1、1 体外分析体外分析 福建医科大学附属第一医院福建医科大学附属第一医院 核医学科核医学科 黄毅相 2 体外分析技术是利用放射分析方法或其派生体外分析技术是利用放射分析方法或其派生 的相关非放射分析技术测定生物样品中微量的相关非放射分析技术测定生物样品中微量 生物活性物质含量的一类分析法。主要用于生物活性物质含量的一类分析法。主要用于 测定样品内的激素、抗原或抗体、受体容量、测定样品内的激素、抗原或抗体、受体容量、 药物浓度以及其他生物活性物质。药物浓度以及其他生物活性物质。 一、定义一、定义 体外分析体外分析 3 体 外 分 析 技 术 体外放射分析体外放射分析 体外非放射分析体外非放射分析
2、放射性竞争放射性竞争 结合分析结合分析 放射性非竞放射性非竞 争结合分析争结合分析 放射免疫分析放射免疫分析 ( RIA) 免疫放射分析免疫放射分析(IRMA) 酶免疫分析酶免疫分析(EIA) 化学发光免疫分析化学发光免疫分析(CLIA) 荧光免疫分析（荧光免疫分析（FIA） 二、分类二、分类 4 放射分析方法或其派生的相关技术。放射分析方法或其派生的相关技术。 在体外进行机体内物质种类和含量的分析在体外进行机体内物质种类和含量的分析 测定。测定。 测定对象是患者血清、血浆或其他体液样测定对象是患者血清、血浆或其他体液样 品内的激素、抗原、抗体、药物浓度和其品内的激素、抗原、抗体、药物浓度和其
3、 它生物活性物质等。它生物活性物质等。 商品化试剂盒的应用（如北方所、原子高商品化试剂盒的应用（如北方所、原子高 科）。科）。 4 三、发展三、发展 5 5 多种体外分析技术的互相渗透。例如将酶免多种体外分析技术的互相渗透。例如将酶免 疫分析技术与荧光技术或化学发光技术结合，疫分析技术与荧光技术或化学发光技术结合， 建立的荧光酶免疫分析及化学发光酶免疫分建立的荧光酶免疫分析及化学发光酶免疫分 析，可极大地提高灵敏度，增大检测范围。析，可极大地提高灵敏度，增大检测范围。 检测自动化（罗氏、西门子、雅培、贝克曼检测自动化（罗氏、西门子、雅培、贝克曼 雷度、新产业等全自动免疫分析仪）。雷度、新产业等
4、全自动免疫分析仪）。 实现多个待测物同时检测，如时间分辨荧光实现多个待测物同时检测，如时间分辨荧光 免疫分析。免疫分析。 发展发展 6 6 在临床和基础医学研究上应用极为广泛。在临床和基础医学研究上应用极为广泛。 如内分泌学、肿瘤学、免疫学、病毒学、如内分泌学、肿瘤学、免疫学、病毒学、 药理学、血液学、消化病学、神经病学、药理学、血液学、消化病学、神经病学、 妇产科学等被广泛应用，有力地推动了妇产科学等被广泛应用，有力地推动了 医学科学的发展。医学科学的发展。 发展发展 7 放射免疫分析放射免疫分析 radioimmunoassay, RIA 8 一、一、RIA定义定义 放射免疫分析（放射免疫
5、分析（radioimmunoassay，RIA） 是指用放射性核素标记已知的抗原或抗体来测定是指用放射性核素标记已知的抗原或抗体来测定 未知的抗体或抗原的体外微量分析方法未知的抗体或抗原的体外微量分析方法,它结合了它结合了 放射性核素的高敏感性和抗原抗体反应的高特异放射性核素的高敏感性和抗原抗体反应的高特异 性性 。 9 二、二、RIA的基本原理的基本原理 利用放射性核素标记的抗原（利用放射性核素标记的抗原（*Ag）和非标记的和非标记的 待测抗原（待测抗原（Ag）竞争结合其特异性抗体（竞争结合其特异性抗体（Ab），反，反 应达到平衡后，分离并分别测定结合的抗原抗体复合应达到平衡后，分离并分别测
6、定结合的抗原抗体复合 物（物（Ag.Ab）的放射性）的放射性（B）和游离抗原放射性和游离抗原放射性（F）。）。 由于由于B或或B/B+F与非标记抗原的含量之间存在竞争抑制与非标记抗原的含量之间存在竞争抑制 的函数关系，依据这一函数关系，通过已知浓度的标的函数关系，依据这一函数关系，通过已知浓度的标 准品绘制出标准曲线即可求出非标记抗原（待测样品）准品绘制出标准曲线即可求出非标记抗原（待测样品） 含量。含量。 10 基本原理基本原理 Ag-Ab + Ag *Ag Ab Ag + + *Ag-Ab + *Ag (B) (F) *Ag与与Ag 免疫活性相同免疫活性相同 *AgAg Ab *Ag与与A
7、b的量恒定的量恒定 Ag= * Ag , AgAb=*AgAb Ag *Ag , *AgAb (B) *Ag(F) Ag *Ag , *AgAb (B) *Ag (F) 11 三、三、RIA试剂盒组成试剂盒组成 RIA分析所需的基本试剂有抗体、标记抗原（抗体、标记抗原（ 125I标记标记) 非标记标准抗原（标准品），非标记标准抗原（标准品），此外试剂盒中还提供分离 试剂，缓冲液及质控品等。 12 四、标准曲线的绘制四、标准曲线的绘制 用一系列已知呈梯度浓度的标准抗原和一定量的标记抗原在一用一系列已知呈梯度浓度的标准抗原和一定量的标记抗原在一 定条件下同限量的特异性抗体进行反应；定条件下同限量的
8、特异性抗体进行反应； 在反应达到平衡后，利用适当的分离方法分离在反应达到平衡后，利用适当的分离方法分离B和和F； 分别测量分别测量B和和F的放射性；的放射性； 用反应变量（如用反应变量（如B%）作为纵坐标，反应剂量（即一系列标准作为纵坐标，反应剂量（即一系列标准 抗原的浓度）作为横坐标绘制一条曲线，就得到不同浓度的标抗原的浓度）作为横坐标绘制一条曲线，就得到不同浓度的标 准抗原对反应变量的竞争抑制曲线，这就是剂量反应曲线即标准抗原对反应变量的竞争抑制曲线，这就是剂量反应曲线即标 准曲线。准曲线。 13 Ag 25 50 100 200 400 800 *Ag Ab 分离分离B、F B%=B/(
9、B+F) F%=F/(B+F) R=B/F B1% B2% B3% B4% B5% B6% 1 2 3 4 5 6 浓度浓度 14 B% 标标 准准 曲曲 线线 15 五、未知样品的测量五、未知样品的测量 在同等条件下，用待测抗原与一定量的标记抗原与在同等条件下，用待测抗原与一定量的标记抗原与 限量特异性抗体发生反应，并用同样的方法分离待限量特异性抗体发生反应，并用同样的方法分离待 测抗原的测抗原的B和和F，测量其放射性，计算出测量其放射性，计算出B%，在标在标 准曲线上就可以查出对应的抗原浓度。准曲线上就可以查出对应的抗原浓度。 16 B% 60 标准曲线及未知样品测定 17 六、操作基本步
10、骤六、操作基本步骤 RIA的操作一般包括加样、孵育、分离、测量和数据的操作一般包括加样、孵育、分离、测量和数据 处理处理5个部分。个部分。 1. 加样：注意所有的试管加样总体积要保持一致加样：注意所有的试管加样总体积要保持一致，所所 处的介质环境也要一致处的介质环境也要一致。 2. 孵育：根据不同的分析对象孵育的温度和时间不同孵育：根据不同的分析对象孵育的温度和时间不同， 一般是一般是37。 3. 分离：选择好的分离方法进行分离分离：选择好的分离方法进行分离。 4. 测量：测量游离或结合物部分的放射性测量：测量游离或结合物部分的放射性。 5. 数据处理：绘制标准曲线和待测物浓度的计算。数据处理
11、：绘制标准曲线和待测物浓度的计算。 18 RIA的优点的优点 1.灵敏度高：一般化学分析法的检出极限为灵敏度高：一般化学分析法的检出极限为10-310-6g，而，而 RIA通常为通常为10-9(ng)、10-12(pg)，甚至，甚至10-15 (fg)、10-18 (ag) 特异性强：特异性强：RIA是基于抗原抗体免疫结合反应，由于抗原是基于抗原抗体免疫结合反应，由于抗原 抗体免疫反应专一性强。抗体免疫反应专一性强。 应用范围广：几乎能应用于所有激素的分析（包括多肽类应用范围广：几乎能应用于所有激素的分析（包括多肽类 和固醇类激素），还能用于各种蛋白质、肿瘤抗原、病毒和固醇类激素），还能用于各
12、种蛋白质、肿瘤抗原、病毒 抗原、细菌抗原、寄生虫抗原以及一些小分子物质和药物抗原、细菌抗原、寄生虫抗原以及一些小分子物质和药物 （如地高辛、毛地黄甙等）的分析。（如地高辛、毛地黄甙等）的分析。 操作简便，商品化程度高操作简便，商品化程度高 19 1.125I半衰期短（半衰期短（60天），试剂不稳定天），试剂不稳定 2.反应时间长，操作难以自动化。反应时间长，操作难以自动化。 3.使用放射性核素，对人体有一定的危害性。使用放射性核素，对人体有一定的危害性。 放射免疫分析有被取代的趋势。放射免疫分析有被取代的趋势。 RIA的缺点的缺点 20 非放射性标记免疫分析技术非放射性标记免疫分析技术 酶标记
13、免疫分析技术酶标记免疫分析技术 化学发光免疫分析技术化学发光免疫分析技术 时间分辨荧光免疫分析技术时间分辨荧光免疫分析技术 21 一、酶标记免疫分析技术一、酶标记免疫分析技术 用酶分子代替放射性核素标记抗原或抗体，用酶分子代替放射性核素标记抗原或抗体， 进行竞争性或非竞争性免疫分析的技术。其进行竞争性或非竞争性免疫分析的技术。其 中应用最多的就是酶联免疫吸附分析法中应用最多的就是酶联免疫吸附分析法 （ELISA）。）。 它是结合了抗原抗体高特异性和酶促反应它是结合了抗原抗体高特异性和酶促反应 的高敏感性的检测技术。的高敏感性的检测技术。 22 操作步骤操作步骤 23 23 酶标记免疫分析仪器酶
14、标记免疫分析仪器 酶标仪酶标仪 洗板机洗板机 半自动酶标记仪：酶标仪与洗板机分离。半自动酶标记仪：酶标仪与洗板机分离。 24 24 全自动酶标记仪：酶标仪与洗板机一体。全自动酶标记仪：酶标仪与洗板机一体。 25 化学发光免疫分析技术是基于化学发光反应和免疫反应建立起化学发光免疫分析技术是基于化学发光反应和免疫反应建立起 来的免疫分析技术，它既具有免疫反应的高特异性，又具有化学发光来的免疫分析技术，它既具有免疫反应的高特异性，又具有化学发光 的高敏感性。的高敏感性。 25 二、化学发光免疫分析技术二、化学发光免疫分析技术 发光原理 标记物 根据发光 物质分类 化学发光免 疫分析技术 化学发光 免
15、疫分析 异鲁米那 或吖啶酯 碱性环境 氧化发光 化学发光酶 免疫分析 过氧化物酶 碱性磷酸酶 酶促反应催 化底物发光 电化学发光 免疫分析 三联吡啶钌 衍生物 与三丙胺电 子交换发光 26 1. 直接化学发光免疫分析法直接化学发光免疫分析法 是用能产生化学发光的化合物代替放射性标记物，是用能产生化学发光的化合物代替放射性标记物， 其他步骤和其他步骤和RIA或或IRMA基本相同。最常用的发光化基本相同。最常用的发光化 合物是合物是异鲁米诺异鲁米诺和和吖啶酯。吖啶酯。它们在碱性条件下遇到过它们在碱性条件下遇到过 氧化物便发生单光子发射，光子的数量和异鲁米诺和氧化物便发生单光子发射，光子的数量和异鲁
16、米诺和 吖啶酯的量成正比，而异鲁米诺和吖啶酯的量是反映吖啶酯的量成正比，而异鲁米诺和吖啶酯的量是反映 复合物的量。复合物的量。 缺点：缺点：闪烁性发光，光信号不稳定。闪烁性发光，光信号不稳定。发光时间集发光时间集 中在加入过氧化物或碱的短时间内。中在加入过氧化物或碱的短时间内。 27 发光发光 磁微粒磁微粒 被测抗原被测抗原 + 抗体抗体 + 带吖啶酯标带吖啶酯标 记物抗体记物抗体 冲洗后冲洗后 （1 1） 加入加入H H2 2O O2 2 （pH10） 直接化学发光的机理直接化学发光的机理 吖啶酯化学发光系统吖啶酯化学发光系统 28 化学发光标记免疫分析法化学发光标记免疫分析法 西门子西门子
17、(拜耳拜耳) ADVIA Centaur XP 西门子西门子(拜耳拜耳) ACS:180 29 化学发光酶免疫分析（化学发光酶免疫分析（chemiluminescence enzyme immunoassay，CLEIA） 是用参与催化某一化学发光反应的酶如辣根过氧化物是用参与催化某一化学发光反应的酶如辣根过氧化物 酶（酶（HRP）或碱性磷酸酶）或碱性磷酸酶(ALP)来标记抗原或抗体，来标记抗原或抗体， 形成抗体形成抗体-待测抗原待测抗原-酶标记抗体复合物，加入发光剂，酶标记抗体复合物，加入发光剂， 酶催化和分解底物发光，计算机光电处理得出具体浓酶催化和分解底物发光，计算机光电处理得出具体浓
18、度数据度数据 2.化学发光酶免疫分析法化学发光酶免疫分析法 30 碱性磷酸酶标记化学发光免疫分析示意图碱性磷酸酶标记化学发光免疫分析示意图 31 化学发光酶免疫分析法化学发光酶免疫分析法 碱磷酶（碱磷酶（APAP）标记的）标记的CLIACLIA 代表公司：贝克曼库尔特代表公司：贝克曼库尔特 经典机型：经典机型：Access Access2Access Access2 原理：磁微粒技术原理：磁微粒技术 酶放大化学发光技术酶放大化学发光技术 AMPPDAMPPD为发光底物为发光底物 32 化学发光酶免疫分析法化学发光酶免疫分析法 碱磷酶（碱磷酶（AP）标记的）标记的CLIA 代表公司：代表公司：D
19、PC 经典机型：经典机型：IMUULITE 2000 原理：塑料珠为载体原理：塑料珠为载体 碱磷酶标记，碱磷酶标记， AMPPD为发光底物为发光底物 33 3. 电化学发光免疫分析电化学发光免疫分析 （ECLI） 应用电化学发光的底物三联吡啶钌作为标记物，标应用电化学发光的底物三联吡啶钌作为标记物，标 记方法是将其衍生物记方法是将其衍生物N-羟基琥珀酰胺（羟基琥珀酰胺（NHS）酯通过化）酯通过化 学反应与抗体或不同化学结构的抗原分子结合，制成标学反应与抗体或不同化学结构的抗原分子结合，制成标 记的抗体或抗原。记的抗体或抗原。ECLI的测定模式与ELISA相似，分两 个布骤进行。以双抗体夹心法测
20、定抗原为例，第一步在 试管中进行，反应物为Ru(bpy)2+3标记的抗体、吸附在磁 性微球上的固相抗体以及受检的标本。 34 反应后除由标记抗体、固相抗体与标本中的抗原形成 的夹心复合物外，尚有多余的标记抗体和固相抗体。随即 用含三丙胺（TPA）的缓冲液冲洗。反应室电极下有磁铁。 含磁性微球的夹心复合物及游离的固相抗体被吸附在电极 表面，游离的标记抗体随冲洗液流出。此时在反应室中即 发生电化学发光反应。发出的光由光电倍增管转为电信号， 通过电信号的测定反映标本中抗原的含量。 35 电化学发光免疫分析示意图电化学发光免疫分析示意图 36 电化学发光免疫测定示意图电化学发光免疫测定示意图 37 标
21、记磁颗粒在电场中发光工作示意图标记磁颗粒在电场中发光工作示意图 38 39 ECLI检测流程图一（双抗体夹心的形成）检测流程图一（双抗体夹心的形成） 40 ECLI检测流程图二检测流程图二 （生物素与亲和素结合）（生物素与亲和素结合） 41 ECLI检测流程图三 磁珠吸引吸附于电极表面） 42 ECLI检测流程图四检测流程图四 （电极充电启动电化学反（电极充电启动电化学反 应）应） 43 ECLI检测流程图五检测流程图五 （撤消磁场冲洗磁珠）（撤消磁场冲洗磁珠） 44 试剂盒实样试剂盒实样 45 优 点 1、标记物可循环利用，发光时间更长、强度更高易 于测定 2、敏感度高可达pg/ml或 pm
22、ol/ml 3、线性范围宽，104 4、反应时间短，20min以内完成测定 5、试剂稳定性好 46 电化学发光电化学发光 电化学发光免疫分析（电化学发光免疫分析（Electro-Chemiluminescence Immunoassay，ECLIA）：三丙胺）：三丙胺(TPA)与发光化合物三联与发光化合物三联 吡啶钌组合，作为化学发光物质建立电化学发光免疫分析。吡啶钌组合，作为化学发光物质建立电化学发光免疫分析。 在电极表面由化学反应引发的特异性化学发光反应，包括在电极表面由化学反应引发的特异性化学发光反应，包括 了电化学和化学发光两个过程了电化学和化学发光两个过程 代表公司：罗氏诊断代表公司
23、：罗氏诊断 经典机型：经典机型：1010 2010 E170 cobas e411 E601 原理：顺磁性微粒做载体原理：顺磁性微粒做载体 （生物素（生物素-亲和素偶联技术）亲和素偶联技术） +电化学发光技术；电化学发光技术； 夹心法和竞争法夹心法和竞争法 2010 47 三、时间分辨荧光免疫分析技术三、时间分辨荧光免疫分析技术 （time-resolved fluoroimmunoassay） 时间分辨荧光免疫分析采用时间分辨荧光免疫分析采用稀土元素稀土元素标记抗体，标记抗体， 利用时间分辨荧光仪特定的延迟时间测量，获得利用时间分辨荧光仪特定的延迟时间测量，获得稀稀 土元素土元素的特异荧光信
24、号，同时消除非特异性荧光物的特异荧光信号，同时消除非特异性荧光物 质的干扰。质的干扰。 48 （一）标记物为具有独特荧光特性的 稀土金属镧系元素 镧系元素的荧光特点：镧系元素的荧光特点： 1.极长的荧光衰退时间极长的荧光衰退时间 铕：铕：730000ns，钐：，钐：50000ns，一般荧光物质：，一般荧光物质：10ns 2.200nm的的Stokes位移位移 铕：激发光铕：激发光340nm，发射光，发射光613nm 荧光素的荧光素的Stokes位移为位移为273nm 3.狭窄的发射峰狭窄的发射峰 4.解离解离-增强技术可使其荧光性提高增强技术可使其荧光性提高100万倍万倍 49 （二）（二）T
25、rFIA的特点的特点 1. 最大限度提高测量方法的灵敏度最大限度提高测量方法的灵敏度 2. 有与有与RIA相似的特异性和精密度相似的特异性和精密度 3. 可同时测定两种以上的抗原可同时测定两种以上的抗原 4. 无辐射污染无辐射污染 50 AQT时间分辨荧光免疫测定仪时间分辨荧光免疫测定仪 AQT90以镧系元素螯合物为标记物，同时利用波长分辨和以镧系元素螯合物为标记物，同时利用波长分辨和 时间分辨两种测量技术，有效排除非特异荧光，以时间分时间分辨两种测量技术，有效排除非特异荧光，以时间分 辨技术测量特异荧光，对待检物质进行定量分析。辨技术测量特异荧光，对待检物质进行定量分析。 51 甲状腺项目
26、肿瘤标志物 性激素类 糖尿病指标 心脏功能 贫血诊断指标 骨质疏松 其它项目 Elecsys系列全自动分析仪系列全自动分析仪检测项目检测项目 最最 齐齐 全全 的的 检检 测测 项项 目目 菜菜 单单 ElecsysElecsys系列全自动分析仪及其检测项目 52 甲甲 状状 腺腺 项项 目目 TSH 促甲状腺激素促甲状腺激素 （查明甲状腺功能的初筛试验）查明甲状腺功能的初筛试验） T3 三碘甲状腺原氨酸三碘甲状腺原氨酸（作用于靶器官的主要甲状腺激素）（作用于靶器官的主要甲状腺激素） T4 甲状腺素甲状腺素 （诊断甲亢、甲低）（诊断甲亢、甲低） FT3 游离三碘甲状腺原氨酸游离三碘甲状腺原氨酸
27、（诊断甲亢、甲减比（诊断甲亢、甲减比T3、T4更可靠）更可靠） FT4 游离甲状腺素游离甲状腺素(同上）同上） TG 甲状腺球蛋白甲状腺球蛋白 （甲状腺体完整性的特殊标志物）（甲状腺体完整性的特殊标志物） Anti-TG 抗抗甲状腺球蛋白抗体甲状腺球蛋白抗体（增高见于慢性桥本甲状腺炎等）（增高见于慢性桥本甲状腺炎等） Anti-TPO 抗抗甲状腺过氧化物酶抗体甲状腺过氧化物酶抗体(同上）同上） ElecsysElecsys系列全自动分析仪及其检测项目 53 肿肿 瘤瘤 标标 志志 物物 AFP 甲胎蛋白甲胎蛋白 （原发性肝癌最特异的肿瘤标志物原发性肝癌最特异的肿瘤标志物） CEA 癌胚抗原癌胚
28、抗原 （增高多见于结肠癌患者）（增高多见于结肠癌患者） CA125 糖类抗原糖类抗原125 （最可靠的卵巢癌诊断指标）（最可靠的卵巢癌诊断指标） CA15-3 糖类抗原糖类抗原15-3（主要用于乳腺癌的监测和筛选）（主要用于乳腺癌的监测和筛选） CA19-9 糖类抗原糖类抗原19-9（胰腺癌敏感性最高的标志物）（胰腺癌敏感性最高的标志物） CA72-4 糖类抗原糖类抗原72-4（胃（胃 肠肠 道道 和和 卵卵 巢巢 癌癌 的的 肿肿 瘤瘤 标标 志志 物）物） Cyfra21-1非小细胞肺癌抗原非小细胞肺癌抗原（鳞癌的首选标志物）（鳞癌的首选标志物） NSE 神经元特异性烯醇化酶神经元特异性烯
29、醇化酶（小细胞肺癌检出的阳性率高）（小细胞肺癌检出的阳性率高） PSA 前列腺特异性抗原前列腺特异性抗原 （前列腺癌的筛选与早期诊断）（前列腺癌的筛选与早期诊断） Free PSA 游离前列腺特异性抗原游离前列腺特异性抗原（前列腺良、恶性疾病的鉴别诊断）（前列腺良、恶性疾病的鉴别诊断） S100 S100蛋白质蛋白质 (辅助诊断恶性黑色素瘤患者能脑损伤患者辅助诊断恶性黑色素瘤患者能脑损伤患者) ElecsysElecsys系列全自动分析仪及其检测项目 54 性性 激激 素素 类类 Cortisol 皮质醇皮质醇 （最主要的糖皮质类固醇）（最主要的糖皮质类固醇） Estradiol 雌二醇雌二醇
30、 （生物活性最强的雌激素）（生物活性最强的雌激素） FSH 促卵泡生成激素促卵泡生成激素 LH 促黄体生成激素促黄体生成激素 HCG 人绒毛膜促性腺激素人绒毛膜促性腺激素（诊断早孕、绒癌、葡萄胎及疗效观察（诊断早孕、绒癌、葡萄胎及疗效观察 宫外孕、男性睾丸肿瘤）宫外孕、男性睾丸肿瘤） + 亚单位亚单位 Progesterone 孕酮孕酮 Prolactin 泌乳素泌乳素 Testosterone 睾酮睾酮 ElecsysElecsys系列全自动分析仪及其检测项目 协同调节和刺激性腺的发育和功能协同调节和刺激性腺的发育和功能 55 心心 脏脏 功功 能能 Myoglobin 肌红蛋白肌红蛋白 （
31、诊断急性心肌梗死的的重要指标）（诊断急性心肌梗死的的重要指标） Troponin T 肌钙蛋白肌钙蛋白T （心肌损伤特异的标志）（心肌损伤特异的标志） Troponin I 肌钙蛋白肌钙蛋白I （心肌损伤特异的标志）（心肌损伤特异的标志） pro-BNP 脑利钠肽前体脑利钠肽前体（反映心衰的标志物）（反映心衰的标志物） ElecsysElecsys系列全自动分析仪及其检测项目 糖尿病项糖尿病项 目目 Insulin/ C-P 胰岛素胰岛素/ C肽（糖尿病的分型）肽（糖尿病的分型） 56 贫贫 血血 诊诊 断断 指指 标标 Diagnostics Ferritin 铁蛋白铁蛋白 (缺铁性贫血的诊
32、断）缺铁性贫血的诊断） B12 维生素维生素B12 （辅助诊断巨幼细胞性贫血）（辅助诊断巨幼细胞性贫血） Folate 叶酸叶酸 （辅助诊断巨幼细胞性贫血）（辅助诊断巨幼细胞性贫血） ElecsysElecsys系列全自动分析仪及其检测项目 57 骨骨 质质 疏疏 松松 Diagnostics -CrossLaps -胶原降解产物胶原降解产物 N-Osteocalcin N端骨钙素端骨钙素 PTH 甲状旁腺激素甲状旁腺激素 P1NP 总总I 型胶原氨基端延长肽型胶原氨基端延长肽 ElecsysElecsys系列全自动分析仪及其检测项目 58 肿瘤标志物检测的基本原则 一、定义 肿瘤标志物（TM
33、）是指在恶性肿瘤发生和增值过程中，由肿瘤细胞的基 因表达而合成分泌的或是由机体对肿瘤反应而异常产生和或升高的反映肿瘤 存在和生长的一类物质，它包括蛋白质、激素、酶（同工酶）、多胺及癌基 因产物等。 二、分类 TM主要分为两类：由肿瘤组织产生的和肿瘤与宿主相互作用而产生的。 1.由肿瘤细胞分泌的标志物 （1）分化抗原标志物 （2）胚胎抗原标志物（AFP、CEA等) （3）糖脂或蛋白质类（CA19-9、CA153、CA242等）。 （4）同工酶类标志物（NSE，CK-BB等）。 （5）激素类标志物（ HCG、ACTH等） （6）肿瘤相关抗原（PSA，TPA等）。 （7）基因类标志物（P53、BCL
34、-2） （8）其它：多胺、唾液酸等 2.宿主反应标志物：SF、2-MG、IL-2R、TNF 59 三、TM临床检测的基本原则 1.TM对肿瘤的辅助诊断价值 2.应用TM对高危人群进行筛查时应遵循下列原则： （1）该肿瘤标志物对早期肿瘤的发现有较高的灵敏度。 （2）测定方法的灵敏度、特异性高、重复性好（AFP、 PSA）。 （3）筛查费用经济、合理。 （4）筛查发现肿瘤标志物异常升高，但无症状和体征时， 必须复查和随访。 3. TM的器官定位价值： 由于绝大多数TM对器官特异性不强，因此，TM阳性不能 对肿瘤进行绝对定位。但少数肿瘤标志物（如前列腺特异 性抗原、甲胎蛋白和甲状腺球蛋白对器官定位有
35、一定的价 值）。 4.不能根据TM浓度的高低来判断肿瘤的大小及进行临床分期。 60 5.TM在肿瘤监测中的价值： TM的主要临床应用价值是判断肿瘤治疗疗效和复发监 测。临床上可通过对肿瘤患者治疗前后及随访中TM浓度变 化的监测，了解肿瘤治疗是否有效，并判断其预后，为进 一步治疗提供参考依据。在患者治疗前应做相关TM检测。 6. TM浓度变化对肿瘤的疗效判断价值：恶性肿瘤治疗后TM浓 度的变化与疗效之间有一定的相关系性，治疗后TM浓度变 化，常有三种类型： （1）TM浓度下降到参考范围，提示肿瘤治疗有效。 （2）TM浓度下降但仍持续在参考范围以上，提示有肿瘤 残留或肿瘤转移。 （3）TM浓度下降
36、到参考范围一段时间后，又重新升高， 提示肿瘤复发或转移。 61 疗效观察可参照下列标准： 无效：TM浓度与治疗前相比下降50% 改善：TM浓度与治疗前相比下降50% 有效：TM浓度与治疗前相比下降90% 显效： TM浓度下降至临界值以下。 7.TM定期随访原则： 恶性肿瘤治疗结束后，应跟据病情对治疗前升高的TM作定期随访 监测。大部分国内外专家建议：治疗后6W做首次测定；3年内每3个 月测定一次；3至5年每半年测定一次；5至7年每年测定一次；随访中 如发现有明显升高，应1月后复测一次，连续2次升高，可预示复发或 转移。 8.TM的联合检测原则：同一种肿瘤或不同类型的肿瘤可有一种或几种 TM异常
37、；同一种TM可在不同的肿瘤中出现。合理选择几项灵敏度、 特异性能互补的TM进行联合检测可提高肿瘤诊断的准确率及确定何 种TM可作为治疗后的随访监测指标。 62 TM联合检测的常用组合 1.肝癌：AFP+AFP异质体（AFP-L3) 2.食道鳞癌：CYFRA21-1+TPS（组织多肽抗原） + SCC（鳞状细胞相关抗原） 食道腺癌：CA19-9+CEA+TPS 3.胃癌：CA72-4+CEA+CA19-9 4.结直肠癌：CA242+CEA+CA19-9+TPS 5胰腺癌：CA242+CA19-9 6乳腺癌：CA153+CEA+CA19-9 7.卵巢癌：CA125+CA724+TPS+AFP 8宫颈癌：SCC+CYFRA21-1+TPS 63
