1、1【教学目标】1.掌握：掌握：葡萄球菌、A群链球菌的主要致病物质、所致疾病；破伤风梭菌致病性和防治原则。2.熟悉：葡萄球菌、A群链球菌的形态染色、培养特性、分类、防治原则，致病性葡萄球菌的鉴别要点；链球菌抗“O”试验及意义；破伤风梭菌的生物学特性。3.了解：葡萄球菌抗原构造，免疫性和微生物检查；链球菌抗原构造，免疫性和细菌学检查；破伤风梭菌免疫性和微生物检查；2一、生物学特征一、生物学特征1 1、形态与染色：、形态与染色：葡萄串状排列的葡萄串状排列的G G+菌。菌。广泛存在于自然界，医务人员带菌率70%，是医院内交叉感染的重要来源。342 2、培养特性、培养特性 易培养易培养 普通平板普通平板
2、血平板：有些菌形成透明溶血环（血平板：有些菌形成透明溶血环（溶血）溶血）有色素有色素 金黄色金黄色白色白色柠檬色柠檬色 普通平板血平板53、生化反应：分解葡萄糖、麦芽糖和蔗糖，产酸不产气，致病株能分解甘露醇。64抗原结构SPA7FabFabFcFc本质：单链多肽，90%以上的金葡菌表面，完全抗原特性：与人和一些动物IgG1，IgG2，IgG4的FC段非特异性结合。作用：1）SPA与IgG结合后所形成的复合物具有抗吞噬、激活补体，促细胞分裂，引起超敏反应、损伤血小板等多种生物活性。巨噬细胞巨噬细胞8 2）含SPA的金黄色葡萄球菌为载体，开展协同凝集试验，用于多种微生物可溶性抗原检测。Y+YYYY
3、+YYYYYYYYYYYY葡萄球菌 Ab 待测 Ag 凝集95 5分类与分型：分类与分型：按色素及生化反应不同：分按色素及生化反应不同：分3 3种种 金黄色葡萄球菌（S.aureus）表皮葡萄球菌（S.epidermidis）腐生葡萄球菌（S.saprophyticus）（致病性葡萄球菌的鉴别）106 6抵抗力：抵抗力：对外界因素的抵抗力强于其他无芽孢菌对外界因素的抵抗力强于其他无芽孢菌对消毒剂和碱性染料（龙胆紫）敏感对消毒剂和碱性染料（龙胆紫）敏感易产生耐药性，特别对青霉素易产生耐药性，特别对青霉素MRSAMRSA耐甲氧西林金黄色葡萄球菌，长期住院、反耐甲氧西林金黄色葡萄球菌，长期住院、反复
4、使用各种广谱抗菌药物、烧伤或有伤口的复使用各种广谱抗菌药物、烧伤或有伤口的病人及与病人及与MRSAMRSA定植或感染的病人接触都是造定植或感染的病人接触都是造成院内成院内MRSAMRSA流行的危险因素。流行的危险因素。11二、致病性：1致病物质:外毒素外毒素葡萄球菌溶血素杀白细胞素肠毒素表皮剥脱毒素毒性休克综合征毒素-1酶酶凝固酶透明质酸酶纤维蛋白酶耐热核酸酶12（1 1）葡萄球菌溶血素：）葡萄球菌溶血素：外毒素，有外毒素，有、等型别，对人致病的主等型别，对人致病的主要是要是 溶素；溶素；能损伤细胞膜，破坏红细胞、白细胞、血小板及能损伤细胞膜，破坏红细胞、白细胞、血小板及多种组织细胞。多种组织
5、细胞。13（2 2）杀白细胞素）杀白细胞素细胞毒素；细胞毒素；只攻击白细胞和吞噬细胞；只攻击白细胞和吞噬细胞；死亡的白细胞形成脓栓、导致中毒性炎症反应和死亡的白细胞形成脓栓、导致中毒性炎症反应和组织坏死；组织坏死；抵抗宿主吞噬细胞吞噬，增强细菌侵袭力。抵抗宿主吞噬细胞吞噬，增强细菌侵袭力。14约约1/31/3临床分离金黄色葡萄球菌可产生，临床分离金黄色葡萄球菌可产生，9 9种血清型。种血清型。引起急性胃肠炎，即引起急性胃肠炎，即食物中毒。食物中毒。耐热耐热100100 30min30min，抗胃肠液中蛋白酶。抗胃肠液中蛋白酶。作用机制：刺激呕吐中枢导致以呕吐为主要症状的食物中作用机制：刺激呕吐
6、中枢导致以呕吐为主要症状的食物中毒。毒。食物中毒食物中毒1-6h污染食物污染食物大量肠毒素大量肠毒素人误食人误食产毒素细菌产毒素细菌呕吐呕吐15（4 4）表皮剥脱毒素）表皮剥脱毒素（表皮溶解毒素）（表皮溶解毒素）裂解表皮的棘细胞层细胞；裂解表皮的棘细胞层细胞；引起烫伤样皮肤综合征引起烫伤样皮肤综合征（SSSSSSSS）（5 5）毒性休克综合征毒素）毒性休克综合征毒素-1-1（TSST-1TSST-1）：）：能引起发热；能引起发热；增加对内毒素的敏感性；增加对内毒素的敏感性；与葡萄球菌肠毒素、溶素及革兰阴性菌产生的内毒素共同与葡萄球菌肠毒素、溶素及革兰阴性菌产生的内毒素共同作用，引发毒性休克综合
7、征。作用，引发毒性休克综合征。16（6）凝固酶：能使经抗凝处理的人或兔血浆发生凝固能使经抗凝处理的人或兔血浆发生凝固 游离凝固酶（分泌到菌体外）游离凝固酶（分泌到菌体外）结合凝固酶（纤维蛋白原受体）结合凝固酶（纤维蛋白原受体）凝固酶原样物质凝固酶原样物质凝固酶样物质纤维蛋白原（液态）纤维蛋白（固态）血浆凝固血浆凝固协同因子纤维蛋白原 +菌体纤维（液态）蛋白原受体 血浆凝固血浆凝固交联交联17致病机理：致病机理：抵抗吞噬细胞的吞噬作用，保护细菌；抵抗吞噬细胞的吞噬作用，保护细菌；保护细菌免受血清中杀菌物质的杀灭；保护细菌免受血清中杀菌物质的杀灭；使感染局限化并能形成血拴。使感染局限化并能形成血拴
8、。意义：意义：鉴别葡萄球菌有无致病性的重要指标鉴别葡萄球菌有无致病性的重要指标18毒素性疾病毒素性疾病 食物中毒 烫伤样皮肤综合征 毒性休克综合征化脓性感染化脓性感染 皮肤软组织感染 内脏器官感染 全身感染2 2所致疾病所致疾病：19特点：脓汁黄而粘稠，化脓灶局限特点：脓汁黄而粘稠，化脓灶局限痈痈皮肤化脓感染皮肤化脓感染20支气管炎、肺炎（脓血痰）支气管炎、肺炎（脓血痰）脓胸脓胸骨髓炎骨髓炎心内膜炎心内膜炎中耳炎中耳炎各器官化脓感染各器官化脓感染多途径侵入机多途径侵入机体，导致多部位体，导致多部位感染感染21SSSS弥漫性红斑和水疱形成，弥漫性红斑和水疱形成，继以表皮上层大片脱落，继以表皮上层
9、大片脱落，受损部位的炎症反应轻受损部位的炎症反应轻微。微。毒素性疾病毒素性疾病：由外毒素引起：由外毒素引起烫伤样皮肤综合征（SSSS）表皮剥脱毒素表皮剥脱毒素22食物中毒食物中毒：产毒菌株污染食物，繁殖产毒，食后：产毒菌株污染食物，繁殖产毒，食后1-6h1-6h发发生急性胃肠炎（恶心、生急性胃肠炎（恶心、呕吐、呕吐、腹疼、腹泻），腹疼、腹泻），1-2d1-2d恢复。恢复。毒性休克综合征：高热，呕吐、腹泻、弥漫性红毒性休克综合征：高热，呕吐、腹泻、弥漫性红疹、低血压，休克等疹、低血压，休克等233 3、免疫性、免疫性机体有天然免疫力机体有天然免疫力感染后建立的特异性免疫力感染后建立的特异性免疫力
10、不强不强，故可反复感染，故可反复感染24ELISA三、微生物学检查法三、微生物学检查法标本标本脓汁，血液，剩余食物，呕吐物等分离培养分离培养血浆凝固酶发酵甘露醇耐热核酸酶直接涂片镜检直接涂片镜检革兰阳性葡萄球菌生长现象色素，溶血溶血生化反应毒素鉴定25四、防治原则四、防治原则防防 注意消毒隔离 注意个人卫生防止医源性感染 防止耐药性产生治 抗菌素药敏试验自身菌苗疗法自身菌苗疗法26第二节第二节 链球菌属链球菌属（1 1）甲型溶血性链球菌：菌落周围有草绿色溶血环，）甲型溶血性链球菌：菌落周围有草绿色溶血环，这类细菌成为草绿色链球菌这类细菌成为草绿色链球菌机会致病菌机会致病菌；（2 2）乙型溶血性
11、链球菌：菌落周围有完全透明溶血环，）乙型溶血性链球菌：菌落周围有完全透明溶血环，这类菌成为溶血性链球菌这类菌成为溶血性链球菌致病力强致病力强；（3 3）丙型溶血性链球菌：菌落周围无溶血环，称不溶）丙型溶血性链球菌：菌落周围无溶血环，称不溶血性链球菌血性链球菌不致病不致病。27溶血溶血28一、生物学性状1形态染色：G+，球形，链状排列，球形或卵圆形，直径0.5-1.0m，链状排列，培养早期（2-4h）有荚膜。无芽胞，无鞭毛。292 2培养特性：培养特性：营养要求高营养要求高(含血液、血清等含血液、血清等)，少，少数专性厌数专性厌O O2 2液体培养为沉淀生长液体培养为沉淀生长血平板呈灰白色表面光
12、滑小菌落，血平板呈灰白色表面光滑小菌落，不同菌株溶血不一不同菌株溶血不一30 3、抗原构造C抗原，细胞壁中，群特异性（分20个群，A A群群 致病菌致病菌(溶血性链球菌或化脓性链球菌）C抗原外层，有四种成分：MM抗原抗原荚膜细胞壁蛋白质多糖肽聚糖细胞膜细胞质31二、致病性与免疫性一）A群链球菌（化脓性链球菌）1致病物质：细胞壁成分细胞壁成分脂磷壁酸（LAT）：菌毛样结构，有助于链球菌的定植。M蛋白：抵抗吞噬；与心肌、肾小球基底膜有共同抗原，与超敏反应有关细胞壁受体：有利于细菌黏附32侵袭性酶侵袭性酶透明质酸酶（扩散因子）：透明质酸酶（扩散因子）：分解细胞间质的透明质酸分解细胞间质的透明质酸组织
13、中扩散组织中扩散链激酶（链激酶（SKSK）：）：SK SK 纤维蛋白溶解纤维蛋白溶解 溶纤维蛋白酶原溶纤维蛋白酶原 溶纤维蛋白酶溶纤维蛋白酶 病菌病菌扩散扩散 用于治疗急性心肌梗塞用于治疗急性心肌梗塞链道酶（链道酶（SDSD）：降解）：降解DNADNA，脓汁变稀，病菌扩散。，脓汁变稀，病菌扩散。胶原酶：溶解胶原纤维胶原酶：溶解胶原纤维33外毒素外毒素链球菌溶血素链球菌溶血素O（SLO）：对氧敏感，遇氧失活SLO破坏红细胞和中性粒细胞抗原性强，感染2周至病后一年内可查到抗体（ASO）ASO试验，风湿热及其活动性的辅助诊断链球菌溶血素S（SLS）：对氧稳定，抗原性弱。引发溶血致热外毒素（红疹毒素）
14、：直接作用于下丘脑引起发热342所致疾病：多途径感染，引起多种疾病，A群引起者占90%以上。（1）化脓性感染：淋巴管炎，淋巴结炎，蜂窝组织炎，扁桃体炎，咽峡炎，鼻窦炎，中耳炎，产褥热等。淋巴管炎面部脓疱疮面部脓疱疮蜂窝组织炎蜂窝组织炎丹毒丹毒35（2）毒素性疾病：猩红热小儿急性呼吸道传染病潜伏期25天，起病急剧，突发高热、头痛、咽痛、恶心、呕吐 典型病征：草莓舌、皮疹、口周苍白36（3 3）超敏反应性疾病）超敏反应性疾病：风湿热：风湿热：A A群链球菌感染群链球菌感染1212周时，表现为关节炎、心肌炎、心周时，表现为关节炎、心肌炎、心内膜炎、心包炎等；内膜炎、心包炎等；急性肾小球肾炎：多见于儿
15、童和少年，链球菌感染急性肾小球肾炎：多见于儿童和少年，链球菌感染1212周后表现周后表现肾脏损害。肾脏损害。M蛋白引发机体的超敏反应蛋白引发机体的超敏反应373 3、免疫性、免疫性：抗抗MM蛋白抗体有保护作用蛋白抗体有保护作用型别间无交叉免疫型别间无交叉免疫猩红热患者可建立牢固的猩红热患者可建立牢固的同型同型抗毒素免疫抗毒素免疫38二）甲型溶血型链球菌（草绿色链球菌）二）甲型溶血型链球菌（草绿色链球菌）亚急性心内膜炎：龋齿：变形链球菌口腔、上呼吸道正常菌群口腔、上呼吸道正常菌群39三、微生物学检查法三、微生物学检查法标本标本直接涂片镜检革兰阳性链球菌革兰阳性链球菌分离培养分离培养脓汁，血液，咽
16、喉拭子脓汁，血液，咽喉拭子1、细菌学诊断40抗“O”试验（ASO test）：链球菌侵入体内产生链球菌溶血素O（SLO），刺激机体产生相应抗体（ASO）。用SLO 检测病人血清中ASO的量。效价为250单位左右，辅助诊断风湿热；400单位，活动性风湿热。2、血清学检查41四、防治原则：积极治疗儿童链球菌感染选用青霉素42一、生物学性状一、生物学性状G G+，芽孢正圆位于菌体顶端，使细菌呈鼓槌状，芽孢正圆位于菌体顶端，使细菌呈鼓槌状，有周鞭毛，专性厌氧有周鞭毛，专性厌氧43致病条件：致病条件：伤口需形成厌氧微环境伤口需形成厌氧微环境 伤口窄而深（如刺伤），有泥土或异物污染 大面积创伤、烧伤，坏死
17、组织多，局部组织缺血 有需氧菌或兼性厌氧菌混合感染的伤口无侵袭力，仅在局部繁殖，其致病作用完全有赖于病菌所产生的外毒素破伤风痉挛毒素破伤风痉挛毒素二、致病性二、致病性44 稳定期产生：一条多肽稳定期产生：一条多肽 细菌裂解释出菌体：断裂为细菌裂解释出菌体：断裂为轻链（轻链（A A链）链）-S-S-S-S-重链（重链（B B链）链）45痉挛毒素重链（B链）+神经元细胞膜受体轻链（A链）进入胞浆内小泡中沿轴索逆行向上沿轴索逆行向上到达脊髓前角，并上行至脑干到达脊髓前角，并上行至脑干阻止释放抑制性神经冲动传递介质抑制性神经冲动传递介质（伸肌、屈肌同时收缩，呈强直性痉挛）（伸肌、屈肌同时收缩，呈强直性
18、痉挛）发病机制发病机制46 典型症状 牙关紧闭 苦笑面容 颈项强直 角弓反张 膈肌痉挛 呼吸困难47破伤风免疫属外毒素免疫，主要是抗毒素发挥中和作用（毒素与中枢神经组织结合非常牢固，一旦结合即非抗毒素所能中和）病后不会获得牢固免疫力获得有效免疫力的途径是人工免疫48临床诊断主要结合创伤史和特有体征临床诊断主要结合创伤史和特有体征微生物学检查对早期诊断意义不大微生物学检查对早期诊断意义不大491.一般措施 正确处理伤口。防止厌氧微环境形成，应用甲硝唑等药物，抑制细菌繁殖。2.人工自动免疫 注射破伤风类毒素。（1）儿童、军人、建筑工人等。（2）36月儿童：白百破三联疫苗。3.人工被动免疫 破伤风抗毒素（TAT）。（1）紧急预防：TAT 15003000u （2）特异治疗：TAT 10万20万u 原则：早期，足量，防过敏。4.清创，大剂量青霉素等抗菌治疗。50
