1、 。真核生物细胞中的DNA中只有不到5的DNA用于所需蛋白质的基因表达,其余的DNA起“结构”作用或“调节”作用。DNA被紧密地包装在多条染色体中,每条染色体中含有一个线状DNA分子,它以左手螺旋方向围着一个个组蛋白八聚体绕圈1.8周,形成串珠状的染色质,被串在一起的小颗粒称为核小体,染色质进一步卷曲形成每圈6个核小体、直径30 nm的染色质丝,它折叠成许多超螺旋环附着在中央骨架上。(一)(一)基因工程中应用的质粒基因工程中应用的质粒 若干细菌某一性状的自发突变率若干细菌某一性状的自发突变率 2.2.涂布试验涂布试验-突变率突变率AAA 丫啶类化合物的诱变机制丫啶类化合物的诱变机制 +v感受态
2、由细胞的遗传性决定,但变现差别很大。感受态由细胞的遗传性决定,但变现差别很大。v 感受态出现时间:只在细菌生长的某一时期出现;不同感受态出现时间:只在细菌生长的某一时期出现;不同菌种的感受态出现在不同生长时期。菌种的感受态出现在不同生长时期。肺炎球菌的感受态出现在生长曲线中的指数期的中肺炎球菌的感受态出现在生长曲线中的指数期的中期,期,芽孢杆菌的一些种则出现在指数期末及稳定期的初芽孢杆菌的一些种则出现在指数期末及稳定期的初期。期。v感受态细胞的比例:当处于感受态高峰时,群体中呈感感受态细胞的比例:当处于感受态高峰时,群体中呈感受态的细胞因菌种而不同。受态的细胞因菌种而不同。枯草芽孢杆菌不超过枯
3、草芽孢杆菌不超过1015%,可维持数小时;,可维持数小时;肺炎球菌和流感嗜血杆菌达到肺炎球菌和流感嗜血杆菌达到100%,只能维持几分,只能维持几分钟。钟。v 同时也受环境因子的影响:同时也受环境因子的影响:cAMP、Ca2+等最明显。如等最明显。如用用CaCl2 处理处理E.coli可以诱发其产生感受态。可以诱发其产生感受态。-Try-his+Try+his-Try+his+混合培养AB:J.Lederberg等(等(1952)在)在鼠伤寒沙门氏菌鼠伤寒沙门氏菌LT22A中发现的。中发现的。AB-Try+his+Try-his+Try+his-噬菌体作为介导噬菌体作为介导转导:以温和转导:以温
4、和噬菌体为媒介,将供体细胞的噬菌体为媒介,将供体细胞的DNA片段携带到受体细胞中,通过交换与整合,片段携带到受体细胞中,通过交换与整合,从而使后者获得前者部分遗传性状的现象。从而使后者获得前者部分遗传性状的现象。转导子:获得新遗传性状的受体细胞。转导子:获得新遗传性状的受体细胞。普遍性转导普遍性转导感染复数感染复数 定义:通过完全缺陷噬菌体对供体菌任定义:通过完全缺陷噬菌体对供体菌任何何DNA小片段的小片段的“误包误包”而实现其遗而实现其遗传性状传递至受体菌的转导现象,称为传性状传递至受体菌的转导现象,称为普遍性转导。普遍性转导。低频转导与高频转导低频转导与高频转导 E.coli K12 (大
5、量大量)+dg(10-5)(E.coliK12gal-(受体菌受体菌)E.coliK12E.coliK12+dg(双重溶源菌)(双重溶源菌)(50%)+dg(50%)(E.coliK12gal-(受体菌受体菌)E.coliK12U.V.U.V.双重溶源菌双重溶源菌E.coliK12(/dg)转导噬菌体(转导噬菌体(dg)+辅助噬菌体(辅助噬菌体()转导子菌落转导子菌落噬菌斑噬菌斑U.V.3.3.溶源转变溶源转变典型实例典型实例 F+F F+F Hfr F Hfr+F (在大多数情况下)在大多数情况下)Hfr F Hfr+Hfr (在极少数情况下)在极少数情况下)接合中断试验与染色体图接合中断试
6、验与染色体图:abcde图:初生F菌株和次生F菌株的由来F F F+F 双双倍倍体体和和单单倍倍体体细细胞胞的的比比较较 项 目 双 倍 体 单 倍 体 细胞 菌落 液体培养 在产孢培养基上 大,椭圆形 大,形态均一 繁殖较快,细胞较分散 形成子囊 小,球形 小,形态变化较多 繁殖较慢,细胞常聚集成团 不形成子囊 u u 准性生殖和有性生殖的比较准性生殖和有性生殖的比较 项 目 准 性 生 殖 有 性 生 殖 参与接合的亲本细胞 独立生活的异核体阶段 接合后双倍体的细胞形态 双倍体变为单倍体的途径 接合发生的几率 形态相同的体细胞 有 与单倍体基本相同 通过有丝分裂 偶然发现,几率低 形态或生理上有分化的性细胞 无 与单倍体明显不同 通过减数分裂 正常出现,几率高 :几种常用菌种保藏方法的比较几种常用菌种保藏方法的比较