扩散作用量反应平行线原理用量反应平行线原理的设计，比较标准品与供试品的设计，比较标准品与供试品两者对接种的试验菌产生两者对接种的试验菌产生抑菌圈的大小抑菌圈
29、的大小，以测定供，以测定供试品效价的一种方法。试品效价的一种方法。l离子交换色谱法离子交换色谱法l离子对色谱法离子对色谱法lRP-HPLC法法第四节第四节 四环素类抗生素四环素类抗生素2CH3NRR3HOHCONH2OOHOHOOHR2R11234567891011122CH3NHOHCONH2OOHOHOOHCH3HO2CH3NHOHCONH2OOHOHOOHCH3HOCl2CH3NHOHCONH2OOHOHOOHCH3HOOH氧四环素氧四环素2CH3NHOHCONH2OOHOHOOHCH3OH脱氧土霉素脱氧土霉素2CH3NRR3HOHCONH2OOHOHOOHR2R1一、一、结构与性质结构
30、与性质两性两性（一）（一）酚羟基、烯醇型羟基酚羟基、烯醇型羟基 弱酸性弱酸性二甲胺基二甲胺基 弱碱性弱碱性1.与酸、碱均能成盐，临床多用与酸、碱均能成盐，临床多用盐酸盐盐酸盐2.强酸或强碱中溶解度强酸或强碱中溶解度 吸湿性吸湿性（二）（二）多含结晶水多含结晶水生成有色配位化合物生成有色配位化合物Ca2+Mg2+Fe3+Al3+旋光性、旋光性、UV、荧光、荧光（三）（三）与金属离子络合与金属离子络合（四）（四）pH3 7.5 荧光荧光 HOHOCaOOOOHOHOO不稳定性不稳定性（五）（五）（1）差向异构化差向异构化差差向向金金霉霉素素差差向向四四环环素素金金霉霉素素四四环环素素 pH淡黄淡黄
31、黑黑蓝色荧光蓝色荧光2CH3NHOHCONH2OOHOHOOHR2R1HO（土霉素、多西环素（土霉素、多西环素不易不易发生差向异构化）发生差向异构化）（2）降解反应降解反应（1）酸性下降解）酸性下降解脱水金霉素脱水金霉素脱水四环素脱水四环素金霉素金霉素四环素四环素 pHmax=445nmmax=435nm橙黄色橙黄色2CH3NHOHCONH2OOHOHOOHCH3HON CH3 2HOHCONH2OOHOOHCH3OH脱水四环素脱水四环素2CH3NHOHCONH2OOHOHOOHCH3HOpH26pH26TCOHCONH2OOHOHOOHCH3HCH32NHOETCN CH3 2HOHCONH
32、2OOHOOHCH3OHATCN2CH3OHCONH2OOHOHOHOCH3HEATCpH2pH2（3）碱性下降解）碱性下降解异四环素异四环素四环素四环素 OH（荧光）（荧光）HOHCONH2OOHOHOOHCH3ON CH3 2二、二、鉴别试验鉴别试验 浓浓H2SO4反应反应（一）（一）黄色黄色朱红色朱红色绿绿蓝蓝深紫色深紫色盐酸多西环素盐酸多西环素盐酸土霉素盐酸土霉素盐酸金霉素盐酸金霉素盐酸四环素盐酸四环素 SOH（二）三氯化铁反应（二）三氯化铁反应（三）荧光法（三）荧光法土土霉霉素素金金霉霉素素四四环环素素绿绿色色荧荧光光蓝蓝色色荧荧光光黄黄色色荧荧光光 OHUV绿色荧光绿色荧光H+UV
33、TLC法法（四）（四）HPLC法法（五）（五）EDTA 克服痕量金属造成的克服痕量金属造成的 拖尾现象拖尾现象（六）（六）IR 法法硅藻土做载体硅藻土做载体三、三、杂质检查杂质检查有关物质有关物质（一）（一）HPLC法法自身稀释对照法自身稀释对照法盐酸四环素盐酸四环素吸收度吸收度（二）（二）nmmax、盐酸四环素盐酸四环素杂质吸收度杂质吸收度EATCATC.Anm、控控制制 异四环素异四环素控制控制 .Anm 注射用注射用四、四、含量测定含量测定HPLC法（外标法）法（外标法）下列哪个药物会发生羟肟酸铁反应下列哪个药物会发生羟肟酸铁反应 A.青霉素青霉素 B.庆大霉素庆大霉素 C.红霉素红霉素 D.链霉素链霉素 E.维生素维生素C 属于属于b b-内酰胺类的抗生素药物有内酰胺类的抗生素药物有 A.青霉素青霉素 B.红霉素红霉素 C.头孢菌素头孢菌素 D.庆大霉素庆大霉素 E.四环素四环素
