1、谢沐风谢沐风 上海市食品药品检验所上海市食品药品检验所质量标准中制订有关物质检查项的原则质量标准中制订有关物质检查项的原则 阐述原料药质量标准中必须拟定有关物质的原理阐述原料药质量标准中必须拟定有关物质的原理 阐述制剂质量标准中可不拟定有关物质的情形阐述制剂质量标准中可不拟定有关物质的情形 当原料药当原料药 0天制剂天制剂 至效期，有关物质皆未变化，至效期，有关物质皆未变化，则可不拟定。则可不拟定。但注射剂必须拟定。（因前几年的但注射剂必须拟定。（因前几年的“药害事件药害事件”）。）。六类仿制药的研发六类仿制药的研发 “解读解读”既有质量标准既有质量标准(1)查询所有制剂与原料药的质量标准。（
2、着重看制剂查询所有制剂与原料药的质量标准。（着重看制剂质量标准，原料药质量标准仅是参考）质量标准，原料药质量标准仅是参考）(2)进口质量标准杂质现今皆为代号；不要想获得杂质进口质量标准杂质现今皆为代号；不要想获得杂质对照品、且无需获得。对照品、且无需获得。(3)根据剖析结果购买杂质对照品。绝非将国外药典中根据剖析结果购买杂质对照品。绝非将国外药典中的所有杂质对照品皆购买来，此乃的所有杂质对照品皆购买来，此乃“劳民伤财劳民伤财”之举之举!(4)也绝非将自我仿制做到皆也绝非将自我仿制做到皆0.10%以下。此乃以下。此乃“自断自断后路后路”!对原研制剂有关物质的对原研制剂有关物质的“剖析剖析”立项后
3、即刻派人购买原研品，至少购买来不同时间段立项后即刻派人购买原研品，至少购买来不同时间段的的3个批号。（勿需获得个批号。（勿需获得“原研原料药原研原料药”）综合分析既有质量标准，色谱条件可酌情改变，如：综合分析既有质量标准，色谱条件可酌情改变，如：(1)尽可能使用尽可能使用25cm长色谱柱。长色谱柱。(2)适当减少有机相比例。适当减少有机相比例。(3)主成分出峰时间至少主成分出峰时间至少12min以后（流速以后（流速1.0ml/min时）时）(4)梯度洗脱可适当延长时间或增大比例。梯度洗脱可适当延长时间或增大比例。最终酌情确定色谱条件最终酌情确定色谱条件（该条件应可分离测定出自身原料药仿制时的中
4、间体）（该条件应可分离测定出自身原料药仿制时的中间体）“解解 读读”原原 研研 制制 剂剂(1)分别测定原研制剂有关物质情况（核心：积分限度分别测定原研制剂有关物质情况（核心：积分限度0.05%，引申至原料药积分，引申至原料药积分0.03%。小数点保留小数点保留2位即位即可，切不可过多，如可，切不可过多，如0.25%、0.08%）(2)取原研制剂的最新批号，分别进行长期试验和加速取原研制剂的最新批号，分别进行长期试验和加速试验试验6个月。（个月。（3个月时便可初见端倪）个月时便可初见端倪）(3)测定技巧：最终一并进行（样品置于冰箱冷藏）。测定技巧：最终一并进行（样品置于冰箱冷藏）。(4)获得原
5、研制剂获得原研制剂“杂质谱杂质谱”。(5)顺便采用顺便采用DAD检测器测定一下主成分纯度。检测器测定一下主成分纯度。原研制剂原研制剂“杂质谱杂质谱”测定结果测定结果ABCD 杂质杂质A不断增加：不断增加：0.15%0.50%（限度（限度0.7%）杂质杂质B不断增加：不断增加：0.20%0.68%（限度（限度1.0%）杂质杂质C不增加：始终保持在不增加：始终保持在0.23%0.25%杂质杂质D不增加：始终保持在不增加：始终保持在0.06%0.07%对仿制制剂与仿制原料药的要求对仿制制剂与仿制原料药的要求 针对原研制剂中不增加的未知杂质针对原研制剂中不增加的未知杂质 (1)该杂质含量在该杂质含量在
6、0.1%以上，以上，如杂质如杂质C 仿制品仿制品中该杂质可以存在，含量不超出原研制剂即中该杂质可以存在，含量不超出原研制剂即可，且可，且 6个月考核结果该杂质量无变化个月考核结果该杂质量无变化/不增加。不增加。结论：结论：质量标准中无需单独控制，笼统要求即可。质量标准中无需单独控制，笼统要求即可。引申至原料药质量控制：引申至原料药质量控制：稳定性考核无增加、含量无稳定性考核无增加、含量无变化。变化。对仿制制剂与仿制原料药的要求对仿制制剂与仿制原料药的要求 针对原研制剂中不增加的未知杂质针对原研制剂中不增加的未知杂质 (2)该杂质量在该杂质量在0.05%0.10%间，间，如杂质如杂质D 仿制品可
7、超出原研品仿制品可超出原研品（如杂质（如杂质D含量为含量为0.07%0.08%），），但只要小于但只要小于 0.10%即可。且即可。且 6个月个月考核结果，该杂质量无变化考核结果，该杂质量无变化/不增加。不增加。结论：结论：质量标准中无需单独控制，笼统要求即可。质量标准中无需单独控制，笼统要求即可。对仿制制剂与仿制原料药的要求对仿制制剂与仿制原料药的要求 针对原研制剂中不存在的杂质针对原研制剂中不存在的杂质 仿制品存在的特有杂质仿制品存在的特有杂质（如杂质（如杂质F），），必须在必须在0.10%0.20%以下，且应在以下，且应在14号稳定性考核中不增加。号稳定性考核中不增加。强烈不建议：因杂质
8、量大于上述限度，去进行杂质强烈不建议：因杂质量大于上述限度，去进行杂质的药理毒理研究，推算出其限度，证明自身产品杂质的药理毒理研究，推算出其限度，证明自身产品杂质量小于该限度的量小于该限度的“钻牛角尖钻牛角尖”作法！作法！解决办法：解决办法：从原料药合成路径和制剂工艺入手；或从原料药合成路径和制剂工艺入手；或提取原料药等手段。提取原料药等手段。对仿制制剂与仿制原料药的要求对仿制制剂与仿制原料药的要求 针对原研制剂中不断增加的杂质针对原研制剂中不断增加的杂质（如杂质（如杂质A和和B）(1)质量标准中肯定规定了其限度质量标准中肯定规定了其限度（因是已知杂质）（因是已知杂质）。(2)通过液质联用探明
9、结构式，购买来对照品通过液质联用探明结构式，购买来对照品/或自我合成或自我合成（此时需验证结构式），验证校正因子。（此时需验证结构式），验证校正因子。(3)只要仿制制剂没有超出质量标准中所规定的限度值，即只要仿制制剂没有超出质量标准中所规定的限度值，即便超出原研制剂量亦可。便超出原研制剂量亦可。（通过有效期（通过有效期“调节调节”、引申至效期设定原则与意义）、引申至效期设定原则与意义）质量标准拟定法质量标准拟定法 虽杂质对照品法最为准确，但对照品的获得与验证令人虽杂质对照品法最为准确，但对照品的获得与验证令人发憷！（自行酌情定夺发憷！（自行酌情定夺）乐于采用乐于采用“相对保留时间相对保留时间-
10、校正因子结合法校正因子结合法”。(1)杂质对照品仅用于研究时验证校正因子（如何验证）和杂质对照品仅用于研究时验证校正因子（如何验证）和系统适用性试验用（讲述如何配制该溶液）。系统适用性试验用（讲述如何配制该溶液）。(2)为确保相对保留时间的准确性，质量标准中必须指明色为确保相对保留时间的准确性，质量标准中必须指明色谱柱型号与具体参数。（绝不要认为这样不好、恰相反！）谱柱型号与具体参数。（绝不要认为这样不好、恰相反！）(3)质量标准中应尽可能拟定系统适用性试验。既可用杂质质量标准中应尽可能拟定系统适用性试验。既可用杂质对照品、对照品、又可用强破坏试验法又可用强破坏试验法。(4)质量标准中应既有已
11、知杂质的针对性测定，也有未知杂质量标准中应既有已知杂质的针对性测定，也有未知杂质的笼统性测定。质的笼统性测定。质量标准中采用强破坏试验法验证系统适用性的典型图谱质量标准中采用强破坏试验法验证系统适用性的典型图谱min0510152025303540mAU 0246 VWD1 A,Wavelength=280 nm(XMF05112203.D)15.753min0510152025303540mAU 0246 VWD1 A,Wavelength=280 nm(XMF05112204.D)14.812 15.928min0510152025303540mAU 0246 VWD1 A,Wavelen
12、gth=280 nm(XMF05112205.D)举例：盐酸普拉克索片的仿制举例：盐酸普拉克索片的仿制 进口质量标准：梯度洗脱、进口质量标准：梯度洗脱、3个波长、个波长、13个代号杂质（且分别个代号杂质（且分别有校正因子、相对保留时间等）。有校正因子、相对保留时间等）。第一步：第一步：勿更改梯度洗脱、仍为勿更改梯度洗脱、仍为3个波长。个波长。第二步：第二步：测定原研品，设定最小峰面积为测定原研品，设定最小峰面积为0.05%。结果仅检出。结果仅检出1个不断增加杂质（加速试验和长期试验结果也证实）和个不断增加杂质（加速试验和长期试验结果也证实）和2个大于个大于0.10%杂质，其他杂质均未检出。杂质
13、，其他杂质均未检出。第三步：第三步：液质联用测定出增加杂质结构式，推算出降解途径；合液质联用测定出增加杂质结构式，推算出降解途径；合成并获得该杂质对照品，质量标准中既可拟定采用杂质对照品测成并获得该杂质对照品，质量标准中既可拟定采用杂质对照品测定该目标杂质、定该目标杂质、也可拟定采用也可拟定采用“相对保留时间相对保留时间-校正因子结合校正因子结合法法”。第四步：第四步：对于另对于另2个大于个大于0.10%、但不增加杂质，仿制制剂也应、但不增加杂质，仿制制剂也应不增加，且含量未超出原研制剂，即可。质量标准中采用笼统法不增加，且含量未超出原研制剂，即可。质量标准中采用笼统法测定即可。测定即可。举例
14、：复方制剂有关物质研究思路举例：复方制剂有关物质研究思路第一步：第一步：查询每一个主成分单方制剂国内外质量标准，观查询每一个主成分单方制剂国内外质量标准，观测是否有目标降解杂质。（应可寻找到测是否有目标降解杂质。（应可寻找到）第二步：第二步：通过杂质谱比较，对未变化通过杂质谱比较，对未变化/增加的杂质，质量标增加的杂质，质量标准中不予拟定（原研制剂一定要平行做稳定性考核试验）。准中不予拟定（原研制剂一定要平行做稳定性考核试验）。第三步：第三步：质量标准中仅拟定降解杂质，既可拟定采用杂质质量标准中仅拟定降解杂质，既可拟定采用杂质对照品法、也可拟定采用对照品法、也可拟定采用“相对保留时间相对保留时
15、间-校正因子结合法校正因子结合法”（推荐前者）（推荐前者）。第四步：第四步：不建议采用笼统法测定未知杂质。不建议采用笼统法测定未知杂质。三类仿制药的研发三类仿制药的研发 无既有质量标准无既有质量标准(1)查询文献，建立色谱条件；同时采用原料药合成的查询文献，建立色谱条件；同时采用原料药合成的中间体验证色谱条件的系统适用性。中间体验证色谱条件的系统适用性。(2)购买购买1批原研制剂批原研制剂（如购买不来、休眠！）（如购买不来、休眠！）(3)进行原研品进行原研品6个月的加速试验和长期试验。个月的加速试验和长期试验。(4)解读原研品，获得解读原研品，获得“杂质谱杂质谱”。(5)回到上述思路：其中回到
16、上述思路：其中 自我合成获得不断增加杂质，自我合成获得不断增加杂质，进行杂质的进行杂质的“药理毒理研究药理毒理研究”，科学拟定杂质限度。，科学拟定杂质限度。强破坏试验的深度剖析强破坏试验的深度剖析 对该理念产生的历史背景对该理念产生的历史背景 试验结论：基本上没有推翻既有色谱条件，实际是试验结论：基本上没有推翻既有色谱条件，实际是 破坏方法：没有统一规定、自己看着办破坏方法：没有统一规定、自己看着办 一定要赋予二极管阵列检测器检测主峰纯度的测定一定要赋予二极管阵列检测器检测主峰纯度的测定 如何应答药审中心老师提出的如何应答药审中心老师提出的“质量守恒质量守恒”要求。要求。该试该试验理念与验理念
17、与14号资料稳定性考核中的号资料稳定性考核中的“含量与有关物质变化含量与有关物质变化应相辅相成应相辅相成”理念是不一致的，所以不应追求！理念是不一致的，所以不应追求！试验中的细节与技巧试验中的细节与技巧 “有关物质皆未变化有关物质皆未变化”的具体含义的具体含义 14号资料稳定性考核数据中，单个杂质量和总杂质号资料稳定性考核数据中，单个杂质量和总杂质量测定数据波动范围均在量测定数据波动范围均在0.02%以内。（着重诠释以内。（着重诠释）引申至自身对照法与归一化法的引申至自身对照法与归一化法的“互换妙用互换妙用”。引申至稳定性考核数据间的引申至稳定性考核数据间的“相辅相成性相辅相成性”。(1)有关
18、物质与含量间。（有关物质间见上）有关物质与含量间。（有关物质间见上）(2)各时间点含量间。（无变化必须在各时间点含量间。（无变化必须在2.0%以内波动）以内波动）(3)列举令人哭笑不得的案例。（资料中色谱图的注释）列举令人哭笑不得的案例。（资料中色谱图的注释）杂质量控制在杂质量控制在0.02%范围内波动的试验技巧范围内波动的试验技巧 从首张液相图谱开始，最小峰面积便设定为原料药从首张液相图谱开始，最小峰面积便设定为原料药/0.03%或制剂或制剂/0.05%。（。（阐述原理和众多案例阐述原理和众多案例）。液相使用技巧液相使用技巧 (1)必须保证空白溶剂色谱图测定理想！必须保证空白溶剂色谱图测定理
19、想！(2)梯度洗脱注意事项（流动相组成与洗脱设定）。梯度洗脱注意事项（流动相组成与洗脱设定）。(3)安装色谱柱的技巧与清洗色谱柱法则。安装色谱柱的技巧与清洗色谱柱法则。(4)最低检出限的最低检出限的“画龙点睛之笔画龙点睛之笔”（相当于（相当于）试验中的细节与技巧试验中的细节与技巧溶液稳定性试验的判定溶液稳定性试验的判定l不能单从主成分入手！不能单从主成分入手！l还要注意所有组分的百分比变化，还要注意所有组分的百分比变化，绝对值变化！绝对值变化！m in024681 01 21 41 61 82 02 22 4m AU6 07 08 09 01 0 01 1 01 2 01 3 01 4 01
20、5 01 6 0m AU6 07 08 09 01 0 01 1 01 2 01 3 01 4 01 5 01 6 091708 5.923 0.8610432888 8.410 98.1659185 14.626 0.5645002 22.729 0.422:2 1 0 n m,8 n m傾 乕 僥 僗 僱 乕 僩昗 弨 梟 塼傾 乕 僥 僗 僱 乕 僩昗 弨 梟 塼 0 2-R e p 4柺 愊曐 帩 帪 娫柺 愊%杂质杂质-1（为已知杂质）（为已知杂质）青青 蒿蒿 琥琥 酯酯杂质杂质-2杂质杂质-3新杂质新杂质时间时间(h)峰面积峰面积百分比百分比峰面积峰面积百分比百分比峰面积峰面积百分
21、比百分比峰面积峰面积百分比百分比均未均未检出检出0148110.14%1036960099.26%575110.55%50320.05%0.5360280.35%1014652598.89%557860.54%223310.22%1595200.57%1038238898.58%580980.55%317170.30%1.5689800.66%1034454198.45%595210.57%338980.32%2789480.75%1036038698.33%591720.56%380650.36%3917080.86%1043288898.16%591850.56%4500020.42%RS
22、D0.96试验中的细节与技巧试验中的细节与技巧 “杂质谱列表与图谱杂质谱列表与图谱”的的“图文并茂图文并茂”14号资料稳定性考核数据中，一个要有一个单独的号资料稳定性考核数据中，一个要有一个单独的“杂质谱大表杂质谱大表”（着重讲述（着重讲述）所附图谱标识一定要一目了然、清清楚楚、美观大所附图谱标识一定要一目了然、清清楚楚、美观大方，力争做到令人赏心悦目、甚至心旷神怡方，力争做到令人赏心悦目、甚至心旷神怡 有关物质图谱必须全部附上，其他图谱有关物质图谱必须全部附上，其他图谱“点到为点到为止止”！切忌所有图谱都附上。！切忌所有图谱都附上。期待着与您的进一步交流！期待着与您的进一步交流！（谢谢 沐沐 风）风）
