1、骨髓检查骨髓检查Bone Marrow Examination.Where?.血常规检查：RBC 1.81012/L；WBC 2.1109/L；PLT 45109/LHow?.Why?.骨髓检查将带给你答案！骨髓检查将带给你答案！.骨髓检查骨髓检查 细胞形态学检查细胞形态学检查 造血干细胞培养造血干细胞培养 骨髓细胞学检查骨髓细胞学检查 细胞抗原检查细胞抗原检查 遗传学分析等遗传学分析等骨髓检查骨髓检查 骨髓活检骨髓活检形态学检查形态学检查细胞化学染色细胞化学染色.概述（概述（Introduction）骨髓骨髓:人体的造血组织，位于身体的许多骨骼内人体的造血组织，位于身体的许多骨骼内,是红细胞
2、，粒细胞和血小板生成的唯一场所，是红细胞，粒细胞和血小板生成的唯一场所，同时也产生淋巴细胞和单核细胞。同时也产生淋巴细胞和单核细胞。.血细胞生成与发育血细胞生成与发育T 淋淋 巴巴 系系祖祖 细细 胞胞B 淋淋 巴巴 系系祖祖 细细 胞胞淋淋 巴巴 系系 干干 细细 胞胞红红 系系祖祖 细细 胞胞粒粒 单单 系系祖祖 细细 胞胞嗜嗜 酸酸 粒粒祖祖 细细 胞胞嗜嗜 碱碱 粒粒祖祖 细细 胞胞巨巨 核核 系系祖祖 细细 胞胞骨骨 髓髓 系系 干干 细细 胞胞全全 能能 干干 细细 胞胞T o tip o ten tia l S tem C ellT S C.血细胞的分化、发育、成熟具有一定的血细
3、胞的分化、发育、成熟具有一定的规律性，我们在辨认细胞时需要掌握下列几规律性，我们在辨认细胞时需要掌握下列几个方面：个方面：胞体胞体 胞质胞质 量、颜色、内含物量、颜色、内含物 胞核胞核 大小、形状、结构、颜色、核膜、大小、形状、结构、颜色、核膜、核仁核仁 核质比核质比.胞体胞体：血细胞随着分化发育其体积逐渐变小血细胞随着分化发育其体积逐渐变小 （除外巨核细胞系；早幼粒大于原粒）（除外巨核细胞系；早幼粒大于原粒）早期红细胞早期红细胞成熟红细胞成熟红细胞.胞质胞质(浆浆):):血细胞随着分化发育其胞质血细胞随着分化发育其胞质 量量 由少到多由少到多 （淋巴除外）（淋巴除外）色色 由深蓝到浅蓝或灰（
4、红）由深蓝到浅蓝或灰（红）颗粒颗粒 由无到有由无到有 （除外红细胞系（除外红细胞系,浆细胞一般浆细胞一般 无颗粒，小淋巴细胞可没有无颗粒，小淋巴细胞可没有 颗粒。）颗粒。）原始细胞原始细胞幼稚细胞幼稚细胞成熟细胞成熟细胞.胞核胞核:血细胞随着分化发育其胞核血细胞随着分化发育其胞核 体积体积由大到小由大到小 （巨核胞核由小到大）（巨核胞核由小到大）形态形态由圆到不规则（红系核型规则而最终消失；由圆到不规则（红系核型规则而最终消失；淋巴细胞的核型改变不明显）淋巴细胞的核型改变不明显）染色质染色质由疏松细致到紧密粗糙由疏松细致到紧密粗糙 颜色颜色由染淡紫色到深紫色由染淡紫色到深紫色成熟细胞成熟细胞幼
5、稚细胞幼稚细胞原始细胞原始细胞.核仁核仁:血细胞随着分化发育其胞核内的核仁血细胞随着分化发育其胞核内的核仁 从有到无。从有到无。（除外淋巴系、单核系，一直有）（除外淋巴系、单核系，一直有）原始细胞原始细胞早期幼稚细胞早期幼稚细胞中晚期幼稚细胞中晚期幼稚细胞核仁核仁核仁核仁.核质比：核质比：由大到小，即核大质少到核小质多由大到小，即核大质少到核小质多 （除外巨核系）（除外巨核系）.一、骨髓细胞形态学检查临床应用一、骨髓细胞形态学检查临床应用1.用于造血系统疾病的诊断、辅助诊断及病情用于造血系统疾病的诊断、辅助诊断及病情监控、疗效观察监控、疗效观察如：白血病、再障、巨幼细胞贫血、血小板减如：白血病
6、、再障、巨幼细胞贫血、血小板减少性紫癜的诊断；缺铁性贫血的辅助诊断少性紫癜的诊断；缺铁性贫血的辅助诊断2.用于某些非造血系统疾病的诊断及辅助诊断用于某些非造血系统疾病的诊断及辅助诊断如：原虫感染、代谢性疾病、转移性癌肿。如：原虫感染、代谢性疾病、转移性癌肿。.n三、适应症、禁忌症，标本采集及送检三、适应症、禁忌症，标本采集及送检（一）（一）.n（二）标本采集部位及方法：（二）标本采集部位及方法：骨髓穿刺术骨髓穿刺术 常用取材部位：常用取材部位：成人：髂前、后上棘成人：髂前、后上棘（较易掌握分寸）（较易掌握分寸）；胸骨胸骨（阳性率高，有一定危险性）（阳性率高，有一定危险性）体位：体位：胸骨及髂前
7、上棘穿刺时取仰卧位；髂后上胸骨及髂前上棘穿刺时取仰卧位；髂后上棘穿刺时取侧卧位。棘穿刺时取侧卧位。采集标本量采集标本量:0.2ml以下以下,如需同时作细菌培养等如需同时作细菌培养等其它检查，应先抽骨髓液涂片。其它检查，应先抽骨髓液涂片。.三、骨髓检查申请单的填写（三、骨髓检查申请单的填写（详细详细）n各医院都有其自己设计印刷的骨髓检查申各医院都有其自己设计印刷的骨髓检查申请单，格式大同小异，基本包括以下内容：请单，格式大同小异，基本包括以下内容：n1.病人基本情况病人基本情况 姓名、性别、年龄、职业、姓名、性别、年龄、职业、门诊号、住院号、通讯地址或工作单位、门诊号、住院号、通讯地址或工作单位
8、、就诊或住院的科室、病室。就诊或住院的科室、病室。.n2.2.标本采集情况标本采集情况（1 1）骨髓来源：注明髂前（左、右）、髂后）骨髓来源：注明髂前（左、右）、髂后 （左、右）、胸骨、脊突；（左、右）、胸骨、脊突；（2 2）取材是否顺利；）取材是否顺利；（3 3）其它取材部位，第几次送检，上次标本编）其它取材部位，第几次送检，上次标本编 号等。号等。n3.3.临床诊断及送检目的。临床诊断及送检目的。.n4.主要症状及病史；主要体征：包括皮肤、主要症状及病史；主要体征：包括皮肤、淋巴结、肝、脾，其它。淋巴结、肝、脾，其它。n5.5.主要实验室检查记录，包括血液学方面及主要实验室检查记录，包括血
9、液学方面及 其他与疾病有关的各类检查结果的详细数其他与疾病有关的各类检查结果的详细数 据。据。n6.6.取材时间、送检时间、送检医师签名。取材时间、送检时间、送检医师签名。.四、骨髓细胞形态学检查程序四、骨髓细胞形态学检查程序n染色；低倍镜检查；油镜检查；（细胞化染色；低倍镜检查；油镜检查；（细胞化学染色）；计算、结合临床资料总结分析学染色）；计算、结合临床资料总结分析得出诊断意见及建议。得出诊断意见及建议。.低倍镜检查低倍镜检查1.1.观察骨髓涂片的取材、涂片及染色情况观察骨髓涂片的取材、涂片及染色情况 取材满意的标准：骨髓小粒、脂肪滴、骨取材满意的标准：骨髓小粒、脂肪滴、骨髓特有细胞髓特有
10、细胞2.2.判断骨髓增生程度判断骨髓增生程度共分五级；按照共分五级；按照有核细胞有核细胞与与成熟红细胞成熟红细胞的比的比.骨髓增生程度分级及临床意义骨髓增生程度分级及临床意义分级有核细胞数成熟红细胞常见情况 极度活跃1:1白血病和某些骨髓增生性疾病 明显活跃1:10骨髓增生性疾病、增生性贫血、ITP、脾亢、感染。某些儿童或青少年 增生活跃1:20正常人，增生性贫血或白血病化疗后 增生减低1:50再障、骨髓纤维化，急性造血停滞。偶见于老年人 极度减低1:200再生障碍性贫血、骨髓坏死等.骨髓增生程度分级(高倍镜）极度减低15/HP增生减低520/HP增生活跃2050/HP明显活跃50100/HP
11、极度活跃100/HP.重要概念：重要概念：粒红比值：粒红比值：粒细胞的百分率总和与有粒细胞的百分率总和与有核红细胞百分率总和之比。核红细胞百分率总和之比。（M:EM:E或或G:EG:E）正常值：正常值：2-4:12-4:1油镜检查：油镜检查：1 1、有核细胞分类计数并观察有无形态异常、有核细胞分类计数并观察有无形态异常2 2、粒、粒/红比值计算红比值计算.正常骨髓象正常骨髓象 n0.0.取材满意、骨髓小粒丰富，图片及染色良取材满意、骨髓小粒丰富，图片及染色良好。增生活跃好。增生活跃n1.1.粒系增生活跃，占有核细胞的粒系增生活跃，占有核细胞的40406060，各阶段细胞比例适当，其中原始粒细胞
12、各阶段细胞比例适当，其中原始粒细胞2%2%，早幼粒细胞早幼粒细胞5%5%，中、晚幼粒细胞约，中、晚幼粒细胞约15%15%，杆，杆状核粒细胞多于分叶核粒细胞。嗜酸性粒细状核粒细胞多于分叶核粒细胞。嗜酸性粒细胞胞5%5%，嗜碱性粒细胞，嗜碱性粒细胞1%1%。各阶段细胞形态。各阶段细胞形态无明显异常。无明显异常。.骨髓取材满意的指标*1.抽吸骨髓时病人有特殊的酸痛感。图2.骨髓液可见骨髓小粒和脂肪滴。图3.镜下可见骨髓特有细胞如:巨核细胞、浆细胞、成骨细胞等。4.中性杆状核/分叶核高于外周血中此比值。（二）骨髓穿刺方法.干抽干抽(dry tap)*指非技术原因，多部位、多次均抽不出指非技术原因，多部
13、位、多次均抽不出骨髓液而言。常见于：骨髓液而言。常见于：骨髓纤维化；骨髓纤维化；骨髓异常增生致骨髓填塞的白血病、真红骨髓异常增生致骨髓填塞的白血病、真红等。等。.n2.2.红系增生活跃，占有核细胞的红系增生活跃，占有核细胞的2020左右，左右，各阶段细胞比例适当，其中原红胞：各阶段细胞比例适当，其中原红胞：2%2%，早幼红细胞早幼红细胞55，中、晚幼红细胞各约为，中、晚幼红细胞各约为1010，细胞形态无明异常。成熟红细胸大小、，细胞形态无明异常。成熟红细胸大小、形态及染色大致正常。形态及染色大致正常。n粒粒/红约红约2-4:12-4:1。n3.3.淋巴细胞占有核细胞淋巴细胞占有核细胞2020(
14、小儿可达小儿可达4040)，单核细胞及浆细胞各，单核细胞及浆细胞各44，大多为成，大多为成熟阶段细胞，且细胞形态无异常。熟阶段细胞，且细胞形态无异常。.正常骨髓象（低倍镜）.常用的化学染色常用的化学染色.概概 念念 细胞化学染色是以细胞化学染色是以细胞形态学细胞形态学为基础，为基础，结合运用结合运用化学反应化学反应的原理对血细胞内的各的原理对血细胞内的各种种化学物质化学物质（糖类、蛋白质、脂类、酶类、（糖类、蛋白质、脂类、酶类、铁、核酸等）作铁、核酸等）作定性、定位、半定量定性、定位、半定量分析分析的方法。的方法。.铁染色铁染色n细胞外铁细胞外铁：骨髓小粒中贮存在单核：骨髓小粒中贮存在单核吞吞
15、噬细胞系统内的铁（幼稚红细胞之外的铁）噬细胞系统内的铁（幼稚红细胞之外的铁）n细胞内铁细胞内铁:幼稚红细胞以内的铁，细胞核周幼稚红细胞以内的铁，细胞核周围围正常值：细胞外铁：正常值：细胞外铁：1+-2+铁粒幼红细胞：铁粒幼红细胞：12%-44%.铁染色（铁染色（iron stainingiron staining）用于小细胞低色素性贫血的鉴别诊用于小细胞低色素性贫血的鉴别诊断断缺铁性贫血：缺铁性贫血：内、外铁均减少内、外铁均减少铁粒幼细胞贫血：铁粒幼细胞贫血：内、外铁均增多内、外铁均增多MA、HA、AA：正常或轻度增多：正常或轻度增多T 淋淋 巴巴 系系祖祖 细细 胞胞B 淋淋 巴巴 系系祖祖
16、 细细 胞胞淋淋 巴巴 系系 干干 细细 胞胞红红 系系祖祖 细细 胞胞粒粒 单单 系系祖祖 细细 胞胞嗜嗜 酸酸 粒粒祖祖 细细 胞胞嗜嗜 碱碱 粒粒祖祖 细细 胞胞巨巨 核核 系系祖祖 细细 胞胞骨骨 髓髓 系系 干干 细细 胞胞全全 能能 干干 细细 胞胞T o tip o te n tia l S te m C e llT S C缺铁性贫血（外铁消失）缺铁性贫血（外铁消失）铁粒幼细胞贫血铁粒幼细胞贫血.原粒原粒单核单核淋巴淋巴早幼早幼晚幼晚幼中幼中幼过氧化物酶染色过氧化物酶染色(peroxidase，POX).中性粒细胞碱性磷酸酶染色中性粒细胞碱性磷酸酶染色(NAP).CML类白类白.
17、非特异酯酶染色非特异酯酶染色(-NAE)：用途：用途：鉴别急粒与急单鉴别急粒与急单结果：结果：粒系（粒系（-）或）或 弱（弱（+）不被）不被NaF抑制抑制 单核、巨噬单核、巨噬(+)，可被可被NaF抑制抑制.糖原染色糖原染色（过碘酸雪夫反应，（过碘酸雪夫反应，PAS)：粒系中原粒粒系中原粒cell(-)cell(-)，早幼粒，早幼粒cellcell强阳性，强阳性，单核（单核（），淋巴（），淋巴（-），少数（），少数（），），红细胞（红细胞（-）；）；巨核呈阳性反应。巨核呈阳性反应。.PAS临床意义AML-M6幼红细胞呈阳性反应MA幼红细胞呈阴性反应.T 淋淋 巴巴 系系祖祖 细细 胞胞B 淋淋
18、 巴巴 系系祖祖 细细 胞胞淋淋 巴巴 系系 干干 细细 胞胞红红 系系祖祖 细细 胞胞粒粒 单单 系系祖祖 细细 胞胞嗜嗜 酸酸 粒粒祖祖 细细 胞胞嗜嗜 碱碱 粒粒祖祖 细细 胞胞巨巨 核核 系系祖祖 细细 胞胞骨骨 髓髓 系系 干干 细细 胞胞全全 能能 干干 细细 胞胞T o tip o te n tia l S te m C e llT S CT 淋淋 巴巴 系系祖祖 细细 胞胞B 淋淋 巴巴 系系祖祖 细细 胞胞淋淋 巴巴 系系 干干 细细 胞胞红红 系系祖祖 细细 胞胞粒粒 单单 系系祖祖 细细 胞胞嗜嗜 酸酸 粒粒祖祖 细细 胞胞嗜嗜 碱碱 粒粒祖祖 细细 胞胞巨巨 核核 系系
19、祖祖 细细 胞胞骨骨 髓髓 系系 干干 细细 胞胞全全 能能 干干 细细 胞胞T o tip o te n tia l S te m C e llT S CT 淋淋 巴巴 系系祖祖 细细 胞胞B 淋淋 巴巴 系系祖祖 细细 胞胞淋淋 巴巴 系系 干干 细细 胞胞红红 系系祖祖 细细 胞胞粒粒 单单 系系祖祖 细细 胞胞嗜嗜 酸酸 粒粒祖祖 细细 胞胞嗜嗜 碱碱 粒粒祖祖 细细 胞胞巨巨 核核 系系祖祖 细细 胞胞骨骨 髓髓 系系 干干 细细 胞胞全全 能能 干干 细细 胞胞T o t ip o t e n t ia l S t e m C e llT S CT 淋淋 巴巴 系系祖祖 细细 胞胞B 淋淋 巴巴 系系祖祖 细细 胞胞淋淋 巴巴 系系 干干 细细 胞胞红红 系系祖祖 细细 胞胞粒粒 单单 系系祖祖 细细 胞胞嗜嗜 酸酸 粒粒祖祖 细细 胞胞嗜嗜 碱碱 粒粒祖祖 细细 胞胞巨巨 核核 系系祖祖 细细 胞胞骨骨 髓髓 系系 干干 细细 胞胞全全 能能 干干 细细 胞胞T o t ip o t e n t ia l S t e m C e llT S C.NoImage谢谢大家谢谢大家HAVE A GOOD DAY!NoImage.
